Name: mechanical conflict-avoidance assay to measure pain behavior in mice
Uploaded: 2022-02-18T14:15:00
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GMはNDSEG大学院フェローシップによって支えられています。VLTは、NIH NIGMS助成金#GM137906とリタ・アレン財団の支援を受けています。AJSは、国防総省の助成金W81XWH-20-1-0277、W81XWH-21-1-0197、およびリタアレン財団によってサポートされています。ワシントン大学医学部のAlexxai Kravitz博士が、チャンバー2階とプローブプレート用の3Dプリンタファイルを自由に設計し、利用できるようにしてくれたことに感謝しています。

マウスの使用およびそれに続く手順を含むすべての実験は、MDアンダーソンがんセンターおよびスタンフォード大学の施設動物ケアおよび使用委員会によって、国立衛生研究所の実験動物のケアおよび使用のためのガイドに厳密に従って承認された。
1. MCAの建設
<ol><li>側壁、床、天井に使用される不透明な白色の厚さ3mmのアクリルから、125mm x 125 mm x ...

<ol>
	<li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia.">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32 (1), 77-88 (1988).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Sheahan, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+nerve+injury+minimally+affect+mouse+voluntary+behaviors+proposed+as+indicators+of+pain.">Inflammation and nerve injury minimally affect mouse voluntary behaviors proposed as indicators of pain.</a> Neurobiology of Pain. 2, 1-12 (2017).</li><li>Wodarski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-centre+replication+of+suppressed+burrowing+behaviour+as+an+ethologically+relevant+pain+outcome+measure+in+the+rat:+a+prospective+multicentre+study.">Cross-centre replication of suppressed burrowing behaviour as an ethologically relevant pain outcome measure in the rat: a prospective multicentre study.</a> Pain. 157 (10), 2350-2365 (2016).</li><li>King, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unmasking+the+tonic-aversive+state+in+neuropathic+pain.">Unmasking the tonic-aversive state in neuropathic pain.</a> Nature Neuroscience. 12 (11), 1364-1366 (2009).</li><li>Harte, S. E., Meyers, J. B., Donahue, R. R., Taylor, B. K., Morrow, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+Conflict+System:+A+Novel+Operant+Method+for+the+Assessment+of+Nociceptive+Behavior.">Mechanical Conflict System: A Novel Operant Method for the Assessment of Nociceptive Behavior.</a> PLoS One. 11 (2), 0150164 (2016).</li><li>Pahng, A. R., Edwards, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Pain+Avoidance-Like+Behavior+in+Drug-Dependent+Rats.">Measuring Pain Avoidance-Like Behavior in Drug-Dependent Rats.</a> Current Protocols in Neuroscience. 85 (1), 53 (2018).</li><li>Odem, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sham+surgeries+for+central+and+peripheral+neural+injuries+persistently+enhance+pain-avoidance+behavior+as+revealed+by+an+operant+conflict+test.">Sham surgeries for central and peripheral neural injuries persistently enhance pain-avoidance behavior as revealed by an operant conflict test.</a> Pain. 160 (11), 2440-2455 (2019).</li><li>LaBuda, C. J., Fuchs, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+test+paradigm+to+measure+the+aversive+quality+of+inflammatory+and+neuropathic+pain+in+rats.">A behavioral test paradigm to measure the aversive quality of inflammatory and neuropathic pain in rats.</a> Experimental Neurology. 163 (2), 490-494 (2000).</li><li>LaBuda, C. J., Fuchs, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphine+and+gabapentin+decrease+mechanical+hyperalgesia+and+escape/avoidance+behavior+in+a+rat+model+of+neuropathic+pain.">Morphine and gabapentin decrease mechanical hyperalgesia and escape/avoidance behavior in a rat model of neuropathic pain.</a> Neuroscience Letters. 290 (2), 137-140 (2000).</li><li>Vichaya, E. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motivational+changes+that+develop+in+a+mouse+model+of+inflammation-induced+depression+are+independent+of+indoleamine+2,3+dioxygenase.">Motivational changes that develop in a mouse model of inflammation-induced depression are independent of indoleamine 2,3 dioxygenase.</a> Neuropsychopharmacology. 44 (2), 364-371 (2019).</li><li>Hasco&#235;t, M., Bourin, M., Nic Dhonnchadha, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+light-dark+paradigm:+a+review.">The mouse light-dark paradigm: a review.</a> Progress in Neuropsychopharmacology &amp; Biological Psychiatry. 25 (1), 141-166 (2001).</li><li>Shepherd, A. J., Mohapatra, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+validation+of+voluntary+gait+and+mechanical+sensitivity+assays+associated+with+inflammatory+and+neuropathic+pain+in+mice.">Pharmacological validation of voluntary gait and mechanical sensitivity assays associated with inflammatory and neuropathic pain in mice.</a> Neuropharmacology. 130, 18-29 (2018).</li><li>Huck, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+Contribution+of+Myeloid-Lineage+TLR4+to+the+Transition+to+Chronic+Pain:+A+Focus+on+Sex+Differences.">Temporal Contribution of Myeloid-Lineage TLR4 to the Transition to Chronic Pain: A Focus on Sex Differences.</a> Journal of Neuroscience. 41 (19), 4349-4365 (2021).</li><li>Pitzer, C., La Porta, C., Treede, R. D., Tappe-Theodor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+and+neuropathic+pain+conditions+do+not+primarily+evoke+anxiety-like+behaviours+in+C57BL/6+mice.">Inflammatory and neuropathic pain conditions do not primarily evoke anxiety-like behaviours in C57BL/6 mice.</a> European Journal of Pain. 23 (2), 285-306 (2019).</li><li>Sieberg, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+drives+anxiety+behavior+in+mice,+results+consistent+with+anxiety+levels+in+diabetic+neuropathy+patients.">Neuropathic pain drives anxiety behavior in mice, results consistent with anxiety levels in diabetic neuropathy patients.</a> Pain Reports. 3 (3), 651 (2018).</li><li>Meuwissen, K. P. V., van Beek, M., Joosten, E. A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burst+and+Tonic+Spinal+Cord+Stimulation+in+the+Mechanical+Conflict-Avoidance+System:+Cognitive-Motivational+Aspects.">Burst and Tonic Spinal Cord Stimulation in the Mechanical Conflict-Avoidance System: Cognitive-Motivational Aspects.</a> Neuromodulation. 23 (5), 605-612 (2020).</li></ol>

