Name: a modified surgical technique for kidney transplantation in mice
Uploaded: 2022-07-22T13:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Modified Surgical Technique for Kidney Transplantation in Mice at JoVE.com

Seslendirme konusundaki yardımları için Dr. Tiantian Bai ekibine, tıbbi illüstrasyondaki yardımları için Bayan Mian Pao'ya teşekkür ederiz. Bu çalışma kısmen uluslararası işbirliklerini teşvik etmek için Alman Araştırma Vakfı (DFG) (AH'ye HO2581/4-1) ve Çin Ulusal Bilim Vakfı (NSFC; #81760291 FJ'ye) tarafından desteklenmiştir.

Tüm hayvan deneyleri, Avrupa Parlamentosu'nun bilimsel amaçlar için kullanılan hayvanların korunmasına ilişkin 2010/63/EU sayılı direktifindeki yönergelere göre yürütülmüştür (Hayvan etik kartı: Aşağı Saksonya Gıda ve İlaç Güvenliği Bakanlığı, #33.9-42502-04-11/0492). Steril cerrahi aletler ve sarf malzemeleri (otoklavlanmış) kullanarak prosedürler uygulayın ve çalışma alanını mümkün olduğunca steril tutmaya çalışın.
NOT: C57BL / 6J erkek fareler do...

<ol>
	<li>Skoskiewicz, M., Chase, C., Winn, H. J., Russell, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplants+between+mice+of+graded+immunogenetic+diversity.">Kidney transplants between mice of graded immunogenetic diversity.</a> Transplantation Proceedings. 5 (1), 721-725 (1973).</li><li>Jiang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+assessment+of+renal+fibrosis+with+magnetization+transfer+MR+imaging:+Validation+and+evaluation+in+murine+renal+artery+stenosis.">Noninvasive assessment of renal fibrosis with magnetization transfer MR imaging: Validation and evaluation in murine renal artery stenosis.</a> Radiology. 283 (1), 77-86 (2017).</li><li>Tse, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+kidney+transplantation:+Models+of+allograft+rejection.">Mouse kidney transplantation: Models of allograft rejection.</a> Journal of Visualized Experiments. (92), e52163 (2014).</li><li>Okazaki, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.Costimulatory+blockade-mediated+lung+allograft+acceptance+is+abrogated+by+overexpression+of+Bcl-2+in+the+recipient.">et al.Costimulatory blockade-mediated lung allograft acceptance is abrogated by overexpression of Bcl-2 in the recipient.</a> Transplantation Proceedings. 41 (1), 385-387 (2009).</li><li>Chuck, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=et+al.Ultra-short+echo-time+magnetic+resonance+imaging+distinguishes+ischemia/reperfusion+injury+from+acute+rejection+in+a+mouse+lung+transplantation+model.">et al.Ultra-short echo-time magnetic resonance imaging distinguishes ischemia/reperfusion injury from acute rejection in a mouse lung transplantation model.</a> Transplant International. 29 (1), 108-118 (2016).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pattern+of+liver,+kidney,+heart,+and+intestine+allograft+rejection+in+different+mouse+strain+combinations.">Pattern of liver, kidney, heart, and intestine allograft rejection in different mouse strain combinations.</a> Transplantation. 62 (9), 1267-1272 (1996).</li><li>Wang, J., Hockenheimer, S., Bickerstaff, A. A., Hadley, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+transplantation+procedure.">Murine renal transplantation procedure.</a> Journal of Visualized Experiments. (29), e1150 (2009).</li><li>Plenter, R., Jain, S., Ruller, C. M., Nydam, T. L., Jani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+kidney+transplant+technique.">Murine kidney transplant technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (104), e52848 (2015).</li><li>Plenter, R. J., Jain, S., Nydam, T. L., Jani, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Revised+arterial+anastomosis+for+improving+murine+kidney+transplant+outcomes.">Revised arterial anastomosis for improving murine kidney transplant outcomes.</a> Journal of Investigative Surgery. 28 (4), 208-214 (2015).</li><li>Rong, S., Lewis, A. G., Kunter, U., Haller, H., Gueler, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+knotless+technique+for+kidney+transplantation+in+the+mouse.">A knotless technique for kidney transplantation in the mouse.</a> Journal of Transplantation. , 127215 (2012).</li><li>Kreimann, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemia+reperfusion+injury+triggers+CXCL13+release+and+B-cell+recruitment+after+allogenic+kidney+transplantation.">Ischemia reperfusion injury triggers CXCL13 release and B-cell recruitment after allogenic kidney transplantation.</a> Frontiers in Immunology. 11, 1204 (2020).</li><li>Schmidbauer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diffusion-Weighted+imaging+and+mapping+of+T1+and+T2+relaxation+time+for+evaluation+of+chronic+renal+allograft+rejection+in+a+translational+mouse+model.">Diffusion-Weighted imaging and mapping of T1 and T2 relaxation time for evaluation of chronic renal allograft rejection in a translational mouse model.</a> Journal of Clinical Medicine. 10 (19), 4318 (2021).</li><li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+technique+for+blood+circuit+reconstruction+in+mouse+heart+transplantation+model.">Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model.</a> Microsurgery. 26, 594-598 (2006).</li><li>Haas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+allograft+nephropathy+or+interstitial+fibrosis+and+tubular+atrophy:+what+is+in+a+name.">Chronic allograft nephropathy or interstitial fibrosis and tubular atrophy: what is in a name.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 23 (3), 245-250 (2014).</li><li>Dang, Z., MacKinnon, A., Marson, L. P., Sethi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tubular+atrophy+and+interstitial+fibrosis+after+renal+transplantation+is+dependent+on+galectin-3.">Tubular atrophy and interstitial fibrosis after renal transplantation is dependent on galectin-3.</a> Transplantation. 93 (5), 477-484 (2012).</li><li>Yin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+circuit+reconstruction+in+an+abdominal+mouse+heart+transplantation+model.">Blood circuit reconstruction in an abdominal mouse heart transplantation model.</a> Journal of Visualized Experiments. (172), e62007 (2021).</li><li>Zhang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+techniques+for+kidney+transplantation+in+mice.">Improved techniques for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 16 (2), 103-109 (1995).</li><li>Mannon, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+rejection+of+mouse+kidney+allografts.">Chronic rejection of mouse kidney allografts.</a> Kidney International. 55 (5), 1935-1944 (1999).</li><li>Coffman, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+renal+function+in+mouse+kidney+allografts+lacking+MHC+class+I+antigens.">Improved renal function in mouse kidney allografts lacking MHC class I antigens.</a> Journal of Immunology. 151 (1), 425-435 (1993).</li><li>Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+curve,+surgical+results+and+operative+complications+for+kidney+transplantation+in+mice.">Learning curve, surgical results and operative complications for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 26 (8), 590-593 (2006).</li></ol>

