Name: mechanical conflict-avoidance assay to measure pain behavior in mice
Uploaded: 2022-02-18T14:15:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mechanical Conflict-Avoidance Assay to Measure Pain Behavior in Mice at JoVE.com

GM поддерживается стипендией NDSEG Graduate Fellowship. VLT поддерживается грантовыми #GM137906 NIH NIGMS и Фондом Риты Аллен. AJS поддерживается грантами Министерства обороны W81XWH-20-1-0277, W81XWH-21-1-0197 и Фондом Риты Аллен. Мы благодарны доктору Алексаю Кравицу из Медицинской школы Вашингтонского университета за разработку и предоставление в свободный доступ файлов 3D-принтера для пола камеры 2 и пластины зонда.

Все эксперименты, связанные с использованием мышей и процедурами, применяемыми в них, были одобрены институциональными комитетами по уходу за животными и их использованию Онкологическим центром MD Anderson и Стэнфордским университетом в строгом соответствии с Руководством Национальных и...

<ol>
	<li>Hargreaves, K., Dubner, R., Brown, F., Flores, C., Joris, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+and+sensitive+method+for+measuring+thermal+nociception+in+cutaneous+hyperalgesia.">A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia.</a> Pain. 32 (1), 77-88 (1988).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Sheahan, T. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+nerve+injury+minimally+affect+mouse+voluntary+behaviors+proposed+as+indicators+of+pain.">Inflammation and nerve injury minimally affect mouse voluntary behaviors proposed as indicators of pain.</a> Neurobiology of Pain. 2, 1-12 (2017).</li><li>Wodarski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cross-centre+replication+of+suppressed+burrowing+behaviour+as+an+ethologically+relevant+pain+outcome+measure+in+the+rat:+a+prospective+multicentre+study.">Cross-centre replication of suppressed burrowing behaviour as an ethologically relevant pain outcome measure in the rat: a prospective multicentre study.</a> Pain. 157 (10), 2350-2365 (2016).</li><li>King, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unmasking+the+tonic-aversive+state+in+neuropathic+pain.">Unmasking the tonic-aversive state in neuropathic pain.</a> Nature Neuroscience. 12 (11), 1364-1366 (2009).</li><li>Harte, S. E., Meyers, J. B., Donahue, R. R., Taylor, B. K., Morrow, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+Conflict+System:+A+Novel+Operant+Method+for+the+Assessment+of+Nociceptive+Behavior.">Mechanical Conflict System: A Novel Operant Method for the Assessment of Nociceptive Behavior.</a> PLoS One. 11 (2), 0150164 (2016).</li><li>Pahng, A. R., Edwards, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Pain+Avoidance-Like+Behavior+in+Drug-Dependent+Rats.">Measuring Pain Avoidance-Like Behavior in Drug-Dependent Rats.</a> Current Protocols in Neuroscience. 85 (1), 53 (2018).</li><li>Odem, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sham+surgeries+for+central+and+peripheral+neural+injuries+persistently+enhance+pain-avoidance+behavior+as+revealed+by+an+operant+conflict+test.">Sham surgeries for central and peripheral neural injuries persistently enhance pain-avoidance behavior as revealed by an operant conflict test.</a> Pain. 160 (11), 2440-2455 (2019).</li><li>LaBuda, C. J., Fuchs, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+test+paradigm+to+measure+the+aversive+quality+of+inflammatory+and+neuropathic+pain+in+rats.">A behavioral test paradigm to measure the aversive quality of inflammatory and neuropathic pain in rats.</a> Experimental Neurology. 163 (2), 490-494 (2000).</li><li>LaBuda, C. J., Fuchs, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphine+and+gabapentin+decrease+mechanical+hyperalgesia+and+escape/avoidance+behavior+in+a+rat+model+of+neuropathic+pain.">Morphine and gabapentin decrease mechanical hyperalgesia and escape/avoidance behavior in a rat model of neuropathic pain.</a> Neuroscience Letters. 290 (2), 137-140 (2000).</li><li>Vichaya, E. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motivational+changes+that+develop+in+a+mouse+model+of+inflammation-induced+depression+are+independent+of+indoleamine+2,3+dioxygenase.">Motivational changes that develop in a mouse model of inflammation-induced depression are independent of indoleamine 2,3 dioxygenase.</a> Neuropsychopharmacology. 44 (2), 364-371 (2019).</li><li>Hasco&#235;t, M., Bourin, M., Nic Dhonnchadha, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+light-dark+paradigm:+a+review.">The mouse light-dark paradigm: a review.</a> Progress in Neuropsychopharmacology &amp; Biological Psychiatry. 25 (1), 141-166 (2001).</li><li>Shepherd, A. J., Mohapatra, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+validation+of+voluntary+gait+and+mechanical+sensitivity+assays+associated+with+inflammatory+and+neuropathic+pain+in+mice.">Pharmacological validation of voluntary gait and mechanical sensitivity assays associated with inflammatory and neuropathic pain in mice.</a> Neuropharmacology. 130, 18-29 (2018).</li><li>Huck, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+Contribution+of+Myeloid-Lineage+TLR4+to+the+Transition+to+Chronic+Pain:+A+Focus+on+Sex+Differences.">Temporal Contribution of Myeloid-Lineage TLR4 to the Transition to Chronic Pain: A Focus on Sex Differences.</a> Journal of Neuroscience. 41 (19), 4349-4365 (2021).</li><li>Pitzer, C., La Porta, C., Treede, R. D., Tappe-Theodor, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+and+neuropathic+pain+conditions+do+not+primarily+evoke+anxiety-like+behaviours+in+C57BL/6+mice.">Inflammatory and neuropathic pain conditions do not primarily evoke anxiety-like behaviours in C57BL/6 mice.</a> European Journal of Pain. 23 (2), 285-306 (2019).</li><li>Sieberg, C. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropathic+pain+drives+anxiety+behavior+in+mice,+results+consistent+with+anxiety+levels+in+diabetic+neuropathy+patients.">Neuropathic pain drives anxiety behavior in mice, results consistent with anxiety levels in diabetic neuropathy patients.</a> Pain Reports. 3 (3), 651 (2018).</li><li>Meuwissen, K. P. V., van Beek, M., Joosten, E. A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Burst+and+Tonic+Spinal+Cord+Stimulation+in+the+Mechanical+Conflict-Avoidance+System:+Cognitive-Motivational+Aspects.">Burst and Tonic Spinal Cord Stimulation in the Mechanical Conflict-Avoidance System: Cognitive-Motivational Aspects.</a> Neuromodulation. 23 (5), 605-612 (2020).</li></ol>

