Name: application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy
Uploaded: 2022-01-12T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Projektkälla: Natural Science Foundation i Guangdong-provinsen (2018A0303130306). Författarna vill tacka Ophthalmic Research Laboratory, Joint Shantou International Eye Center vid Shantou University och Chinese University of Hong Kong för finansiering och material.

Verksamheten utfördes efter uttalandet om användning av djur i oftalmisk och synforskning från Association for Research in Vision and Ophthalmology. Den experimentella designen godkändes av den institutionella djuretiska kommittén (medicinsk etikkommitté för JSIEC, EC 20171213(4) -P01). Två månader gamla C57BL/6J-möss och Vldlr-knockoutmöss användes i denna studie. Det fanns 7 möss i varje grupp, som alla var kvinnliga och vägde 20 g till 24 g.
1. Experimentella förhålla...

<ol>
	<li>Frombach, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serine+protease-mediated+cutaneous+inflammation:+characterization+of+an+ex+vivo+skin+model+for+the+assessment+of+dexamethasone-loaded+core+multishell-nanocarriers.">Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers.</a> Pharmaceutics. 12 (9), 862 (2020).</li><li>Osiac, E., S&#259;ftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+Doppler+optical+coherence+tomography+in+the+gastrointestinal+tract.">Optical coherence tomography and Doppler optical coherence tomography in the gastrointestinal tract.</a> Journal of Gastroenterology. 17 (1), 15-20 (2011).</li><li>Xiong, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+optical+coherence+tomography+for+bladder+cancer:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Diagnostic accuracy of optical coherence tomography for bladder cancer: A systematic review and meta-analysis.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 27, 298-304 (2019).</li><li>Andrews, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+of+the+aging+kidney.">Optical coherence tomography of the aging kidney.</a> &amp; Clinical Transplantation. 14 (6), 617-622 (2016).</li><li>Terashima, M., Kaneda, H., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+optical+coherence+tomography+in+coronary+intervention.">The role of optical coherence tomography in coronary intervention.</a> The Korean Journal of Internal Medicine. 27 (1), 1-12 (2012).</li><li>Avital, Y., Madar, A., Arnon, S., Koifman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+coronary+calcifications+in+optical+coherence+tomography+imaging+using+deep+learning.">Identification of coronary calcifications in optical coherence tomography imaging using deep learning.</a> Scientific Reports. 11 (1), 11269 (2021).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Science. 254 (5035), 1178-1181 (1991).</li><li>Tsai, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+in+gastroenterology:+a+review+and+future+outlook.">Optical coherence tomography in gastroenterology: a review and future outlook.</a> Journal of Biomedical Optics. 22 (12), 1-17 (2017).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+optical+intensity+on+optical+coherence+tomography+and+retinal+ischemia+in+branch+retinal+vein+occlusion.">Relationship between optical intensity on optical coherence tomography and retinal ischemia in branch retinal vein occlusion.</a> Scientific Reports. 8 (1), 9626 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+retinal+layer+optical+intensities+on+three-dimensional+optical+coherence+tomography.">Quantitative analysis of retinal layer optical intensities on three-dimensional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 54 (10), 6846-6851 (2013).</li><li>Cruz-Herranz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+retinal+changes+with+optical+coherence+tomography+predicts+neuronal+loss+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Monitoring retinal changes with optical coherence tomography predicts neuronal loss in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 203 (2019).</li><li>Podoleanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Journal of Microscopy. 247 (3), 209-219 (2012).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+findings+in+the+retinas+of+SOD1+knockout+mice.">Optical coherence tomography findings in the retinas of SOD1 knockout mice.