Farelerde deri nakli modeli, alloimmün rejeksiyon olaylarını incelemek için basit ve kolay bir şekilde gerçekleştirilirken, kalp16 ve böbrek nakli10 sonrası alloimmün ilişkili inflamatuar değişiklikleri daha spesifik olarak araştırmak için cerrahi tekniklerin karmaşık ve çok zorlu olduğu kanıtlanmıştır. Transplant nefrologunun bakış açısına göre, etkili ve uzun vadeli stabil bir fare böbrek nakli modelinin kurulması, birçok fonksiyonel ve im...

Sakowitz ve ark. 1973 yılında ilk kez böbrek transplantasyonunun fare modellerini geliştirdiğinden beri1, transplant iskemik hasarı ve alloimmün rejeksiyon mekanizmalarını incelemek ve allogreft sağkalımını uzatmak ve muhtemelen immünolojik toleransı sağlamak için yeni tedaviler geliştirmek için önemli bir deneysel araç olarak kanıtlanmıştır. Bununla birlikte, cerrahi tekniğin karmaşık ve çok zorlu olduğu kanıtlanmıştır, bazen prerenal immünolojik olmayan böbrek nakli yetmezliğine yol açan vasküler anastomoz darlıkları2, iskeminin neden olduğu postrenal yetmezlik ve nakledilen üreterin müteakip nekrozu, nakledilen üreterin anastomozunun darlıkları ve / veya alıcının idrar mesanesinin darlıkları idrar çıkışının bozulmasına neden olan komplikasyonlara neden olmuştur. Bunların hepsi, farelerde böbrek transplantasyonunun daha da gelişmemesinin ve bu nedenle yaygın olarak kullanılmamasının nedenleridir. Vasküler ve üriner sistem komplikasyonları olmadan etkili ve uzun süreli stabil bir fare böbrek nakli modeli oluşturmak, böbrek immün aracılı ve aynı zamanda bulaşıcı hastalıklara odaklanarak nakil alanındaki birçok çalışma için hala yeri doldurulamaz bir öneme sahiptir3. Ek olarak, akciğer, kalp ve bağırsak nakli 4,5 gibi murin modellerindeki diğer organ nakilleriyle karşılaştırıldığında, fare böbrek nakli modeli, majör histokompatibilite antijen eşitsizliği 3,6 ortamında bile uzun süreli sağkalımı incelemek için bir şans sunmaktadır. Ayrıca, donör-alıcı suş kombinasyonlarının aynı ortamında, kalp veya böbrek gibi farklı organ nakillerinin, allogreft reddinin farklı dinamikleri ve başlangıçları ile karakterize olduğu gösterilmiştir3. Ayrıca, nefrolojik açıdan bakıldığında, akut ve kronik rejeksiyon olayları bağlamında parankimal aracılı immün düzenleyici mekanizmaları incelemek için basit cilt nakli deneylerinden daha uygun bir modeldir.
Farelerde böbrek nakli cerrahi tekniği ile ilgili önceki raporlara dayanarak 3,7,8,9, grubumuzda son 10 yılda başarıyla uygulanan aşağıdaki güvenilir gelişmeleri gösteriyoruz10,11,12: İlk olarak, renal arter en blok rezeke edildiğinden üreter arteri güvenli bir şekilde korunmaktadır. abdominal aortun ilgili kısmı ile birlikte. İkincisi, anastomozun son dikişinin geleneksel yaklaşım gibi üst bağın ucuna bağlanmadığı, ancak serbest kaldığı düğümsüz bir vasküler anastomozun yeni, basit ve hızlı bir tekniğidir. Bu teknik, damar darlığını ve intraabdominal kanamayı önlemek için renal reperfüzyon sonrası anastomozun boyutunun arttırılmasını veya azaltılmasını sağlar. Üçüncü olarak, 21 G ve 30 G şırınga iğneleri, donör üreterin alıcının mesane duvarına implante edilmesi için yardımcı bir delinme kılavuz aracı olarak kullanıldı ve alıcının mesanesindeki hasarı azalttı ve darlık içermeyen anastomoz oluşumunu kolaylaştırdı.
Bu yazıda ayrıca geleneksel, yaygın olarak kullanılan tekniği laboratuvarımızda kurulan modifiye teknikle karşılaştırdık ve renal tübüler atrofi ve böbrek nakli interstisyel doku fibrozisi derecelerinde anlamlı bir fark bulamadık. Önceki çalışmalarda lokal kanama, tromboz, damar anastomozu yapılma süresi ve sağkalım oranı açısından bu yeni tekniğin sonuçlarını konvansiyonel yöntemle karşılaştırdık. Lokal tromboz olaylarında önemli azalmalar (%1.1'e karşı %6.6), anastomoz prosedürü için daha kısa bir süre ve yüksek oranda tekrarlanabilir böbrek sinjenik greft uzun süreli sağkalım (klasik yaklaşımla %95'e karşı %84) gibi iyileşmeler bulduk10.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>30G-needles</td>
			<td>Braun</td>
			<td>456300</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>acepromazine</td>
			<td>CP Pharma</td>
			<td>Tranquisol P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bepanthen eye ointment</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 01578675</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bonn Micro Forceps</td>
			<td>FST</td>
			<td>11083-07</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Box for insulation and oxygen supply device</td>
			<td>RUSKINN</td>
			<td>INVIV</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6J&#160; mice</td>
			<td>Charles River. Germany</td>
			<td>no catalog number</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>Rimadyl 50 mg/ml</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CATHETER-FEP 26G</td>
			<td>TERUMO</td>
			<td>Surflo-W</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip Applicator Forceps Style</td>
			<td>FST</td>