Как и во всех поведенческих тестах, правильное обращение, рандомизация и ослепление обращения с животными имеют важное значение во всем. Учитывая многофакторные входные данные в сложном поведении и принятии решений, крайне важно, чтобы животные обрабатывались, привыкали и тестировали...

Боль — это сложный опыт с сенсорными и аффективными компонентами. Снижение порога восприятия боли и гиперчувствительность к тепловым и/или механическим раздражителям являются ключевыми особенностями этого опыта, которые могут охватить тесты болевого поведения, вызванные стимулом (например, тест Харгривза на тепловую чувствительность и тест фон Фрея на механическую чувствительность)1,2. Хотя такие тесты дают надежные и воспроизводимые результаты, они ограничены их зависимостью от рефлексивного ухода от воспринимаемого вредного стимула. Это поставило под сомнение постоянную зависимость исследований боли только от этих тестов. С этой целью исследователи боли в течение нескольких лет изучали альтернативные / дополнительные поведенческие тесты для использования в моделях боли грызунов в попытке охватить больше аффективных и / или мотивационных компонентов боли. Эти невызываемые, добровольные или нерефлексивные меры (например, бег колес, роение, обусловленное предпочтение места 3,4,5) реализуются в попытке улучшить переводимость доклинических исследований боли.
Анализ механического предотвращения конфликтов (MCA) был первоначально описан Harte et al. в 2016году 6, используется преимущественно у крыс 7,8 и представляет собой модификацию более раннего подхода - парадигмы побега-избегания места. В этом подходе вредный стимул задней лапы выполняется в желательной (темной) камере, чтобы стимулировать целенаправленное поведение животного, чтобы избежать / избежать такой стимуляции 9,10. Вместо того, чтобы полагаться на ручную вредную стимуляцию задней лапы наблюдателем, анализ MCA заставляет мышей договариваться о потенциально вредном стимуле, чтобы избежать отвратительной среды и достичь темной камеры. Конфликт / избегание, которое дает анализу его название, возникает из этих двух конкурирующих мотиваций: избегать ярко освещенных областей и избегать вредной стимуляции лап. Анализ MCA также разделяет особенности с условным тестированием предпочтений места, где сочетание облегчения боли с сигналами окружающей среды приводит к изменениям в поведении, которые отражают предпочтение обезболивающего / вознаграждающего контекста11.
По сути, все эти анализы разделяют схожий подход: использование сдвига в предпочтении животного одной аверсивной среде перед другой в качестве индикатора их аффективного / мотивационного состояния. Анализ MCA представляет собой 3-камерную парадигму, состоящую из ярко освещенной камеры, за которой следует темная средняя камера с регулируемыми по высоте зондами и темная третья камера без каких-либо аверсивных стимулов. Неповрежденная мышь обычно мотивирована сбежать в затемненную камеру, учитывая врожденное отвращение грызунов к яркому свету12. В этом примере естественная мотивация к выходу из ярко освещенной среды преодолевает нежелание сталкиваться со стимуляцией задней лапы (регулируемые датчики высоты), которая возникает исключительно в затемненной среде. Напротив, мышь, испытывающая боль (например, из-за воспаления или невропатии), может предпочесть проводить больше времени в ярко освещенной среде, поскольку есть мотивация избегать неприятного тактильного опыта механических зондов в условиях продолжающейся тактильной гиперчувствительности.
В этой статье описывается модифицированная версия анализа MCA. Мы адаптировали оригинальный метод (который был выполнен на крысах6) для использования на мышах. Мы также сократили количество тестируемых зондов с шести до трех (0, 2 и 5 мм над высотой пола), чтобы упростить сбор данных. Этот подход был протестирован на нескольких моделях боли и подтвержден известными анальгетиками, что указывает на то, что гиперчувствительность к боли и / или связанные с ней аффективные и мотивационные изменения приводят к этим изменениям в поведении. Этот подход относительно быстр в проведении и адаптируем по сравнению с другими нерефлексивными мерами, которые могут занять много дней привыкания и обучения 1,2. В сочетании с другими мерами боли MCA может генерировать ценную информацию об аффективных и мотивационных аспектах боли.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>32.8ft 3000K-6000K Tunable White LED Strip Lights, Dimmable Super Bright LED Tape Lights with 600 SMD 2835 LEDs</td>