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 9 (4), 15 (2020).</li><li>Berger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+rodent+eye:+highlighting+layers+of+the+outer+retina+using+signal+averaging+and+comparison+with+histology.">Spectral-domain optical coherence tomography of the rodent eye: highlighting layers of the outer retina using signal averaging and comparison with histology.</a> PLoS One. 9 (5), 96494 (2014).</li><li>Burns, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+murine+imaging+for+assessing+photoreceptor+degeneration+in+vivo.">New developments in murine imaging for assessing photoreceptor degeneration in vivo.</a> Advances in Experimental Medicine &amp; Biology. 854, 269-275 (2016).</li><li>Jagodzinska, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography:+imaging+mouse+retinal+ganglion+cells+in+vivo.">Optical coherence tomography: imaging mouse retinal ganglion cells in vivo.</a> Journal of Visualized Experiments: Jove. (127), e55865 (2017).</li><li>Kocaoglu, O. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+fundus+imaging+and+optical+coherence+tomography+of+the+mouse+retina.">Simultaneous fundus imaging and optical coherence tomography of the mouse retina.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 48 (3), 1283-1289 (2007).</li><li>Tode, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+stimulation+of+the+retina+reduces+Bruch's+membrane+thickness+in+age+related+macular+degeneration+mouse+models.">Thermal stimulation of the retina reduces Bruch's membrane thickness in age related macular degeneration mouse models.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 7 (3), 2 (2018).</li><li>Wang, R., Jiang, C., Ma, J., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+morphological+changes+in+the+retina+of+rhodopsin-/-+mice+with+spectral+domain+optical+coherence+tomography.">Monitoring morphological changes in the retina of rhodopsin-/- mice with spectral domain optical coherence tomography.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (7), 3967-3972 (2012).</li><li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral-domain+optical+coherence+tomographic+analysis+of+Rdh5-/-+mice+retina.">A spectral-domain optical coherence tomographic analysis of Rdh5-/- mice retina.</a> PLoS ONE. 15 (4), 0231220 (2020).</li><li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+imaging+by+optical+coherence+tomography+to+monitor+retinal+degeneration+in+the+mouse.">Noninvasive imaging by optical coherence tomography to monitor retinal degeneration in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 42 (12), 2981-2989 (2001).</li><li>Horio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+change+of+optical+coherence+tomography+scans+in+retinal+degeneration+slow+mice.">Progressive change of optical coherence tomography scans in retinal degeneration slow mice.</a> Archives of Ophthalmology. 119 (9), 1329-1332 (2001).</li><li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+VLDLR+in+the+retina+and+evolution+of+subretinal+neovascularization+in+the+knockout+mouse+model's+retinal+angiomatous+proliferation.">Expression of VLDLR in the retina and evolution of subretinal neovascularization in the knockout mouse model's retinal angiomatous proliferation.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 49 (1), 407-415 (2008).</li><li>Wyne, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+VLDL+receptor+in+endothelial+cells.">Expression of the VLDL receptor in endothelial cells.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 16 (3), 407-415 (1996).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+characterization+of+spontaneous+retinal+neovascularization+in+the+mouse+eye+by+multifunctional+optical+coherence+tomography.">In vivo characterization of spontaneous retinal neovascularization in the mouse eye by multifunctional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 59 (5), 2054-2068 (2018).</li><li>Fang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundus+autofluorescence,+spectral-domain+optical+coherence+tomography,+and+histology+correlations+in+a+Stargardt+disease+mouse+model.">Fundus autofluorescence, spectral-domain optical coherence tomography, and histology correlations in a Stargardt disease mouse model.</a> The FASEB Journal. 34 (3), 3693-3714 (2020).</li></ol>