すべての行動テストと同様に、動物の治療に対する適切な取り扱い、無作為化、および盲検化は、全体を通して不可欠です。複雑な行動や意思決定への多因子インプットを考えると、苦痛を最小限に抑えながら、動物をできるだけ一貫して扱い、慣れさせ、テストすることが不可欠です。また、チャンバー1にマウスを配置し、LEDライトをオンにし、バリアを取り除くタイミングを再現するに...

痛みは、感覚的および感情的な要素を持つ複雑な経験です。疼痛知覚の閾値の低下および熱的および/または機械的刺激に対する過敏症は、この経験の重要な特徴であり、刺激誘発性疼痛行動試験が捕捉することができる(ハーグリーブスの熱感受性の試験および機械的感受性のフォン・フライ検定のような)1,2。このようなテストは堅牢で再現可能な結果をもたらしますが、知覚された有害な刺激からの反射的な撤退への依存によって制限されています。これは、これらの検査のみに対する疼痛研究の継続的な依存に疑問を投げかけている。そのために、疼痛研究者は数年前からげっ歯類の疼痛モデルで使用するための代替/補完的な行動テストを模索し、痛みの感情的および/または動機付けの要素をより多く捉えようと努力してきました。これらの非誘発的、自発的、または非反射的手段(例えば、車輪走行、穴掘り活動、条件付けられた場所の選好3、4、5)は、前臨床疼痛研究の翻訳可能性を改善する試みにおいて実施されている。
機械的衝突回避(MCA)アッセイは、もともとHarte et al. in 20166で記載され、主にラット7,8で使用され、以前のアプローチ - 場所 - 回避パラダイム - の修正を表しています。このアプローチでは、後肢の有害な刺激が、そうでなければ望ましい(暗い)チャンバ内で行われ、そのような刺激を逃れる/回避するために動物の意図的な行動を駆動する9,10。MCAアッセイは、観察者による後肢の手動の有害な刺激に頼る代わりに、マウスに潜在的に有害な刺激を交渉させ、嫌悪的な環境を脱出し、暗い部屋に到達する。アッセイにその名前を与える対立/回避は、これらの2つの競合する動機から生じます:明るく照らされた領域を脱出し、足の有害な刺激を避ける。MCAアッセイはまた、疼痛緩和と環境合図の組み合わせが、疼痛緩和/報酬的文脈に対する選好を反映する行動の変化を促進する条件付けられた場所嗜好試験の特徴を共有する11。
根本的に言えば、これらすべてのアッセイは同様のアプローチを共有しています:ある嫌悪的な環境に対する動物の好みを別の環境よりもシフトさせることを、感情的/動機付けの状態の指標として使用します。MCAアッセイは、明るく照らされたチャンバと、それに続く高さ調節可能なプローブを備えた暗い中間チャンバと、嫌悪刺激のない暗い第3チャンバからなる3チャンバパラダイムです。怪我をしていないマウスは、明るい光12に対するげっ歯類の生来の嫌悪感を考えると、典型的には、暗くなった部屋に逃げるように動機付けられる。この例では、明るく照らされた環境から逃れようとする自然な動機は、暗くなった環境で排他的に発生する後足の刺激(調整可能な高さプローブ)に遭遇する不本意さを克服します。対照的に、痛みを経験しているマウス(例えば、炎症または神経障害による)は、進行中の触覚過敏症の設定において機械的プローブの不快な触覚経験を避ける動機があるため、明るく照らされた環境でより多くの時間を過ごすことを選択する可能性がある。
この記事では、MCA アッセイの修正版について説明します。我々は、マウスでの使用のために元の方法(ラット6で実施した)を適応させた。また、データ収集を効率化するため、プローブの高さを6から3(床の高さから0、2、5mm)に減らしました。このアプローチは、複数の疼痛モデルにわたってテストされ、既知の鎮痛薬で検証されており、疼痛過敏症および/または関連する感情的および動機付けの変化が行動におけるこれらの変化を促進していることを示している。このアプローチは、他の非反射的手段と比較して比較的迅速に実施でき、適応性があり、慣れと訓練に何日もかかることがあります1,2。MCAは、他の疼痛の尺度と協調して、疼痛の感情的および動機付けの側面に関する貴重な洞察を生成することができる。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>32.8ft 3000K-6000K Tunable White LED Strip Lights, Dimmable Super Bright LED Tape Lights with 600 SMD 2835 LEDs</td>
			<td>Lepro</td>
			<td>SKU: 410087-DWW-US</td>
			<td>For lighting chamber 1. https://www.lepro.com/32ft-dimmable-tunable-white-led-strip-lights.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D printed &#39;spike bed&#39; and &#39;chamber 2 floor&#39;</td>
			<td>Shapeways</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Optional, for mechanical probes as an alternative to blunted map pins.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To clean MCA between mice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acryl-Hinge 2</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>for attaching chamber lids to rear walls. https://www.tapplastics.com/product/plastics/handles_hinges_latches/acryl_hinge_2/122</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemcast Cast Acrylic Sheet, Clear</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3mm thick. For front wall of chamber 1. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_cast_clear/510</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemcast Cast Transparent Colored Acrylic, Transparent Dark Red - 50%</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3mm thick. 50% light transmission. For walls and lids of chambers 2 and 3. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_transparent_colors/519</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemcast Translucent &#38; Opaque Colored Cast Acrylic, Sign Opaque White - 0.1%</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3mm thick. For side walls and lid of chamber 1. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_color/341</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disinfectant (e.g. Quatricide)</td>
			<td>Pharmacal Research Laboratories, Inc.</td>
			<td>65020F</td>
			<td>To disinfect MCA at the end of a testing session.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry-erase markers and board</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To add experimental info to the beginning of video footage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Map pins</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Optional, for mechanical probes. Use sandpaper to blunt sharp points before use. Can be used in place of 3D-printed parts.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper towels</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To clean/disinfect MCA.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SCIGRIP Weld-On #3 Acrylic Cement</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For assembling acrylic sheets into chambers and affixing hinges. https://www.tapplastics.com/product/repair_products/plastic_adhesives/weld_on_3_cement/131</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopwatch</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To record escape latencies/dwell times in real-time or from recorded video.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To ensure LED turn-on, barrier removal and test completion are timed consistently.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Video camera</td>
			<td>Various</td>
			<td>HDRCX405 Handycam Camcorder</td>
			<td>To record mouse behavior in the MCA device. Can be substituted with any consumer-grade video camera capable of 1080p resolution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tripod</td>
			<td>Famall</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any tripod that can hold the camera at bench height for recording MCA footage is acceptable.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mechanical conflict-avoidance assay to measure pain behavior in mice

