Name: primary cultures of rat astrocytes and microglia and their use in the study of amyotrophic lateral sclerosis
Uploaded: 2022-06-23T12:30:00
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这项工作得到了塞尔维亚共和国教育科技发展部合同编号 451-03-9/2021-14/ 200178、FENS - NENS 教育和培训集群项目“神经炎症中神经胶质细胞三边课程”和 EC H2020 MSCA RISE 赠款 #778405 的支持。我们感谢Marija Adžić和Mina Perić提供免疫组织化学图像，感谢Danijela Bataveljić帮助撰写论文。

所有实验均按照欧盟关于为科学目的保护动物的指令进行，并得到贝尔格莱德大学生物学院伦理委员会的许可（批准号EK-BF-2016/08）。关于患者材料（IgG血清），根据世界医学协会道德规范（赫尔辛基宣言）收集用于常规临床检查，并征得患者同意，用于涉及人类的实验。该方案已获得塞尔维亚临床中心伦理委员会（第850/6号）的批准。
1. 原代细胞培养准备
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本文介绍了原代细胞培养方法，作为一种快速且“预算内”的工具，用于研究大鼠hSOD1G93A 模型中的细胞（病理）生理学的不同方面，例如ALS。因此，该技术适用于单细胞水平的研究，可以在更高的组织水平（即，在组织切片或活体动物中）进行外推和进一步研究。然而，细胞培养作为一种技术有一些注意事项。最重要的是在冰上进行脑组织分离和细胞解离，并在尽可能短的时间内进行这?...