			<td>18057-14</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14114-G</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cutasept skin disinfection</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BODL980365</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dehydrator</td>
			<td>DIAPATH</td>
			<td>Donatello</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electrosurgical pen</td>
			<td>Bovie</td>
			<td>CHANGE-A-TIP</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding machine</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-P5</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co. LtD</td>
			<td>100092683</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Frozen platform</td>
			<td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td>
			<td>JB-L5</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gauze pads, cotton swabs</td>
			<td>Lohmann-Rauscher</td>
			<td>13353</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass slide</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G6004</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HE dye solution set</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G1003</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating mat</td>
			<td>THERMO MAT PRO 30W</td>
			<td>HTP-30</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hemostatic sponge</td>
			<td>CuraSpon</td>
			<td>J1276A</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>heparine-solution</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 03029820</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ice box</td>
			<td>PETZ</td>
			<td>No Catalog Number available</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging system</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Nikon DS-U3</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inhalation anesthesia device</td>
			<td>GROPPLER</td>
			<td>BKGM 0616</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>CP Pharma</td>
			<td>Isofluran CP 1 ml/ml</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketamine</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masson dye solution set</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>G1006</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>metamizole</td>
			<td>WDT</td>
			<td>no catalog numer</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro scissors</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-00,15000-10</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Serrefine ( Clamp ) Angled / 16 mm</td>
			<td>FST</td>
			<td>18055-06</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>LEICAMZ6</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope light</td>
			<td>SCHOTT</td>
			<td>KL2500LED</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral gum</td>
			<td>SCRC</td>
			<td>10004160</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td>Tianjin Laibo Rui Instrument Equipment Co., Ltd</td>
			<td>GFL-230</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pathology slicer</td>
			<td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td>
			<td>RM2016</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution (NaCl 0.9 %)</td>
			<td>Haus-Apotheke</td>
			<td>PZN 06178437</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>scissors</td>
			<td>Peha Instruments</td>
			<td>991083/4</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slides</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>small Petri dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>8,33,900</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>straight forceps</td>
			<td>WPI</td>
			<td>14113-G</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical tape</td>
			<td>BSN</td>
			<td>4120</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture Tying Forceps - 10 cm</td>
			<td>FST</td>
			<td>18025-10</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(10-0)</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>N2540</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(4-0)</td>
			<td>ETHILON</td>
			<td>V4940H</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures(7-0)</td>
			<td>ETHILON</td>
			<td>1647H</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (0,3 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>324826</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe (1 mL)</td>
			<td>BD</td>
			<td>320801</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue spreader</td>
			<td>Zhejiang Kehua Instrument Co., Ltd</td>
			<td>KD-P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Upright optical microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Nikon Eclipse E100</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene</td>
			<td>Sinopharm Group Chemical Reagent Co. LtD</td>
			<td>10023418</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a modified surgical technique for kidney transplantation in mice