			<td>Lepro</td>
			<td>SKU: 410087-DWW-US</td>
			<td>For lighting chamber 1. https://www.lepro.com/32ft-dimmable-tunable-white-led-strip-lights.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3D printed &#39;spike bed&#39; and &#39;chamber 2 floor&#39;</td>
			<td>Shapeways</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Optional, for mechanical probes as an alternative to blunted map pins.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To clean MCA between mice.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acryl-Hinge 2</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>for attaching chamber lids to rear walls. https://www.tapplastics.com/product/plastics/handles_hinges_latches/acryl_hinge_2/122</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemcast Cast Acrylic Sheet, Clear</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3mm thick. For front wall of chamber 1. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_cast_clear/510</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemcast Cast Transparent Colored Acrylic, Transparent Dark Red - 50%</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3mm thick. 50% light transmission. For walls and lids of chambers 2 and 3. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_transparent_colors/519</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemcast Translucent &#38; Opaque Colored Cast Acrylic, Sign Opaque White - 0.1%</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>3mm thick. For side walls and lid of chamber 1. https://www.tapplastics.com/product/plastics/cut_to_size_plastic/acrylic_sheets_color/341</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disinfectant (e.g. Quatricide)</td>
			<td>Pharmacal Research Laboratories, Inc.</td>
			<td>65020F</td>
			<td>To disinfect MCA at the end of a testing session.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dry-erase markers and board</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To add experimental info to the beginning of video footage.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Map pins</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Optional, for mechanical probes. Use sandpaper to blunt sharp points before use. Can be used in place of 3D-printed parts.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paper towels</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To clean/disinfect MCA.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SCIGRIP Weld-On #3 Acrylic Cement</td>
			<td>TAP Plastics</td>
			<td>N/A</td>
			<td>For assembling acrylic sheets into chambers and affixing hinges. https://www.tapplastics.com/product/repair_products/plastic_adhesives/weld_on_3_cement/131</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopwatch</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To record escape latencies/dwell times in real-time or from recorded video.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Timer</td>
			<td>Various</td>
			<td>N/A</td>
			<td>To ensure LED turn-on, barrier removal and test completion are timed consistently.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Video camera</td>
			<td>Various</td>
			<td>HDRCX405 Handycam Camcorder</td>
			<td>To record mouse behavior in the MCA device. Can be substituted with any consumer-grade video camera capable of 1080p resolution.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tripod</td>
			<td>Famall</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Any tripod that can hold the camera at bench height for recording MCA footage is acceptable.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mechanical conflict-avoidance assay to measure pain behavior in mice

