Name: pre-implantation genetic testing for aneuploidy on a semiconductor based next-generation sequencing platform
Uploaded: 2022-08-17T12:50:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Pre-Implantation Genetic Testing for Aneuploidy on a Semiconductor Based Next-Generation Sequencing Platform at JoVE.com

نود أن نشكر الدكتور تشانغيونغ مينغ والسيد رونغجي هو على مشورتهما بشأن تطبيق LIMS الموسع. يتم دعم هذه الدراسة من قبل مشاريع البحوث الخاصة PLA لتنظيم الأسرة (17JS008 ، 20JSZ08) ، وصندوق مختبر قوانغشي الرئيسي لأبحاث أمراض التمثيل الغذائي (رقم 20-065-76) ، ومشروع أبحاث العلوم والتكنولوجيا الصحية المواطن في قوانغتشو (201803010034).

تمت مراجعة جميع البروتوكولات وخزعة الأديم التغصني (قسم 1.1.1.1) المطبقة في هذه الدراسة والموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات البحوث البشرية في المستشفى رقم 924 في 18 سبتمبر 2017 (رقم: PLA924-2017-59). قدم المرضى / المشاركون موافقتهم الخطية المستنيرة للمشاركة في هذه الدراسة.
1. عزل الحمض ا?...

