Name: application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy
Uploaded: 2022-01-12T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Proje Kaynağı: Guangdong Eyaleti Doğa Bilimleri Vakfı (2018A0303130306). Yazarlar, finansman ve materyaller için Oftalmik Araştırma Laboratuvarı, Shantou Üniversitesi Ortak Shantou Uluslararası Göz Merkezi ve Hong Kong Çin Üniversitesi'ne teşekkür eder.

Operasyonlar, Görme ve Oftalmoloji Araştırmaları Derneği'nin Oftalmik ve Görme araştırmalarında Hayvanların Kullanımına İlişkin Bildirisi'ni takiben gerçekleştirildi. Deneysel tasarım kurumsal hayvan etik komitesi (JSIEC, EC Tıbbi Etik Komitesi, EC 20171213(4)-P01) tarafından onaylanmıştır. Bu çalışmada iki aylık C57BL/6J fareler ve Vldlr nakavt fareleri kullanılmıştır. Her grupta, hepsi dişi olan ve 20 g ila 24 g ağırlığında olan 7 fare vardı.
1. De...

<ol>
	<li>Frombach, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serine+protease-mediated+cutaneous+inflammation:+characterization+of+an+ex+vivo+skin+model+for+the+assessment+of+dexamethasone-loaded+core+multishell-nanocarriers.">Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers.</a> Pharmaceutics. 12 (9), 862 (2020).</li><li>Osiac, E., S&#259;ftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+Doppler+optical+coherence+tomography+in+the+gastrointestinal+tract.">Optical coherence tomography and Doppler optical coherence tomography in the gastrointestinal tract.</a> Journal of Gastroenterology. 17 (1), 15-20 (2011).</li><li>Xiong, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+optical+coherence+tomography+for+bladder+cancer:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Diagnostic accuracy of optical coherence tomography for bladder cancer: A systematic review and meta-analysis.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 27, 298-304 (2019).</li><li>Andrews, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+of+the+aging+kidney.">Optical coherence tomography of the aging kidney.</a> &amp; Clinical Transplantation. 14 (6), 617-622 (2016).</li><li>Terashima, M., Kaneda, H., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+optical+coherence+tomography+in+coronary+intervention.">The role of optical coherence tomography in coronary intervention.</a> The Korean Journal of Internal Medicine. 27 (1), 1-12 (2012).</li><li>Avital, Y., Madar, A., Arnon, S., Koifman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+coronary+calcifications+in+optical+coherence+tomography+imaging+using+deep+learning.">Identification of coronary calcifications in optical coherence tomography imaging using deep learning.</a> Scientific Reports. 11 (1), 11269 (2021).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Science. 254 (5035), 1178-1181 (1991).</li><li>Tsai, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+in+gastroenterology:+a+review+and+future+outlook.">Optical coherence tomography in gastroenterology: a review and future outlook.</a> Journal of Biomedical Optics. 22 (12), 1-17 (2017).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+optical+intensity+on+optical+coherence+tomography+and+retinal+ischemia+in+branch+retinal+vein+occlusion.">Relationship between optical intensity on optical coherence tomography and retinal ischemia in branch retinal vein occlusion.</a> Scientific Reports. 8 (1), 9626 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+retinal+layer+optical+intensities+on+three-dimensional+optical+coherence+tomography.">Quantitative analysis of retinal layer optical intensities on three-dimensional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 54 (10), 6846-6851 (2013).</li><li>Cruz-Herranz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+retinal+changes+with+optical+coherence+tomography+predicts+neuronal+loss+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Monitoring retinal changes with optical coherence tomography predicts neuronal loss in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 203 (2019).</li><li>Podoleanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Journal of Microscopy. 247 (3), 209-219 (2012).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+findings+in+the+retinas+of+SOD1+knockout+mice.">Optical coherence tomography findings in the retinas of SOD1 knockout mice.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 9 (4), 15 (2020).</li><li>Berger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+rodent+eye:+highlighting+layers+of+the+outer+retina+using+signal+averaging+and+comparison+with+histology.">Spectral-domain optical coherence tomography of the rodent eye: highlighting layers of the outer retina using signal averaging and comparison with histology.