I denna studie tillämpades OCT-avbildning med hjälp av ett näthinnebildsystem för små djur för att utvärdera retinala förändringar hos Vldlr-knockoutmöss , som visar ofullständig bakre glaskroppsavskiljning, subretinal neovaskularisering och retinal tjockleksförtunning. OCT är en icke-invasiv avbildningsmetod för att undersöka näthinnans tillstånd in vivo. De flesta ULT-enheter är utformade för mänsklig ögonundersökning. Storleken på hårdvaruutrustningen, inställningen av bränn...

Optisk koherenstomografi (OCT) är en avbildningsteknik som kan ge in vivo högupplöst och tvärsnittsavbildning för vävnad 1,2,3,4,5,6,7,8, särskilt för icke-invasiv undersökning i näthinnan 9,10,11,12 . Det kan också användas för att kvantifiera några viktiga biomarkörer, såsom retinal tjocklek och retinal nervfiberskikttjocklek. Principen för OCT är optisk koherensreflektometri, som erhåller tvärsnittsvävnadsinformation från koherensen av ljus som reflekteras från ett prov och omvandlar det till en grafisk eller digital form genom ett datorsystem7. OCT används ofta i oftalmologiska kliniker som ett viktigt verktyg för diagnos, uppföljning och hantering för patienter med näthinnesjukdomar. Det kan också ge insikt i patogenesen av näthinnesjukdomar.
Förutom kliniska tillämpningar har OCT också använts i djurstudier. Även om patologi är guldstandarden för morfologisk karakterisering, har OCT fördelen med icke-invasiv in vivo-avbildning och longitudinell uppföljning. Dessutom har det visat sig att OCT är väl korrelerat med histopatologi i retinopati djurmodeller 11,13,14,15,16,17,18,19,20. Musen är det vanligaste djuret i biomedicinska studier. Men dess små ögonbollar utgör en teknisk utmaning för att genomföra OCT-avbildning hos möss.
Jämfört med den OCT som först användes för retinal avbildning hos möss21,22, har OCT hos små djur nu optimerats med avseende på hårdvaru- och mjukvarusystem. Till exempel minskar OCT, i kombination med trackern, signifikant signal-brusförhållandet; OCT-programvarusystemuppgraderingar gör att fler retinala lager kan detekteras automatiskt; och den integrerade DLP-beamern hjälper till att minska rörelseartefakterna.
Lipoproteinreceptor med mycket låg densitet (Vldlr) är ett transmembranprotein i endotelceller. Det uttrycks på retinala vaskulära endotelceller, retinala pigmentepitelceller och runt det yttre begränsande membranet23,24. Subretinal neovaskularisering är fenotypen för Vldlr knockout-möss23. Därför används Vldlr knockoutmöss för att undersöka patogenesen och potentiell behandling av subretinal neovaskularisering. Denna artikel visar tillämpningen av OCT-avbildning för att upptäcka retinala lesioner hos Vldlr knockout-möss, i hopp om att ge någon teknisk referens för retinopatiforskning i smådjursmodeller.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100-Dpt contact lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double aspheric 60-Dpt glass lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating blanket</td>
			<td>POPOCOLA</td>
			<td>CW-DRT-01</td>
			<td>50 x 35 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection syringe (1 mL)</td>
			<td>Kaile</td>
			<td></td>
			<td>0.45 x 16RWLB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel</td>
			<td>EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 g: 0.015 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical sodium hyaluronate gel</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>16H01E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringes</td>
			<td>Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD</td>
			<td>Q31/0113000236C001-2017</td>
			<td>50 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine solution</td>
			<td>Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RETImap</td>
			<td>ROLAND CONSULT</td>
			<td>19-99_50-2.1_1.2E</td>
			<td>cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ear studs</td>
			<td>OSMO POCKET OT110</td>
			<td>INS1005-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>Santen Pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X1251-5G</td>
			<td>5 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>Virbac.S.A</td>
			<td>7FRPA</td>
			<td>Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy

Optisk koherenstomografi (OCT) erbjuder en icke-invasiv metod för diagnos av retinopati. OCT-maskinen kan fånga retinala tvärsnittsbilder från vilka näthinnans tjocklek kan beräknas. Även om OCT används i stor utsträckning i klinisk praxis är dess tillämpning i grundforskning inte lika utbredd, särskilt hos små djur som möss. På grund av den lilla storleken på deras ögonbollar är det utmanande att genomföra fundus-avbildningsundersökningar hos möss. Därför krävs ett specialiserat retinalt bildsystem för att rymma OCT-avbildning på små djur. Denna artikel visar ett litet djurspecifikt system för ULT-undersökningsförfaranden och en detaljerad metod för bildanalys. Resultaten av retinal OCT-undersökning av knockoutmöss med mycket låg densitet lipoproteinreceptor (Vldlr) och C57BL / 6J-möss presenteras. OCT-bilderna av C57BL/6J-möss visade näthinnelager, medan de av Vldlr-knockoutmöss visade subretinal neovaskularisering och retinal gallring. Sammanfattningsvis skulle OCT-undersökning kunna underlätta icke-invasiv detektion och mätning av retinopati i musmodeller.

Tack vare de högupplösta skanningarna av OCT kan lagren i musens näthinna observeras och onormala reflektioner och deras exakta platser kan identifieras. De retinala OCT-bilderna av Vldlr knockout-möss och C57BL/6J-möss jämfördes i denna studie. OCT-bilderna av alla C57BL/6J-möss visade olika näthinneskikt med olika reflektivitet, och avgränsningen var tydlig (figur 8D). Däremot visade alla Vldlr knockout-möss onormala, hyperreflekterande lesioner på OCT-bilder...

Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Här beskriver vi en in vivo-avbildningsteknik med optisk koherenstomografi för att underlätta diagnos och kvantitativ mätning av retinopati hos möss.

Tillämpning av optisk koherenstomografi på en musmodell av retinopati

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Optisk koherenstomografi används ofta vid klinisk diagnos av olika näthinnesjukdomar, men det är fortfarande utmanande att tillämpa i musmodeller. Detta protokoll beskriver hur man hanterar ULT-tekniken hos djur. Denna teknik kan tillämpas på djur med olika ögonglobstorlekar.Det möjliggör icke-invasiv, högupplöst och realtids retinal tvärsnittsavbildning, tillsammans med kvantitativa mätningar av retinal tjocklek. OCT hjälper till med retinopatidiagnos genom att identifiera lesionsfunktionerna som plats, intervall, form och storlek på lesionerna, liksom alla misstänkta retinala abnormiteter såsom retinal neovaskularisering. Detta protokoll är tillämpligt på djurstudier eller fundussjukdomar, inklusive och näthinnesjukdomar.Innan du börjar proceduren, var förberedd och följ protokollet steg för steg. Utför experimentet när djuret bedövas. Man bör kunna få OCT-bilder av god kvalitet efter lite övning.För att börja, slå på datorn och starta programvaran. Klicka på testprogramknappen för att slutföra testprogrammet. Slå sedan på termostaten och förvärm den till 37 grader Celsius.Efter programtestningen startar du OCT-modulproceduren. Skapa ett nytt ämne och fyll i musinformationen. Förvärm sedan den elektriska filten och täck den med kirurgiska handdukar.Placera den bedövade musen på den elektriska filtplattformen och täck omedelbart båda ögonen med medicinsk natriumhyaluronatgel. Placera sedan en 100D-kontaktlins på mushornhinnan med den konkava sidan som rör natriumhyaluronatgelén på hornhinnans yta. Placera sedan musen på den lilla djurplattformen med konstant temperatur på cSLO-enheten.Justera kontaktlinsens vinkel med pincett för att hålla pupillen i mitten av linsen. Finjustera justeringarna av huvudet så att ögat vetter rakt fram. Klicka på OCT-knappen, välj musmodulen och starta cSLO-programmet.Använd sedan manöverspaken för att långsamt flytta den förinställda linsen mot kontaktlinsen. Gör ytterligare justeringar för att justera bilden av den främre bakre polen och centrera den vid det optiska nervhuvudet. Starta sedan OCT-programmet och klicka på förloppsindikatorn upp och ner tills OCT-bilden visas.Justera det minsta intervallet mellan 0 och 20 och det maximala intervallet mellan 40 och 60. Justera sedan det förinställda linsavståndet och positionsriktningen tills en idealisk OCT-bild erhålls. Välj skanningsposition genom att flytta standardlinjen i cSLO.Klicka sedan på medelvärdet för att lägga över cSLO- och OCT-bildsignalen och klicka på skottknappen för att hämta SLO OCT-bilden. Efter experimentet, ta bort 100D-kontaktlinsen och applicera levofloxacin ögongel för att skydda hornhinnan. För korrigering av retinal stratifiering, klicka på belastningsundersökning på OCT-gränssnittet och ring ut OCT-bilderna från ett popup-fönster.Dubbelklicka sedan på bilden i mediebehållaren för att visa den på skärmen. Klicka sedan på lagerdetektering för att slutföra automatisk skiktning på näthinnan. När du har markerat skiljelinjen på båda sidor av lagret som förberetts för analys klickar du på redigera lager för att justera avståndet och begränsa intervallet.Ändra sedan linjen genom att flytta den röda cirkeln. Om du vill mäta näthinnans lamineringstjocklek klickar du på måttmarkörknappen och väljer skiljelinjen för det lager som ska analyseras för att visa skiktets gräns på OCT-bilden. Välj sedan Anslut med lager och håll kontakten när du är på språng.Välj sedan det område som ska visa resultaten och klicka på den position som ska analyseras på OCT-bilden så att mätlinjen visas. Klicka på nästa kolumn för efterföljande mätningar och för att avslöja tidigare data. Om du vill mäta full näthinnetjocklek väljer du rad ett och rad sju i listan i det övre högra hörnet.Sedan, från utseendet av retinal struktur vid kanten av den optiska papillen, mäta fyra värden vid 200 mikrometeravståndsintervall på den horisontella linjalen. OCT-bilder av C57BL/6-möss visade olika näthinneskikt med tydlig avgränsning. Däremot visade Vldlr knockoutmöss onormala hyperreflekterande lesioner.OCT-bilderna visade några mellersta reflekterande band på näthinneytorna på Vldlr-knockoutmössen. Dessa band fästes på näthinnekärlet, vilket överensstämmer med ULT-egenskaperna hos ofullständig glaskroppsavskiljning. En hyperreflekterande lesion uppträdde på subretinalutrymmet och spred sig till det yttre kärnskiktet, men bröt inte igenom det yttre plexiformskiktet.ULT-utseendet på denna lesion överensstämde med patologiska fynd. Den patologiska sektionen visade att neovaskularisering bröt igenom retinalpigmentepitelskiktet, fotoreceptorns inre-yttre segment och det yttre begränsande membranet, invaderade det yttre kärnskiktet, men inte det yttre plexiformskiktet. Ett annat band av hyperreflekterande lesion, som ligger vid subretinalutrymmet, involverade inte det yttre kärnskiktet.I överensstämmelse med patologiska fynd bröt denna subretinala neovaskularisering inte genom det yttre begränsande membranet. Att jämföra näthinnans tjocklek på höger öga i de tidsmässiga, nasala, överlägsna och underlägsna riktningarna hos den bakre polären mellan de två grupperna avslöjade att näthinnetjockleken hos Vldlr-knockoutmössen var signifikant lägre än för C57BL/6J-mössen. När du utför protokollet, placera en 100D-kontaktlins ordentligt på hornhinnan och justera sedan bildpositionen.Välj skanningsplats och lägg över bilden innan du fotograferar. Efter denna procedur är främre segment OCT möjligt, vilket kräver att avståndet mellan den förinställda linsen och hornhinnan ändras. Det kan visa hornhinnan, främre kammaren, iris, ciliary kropp och lins.Denna teknik ger ett viktigt verktyg för retinopatiforskning i smådjursmodeller, vilket främjar icke-invasiv detektion och mätning av retinopati i grundforskning.