疼痛は、感覚的(侵害受容的)および情動的(不快な)次元の両方からなる。前臨床モデルでは、疼痛は伝統的に、疼痛の侵害受容性成分に関する推論を可能にするが、疼痛の感情的または動機的成分に関する情報をほとんど提供しない反射的試験を用いて評価されてきた。したがって、これらの痛みの要素を捉えるテストを開発することは、翻訳的に重要です。したがって、研究者は非反射的行動アッセイを使用して、そのレベルでの疼痛知覚を研究する必要があります。機械的衝突回避(MCA)は、3チャンバーパラダイムにおける有害な機械的刺激に対する動機付け応答を研究するための確立された自発的非反射的行動アッセイである。マウスの位置選好の変化は、競合する有害な刺激に直面したとき、足の触覚刺激に対する明るい光の知覚された不快感を推測するために使用される。このプロトコルは、疼痛研究者がさまざまなマウス疼痛モデルにおける情動動機付け応答を理解するために使用できるMCAアッセイの修正版を概説する。ここでは特に説明していませんが、MCAデータの例は、足底内完全フロイントアジュバント(CFA)、予備神経損傷(SNI)、および骨折/キャスティングモデルを疼痛モデルとして使用して、MCA手順を説明しています。

MCAアッセイは、いくつかの機械的に異なるマウス疼痛モデルで首尾よく使用されている。図2は、選択した結果尺度がチャンバ 2 の中間点を横切っていたデータを示しています(図2A)。チャンバー3への脱出に対する中間点を用いて得られたデータは、プローブ高さ5mmの神経因性疼痛の免れた神経損傷(SNI)モデルにおいて、チャンバー3脱出のための〜4...

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Mechanical Conflict-Avoidance Assay to Measure Pain Behavior in Mice

機械的競合回避アッセイは、マウスの疼痛感受性の非反射的読み出しとして使用され、様々なマウス疼痛モデルにおける情動動機付け応答をよりよく理解するために使用することができる。

マウスの疼痛行動を測定するための機械的衝突回避アッセイ

Pain comprises of both sensory (nociceptive) and affective (unpleasant) dimensions. In preclinical models, pain has traditionally been assessed using ...