</a> PLoS One. 9 (5), 96494 (2014).</li><li>Burns, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+murine+imaging+for+assessing+photoreceptor+degeneration+in+vivo.">New developments in murine imaging for assessing photoreceptor degeneration in vivo.</a> Advances in Experimental Medicine &amp; Biology. 854, 269-275 (2016).</li><li>Jagodzinska, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography:+imaging+mouse+retinal+ganglion+cells+in+vivo.">Optical coherence tomography: imaging mouse retinal ganglion cells in vivo.</a> Journal of Visualized Experiments: Jove. (127), e55865 (2017).</li><li>Kocaoglu, O. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+fundus+imaging+and+optical+coherence+tomography+of+the+mouse+retina.">Simultaneous fundus imaging and optical coherence tomography of the mouse retina.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 48 (3), 1283-1289 (2007).</li><li>Tode, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+stimulation+of+the+retina+reduces+Bruch's+membrane+thickness+in+age+related+macular+degeneration+mouse+models.">Thermal stimulation of the retina reduces Bruch's membrane thickness in age related macular degeneration mouse models.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 7 (3), 2 (2018).</li><li>Wang, R., Jiang, C., Ma, J., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+morphological+changes+in+the+retina+of+rhodopsin-/-+mice+with+spectral+domain+optical+coherence+tomography.">Monitoring morphological changes in the retina of rhodopsin-/- mice with spectral domain optical coherence tomography.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (7), 3967-3972 (2012).</li><li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral-domain+optical+coherence+tomographic+analysis+of+Rdh5-/-+mice+retina.">A spectral-domain optical coherence tomographic analysis of Rdh5-/- mice retina.</a> PLoS ONE. 15 (4), 0231220 (2020).</li><li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+imaging+by+optical+coherence+tomography+to+monitor+retinal+degeneration+in+the+mouse.">Noninvasive imaging by optical coherence tomography to monitor retinal degeneration in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 42 (12), 2981-2989 (2001).</li><li>Horio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+change+of+optical+coherence+tomography+scans+in+retinal+degeneration+slow+mice.">Progressive change of optical coherence tomography scans in retinal degeneration slow mice.</a> Archives of Ophthalmology. 119 (9), 1329-1332 (2001).</li><li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+VLDLR+in+the+retina+and+evolution+of+subretinal+neovascularization+in+the+knockout+mouse+model's+retinal+angiomatous+proliferation.">Expression of VLDLR in the retina and evolution of subretinal neovascularization in the knockout mouse model's retinal angiomatous proliferation.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 49 (1), 407-415 (2008).</li><li>Wyne, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+VLDL+receptor+in+endothelial+cells.">Expression of the VLDL receptor in endothelial cells.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 16 (3), 407-415 (1996).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+characterization+of+spontaneous+retinal+neovascularization+in+the+mouse+eye+by+multifunctional+optical+coherence+tomography.">In vivo characterization of spontaneous retinal neovascularization in the mouse eye by multifunctional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 59 (5), 2054-2068 (2018).</li><li>Fang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundus+autofluorescence,+spectral-domain+optical+coherence+tomography,+and+histology+correlations+in+a+Stargardt+disease+mouse+model.">Fundus autofluorescence, spectral-domain optical coherence tomography, and histology correlations in a Stargardt disease mouse model.</a> The FASEB Journal. 34 (3), 3693-3714 (2020).</li></ol>

Bu çalışmada, Vldlr nakavt farelerinde eksik posterior vitreus dekolmanı, subretinal neovaskülarizasyon ve retina kalınlığında incelme gösteren retinal değişiklikleri değerlendirmek için küçük hayvan retinal görüntüleme sistemi kullanılarak OCT görüntüleme uygulanmıştır. OKT, retinanın durumunu in vivo olarak incelemek için kullanılan noninvaziv bir görüntüleme yöntemidir. Çoğu OCT cihazı insan gözü muayenesi için tasarlanmıştır. Donanım ekipmanının boyutu, ...