细胞培养技术在健康和疾病的细胞神经生理学不同领域取得了许多进展。特别是，从实验室动物的神经元组织中新鲜分离的原代细胞培养物使实验者能够仔细研究不同生化介质和生理设置中不同细胞的行为。使用不同的荧光生理指示剂（例如Ca2+敏感染料）与延时视频显微镜相结合，可以实时更好地了解细胞的生物物理和生化过程。
ALS是一种破坏性的神经退行性疾病，影响上运动神经元和下运动神经元1。该病具有家族型的复杂发病机制，但主要是散发形式（90% 的病例）2。众所周知，非细胞自主机制有助于ALS病理生理学，主要是由于神经胶质细胞的重要作用3。ALS也被很好地描述为一种神经炎症性疾病，涉及体液和炎症的细胞因素。
免疫球蛋白G被广泛用作ALS和其他神经退行性疾病的分子标志物。研究该标志物的血清水平可以指示疾病中神经炎症的存在和阶段4，5，6，而其在脑脊液中的存在可以表明血脑屏障的破坏7。IgG也被确定为ALS患者脊髓运动神经元中的沉积物7。然而，这种方法在IgG水平与疾病分期和特征的相关性方面显示出一些不一致之处6。
从ALS患者血清中分离的IgG（ALS IgG）可以在幼稚星形胶质细胞中诱导钙反应8和神经元中的谷氨酸释放，这表明兴奋性毒性作用 - ALS病理学9的标志。然而，对hSOD1G93A ALS大鼠模型（包含人SOD1突变的多个拷贝10）的研究表明，培养的神经胶质细胞11，组织12，13，14或活体动物13中有许多氧化应激标志物。值得注意的是，从ALS大鼠模型培养的星形胶质细胞比来自非转基因同窝的星形胶质细胞更容易发生过氧化物诱导的氧化应激11。
培养中的小胶质细胞以不太明显的方式受到ALS IgG的影响。也就是说，BV-2小胶质细胞系仅响应于4/11 ALS IgG患者样本的应用，显示出来自氧化应激荧光标记物的信号升高15。众所周知，小胶质细胞参与许多神经炎症病理，增加了ALS16，17非细胞自主机制的氧化应激和晚期进展阶段。然而，ALS IgGs的数据表明，这些细胞可能不像星形胶质细胞那样对这些ALS炎症的体液因子有反应。已经对来自ALS小鼠模型的原代星形胶质细胞进行了几项研究，不仅在幼崽中，而且在有症状的动物中，无论是在大脑还是脊髓上18，19，20，21。小胶质细胞原代培养也是如此，尽管程度低于星形胶质细胞，并且主要来自胚胎阶段的大脑区域22，23，24。
我们在培养的细胞上使用Ca2+的延时视频成像，主要作为跟踪该离子的细胞内瞬变作为兴奋性毒性的生理标志物的手段。因此，通过对这些瞬变（振幅、瞬态下面积、上升时间、频率）进行生物物理表征，研究人员可以从不同的神经变性细胞模型中获得实验诊断参数。因此，该技术提供了对IgG作为疾病生物标志物进行定量生理评估的优势。有大量关于IgG和Ca2+在诱导ALS中的作用的文献。这些研究中的大多数是通过将患者IgGs注射到实验动物25，26，27，28，29中诱导ALS进行的，然后显示细胞内Ca 2+升高和IgG沉积。一系列研究探讨了ALS IgGs对体外运动突触的影响30，31，32。在上述背景下，这里介绍的技术将重点放在神经胶质细胞作为ALS非细胞自主机制的重要参与者上，并量化了它们对IgG的潜在兴奋毒性反应作为神经炎症的体液因子。这种方法在测试其他体液因子（如全血清、脑脊液或细胞因子）中可能具有更广泛的应用，这些因子在不同的细胞培养系统和一般炎症的细胞模型中。
本文描述了如何从Sprague Dawley大鼠的皮质制备神经胶质细胞，星形胶质细胞和小胶质细胞的原代培养物，以及如何进一步使用这些细胞研究患者血清来源的IgG的ALS病理生理学。详细介绍了培养细胞的染料上样（图1）和延时视频成像实验中Ca2+ 变化的记录方案。视频记录的例子将显示与ATP相比，神经胶质细胞对ALS IgG的反应，后者激活嘌呤能膜受体。首次展示了一个关于从hSOD1G93A ALS大鼠大脑中分离的星形胶质细胞如何与非转基因对照相比对ALS IgG产生更显着的Ca2+ 反应的示例，以及如何将该过程与Ca2 + 商店操作的差异联系起来。还显示了ALS IgG急性攻击的小胶质细胞中的钙成像示例，细胞内钙仅有适度反应。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>15 mL tube</td>
			<td>Sarstedt, Germany</td>
			<td>62 554 502</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2 mL tube</td>
			<td>Sarstedt, Germany</td>
			<td>72.691</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>21 G needle</td>
			<td>Nipro, Japan</td>
			<td>HN-2138-ET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23 G needle</td>
			<td>Nipro, Japan</td>
			<td>HN-2338-ET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL syringe</td>
			<td>Nipro, Japan</td>
			<td>SY3-5SC-EC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 mm circular glass coverslip</td>
			<td>Menzel Glasser, Germany</td>
			<td>630-2113</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>ThermoFisher Sientific, USA</td>
			<td>130181</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>A9062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AxioObserver A1</td>
			<td>Carl Zeiss, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumine</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>B6917</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>2110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>10236276001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-glucose</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>158968</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>D5648</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey-anti goat AlexaFluor 647 IgG antibody</td>
			<td>Invitrogen, USA</td>
			<td>A-21447</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey-anti mouse AlexaFluor 488 IgG antibody</td>
			<td>Invitrogen, USA</td>
			<td>A-21202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>EDS-100G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>E4378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#8221;evolve&#8221;-EM 512 Digital Camera System</td>
			<td>Photometrics, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Gibco, ThermoFisher Scientific, USA</td>
			<td>10500064</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fiji ImageJ Software</td>
			<td>Open source under the GNU General Public Licence</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC filter set</td>
			<td>Chroma Technology Inc., USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluo-4 AM</td>
			<td>Molecular Probes, USA</td>
			<td>F14201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat anti-Iba1</td>
			<td>Fujifilm Wako Chemicals, USA</td>
			<td>011-27991</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Biowest, France</td>
			<td>P5455</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HighSpeed Solution Exchange System</td>
			<td>ALA Scientific Instruments, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Memmert GmbH + Co. KG, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>M2393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matlab software</td>
			<td>Math Works, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse anti-GFAP</td>
			<td>Merck Millipore, USA</td>
			<td>MAB360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mowiol 40-88</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>324590</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal donkey serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>D9663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>158127</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicilin and Streptomycin</td>
			<td>ThermoFisher Sientific, USA</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-L-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>P5899</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>P5405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium dihydrogen phosphate</td>
			<td>Carlo Erba Reagents, Spain</td>
			<td>471686</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaker DELFIA PlateShake</td>
			<td>PerkinElmer Life Sciencies, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>S3817</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>S5886</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium phosphate dibasic heptahydrate</td>
			<td>Carl ROTH GmbH</td>
			<td>X987.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>P5280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thapsigargine</td>
			<td>Tocris Bioscience, UK</td>
			<td>1138</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X - 100</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>T4799</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vapro Vapor Pressure Osmometer 5520</td>
			<td>Wescor, ELITechGroup Inc., USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ViiFluor Imaging System</td>
			<td>Visitron System Gmbh, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VisiChrome Polychromator System</td>
			<td>Visitron System Gmbh, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VisiView high performance setup</td>
			<td>Visitron System Gmbh, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xenon Short Arc lamp</td>
			<td>Ushio, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