Боль включает в себя как сенсорные (ноцицептивные), так и аффективные (неприятные) измерения. В доклинических моделях боль традиционно оценивалась с использованием рефлексивных тестов, которые позволяют делать выводы относительно ноцицептивного компонента боли, но предоставляют мало информации об аффективном или мотивационном компоненте боли. Поэтому разработка тестов, которые фиксируют эти компоненты боли, важна с точки зрения трансляции. Следовательно, исследователи должны использовать нерефлексивные поведенческие анализы для изучения восприятия боли на этом уровне. Механическое избегание конфликтов (MCA) - это установленный добровольный нерефлексивный поведенческий анализ для изучения мотивационных реакций на вредный механический стимул в парадигме 3 камер. Изменение предпочтения мыши в отношении местоположения, когда она сталкивается с конкурирующими вредными стимулами, используется для вывода о воспринимаемой неприятности яркого света по сравнению с тактильной стимуляцией лап. Этот протокол описывает модифицированную версию анализа MCA, который исследователи боли могут использовать для понимания аффективно-мотивационных реакций в различных моделях боли у мышей. Хотя это конкретно не описано здесь, наши примеры данных MCA используют внутриплантарный полный адъювант Фройнда (CFA), травму сохраненного нерва (SNI) и модель перелома / литья в качестве моделей боли для иллюстрации процедуры MCA.

Анализ MCA был успешно использован с несколькими механистически различными моделями боли у мышей. На рисунке 2 показаны данные, в которых мера выбора результата пересекала среднюю точку камеры 2 (рисунок 2А). Данные, полученные с помощью промежуточной точк?...

Watch this Scientific Journal Video about Mechanical Conflict-Avoidance Assay to Measure Pain Behavior in Mice at JoVE.com

Mechanical Conflict-Avoidance Assay to Measure Pain Behavior in Mice

Механический анализ избегания конфликтов используется в качестве нерефлексивного считывания болевой чувствительности у мышей, которое может быть использовано для лучшего понимания аффективно-мотивационных реакций в различных моделях боли у мышей.

Механический анализ избегания конфликтов для измерения болевого поведения у мышей

Pain comprises of both sensory (nociceptive) and affective (unpleasant) dimensions. In preclinical models, pain has traditionally been assessed using ...