Optik koherens tomografi (OKT), 1,2,3,4,5,6,7,8 dokusu için, özellikle retinadaki noninvaziv inceleme için in vivo yüksek çözünürlüklü ve kesitsel görüntüleme sağlayabilen bir görüntüleme tekniğidir 9,10,11,12 . Ayrıca retina kalınlığı ve retina sinir lifi tabakası kalınlığı gibi bazı önemli biyobelirteçleri ölçmek için de kullanılabilir. OCT'nin prensibi, bir numuneden yansıyan ışığın tutarlılığından kesitsel doku bilgisini elde eden ve bir bilgisayar sistemi aracılığıyla grafik veya dijital bir forma dönüştüren optik tutarlılık reflektometrisidir7. OKT, retina hastalıkları olan hastaların tanısı, takibi ve yönetimi için gerekli bir araç olarak oftalmoloji kliniklerinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Ayrıca retina hastalıklarının patogenezi hakkında fikir verebilir.
Klinik uygulamalara ek olarak, OCT hayvan çalışmalarında da kullanılmıştır. Patoloji morfolojik karakterizasyonun altın standardı olmasına rağmen, OKT noninvaziv in vivo görüntüleme ve uzunlamasına takip avantajına sahiptir. Ayrıca, OKT'nin retinopati hayvan modellerinde histopatoloji ile iyi ilişkili olduğu gösterilmiştir 11,13,14,15,16,17,18,19,20. Fare, biyomedikal çalışmalarda en sık kullanılan hayvandır. Bununla birlikte, küçük göz küreleri farelerde OCT görüntüleme yapmak için teknik bir zorluk oluşturmaktadır.
İlk olarak farelerde retinal görüntüleme için kullanılan OCT21,22 ile karşılaştırıldığında, küçük hayvanlarda OCT artık donanım ve yazılım sistemlerine göre optimize edilmiştir. Örneğin, OCT, izleyici ile birlikte, sinyal-gürültü oranını önemli ölçüde azaltır; OCT yazılım sistemi yükseltmeleri, daha fazla retina katmanının otomatik olarak algılanmasını sağlar; ve entegre DLP beamer, hareket artefaktlarını azaltmaya yardımcı olur.
Çok düşük yoğunluklu lipoprotein reseptörü (Vldlr), endotel hücrelerinde bulunan bir transmembran proteinidir. Retinal vasküler endotel hücreleri, retinal pigment epitel hücreleri ve dış sınırlayıcı membran23,24 çevresinde eksprese edilir. Subretinal neovaskülarizasyon, Vldlr nakavt fareleri23'ün fenotipidir. Bu nedenle, Vldlr nakavt fareleri, subretinal neovaskülarizasyonun patogenezini ve potansiyel tedavisini araştırmak için kullanılır. Bu makalede, küçük hayvan modellerinde retinopati araştırması için bazı teknik referanslar sağlamayı umarak, Vldlr nakavt farelerinde retinal lezyonları tespit etmek için OCT görüntülemenin uygulanması gösterilmektedir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100-Dpt contact lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double aspheric 60-Dpt glass lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating blanket</td>
			<td>POPOCOLA</td>
			<td>CW-DRT-01</td>
			<td>50 x 35 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection syringe (1 mL)</td>
			<td>Kaile</td>
			<td></td>
			<td>0.45 x 16RWLB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel</td>
			<td>EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 g: 0.015 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical sodium hyaluronate gel</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>16H01E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringes</td>
			<td>Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD</td>
			<td>Q31/0113000236C001-2017</td>
			<td>50 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine solution</td>
			<td>Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RETImap</td>
			<td>ROLAND CONSULT</td>
			<td>19-99_50-2.1_1.2E</td>
			<td>cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ear studs</td>
			<td>OSMO POCKET OT110</td>
			<td>INS1005-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>Santen Pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X1251-5G</td>
			<td>5 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>Virbac.S.A</td>
			<td>7FRPA</td>
			<td>Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy

Optik koherens tomografi (OKT) retinopati tanısında noninvaziv bir yöntem sunmaktadır. OCT makinesi, retina kalınlığının hesaplanabileceği retinal kesitsel görüntüleri yakalayabilir. OCT klinik pratikte yaygın olarak kullanılmasına rağmen, temel araştırmalardaki uygulaması, özellikle fareler gibi küçük hayvanlarda yaygın değildir. Göz kürelerinin küçük boyutu nedeniyle, farelerde fundus görüntüleme incelemeleri yapmak zordur. Bu nedenle, küçük hayvanlarda OCT görüntülemeyi yerleştirmek için özel bir retinal görüntüleme sistemi gereklidir. Bu makalede, OCT muayene prosedürleri için küçük hayvanlara özgü bir sistem ve görüntü analizi için ayrıntılı bir yöntem gösterilmektedir. Çok düşük yoğunluklu lipoprotein reseptörü (Vldlr) nakavt fareleri ve C57BL/6J farelerin retinal OCT incelemesinin sonuçları sunulmuştur. C57BL / 6J farelerinin OCT görüntüleri retina tabakalarını gösterirken, Vldlr nakavt farelerininki subretinal neovaskülarizasyon ve retina incelmesi gösterdi. Özetle, OCT muayenesi fare modellerinde retinopatinin noninvaziv tespitini ve ölçümünü kolaylaştırabilir.

OCT'nin yüksek çözünürlüklü taramaları sayesinde, fare retinasının katmanları gözlemlenebilir ve anormal yansımalar ve bunların tam konumları belirlenebilir. Bu çalışmada Vldlr nakavt fareleri ve C57BL/6J farelerin retinal OCT görüntüleri karşılaştırıldı. Tüm C57BL/6J farelerinin OCT görüntüleri, farklı yansıtıcılığa sahip çeşitli retina tabakaları gösterdi ve sınır açıktı (Şekil 8D). Buna karşılık, tüm Vldlr nakavt fareler...

Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Burada, farelerde retinopatinin tanısını ve kantitatif ölçümünü kolaylaştırmak için optik koherens tomografi kullanan bir in vivo görüntüleme tekniğini tanımladık.