Research

JoVE Journal

Medicine

Doppler Optical Coherence Tomography of Retinal Circulation

Doppler optisk koherens tomografi av retinal Cirkulation

Noncontact retinal blood flow measurements are performed with a Fourier domain optical coherence tomography (OCT) system using a circumpapillary double ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared optisk projektionstomografi för bedömningar av β-cells massdistribution i diabetesforskning

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Generation och 3-dimensionell kvantifiering av arteriell Skador i möss med användning av optisk Projection Tomography

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, perkutan, Needle Based, optisk koherens tomografi av Renal Masses

Optical coherence tomography (OCT) is the optical equivalent of ultrasound imaging, based on the backscattering of near infrared light. OCT provides real ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

En neonatal mus ryggmärgskompression skada Modell

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Diffuse Optical Spectroscopy for the Quantitative Assessment of Acute Ionizing Radiation Induced Skin Toxicity Using a Mouse Model

Diffus optisk spektroskopi för kvantitativ bedömning av akut joniserande strålning inducerad Skin toxicitet med hjälp av en musmodell

Acute skin toxicities from ionizing radiation (IR) are a common side effect from therapeutic courses of external beam radiation therapy (RT) and ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Använda Micro-datortomografi för bedömning av tumörutveckling och uppföljning av behandlingssvar i en musmodell av lungcancer

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Ultrahigh Resolution Mouse Optical Coherence Tomography to Aid Intraocular Injection in Retinal Gene Therapy Research

Ultrahög upplösning mus optisk koherenstomografi till stöd intraokulär injektion i näthinnans genterapi forskning

HR-SD-OCT is utilized to monitor the progression of photoreceptor degeneration in live mouse models, assess the delivery of therapeutic agents into the ...

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Avbildning av Cx3cr1gfp/gfp Reporter möss med Spectral-domän optisk koherenstomografi och Scanning Laser Oftalmoskopi

Spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) and scanning laser ophthalmoscopy (SLO) are extensively used in experimental ophthalmology. In the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet mätning av mus mesenterica artär med Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...