Этот метод может помочь ответить на вопросы об эффективном или мотивационном состоянии животных при различных болевых условиях. Это важный шаг в улучшении перевода доклинических исследований. Основным преимуществом этой техники является то, что она относительно быстра и проста в выполнении, но все же оценивает сложные мотивации, которые влияют на поведение, связанное с болью.Начните с строительства боковых стен, пола и потолка камеры, используя непрозрачный белый акрил толщиной три миллиметра. Для передней облицовочной стены используйте прозрачный акрил толщиной три миллиметра. Прикрепите крышку камеры шарниром, чтобы мышей можно было легко поместить в камеру и извлечь из нее.Затем прикрепите самоклеящуюся светодиодную ленту к внутренней поверхности крышки, чтобы обеспечить освещение около 4 800 люкс. Сдвиньте непрозрачный акриловый лист в положение и из него, чтобы закрыть камеру от остальной части устройства MCA. Затем сконструируйте двухнеосвещенную камеру длиной 270 миллиметров, испытательную камеру MCA, используя полупрозрачный темно-красный акрил со всех сторон с откидной крышкой сверху.Затем поместите сетку 13 x 31 с двумя миллиметровыми отверстиями на полу камеры, через которую может выступать массив тупых зондов с наконечниками диаметром 0,5 миллиметра. Отрегулируйте высоту зондов, поместив дополнительные акриловые листы под опорную пластину зонда. Используя этот подход, настройте устройство с нулевой, двух- и пятимиллиметровой высотой зонда.В качестве альтернативы притупленным штифтам карты или аналогичным материалам используйте файлы 3D-принтера для печати пола второй камеры и пластины зонда моющимся и биосовместимым материалом, таким как пластик нейлон 12. Наконец, сконструируйте темную камеру три, используя полупрозрачный темно-красный акрил со всех сторон с откидной крышкой, похожей на камеры один и два. Поместите его на противоположный конец камеры один, чтобы служить затемненной областью выхода из механических зондов во второй камере.За один день до планирования базового тестирования акклиматизируйте мышей к блоку MCA в течение 5-15 минут со своими товарищами по клетке, чтобы облегчить социальное исследование всего устройства. Убедитесь, что светодиоды в первой камере выключены, барьер между первой и двумя камерами остается открытым, а зонды не выступают через пол второй камеры. Затем настройте видеокамеру, способную записывать 1080-пиксельные кадры на штатив с боковым видом всего устройства MCA.Настройте поле зрения таким образом, чтобы MCA заполнял записанное изображение. Как только запись начнется, удерживайте ручную доску сухого стирания в поле обзора камеры, чтобы пометить начало видео идентифицирующей информацией о тестировании животного. Для первого запуска установите высоту зонда на ноль и переместите тестируемую мышь из домашней клетки в камеру с барьерной дверцей на месте.Запустите таймер, который виден в записанных кадрах. Через 10 секунд включите в камере один светодиод. После того, как мышь находилась в освещенной камере в течение 20 секунд, снимите барьер между камерами один и два.Наблюдайте за животным в течение двух минут и измеряйте задержки или время ожидания с помощью секундомера, пока тест продолжается. Запишите задержку до первого входа во вторую камеру, задержку до пересечения более чем на полпути через вторую камеру, общее время пребывания во второй камере, задержку для достижения третьей камеры и общее время ожидания в каждой камере в течение двух минут и преобразуйте их в пропорции. После завершения тестирования верните мышь в ее домашнюю клетку.Очистите камеры MCA 70% этанолом и дайте ему полностью высохнуть. После запуска всех мышей в когорте с высотой зонда, установленной на ноль, вставьте трехмиллиметровый лист акрила под механическую опорную пластину зонда и повторите пробег с высотой зонда в два миллиметра. После запуска всех мышей с высотой зонда, установленной на два миллиметра, вставьте еще один трехмиллиметровый лист акрила под опорную плиту зонда и повторите пробег с высотой зонда в пять миллиметров.Выполните заключительную уборку дезинфицирующим средством в конце сеанса тестирования. В полной модели воспаления, вызванной адъювантами Фройнда, солевой раствор не изменяет латентность побега по сравнению с исходным уровнем. Мыши, которым вводили адъювант, показали значительное увеличение задержки побега через четыре дня после инъекции, но только тогда, когда высота зонда была увеличена до пяти миллиметров.Эта повышенная латентность не наблюдалась у мышей, которые получали карпрофен за 90 минут до начала тестирования. Модель травмы нерва при невропатической боли значительно увеличила латентность для побега по сравнению с исходным уровнем, когда высота зонда была установлена на уровне пяти миллиметров. Это увеличение было предотвращено введением опиоидного анальгетика бупренорфина за 90 минут до тестирования.Повышенная задержка побега также наблюдалась у мышей, которые не проходили базовый раунд тестирования MCA до повреждения нерва. Повышенная задержка побега у спасенных мышей с повреждением нерва на пять миллиметров была предотвращена габапентином, введенным за 90 минут до тестирования. В модели перелома или литья задержка при выходе из камеры увеличивалась пропорционально высоте зонда до травмы.После травмы задержка осталась неизменной на уровне нуля миллиметров, но значительно увеличилась на высоте двух миллиметров и пяти миллиметров для мужчин и пятимиллиметровой высоте зонда для женщин по сравнению с исходным уровнем. Самое главное, что нужно помнить при попытке этой процедуры, это убедиться, что все мыши привыкли к устройству MCA, и поддерживать правильную рандомизацию и ослепление на протяжении всего исследования. Этот метод может использоваться наряду с другими показателями болевой чувствительности, включая фон Фрея или условное предпочтение места.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Methods to Assay Drosophila Behavior