Optik Koherens Tomografinin Retinopatinin Bir Fare Modeline Uygulanması

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Optik koherens tomografi, farklı retina hastalıklarının klinik tanısında yaygın olarak kullanılmaktadır, ancak fare modellerinde uygulanması hala zordur. Bu protokol, hayvanlarda OCT tekniğinin nasıl yönetileceğini açıklar. Bu teknoloji farklı göz küresi boyutlarına sahip hayvanlara uygulanabilir.İnvaziv olmayan, yüksek çözünürlüklü ve gerçek zamanlı retinal kesitsel görüntülemenin yanı sıra retina kalınlığının kantitatif ölçümlerini sağlar. OKT, lezyonların lokalizasyonu, aralığı, şekli ve büyüklüğü gibi lezyon özelliklerinin yanı sıra retinal neovaskülarizasyon gibi şüphelenilen tüm retinal anormallikleri tanımlayarak retinopati tanısında yardımcı olur. Bu protokol, retina hastalıkları da dahil olmak üzere hayvan çalışmaları veya fundus hastalıkları için geçerlidir.Prosedüre başlamadan önce hazırlıklı olun ve protokolü adım adım takip edin. Hayvan anestezi uygulandığında deneyi yapın. Bazı uygulamalardan sonra kaliteli OCT görüntüleri elde edilebilmelidir.Başlamak için bilgisayarı açın ve yazılımı başlatın. Test programını tamamlamak için test programı düğmesini tıklatın. Ardından, termostatı açın ve 37 santigrat dereceye kadar önceden ısıtın.Program testinden sonra, OCT modülü yordamını başlatın. Yeni bir konu oluşturun ve fare bilgilerini doldurun. Ardından, elektrikli battaniyeyi önceden ısıtın ve cerrahi havlularla örtün.Anestezi uygulanan fareyi elektrikli battaniye platformuna yerleştirin ve hemen her iki gözü de tıbbi sodyum hyaluronatis jeli ile kaplayın. Ardından, fare korneasına, içbükey tarafı kornea yüzeyindeki sodyum hyaluronatat jeline dokunacak şekilde 100D kontakt lens yerleştirin. Ardından, fareyi cSLO cihazının küçük, sabit sıcaklıktaki hayvan platformunun üzerine getirin.Göz bebeğini lensin merkezinde tutmak için forseps ile kontakt lensin açısını ayarlayın. Gözün düz bir şekilde öne bakmasını sağlamak için kafadaki ayarlamalara ince ayar yapın. OCT düğmesine tıklayın, fare modülünü seçin ve cSLO programını başlatın.Ardından, ön ayarlı lensi yavaşça kontakt lense doğru hareket ettirmek için çalışma kolunu kullanın. Anterior-posterior kutbun görüntüsünü optik sinir kafasında ortalayarak hizalamak için daha fazla ayarlama yapın. Ardından, OCT programını başlatın ve OCT görüntüsü görünene kadar ilerleme çubuğunu yukarı ve aşağı tıklatın.Minimum aralığı 0 ile 20 arasında, maksimum aralığı ise 40 ile 60 arasında ayarlayın. Ardından, ideal bir OCT görüntüsü elde edilene kadar önceden ayarlanmış lens mesafesini ve konum yönünü ayarlayın. cSLO'daki standart çizgiyi hareket ettirerek tarama konumunu seçin.Ardından, cSLO ve OCT görüntü sinyalini kaplamak için ortalama'yı tıklatın ve SLO OCT görüntüsünü almak için çekim düğmesini tıklatın. Deneyden sonra, 100D kontakt lensi çıkarın ve korneayı korumak için levofloksasin göz jelini uygulayın. Retinal tabakalaşma düzeltmesi için, OCT arayüzünde yük incelemesine tıklayın ve bir açılır pencereden OCT görüntülerini çağırın.Ardından, ekranda görüntülemek için medya kabındaki görüntüyü çift tıklatın. Ardından, retinada otomatik katmanlamayı tamamlamak için katman algılamaya tıklayın. Analiz için hazırlanan katmanın her iki tarafındaki bölme çizgisini seçtikten sonra, aralığı ayarlamak ve aralığı sınırlamak için katmanı düzenle'yi tıklatın.Ardından, kırmızı daireyi hareket ettirerek çizgiyi değiştirin. Retinal laminasyon kalınlığını ölçmek için, ölçüm işaretçisi düğmesini tıklatın ve OCT görüntüsünde katmanın sınırını görüntülemek üzere analiz edilecek katmanın bölme çizgisini seçin. Ardından, katmanla bağlan'ı seçin ve hareket halindeyken bağlı kalın.Ardından, sonuçların görüntüleneceği alanı seçin ve ölçüm çizgisinin görünmesini sağlamak için OCT görüntüsünde analiz edilecek konumu tıklatın. Sonraki ölçümler için ve önceki verileri ortaya çıkarmak için bir sonraki sütuna tıklayın. Tam retina kalınlığını ölçmek için, sağ üst köşedeki listeden birinci satırı ve yedinci satırı seçin.Daha sonra, optik papillanın kenarındaki retinal yapının görünümünden, yatay cetvel üzerinde 200 mikrometre aralıklı aralıklarla dört değer ölçün. C57BL/6 farelerin OCT görüntüleri, net sınırları olan çeşitli retina tabakalarını gösterdi. Buna karşılık, Vldlr nakavt fareleri anormal hiperreflektif lezyonlar gösterdi.OCT görüntüleri, Vldlr nakavt farelerinin retinal yüzeylerinde bazı orta yansıtıcı bantlar gösterdi. Bu bantlar retina damarına yapışmış olup, eksik vitreus dekolmanı OCT özellikleri ile tutarlıdır. Subretinal boşlukta bir hiperreflektif lezyon ortaya çıktı ve dış nükleer tabakaya yayıldı, ancak dış pleksiform tabakayı kırmadı.Bu lezyonun OKT görünümü patolojik bulgularla uyumluydu. Patolojik kesit, neovaskülarizasyonun retinal pigment epitel tabakasını, fotoreseptör iç-dış segmentlerini ve dış sınırlayıcı membranı kırarak dış nükleer tabakayı invaze ettiğini, ancak dış pleksiform tabakayı invaze etmediğini gösterdi. Subretinal boşlukta bulunan bir başka hiperreflektif lezyon bandı, dış nükleer tabakayı içermiyordu.Patolojik bulgularla uyumlu olarak, bu subretinal neovaskülarizasyon dış sınırlayıcı membranı kırmadı. İki grup arasında sağ gözün retinal kalınlığının posterior poların zamansal, nazal, üst ve alt yönlerinde karşılaştırılması, Vldlr nakavt farelerinin retina kalınlığının C57BL / 6J farelerinkinden anlamlı derecede düşük olduğunu ortaya koymuştur. Protokolü uygularken, korneaya düzgün bir şekilde 100D kontakt lens yerleştirin, ardından görüntü konumunu ayarlayın.Tarama konumunu seçin ve çekimden önce görüntüyü bindirin. Bu prosedürü takiben, ön ayarlı lens ile kornea arasındaki mesafenin değiştirilmesini gerektiren ön segment OCT uygulanabilir. Korneayı, ön kamsayı, irisi, siliyer gövdeyi ve lensi gösterebilir.Bu teknik, küçük hayvan modellerinde retinopati araştırması için önemli bir araç sağlar ve temel araştırmalarda retinopatinin non-invaziv tespitini ve ölçümünü teşvik eder.