Farelerde böbrek nakli karmaşık ve zorlu bir cerrahi prosedürdür. Bu operasyonun temel adımlarını gösteren çok az yayın var. Bu nedenle, bu makale tekniği tanıtmakta ve bu operasyonla ilişkili cerrahi uyarılara işaret etmektedir. Ek olarak, geleneksel prosedüre kıyasla önemli değişiklikler gösterilmiştir. İlk olarak, abdominal aortun bir yaması kesilir ve hazırlanır, böylece üreter arteri de dahil olmak üzere renal arterin proksimal bifurkasyonları donör böbrek en blok ile birlikte transekte edilir. Bu, üreter nekrozu riskini azaltır ve idrar yolu tıkanıklığının gelişmesini önler. İkincisi, böbrek nakli reperfüzyonu başlatıldıktan sonra operatörün anastomozun boyutunu esnek bir şekilde artırmasına veya azaltmasına izin veren yeni bir vasküler anastomoz yöntemi gösterilmiştir. Bu, damar darlıklarının ve intraabdominal kanamanın gelişmesini önler. Üçüncü olarak, hassas donör üreterin ve alıcı mesanesinin travmaya neden olmayan anastomozunu sağlayan bir teknik gösterilmiştir. Bu protokolün benimsenmesi operasyon süresini kısaltabilir ve alıcının mesanesine verilen hasarı azaltabilir, böylece alıcı fareler için operasyon başarı oranını önemli ölçüde artırabilir.

Transplantasyondan dört hafta sonra, hem modifiye teknik hem de konvansiyonel teknik, doğal alıcı kontralateral böbreklere kıyasla 14,15 oranında renal tübüler atrofi14,15 orta derecede bulgular göstermiştir (Şekil 1). Renal tübül atrofisinin derecesi, iki farklı teknik arasında anlamlı bir fark göstermedi. Masson Goldner'ın transplantasyondan 12 hafta sonra böbreklerin14,15'ini trikrom boy...