primary cultures of rat astrocytes and microglia and their use in the study of amyotrophic lateral sclerosis

该协议演示了如何从Sprague Dawley大鼠的皮质制备神经胶质细胞，星形胶质细胞和小胶质细胞的原代培养物，以及如何使用这些细胞来研究肌萎缩侧索硬化症（ALS）的病理生理学大鼠hSOD1G93A 模型中。首先，该协议展示了如何从出生后大鼠皮质中分离和培养星形胶质细胞和小胶质细胞，然后如何使用星形胶质细胞的神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）标记物和离子钙结合衔接分子1（Iba1）小胶质细胞标记物通过免疫细胞化学来表征和测试这些培养物的纯度。在下一阶段，描述了培养细胞的染料负载（钙敏感Fluo 4-AM）的方法，并在活细胞的视频成像实验中记录了Ca2+ 的变化。
视频记录的示例包括：（1）从ALS患者分离的免疫球蛋白G（IgG）急性暴露于免疫球蛋白G（IgG）的培养星形胶质细胞的Ca2+成像病例，与同一实验中证明的ATP反应相比，显示出特征性和特异性反应。示例还显示，与非转基因对照相比，hSOD1G93A 星形胶质细胞中 ALS IgG 诱发的细胞内钙浓度瞬时升高更显着;（2）在内质网Ca 2 + ATP酶的非竞争性抑制剂thapsigargin（Thg）消耗钙储存期间培养的星形胶质细胞的Ca2+成像，然后通过在记录溶液中添加钙引发的储存操作的钙进入，这证明了hSOD1G93A和非转基因星形胶质细胞中Ca2 +储存操作之间的差异;（3）培养的小胶质细胞的Ca 2+成像主要显示对ALS IgG缺乏反应，而ATP应用引起Ca2+变化。本文还强调了关于培养物的关键细胞密度和纯度、选择正确浓度的Ca2+染料和染料加载技术的可能注意事项和注意事项。

培养中不同神经胶质细胞类型的表征 产生用于实验的星形胶质细胞通常需要15-21天，而小胶质细胞需要10-15天才能生长。进行免疫染色以评估培养物的细胞纯度。 图1 显示了星形胶质细胞标志物GFAP和小胶质细胞标志物Iba1在各自培养物中的双重标记表达。
已知钙成像可揭示健康和患病星形胶质细胞的细胞生理学差异。以前在野生型星形胶?...

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Primary Cultures of Rat Astrocytes and Microglia and Their Use in the Study of Amyotrophic Lateral Sclerosis

我们在这里提出了一个关于如何从大鼠皮质制备神经胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的原代培养物的协议，用于细胞内 Ca2+ 的延时视频成像，用于研究 hSOD1G93A 大鼠模型中肌萎缩侧索硬化症的病理生理学。

大鼠星形胶质细胞和小胶质细胞的原代培养及其在肌萎缩侧索硬化症研究中的应用

This protocol demonstrates how to prepare primary cultures of glial cells, astrocytes, and microglia from the cortices of Sprague Dawley rats and how to ...