この方法は、異なる疼痛条件下での動物の有効または動機付け状態に関する質問に答えるのに役立ちます。これは、前臨床研究の翻訳を改善するための重要なステップです。このテクニックの主な利点は、比較的迅速かつ簡単に実行できますが、痛みに関連する行動に影響を与える複雑な動機を評価することです。まず、第1室の側壁、床、天井を、厚さ3ミリメートルの不透明な白色アクリルを用いて構築することから始める。正面に面した壁には、厚さ3ミリメートルの透明なアクリルを使用してください。チャンバー1の蓋をヒンジで取り付けて、マウスをチャンバー内に簡単に配置してチャンバーから取り出すことができるようにします。次に、自己粘着性発光ダイオードテープを蓋の内面に貼り付けて、約4,800ルクスの照明を提供します。不透明なアクリルシートを所定の位置に出し入れして、チャンバー1をMCAデバイスの他の部分から閉じます。次に、長さ270ミリメートルの無点灯チャンバ2、MCA試験チャンバを、上部にヒンジ付き蓋を有する全側面に半透明の濃い赤色アクリルを用いて構築する。次に、チャンバーの床に2つのミリメートルの穴を持つ13 x 31グリッドを配置し、直径0.5ミリメートルの先端を備えた鈍いプローブの配列を突出させることができます。プローブベースプレートの下にアクリル板を追加して、プローブの高さを調整します。このアプローチを使用して、プローブの高さを 0 mm、2 mm、および 5 mm に設定してデバイスを構成します。鈍いマップピンまたは同様の材料の代わりに、3Dプリンタファイルを使用して、チャンバ2の床とプローブプレートをナイロン12プラスチックなどの洗濯可能で生体適合性のある材料で印刷します。最後に、チャンバー1と2に似たヒンジ付き蓋で、四方に半透明の濃い赤色のアクリルを使用して暗いチャンバー3を構築します。チャンバ1の反対側の端に配置して、チャンバ2の機械プローブからの暗くなった脱出領域として機能します。ベースラインテストをスケジュールする1日前に、マウスをケージメイトと一緒にMCAユニットに5〜15分間順応させ、デバイス全体の社会的探査を容易にします。チャンバ1のLEDがオフになっていること、チャンバ1とチャンバ2の間のバリアが開いたままになっていること、およびプローブがチャンバ2の床から突き出ていないことを確認します。次に、MCA デバイス全体の側面を向いた三脚に 1080 ピクセルの映像を記録できるビデオ カメラを設定します。MCA が記録した画像に収まるように視野を調整します。録画が開始されたら、カメラのフィールドビューにハンドヘルドドライイレースボードを持ち、ビデオの開始に動物のテストの実行に関する識別情報でラベルを付けます。最初の実行では、プローブの高さをゼロに設定し、バリアドアが所定の位置にある状態で、テスト対象のマウスをホームケージからチャンバー1に移します。録画したフッテージに表示されるタイマーを開始します。10秒後、チャンバー1のLEDをオンにします。マウスが点灯したチャンバーに20秒間入った後、チャンバー1とチャンバー2の間のバリアを撤回します。動物を2分間観察し、テストが進行中にストップウォッチで待ち時間または滞留時間を測定します。チャンバ2への最初の入室までのレイテンシ、チャンバ2を横切る半分以上交差するレイテンシ、チャンバ2の合計滞留時間、チャンバ3に到達するレイテンシ、および2分以内の各チャンバ内の合計デュエル時間を記録し、それらを比率に変換します。テストが完了したら、マウスをホームケージに戻します。MCAチャンバーを70%エタノールで洗浄し、完全に乾燥させます。プローブの高さをゼロに設定してコホート内のすべてのマウスを走らせた後、機械式プローブベースプレートの下にアクリルの3ミリメートルシートを挿入し、プローブの高さが2ミリメートルでランを繰り返します。プローブの高さを2ミリメートルに設定してすべてのマウスを走らせた後、プローブベースプレートの下にアクリルのシートを3枚挿入し、プローブの高さを5ミリメートルにしてランを繰り返します。テストセッションの最後に消毒剤で最終洗浄を行います。完全なフロイントのアジュバント誘発性炎症性疼痛モデルでは、生理食塩水注射はベースラインと比較して脱出潜時を変化させない。アジュバントを注射したマウスは、注射後4日目に脱出潜伏時間の有意な増加を示したが、プローブの高さが5ミリメートルに上昇したときのみであった。この増加した潜伏時間は、試験開始の90分前にカルプロフェンを投与されたマウスでは見られなかった。神経因性疼痛の神経損傷モデルでは、プローブの高さを5ミリメートルに設定した場合、ベースラインと比較して脱出までの潜伏時間が有意に増加した。この増加は、試験の90分前にオピオイド鎮痛薬ブプレノルフィンを投与することによって防止された。脱出潜伏時間の増加は、神経損傷前にMCA試験のベースラインラウンドを受けなかったマウスにおいても観察された。5ミリメートルでの神経損傷を免れたマウスにおける脱出潜伏時間の増加は、試験の90分前にガバペンチン投与によって防止された。骨折または鋳造モデルでは、チャンバ1から脱出するレイテンシは、損傷前のプローブ高さに比例して増加した。損傷後、潜伏時間はゼロミリメートルで変化しなかったが、ベースラインと比較して、男性の2ミリメートルと5ミリメートルのプローブ高さと女性の5ミリメートルのプローブの高さで有意に増加した。この手順を試みる際に覚えておくべき最も重要なことは、すべてのマウスがMCA装置に慣れていることを確認し、研究を通して適切な無作為化と盲検化を維持することです。この方法は、フォン・フレイまたは条件付き場所選好を含む疼痛感受性の他の尺度と共に使用することができる。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

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Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

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A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

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