<ol>
	<li>Driscoll, D. A., Gross, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice.+Prenatal+screening+for+aneuploidy.">Clinical practice. Prenatal screening for aneuploidy.</a> The New England Journal of Medicine. 360 (24), 2556-2562 (2009).</li><li>Hassold, T., Hunt, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=To+err+(meiotically)+is+human:+the+genesis+of+human+aneuploidy.">To err (meiotically) is human: the genesis of human aneuploidy.</a> Nature Reviews Genetics. 2 (4), 280-291 (2001).</li><li>Hong, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+aneuploidy+rates+are+equivalent+in+natural+cycles+and+gonadotropin-stimulated+cycles.">Embryonic aneuploidy rates are equivalent in natural cycles and gonadotropin-stimulated cycles.</a> Fertility and Sterility. 112 (4), 670-676 (2019).</li><li>Adams, D. R., Eng, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Next-generation+sequencing+to+diagnose+suspected+genetic+disorders.">Next-generation sequencing to diagnose suspected genetic disorders.</a> The New England Journal of Medicine. 379 (14), 1353-1362 (2018).</li><li>Merriman, B., Team, I. T., Rothberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+ion+torrent+semiconductor+chip+based+sequencing.">Progress in ion torrent semiconductor chip based sequencing.</a> Electrophoresis. 33 (23), 3397-3417 (2012).</li><li>Quail, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tale+of+three+next+generation+sequencing+platforms:+comparison+of+Ion+Torrent,+Pacific+Biosciences+and+Illumina+MiSeq+sequencers.">A tale of three next generation sequencing platforms: comparison of Ion Torrent, Pacific Biosciences and Illumina MiSeq sequencers.</a> BMC Genomics. 13 (1), 341 (2012).</li><li>Kane, S. C., Willats, E., Bezerra Maia, E. H. M. S., Hyett, J., da Silva Costa, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-implantation+genetic+screening+techniques:+Implications+for+clinical+prenatal+diagnosis.">Pre-implantation genetic screening techniques: Implications for clinical prenatal diagnosis.</a> Fetal Diagnosis and Therapy. 40 (4), 241-254 (2016).</li><li>Dilliott, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+next-generation+sequencing+and+bioinformatics+pipeline+to+evaluate+genetic+determinants+of+constitutional+disease.">Targeted next-generation sequencing and bioinformatics pipeline to evaluate genetic determinants of constitutional disease.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (134), e57266 (2018).</li><li>Ion ReproSeq&#8482; PGS View Kits User Guide. Thermo Fisher Scientific Available from: <a target="_blank" href="https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/MAN0016158_IonReproSeqPGSView_UG.pdf">https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/MAN0016158_IonReproSeqPGSView_UG.pdf</a> (2017)</li><li>PicoPLEX&#174; Single Cell WGA Kit User Manual. Takara Bio USA Available from: <a target="_blank" href="https://www.takarabio.com/documents/User%20Manual/PicoPLEX%20Single%20Cell%20WGA%20Kit%20User%20Manual/PicoPLEX%20Single%20Cell%20WGA%20Kit%20User%20Manual_112219.pdf">https://www.takarabio.com/documents/User%20Manual/PicoPLEX%20Single%20Cell%20WGA%20Kit%20User%20Manual/PicoPLEX%20Single%20Cell%20WGA%20Kit%20User%20Manual_112219.pdf</a> (2019)</li><li>. Qubit&#174; 3.0 Fluorometer User Guide, Invitrogen by Life Technologies Available from: <a target="_blank" href="https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/qubit_3_fluorometer_man.pdf">https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/qubit_3_fluorometer_man.pdf</a> (2014)</li><li>Ion AmpliSeq&#8482; DNA and RNA Library Preparation User Guide. Thermo Fisher Scientific Available from: <a target="_blank" href="https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/MAN0006735_AmpliSeq_DNA_RNA_LibPrep_UG.pdf">https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/MAN0006735_AmpliSeq_DNA_RNA_LibPrep_UG.pdf</a> (2019)</li><li>Ion OneTouch 2 System User Guide. Thermo Fisher Scientific Available from: <a target="_blank" href="https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/MAN0014388_IonOneTouch2Sys_UG.pdf">https://tools.thermofisher.com/contents/sfs/manuals/MAN0014388_IonOneTouch2Sys_UG.pdf</a> (2015)</li><li>Ion Pl Hi-Q OT2 200 Kit User Guide. Thermo Fisher Scientific Available from: <a target="_blank" href="https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0010857_Ion_Pl_HiQ_OT2_200_Kit_UG.pdf">https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/manuals/MAN0010857_Ion_Pl_HiQ_OT2_200_Kit_UG.pdf</a> (2017)</li><li>Ion Pl Hi-Q Sequencing 200 Kit User Guide. Thermo Fisher Scientific Available from: <a target="_blank" href="https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/MAN0010947_Ion_Pl_HiQ_Seq_200_Kit_UG.pdf">https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/MAN0010947_Ion_Pl_HiQ_Seq_200_Kit_UG.pdf</a> (2017)</li><li>Torrent Suite Software 5.6. Help Guide. Thermo Fisher Scientific Available from: <a target="_blank" href="https://www.thermofisher.com/in/en/home/life-science/sequencing/next-generation-sequencing/ion-torrent-next-generation-sequencing-workflow/ion-torrent-next-generation-sequencing-data-analysis-workflow/ion-torrent-suite-software.html">https://www.thermofisher.com/in/en/home/life-science/sequencing/next-generation-sequencing/ion-torrent-next-generation-sequencing-workflow/ion-torrent-next-generation-sequencing-data-analysis-workflow/ion-torrent-suite-software.html</a> (2017)</li><li>Wiedenhoeft, J., Brugel, E., Schliep, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast+Bayesian+inference+of+copy+number+variants+using+Hidden+Markov+models+with+wavelet+compression.">Fast Bayesian inference of copy number variants using Hidden Markov models with wavelet compression.</a> PLoS Computational Biology. 12 (5), 1004871 (2016).</li><li>Rubio, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-implantation+genetic+screening+using+fluorescence+in+situ+hybridization+in+patients+with+repetitive+implantation+failure+and+advanced+maternal+age:+two+randomized+trials.">Pre-implantation genetic screening using fluorescence in situ hybridization in patients with repetitive implantation failure and advanced maternal age: two randomized trials.