该协议允许揭示细胞间钙信号模式，表征健康和疾病中的每种细胞类型反应。该技术允许对复杂的细胞行为进行快速而详细的生物物理表征。我们计划使用这种IgG诱导的钙信号传导作为神经炎症性疾病个性化医疗的指纹。在现实生活中，要看到和跟踪所有的过程和事件并不容易，尤其是在显微镜下发生的那些。因此，视觉数据很重要。斩首一到三天大的幼崽后，用小角度剪刀切开皮肤，露出头骨。然后通过将大孔切向眼眶来打开颅骨，并进行垂直的中线切口。从头骨中取出大脑，并将其放入含有PBS的培养皿中。用镊子的尖端撕裂两个半球之间的连接，并通过轻轻地将半球从中心推到侧面，用弯曲的镊子将半球分开。使用直镊子和弯曲的镊子小心地撕裂脑膜以去除脑膜。然后用弯曲的镊子捏住海马体，将其取出，丢弃，或将其用于另一种细胞培养制剂。接下来，将皮层转移到含有三毫升冷PBS的15毫升管中，并通过用1毫升吸头上下移液10至15次来均质组织。将细胞以500g离心五分钟。弃去上清液，用一毫升吸头移液将沉淀重悬于三毫升冷PBS中。再次离心，并将沉淀重悬于两毫升补充有10%FBS和抗生素的完全DMEM中。将匀浆转移到两毫升管中后，将匀浆通过 21 和 23 号针头以制成单细胞悬浮液。将从一个皮层制备的细胞悬液倒入含有三毫升完整DMEM的60毫米培养皿中，轻轻摇动培养皿，使悬浮液均匀分布。将细胞在含有5%二氧化碳和95%空气的加湿培养箱中以37摄氏度孵育。为了促进星形胶质细胞的生长，去除旧培养基，并用预热的PBS洗涤细胞，以去除松散附着的神经胶质细胞和FBS痕迹，一旦它们达到70%至80%汇合。然后通过加入一毫升预热的胰蛋白酶溶液来胰蛋白酶消化星形胶质细胞的底层，并在37摄氏度下孵育两到五分钟。使用显微镜检查细胞是否开始分离，并加入四毫升完整的DMEM。收集细胞悬液，并将其转移到15毫升管中。然后将试管以500g离心五分钟。弃去上清液并将沉淀重悬于一毫升完全培养基中。使用血细胞计数器计数细胞。接下来，准备培养皿并加入培养基。在5毫升新鲜的完全DMEM中以每平方厘米10至第四个细胞的密度重新铺板细胞，并在每次更换培养基之前用完全DMEM洗涤细胞。达到70%至80%汇合后，重复胰蛋白酶消化，并在7毫米聚L-赖氨酸涂层的圆形玻璃盖玻片上接种5次10至第三个星形胶质细胞。让它们附着 10 分钟，然后添加完整的 DMEM。48小时后在实验中使用它们。制备小胶质细胞培养物后，为了促进小胶质细胞，让神经胶质细胞汇合，小胶质细胞将在10至15天后出现在星形胶质细胞层的顶部。在轨道振荡器上以220 RPM摇动培养皿两个小时。现在，用一毫升移液器吸头吸出上清液，轻轻清洗分离和松散附着的细胞。将上清液轻轻分配到细胞层上数次，确保在此洗涤步骤中覆盖整个细胞层表面。收集带有分离细胞的培养基，并将其转移到15毫升管中。如前所述离心、重悬和计数细胞。在七毫米聚-L-赖氨酸涂层的圆形玻璃盖玻片上播种5次10至第三个小胶质细胞。让它们附着 10 分钟并添加完整的 DMEM。48小时后在实验中使用它们。要洗掉完整的DMEM，请将一张盖玻片转移到装有细胞外溶液的培养皿中。通过用细胞外溶液稀释一毫摩尔Fluo-4AM来制备染料负载溶液，以达到五微摩尔的最终浓度。将带有细胞的盖玻片在室温下在黑暗中将细胞放入染料加载溶液中30分钟，并在细胞外溶液中洗涤细胞20分钟。将盖玻片放入装有一毫升工作溶液的记录室中。选择在整个实验过程中具有一致细胞数的视野。开始成像并通过获取基础荧光水平三到五分钟来确定基线。然后停止工作溶液的流动，并切换到测试溶液所需的时间长度。在每个测试溶液之间，用恒定流量的工作溶液洗涤细胞三到五分钟。通过从溶液顶部安排恒定的吸力，将记录室中的溶液体积保持在一毫升。选择信号强度最高的帧，并使用多边形工具应用程序环绕一个像元。环绕采集场中的所有像元后，使用圆形工具在背景中选择五个感兴趣区域。然后测量单个单元格的平均信号强度和每个时间帧的背景。选择所有感兴趣的区域，并使用 ImageJ 中 ROI 管理器中的“多测量”命令或商业软件中的任何等效命令。在MATLAB软件中导入数据后，平均5个背景ROI，并从同时采集的帧的平均ROI强度中减去每帧的平均背景。然后，通过确定钙峰的幅度，钙瞬态的积分变化，峰值时间，上升时间，半宽和频率来分析钙活性。GFAP用于可视化星形胶质细胞，Iba1用于可视化小胶质细胞。hSOD1G93A星形胶质细胞对ALS免疫球蛋白G的反应与非转基因星形胶质细胞相比，钙瞬变幅度更大，整体综合变化更显着，达到峰值的时间更短。对ALS免疫球蛋白G的反应与对ATP的反应是可区分的。hSOD1G93A星形胶质细胞在储存中具有更高水平的钙离子，如储存耗尽所揭示的那样，表明该离子过载。培养小胶质细胞，并随着时间的推移提取平均荧光强度。三个细胞的钙迹线表示只有一个细胞对ALS免疫球蛋白G有反应，而所有细胞对ATP有反应。伪彩色图像表示响应ALS，IgG和ATP的荧光强度和基线。细胞需要充分加载，成像系统的参数需要适当调整，以便在实验过程中信号不分离。除了钙释放外，还可以进行膜片钳。因此，可以获得不同膜离子电流与钙发射之间相关性的更完整的图片。对细胞内钙稳态的理解对于探索对自然以及压力和外部刺激的几种反应至关重要。