Methods to Assay Drosophila Behavior

Методы Анализ Drosophila Поведение

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

A Single-fly Assay for Foraging Behavior in Drosophila

Одно-муха Анализ на нагула поведения в<em&gt; Дрозофилы</em

For many animals, hunger promotes changes in the olfactory system in a manner that facilitates the search for appropriate food sources. In this video ...

Membrane Potential Dye Imaging of Ventromedial Hypothalamus Neurons From Adult Mice to Study Glucose Sensing

Мембранный потенциал Краска Визуализация вентромедиального Hypothalamus нейроны от взрослых мышей по изучению глюкозы Sensing

Studies of neuronal activity are often performed using neurons from rodents less than 2 months of age due to the technical difficulties associated with ...

A Simple and Inexpensive Method for Determining Cold Sensitivity and Adaptation in Mice

Простой и недорогой метод для определения холодную чувствительность и адаптация в мышах

Cold hypersensitivity is a serious clinical problem, affecting a broad subset of patients and causing significant decreases in quality of life.  The cold ...

Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

Assays to Detect UV-reflecting Structures and Determine their Importance in Mate Preference using the Sailfin Molly Poecilia latipinna

Анализы для обнаружения УФ-отражающих структур и определить их значение в Mate Предпочтение используя SailFin Молли<em&gt; Poecilia latipinna</em

Many organisms use cues and signals beyond human sensitivity during social interactions. It is important to take into account how organisms perceive their ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

Простой способ измерить изменения в Reward обращаемость за помощью<em&gt; Дрозофилы</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

Assay to Measure Nucleocytoplasmic Transport in Real Time within Motor Neuron-like NSC-34 Cells

Анализ для измерения нуклеоцитоплазматического транспорта в реальном времени в моторных нейроноподобных клетках NSC-34

Nucleocytoplasmic transport refers to the import and export of large molecules from the cell nucleus. Recently, a number of studies have shown a ...

High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay

High-throughput Analysis of Locomotor Behavior in the Drosophila Island Assay

Высок объём анализ двигательного поведения в Assay остров дрозофилы

Advances in next-generation sequencing technologies contribute to the identification of (candidate) disease genes for movement disorders and other ...

Optogenetic Entrainment of Hippocampal Theta Oscillations in Behaving Mice

Optogenetic ГРЭС гиппокампа тета колебаний в себя мышей

Extensive data on relationships of neural network oscillations to behavior and organization of neuronal discharge across brain regions call for new tools ...