Watch this Scientific Journal Video about A Modified Surgical Technique for Kidney Transplantation in Mice at JoVE.com

A Modified Surgical Technique for Kidney Transplantation in Mice

Bu protokol, modifiye arteriyel anastomoz stratejisine odaklanan fare böbrek transplantasyonunun yeni bir cerrahi tekniğini sunmaktadır. Basit ve daha güvenli bir üreter-mesane anastomoz yöntemini içeren bir vasküler sütür tekniği de sunulmaktadır. Bu modifikasyonlar ameliyat süresini kısaltır ve fare böbrek nakli işleminin başarı oranını artırır.

Farelerde Böbrek Nakli için Modifiye Bir Cerrahi Teknik

Kidney transplantation in mice is a complicated and challenging surgery procedure. There are very few publications demonstrating the key steps of this ...

Farelerde böbrek transplantasyonu, akut ve kronik allogreft reddi mekanizmalarının incelenmesi için gereklidir. Burada damar anastomozu için yeni bir cerrahi teknik ve farelerde abdominal böbrek nakli modelinde üreteral implantasyon tanıtılmaktadır. Geleneksel fare böbrek nakli modellerinde, aortun üst kısmı renal arterlere yaklaşık olarak bağlanır.Donörün sol renal veni vena kavada transekte edilir ve donör aort, alıcının abdominal aortuna daha sonra anastomoz olmak üzere renal arterin altına eşit olarak bölünür. Fare böbrek transplantasyonunun bu modifiye tekniğinde, donör sol böbrek damarı da vena kavada transekte edilir, ancak donör aort, renal arterin yavrularının üzerinde kesilir ve alıcı abdominal aort için anastomoz yapılır. Aortun donör ucu bağlanırken, üreter arteri kasıtlı olarak korunur.Şimdi cerrahi prosedürün gösterimine başlıyoruz. Anestezi için, bilinç kaybına neden olmak için fareyi izofluranın yaklaşık 40 ila 60 saniye solunması için kutuya yerleştirin. Fare anestezi uygulandıktan sonra fareyi tartın.Fare ağırlığına göre, anestezi uygulanan fareye intraperitoneal ketamin, ksilazin, asepromazin enjeksiyonu yapılır. Anestezi etkili olduğunda, karın kürkünü klipsleyin. Ardından, fareyi ameliyat masasına sabitleyin ve dezenfekte edin.Çapraz karın insizyonunu kullanarak cildi kesin. Karın duvarının kaslarını kesin. Daha sonra, iç organları dikkatli bir şekilde salin emdirilmiş bir gazlı bezle uzaklaştırın.Sol böbrek, aort ve inferior vena kavayı açığa çıkarın. Altta yatan dalları ve sol adrenal damar dahil diğer küçük damarlar da dahil olmak üzere sol bel damarlarını dikkatlice koterize edin. Sol ve sağ renal arterler arasındaki aort bölgesini yaklaşık iki milimetre uzunluğunda mobilize edin.İnfrarenal inferior vena kava ve aortu ayırın. Ve bu damarın etrafına 7.06 dikişli gevşek bir bağ yerleştirmek için aortun altına kavisli forseps geçirin. Aort bölgesini sağ renal arterin altındaki ve inferior vena kavayı iki beş milimetre mikrovasküler kelepçe kullanarak çapraz kelepçeleyin.Sol böbrek damarını vena kavadan transekte edin. Aortu bir mililitre heparin çözeltisi ile yıkayın. Ligattürü sıkın ve aortu ligatürün altında ve proksimal kelepçenin altında kesin.Hassas üreter arterinin tamamen korunması için dikkatlice hazırlanın. sol böbreği ve ilişkili damarları, dokuyu çevreleyen tüm damarları dikkatli bir şekilde koterize ederek tamamen serbest bırakır. Böbreği çıkarın ve dört derecede hücre hattı çözeltisinde saklayın.İlk ameliyat adımları, anestezi ve dezenfeksiyon dahil olmak üzere donör fare için daha önce gösterilenlere benzer. Karnı medyan kesi ile açın, ardından karın organlarını tuzlu su çözeltisi kullanarak ıslak bir gazlı bezle örtün. İnfrarenal aortu dikkatlice koruyun ve her büyük damar dalının koterize edildiğinden emin olun.Sol üreteri böbrek pelvisine yakın bir pozisyonda dikkatlice diseke etmek için elektrikli koteri kullanın. Ardından, sol böbreği çıkarın. İnferior vena kava ve abdominal aortu açığa çıkarın ve bunları yaklaşık dört milimetre uzunluğundaki çevreleyen yağ dokusundan ayırın.Daha sonra her biri yaklaşık ve distal olarak iki mikrovasküler kelepçe ile çapraz kelepçe. Aort duvarından proksimal ila distal şekilde yerleştirilen 10/0 monofilament sütür iğnesini yönlendirmek için bir mikro iğne tutucu kullanın. Yaklaşık bir milimetrelik eliptik arteriyotomi, dikişin hafifçe yukarı doğru çekilmesiyle elde edilirken, iğnenin