Research

JoVE Journal

Medicine

Doppler Optical Coherence Tomography of Retinal Circulation

Retina Sirkülasyon Doppler Optik Koherens Tomografi

Noncontact retinal blood flow measurements are performed with a Fourier domain optical coherence tomography (OCT) system using a circumpapillary double ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Diyabet Araştırma β-hücre Kütle Dağılımı değerlendirmelerinde Kızılötesi Optik Projeksiyon Tomografi civarında

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Üretim ve Farelerde arteriyel Lezyonlarının 3-Boyutlu kantitasyonu Optik Projeksiyon Tomografi ile

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

Vivo, Perkütan, İğne Tabanlı, Böbrek Kitlelerin Optik Koherens Tomografi

Optical coherence tomography (OCT) is the optical equivalent of ultrasound imaging, based on the backscattering of near infrared light. OCT provides real ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Bir Yenidoğan Fare Omurilik Sıkıştırma Yaralanması Modeli

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Diffuse Optical Spectroscopy for the Quantitative Assessment of Acute Ionizing Radiation Induced Skin Toxicity Using a Mouse Model

Bir fare Modeli Kullanılarak Akut Radyasyondan Bağlı Cilt zehirlilik Kantitatif Değerlendirme optik tayf Diffüz

Acute skin toxicities from ionizing radiation (IR) are a common side effect from therapeutic courses of external beam radiation therapy (RT) and ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Tümör Gelişim Değerlendirme Mikro bilgisayarlı Tomografi ile ve Takibi Tedavi Yanıtın Akciğer Kanseri Fare Modeli

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Ultrahigh Resolution Mouse Optical Coherence Tomography to Aid Intraocular Injection in Retinal Gene Therapy Research

Ultrahigh çözünürlük fare optik koherens tomografi göz içi enjeksiyon Retina gen terapisi araştırma yardımcı olmak için

HR-SD-OCT is utilized to monitor the progression of photoreceptor degeneration in live mouse models, assess the delivery of therapeutic agents into the ...

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

Vivo Tayf alanlı optik Koherens tomografi ve lazer Ophthalmoscopy tarama Cx3cr1gfp/gfp muhabir farelerin görüntüleme

Spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) and scanning laser ophthalmoscopy (SLO) are extensively used in experimental ophthalmology. In the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...