</a> Fertility and Sterility. 99 (5), 1400-1407 (2013).</li><li>Gleicher, N., Kushnir, V. A., Barad, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preimplantation+genetic+screening+(PGS)+still+in+search+of+a+clinical+application:+a+systematic+review.">Preimplantation genetic screening (PGS) still in search of a clinical application: a systematic review.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 12, 22 (2014).</li><li>Bono, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+semiconductor+next-generation+sequencing-based+protocol+for+pre-implantation+genetic+diagnosis+of+reciprocal+translocations.">Validation of a semiconductor next-generation sequencing-based protocol for pre-implantation genetic diagnosis of reciprocal translocations.</a> Prenatal Diagnosis. 35 (10), 938-944 (2015).</li><li>Handyside, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=24-chromosome+copy+number+analysis:+a+comparison+of+available+technologies.">24-chromosome copy number analysis: a comparison of available technologies.</a> Fertility and Sterility. 100 (3), 595-602 (2013).</li><li>Wells, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+utilisation+of+a+rapid+low-pass+whole+genome+sequencing+technique+for+the+diagnosis+of+aneuploidy+in+human+embryos+prior+to+implantation.">Clinical utilisation of a rapid low-pass whole genome sequencing technique for the diagnosis of aneuploidy in human embryos prior to implantation.</a> Journal of Medical Genetics. 51 (8), 553-562 (2014).</li><li>El-Metwally, S., Hamza, T., Zakaria, M., Helmy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Next-generation+sequence+assembly:+Four+stages+of+data+processing+and+computational+challenges.">Next-generation sequence assembly: Four stages of data processing and computational challenges.</a> PLoS Computational Biology. 9 (12), 1003345 (2013).</li><li>Jennings, L. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+validation+of+next-generation+sequencing-based+oncology+panels:+A+joint+consensus+recommendation+of+the+Association+for+Molecular+Pathology+and+College+of+American+Pathologists.">Guidelines for validation of next-generation sequencing-based oncology panels: A joint consensus recommendation of the Association for Molecular Pathology and College of American Pathologists.</a> The Journal of Molecular Diagnostics: JMD. 19 (3), 341-365 (2017).</li><li>de Bourcy, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+comparison+of+single-cell+whole+genome+amplification+methods.">A quantitative comparison of single-cell whole genome amplification methods.</a> PLoS One. 9 (8), 105585 (2014).</li><li>Fiorentino, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+next-generation+sequencing+technology+for+comprehensive+aneuploidy+screening+of+blastocysts+in+clinical+pre-implantation+genetic+screening+cycles.">Application of next-generation sequencing technology for comprehensive aneuploidy screening of blastocysts in clinical pre-implantation genetic screening cycles.</a> Human Reproduction. 29 (12), 2802-2813 (2014).</li><li>Damerla, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ion+Torrent+sequencing+for+conducting+genome-wide+scans+for+mutation+mapping+analysis.">Ion Torrent sequencing for conducting genome-wide scans for mutation mapping analysis.</a> Mammalian Genome. 25 (3-4), 120-128 (2014).</li><li>Brezina, P. R., Anchan, R., Kearns, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preimplantation+genetic+testing+for+aneuploidy:+what+technology+should+you+use+and+what+are+the+differences.">Preimplantation genetic testing for aneuploidy: what technology should you use and what are the differences.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 33 (7), 823-832 (2016).</li><li>Landrum, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ClinVar:+improving+access+to+variant+interpretations+and+supporting+evidence.">ClinVar: improving access to variant interpretations and supporting evidence.</a> Nucleic Acids Research. 46, 1062-1067 (2018).</li><li>Genomes Project, C, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+global+reference+for+human+genetic+variation.">A global reference for human genetic variation.</a> Nature. 526 (7571), 68-74 (2015).</li><li>McKusick, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mendelian+inheritance+in+man+and+its+online+version,+OMIM.">Mendelian inheritance in man and its online version, OMIM.</a> American Journal of Human Genetics. 80 (4), 588-604 (2007).</li><li>Wang, K., Li, M., Hakonarson, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ANNOVAR:+functional+annotation+of+genetic+variants+from+high-throughput+sequencing+data.">ANNOVAR: functional annotation of genetic variants from high-throughput sequencing data.</a> Nucleic Acids Research. 38 (16), 164 (2010).</li><li>Zhao, M., Zhao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNVannotator:+A+comprehensive+annotation+server+for+copy+number+variation+in+the+human+genome.">CNVannotator: A comprehensive annotation server for copy number variation in the human genome.</a> PLoS One. 8 (11), 80170 (2013).</li><li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+application+of+next-generation+sequencing+in+pre-implantation+genetic+diagnosis+cycles+for+Robertsonian+and+reciprocal+translocations.">Clinical application of next-generation sequencing in pre-implantation genetic diagnosis cycles for Robertsonian and reciprocal translocations.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 33 (7), 899-906 (2016).</li><li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+allele+with+resolved+carrier+status+of+Robertsonian+and+reciprocal+translocation+in+human+pre-implantation+embryos.">Mapping allele with resolved carrier status of Robertsonian and reciprocal translocation in human pre-implantation embryos.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (41), 8695-8702 (2017).</li></ol>