alt yüzünün hemen altından ince, kavisli makasla kesilir.Donör alıcı aort anastomozunu uçtan uca uygulayın. Anastomozun proksimal ve distal uçlarını dikin. İki ayrı 10.0 dikiş kullanılarak son dikiş.Bağladıktan sonra, iğne de dahil olmak üzere iki uzun dikişi yerinde bırakın. Anastomozun aort duvarının sol tarafını distal-proksimal yönde eşit aralıklı iki dikişle sürekli dikin. Son dikişten sonra, sütürü üst dikiş bağının üzerindeki damar duvarının kısmi kalınlığından geçirin ve aynı anda alt dikiş bağının kısa ucuna yumuşak bir çekiş uygulayın.Bu yeni düğümsüz teknikte, son dikişin üst bağın kısa ucuna bağlı olmadığını unutmayın. Nakledilen böbreği normal konumuna getirin. Şimdi sürekli olarak aort anastomozunun sağ duvarını proksimal ila distal bir şekilde proksimal ila distal bir şekilde üç dikiş kullanarak dikin.Not, konvansiyonel cerrahi tekniğe kıyasla, son dikiş yakındaki distal bağ ile birleştirilir. Alt dikişin sonuna bağlamayın, bunun yerine yaklaşık iki ila üç milimetrelik serbest bir uzunluk bırakmak için kesin. İnferior vena kava uzunlamasına yaklaşık 1,5 milimetre yeterli uzunlukta kesin.Bu insizyonu aort muadilinin biraz altına yerleştirin. Venöz anastomozu, anastomozun her iki tarafı için dört ila beş dikişin gerekli olduğu farkıyla, daha önce tarif edildiği gibi aynı dikiş prosedürünü kullanarak gerçekleştirin. Son dikiş, yukarıda tarif edilen aort anastomozuna benzer uzunlukta serbest bir uç olarak bırakılır.Ve yeni düğümsüz anastomoz tekniği, son dikiş bağlı değil, serbest bırakılır. Bu, ameliyat süresini kısaltır ve cerrahın anastomozun boyutunu artırmasını veya azaltmasını sağlar. Bu gelişme vasküler anastomozun zorluğunu ve ameliyat sonrası komplikasyonlarını azaltır.Her iki anastomozu da tamamladıktan sonra, dikişli bölgeye yaklaşık 10 ila 20 saniye boyunca hafif bir basınç uygulamak için kuru bir çubuk kullanın. Bundan sonra, her iki kelepçe de çıkarılabilir. 10.0 dikişli düz bir iğne kullanarak alıcının idrar kesesine nüfuz edin ve rehberlik için 21 G'lık bir iğne lümenine yerleştirin.Şimdi 21 G iğneyi önceki iğne uygulamasının yerine bir delik açmak ve iğneyi çıkarmak için yönlendirin. Kesilmiş üreter ucunu dikin ve mesanenin giriş yerinde tekrar bu 10.0 dikişle mesaneyi delin. 10.0 filamentini ve üreteri inşa edilen delikten idrar kesesine çekin.Donörün üreterini alıcının idrar kesesine anastomoz edin. Burada, üreterin dış zarını mesane duvarının dış zarına bağlayın ve aralıklı dikişleri üç ila dört dikişle gerçekleştirin. Çekiş dikişini dışarı çekin.Bağırsakları tekrar karın boşluğuna yerleştirin. İki katmanlı dikişler yapın, önce karın kasları ve ardından karın yarasını kapatmak için cilt tarafından takip edilir. Nakledilen fareleri ameliyattan sonra iyileşmek için oksijen ve sıcaklık kontrollü bir odaya yerleştirin.Ameliyattan dört gün sonra yeterli postoperatif analjezi verin. Transplantasyon anestezisinden beş gün sonra alıcı farenin kontralateral nefrektomisini gerçekleştirin. Farenin durumunu kaldırın ve kaydedin.Konvansiyonel ve modifiye transplantasyon tekniklerini, transplante edilen izogreft böbreklerin histolojik değişikliklerini doğal alıcı kontralateral böbreklere karşı değerlendirerek karşılaştırdık. Hem renal tübüllerin kupa derecesi hem de renal interstisyel fibrozisin transplantasyondan sırasıyla dört ve 12 hafta sonra anlamlı olarak farklı olduğu bulunmadı. Bu yeni düğümsüz tekniğin sonuçlarını daha önce araştırmış ve interoperatif ve postoperatif komplikasyonların teknik yönleri açısından klasik yaklaşımla karşılaştırmıştık.Burada gösterilen modifiye teknik, intragreft arteriyel venöz trombotik olayların daha düşük bir oluşumu ile ilişkiliydi. Darlığı gerçekleştirme süresi anlamlı olarak daha azdı ve mükemmel bir böbrek izogrefti ile uzun süreli sağkalım sağlandı. Farelerde böbrek nakli karmaşık ve son teknoloji bir prosedürdür.Bu, genel başarı oranını iyileştirmeyi taahhüt eden bir damar anastomozu ve renal implantasyon için yeni bir cerrahi tekniktir ve böbrek nakli sonrası otoimmün yanıtı incelemek için güvenilir bir araçtır.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D Multimodality Imaging of Citrobacter rodentium Infections in Mice