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Protocol for Three-dimensional Confocal Morphometric Analysis of Astrocytes

协议星形胶质细胞的三维共聚焦形态分析

As glial cells in the brain, astrocytes have diverse functional roles in the central nervous system. In the presence of harmful stimuli, astrocytes modify ...

科研

神经科学

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

使用的跟踪经典条件反射，评估胎儿酒精谱系障碍大鼠模型海马功能障碍

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

Rapid and Refined CD11b Magnetic Isolation of Primary Microglia with Enhanced Purity and Versatility

原代小胶质的快速和精细的CD11b电磁隔离带增强的纯度和多功能性

Microglia are the primary responders to central nervous system insults; however, much remains unknown about their role in regulating neuroinflammation. ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

时间依赖性增加对微电极阵列刺激神经元细胞培养物的网络响应

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...

Characterization and Isolation of Mouse Primary Microglia by Density Gradient Centrifugation

密度梯度离心法分离小鼠原发胶质细胞的研究

Microglia, the resident immune cells in the brain, are the first responders to inflammation or injury in the central nervous system. Recent research has ...

Cell-based Assay to Study Antibody-mediated Tau Clearance by Microglia

微胶质细胞抗体介导的陶氏清除研究

Alzheimer&#39;s disease (AD) is a progressive neurodegenerative condition in which aggregated tau and amyloid proteins accumulate in the brain causing ...

An Antibody Feeding Approach to Study Glutamate Receptor Trafficking in Dissociated Primary Hippocampal Cultures

抗体喂养方法研究分离原发性希马培养物中的谷氨酸受体贩运

Cellular responses to external stimuli heavily rely on the set of receptors expressed at the cell surface at a given moment. Accordingly, the population ...

Use of Capillary Electrophoresis Immunoassay to Search for Potential Biomarkers of Amyotrophic Lateral Sclerosis in Human Platelets

使用毛细血管电泳免疫测定来寻找人类血小板肌萎缩性侧索硬化的潜在生物标志物

Capillary electrophoresis immunoassay (CEI), also known as capillary western technology, is becoming a method of choice for screening disease relevant ...

Use of Primary Cultured Hippocampal Neurons to Study the Assembly of Axon Initial Segments

使用初级培养的希波坎帕神经元来研究Axon初始片段的组装

Neuronal axon initial segments (AIS) are sites of initiation of action potentials and have been extensively studied for their molecular structure, ...

Evaluation of Motor Impairment in C. elegans Models of Amyotrophic Lateral Sclerosis

Evaluation of Motor Impairment in C. elegans Models of Amyotrophic Lateral Sclerosis

秀丽隐杆线虫运动障碍评估 肌萎缩性侧索硬化症模型

The neurodegenerative disease amyotrophic lateral sclerosis (ALS) features progressive loss of motor neurons accompanied by muscle weakness and motor ...