اختلال الصيغة الصبغية للكروموسومات للأجنة هو سبب نسبة كبيرة من فقدان الحمل ، سواء تم تصوره بشكل طبيعي أو في المختبر الإخصاب (IVF). في الممارسة السريرية للتلقيح الاصطناعي ، يقترح أن فحص اختلال الصيغة الصبغية للجنين ونقل جنين euploidy يمكن أن يحسن نتائج التلقيح الاصطناعي. التهجين الفلوري ?...

Aneuploidy هو خلل في عدد الكروموسومات من خلال وجود واحد أو أكثر من الكروموسومات الإضافية أو عدم وجود واحد أو أكثر من الكروموسومات. يمكن للأجنة التي تحمل نوعا من اختلال الصيغة الصبغية ، مثل فقدان كروموسوم X واحد (متلازمة تيرنر) ، أو نسخ إضافية من الأوسومات الذاتية ، مثل التثلث الصبغي من autosome 21 (متلازمة داون) ، و 13 (متلازمة باتاو) ، و 18 (متلازمة إدواردز) ، أو الكروموسومات الجنسية الإضافية مثل 47 ، XXY (متلازمة كلاينفلتر) و 47 ، XXX (متلازمة X الثلاثية) ، البقاء على قيد الحياة حتى نهاية العيوب الخلقية1. Aneuploidy هو السبب الرئيسي للإجهاض في الأشهر الثلاثة الأولى وفشل الإخصاب في المختبر (IVF)2. وتفيد التقارير أن معدل اختلال الصيغة الصبغية يمكن أن يتراوح من 25.4٪ -84.5٪ من خلال الطبقات العمرية المختلفة للدورة الطبيعية ومجموعة التحكم الطبية في ممارسة التلقيح الاصطناعي3.
أصبحت تكنولوجيا تسلسل الجيل التالي تطبق بشكل كبير في تحديد المعلومات الوراثية سريريا. يوفر وصولا عمليا إلى تسلسل الجينوم بكفاءة وإنتاجية عالية. على وجه الخصوص ، أحدث تسلسل الجيل التالي ثورة أيضا في تشخيص الاضطرابات ذات العوامل الوراثية واختبارات الشذوذ في الجينوم4. باستخدام تقنية تسلسل أشباه الموصلات لنقل الإشارات الكيميائية مباشرة في تسلسل التفاعل الحيوي إلى بيانات رقمية ، يوفر نظام التسلسل القائم على أشباه الموصلات كشفا مباشرا في الوقت الفعلي لتسلسل البيانات في 3-7 h 5,6.
في إجراء التلقيح الاصطناعي ، يقوم الاختبار الجيني قبل الزرع (PGT) بالتحقيق في الملف الجيني للجنين قبل نقله إلى الرحم لتحسين نتائج التلقيح الاصطناعي وتقليل خطر الاضطرابات الوراثية عند الأطفال حديثي الولادة 1,7. في PGT جنبا إلى جنب مع تقنيات NGS ، يتم تضخيم المواد الوراثية المستخرجة من أقل من 10 خلايا باستخدام مجموعات تضخيم الجينوم الكاملة أو كاشف تضخيم الجينوم الكامل الذي تم تطويره بشكل مستقل. وهذا يتطلب خطوة واحدة فقط في مرحلة التضخيم ولا يتطلب التضخيم المسبق ، للحصول على منتجات تضخيم الجينوم الكامل. يتم تصميم وتطبيق الاشعال أو اللوحات لمتغير رقم النسخ وتسلسل مواقع الجينات الخاصة في المكتبة التي تم إنشاؤها.
يتضمن سير العمل النموذجي للاختبار الجيني قبل الزرع - اختلال الصيغة الصبغية (PGT-A) في NGS إجراءات تسلسلية ، ويتطلب عبء عمل مكثفا من موظفي المختبر8. قد يؤدي بعض سوء التشغيل الناجم عن التراجع عن الإجراء إلى فقدان غير مرغوب فيه لكل من الوقت والموارد في المختبر. ومن المفيد وضع إجراء تشغيل موحد موجز وواضح لسير عمل PGS-NGS؛ ومع ذلك، لا يمكن لبروتوكولات تنسيق الكلمات تقديم معلومات أكثر تفصيلا حول معالجة العينات ومعالجة الأجهزة وإعدادات الأدوات، والتي يمكن تصورها في بروتوكول فيديو. في هذه المقالة ، يمكن أن يوفر سير العمل الذي تم التحقق منه جنبا إلى جنب مع عرض مرئي لتفاصيل التشغيل بروتوكولات إحالة أكثر مباشرة وبديهية في ممارسة PGT على منصة تسلسل أشباه الموصلات.
يصف البروتوكول هنا طريقة تدعم تجميع ما يصل إلى 16 خزعة جنين بالتوازي. بالنسبة للدفعات الأكبر ، يوصى باستخدام بروتوكول تجاري قائم على المجموعة لتسلسل أشباه الموصلات ، مثل Reproes-PGS.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.45 &#956;m Syringe Filter Unit</td>
			<td>Merkmillipore</td>
			<td>Millex-HV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL DNA LoBind Tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30108051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL tubes</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>188261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2.0 mLDNA LoBind Tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30108078</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL tubes</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5x Anstart Taq Buffer (Mg2+ Plus)</td>
			<td>FAPON</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Anstart Tap DNA Polymerase</td>
			<td>FAPON</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AMPure XP reagent (magnetic beads for dna binding)</td>
			<td>Beckman</td>
			<td>A63881</td>
			<td>https://www.beckman.com/reagents/genomic/cleanup-and-size-selection/pcr/a63881</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Lysis buffer</td>
			<td>Southern Medical University</td>
			<td></td>
			<td>Cell lysis buffer containing 40 mM Tris (pH 8), 100 mM NaCl, 2 mM EDTA, 1 mM ethylene glycol tetraacetic acid (EGTA), 1% (v/v) Triton X-100, 5 mM sodium pyrophosphate, 2 mM &#946;-glycerophosphate, 0.1% SDS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ClinVar</td>
			<td>NCBI</td>
			<td></td>
			<td>https://www.ncbi.nlm.nih.gov/clinvar/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DNA elution buffer</td>
			<td>NEB</td>
			<td>T1016L</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>dNTP</td>
			<td>Vazyme</td>