4D modelli Görüntüleme<em&gt; Citrobacter rodentium</emFarelerde&gt; Enfeksiyonlar

This protocol outlines the steps required to  longitudinally monitor a bioluminescent bacterial infection using composite 3D diffuse light imaging ...

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Long Term Chronic Pseudomonas aeruginosa Airway Infection in Mice

Uzun Vadeli Kronik<em&gt; Pseudomonas aeruginosa</emFarelerde&gt; Havayolu Enfeksiyon

A mouse model of chronic airway infection is a key asset in cystic fibrosis (CF) research, although there are a number of concerns regarding the model ...

Transplantation of Tail Skin to Study Allogeneic CD4 T Cell Responses in Mice

Farelerde allojenik CD4 + T hücre Cevapları Eğitim için Kuyruk Cilt Nakli

The study of T cell responses and their consequences during allo-antigen recognition requires a model that enables one to distinguish between donor and ...

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

In Vitro and In Vivo Assessment of T, B and Myeloid Cells Suppressive Activity and Humoral Responses from Transplant Recipients

Vitro ve In Vivo değerlendirme T, B ve Myeloid hücrelerin süpresif etkinlik ve nakli alıcılardan gelen Humoral yanıt

The main concern in transplantation is to achieve specific tolerance through induction of regulatory cells. The understanding of tolerance mechanisms ...

Induction of Paralysis and Visual System Injury in Mice by T Cells Specific for Neuromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4

Felç ve görsel sistem yaralanma tarafından Nöromyelitis Optica Autoantigen Aquaporin-4 T hücreleri belirli farelerde indüksiyon

While it is recognized that aquaporin-4 (AQP4)-specific T cells and antibodies participate in the pathogenesis of neuromyelitis optica (NMO), a human ...

Measuring Deformability and Red Cell Heterogeneity in Blood by Ektacytometry

Deformasyon ve kan Ektacytometry tarafından kırmızı hücre heterojenite ölçme

Decreased red cell deformability is characteristic of several disorders. In some cases, the extent of defective deformability can predict severity of ...

Printed Glycan Array: A Sensitive Technique for the Analysis of the Repertoire of Circulating Anti-carbohydrate Antibodies in Small Animals

Basılı Glycan dizi: Anti-karbonhidrat antikorlar küçük hayvanlarda dolaşan repertuar analizi için hassas tekniği

The repertoire of circulating anti-carbohydrate antibodies of a given individual is often associated with its immunological status. Not only the ...

Renal Subcapsular Transplantation of 2'-Deoxyguanosine-Treated Murine Embryonic Thymus in Nude Mice

Çıplak farelerde 2 '-Deoxyguanosine tedavi Murine embriyonik Thymus renal subkapsüler nakli

The thymus is an important central immune organ, which plays an essential role in the development and differentiation of T cells. Thymus transplantation ...

An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications ...

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

Murin Kalp Nakli için Manşet Tekniğinin Optimizasyonu

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...