			<td>P031-AA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DynaMag-2 Magnet</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>12321D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl alcohol</td>
			<td>Guangzhou Chemical Reagent Factory Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>http://www.chemicalreagent.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Independently developed whole genome amplification reagents</td>
			<td>Southern Medical University</td>
			<td></td>
			<td>The reagents consist of the following components: 
			1. Cell Lysis 
			2. Amplification Pre-mixed solution 
			&#160;&#160;&#160; 1) Primer WGA-P2 (10 &#956;M) 
			&#160;&#160;&#160; 2) dNTP (10 mM) 
			&#160;&#160;&#160; 3) 5x Anstart Taq Buffer (Mg2+ Plus) 
			3. Amplification Enzyme 
			&#160;&#160;&#160; 1) Anstart Tap DNA Polymerase (5 U/&#956;L)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion PI Hi-Q OT2 200 Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A26434</td>
			<td>Kit mentioned in step 4.2.8</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion PI Hi-Q Sequencing 200 Kit&#160;&#160;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>A26433</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion Proton System</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4476610</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ion Reporter Server System</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4487118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isopropanol</td>
			<td>Guangzhou Chemical Reagent Factory</td>
			<td></td>
			<td>http://www.chemicalreagent.com/</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Library Preparation Kit</td>
			<td>Daan Gene Co., Ltd</td>
			<td>114</td>
			<td>https://www.daangene.com/pt/certificate.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S5881-1KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclease-Free Water</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>AM9932</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligo WGA-P2</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td></td>
			<td>5&#39;-ATGGTAGTCCGACTCGAGNNNN 
			NNNNATGTGG-3&#39;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OneTouch 2 System</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4474779</td>
			<td>&#160;Template amplification and enrichment system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCR tubes</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>PCR-02D-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PicoPLEX WGA Kit</td>
			<td>Takara Bio USA</td>
			<td>R300671</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette tips</td>
			<td>Quality Scientific Products</td>
			<td></td>
			<td>https://www.qsptips.com/products/standard_pipette_tips.aspx</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable Mini Centrifuge LX-300</td>
			<td>Qilinbeier</td>
			<td>E0122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qubit 3.0 Fluorometer</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>Q33216</td>
			<td>Fluorometer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qubit Assay Tubes</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>Q32856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qubit dsDNA HS Assay Kit</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>Q32851</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sequencer server system</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Torrent Suite Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sequencing Reactions Universal Kit</td>
			<td>Daan Gene Co., Ltd</td>
			<td>113</td>
			<td>https://www.daangene.com/pt/certificate.html 
			This kit contains the following components: 
			1. Template Preparation Kit Set 
			 
			1.1 Template Preparation Kit: 
			Emulsion PCR buffer 
			Emulsion PCR enzyme mix 
			Template carrier solution 
			 
			1.2 Template Preparation solutions: 
			Template preparation reaction oil I 
			emulsifier breaking solution II 
			Template Preparation Reaction Oil II 
			Nuclease-free water 
			Tween solution 
			Demulsification solution I 
			Template washing solution 
			C1 bead washing solution 
			C1 bead resuspension solution 
			Template resuspension solution 
			 
			1.3 Template Preparation Materials: 
			Reagent tube I 
			connector 
			Collection tube 
			Reagent tube pipette I 
			Amplification plate 
			8 wells strip 
			Dedicated tips 
			Template preparation washing adapter 
			Template preparation filter 
			 
			2. Sequencing Kit Set 
			 
			2.1 Sequencing Kit: 
			dGTP 
			dCTP 
			dATP 
			dTTP 
			Sequencing enzyme solution 
			Sequencing primers 
			Quality control templates 
			 
			2.2&#160; Sequencing Solutions: 
			Sequencing solution II 
			Sequencing solution IIII 
			Annealing buffer 
			Loading buffer 
			Foaming agent 
			Chlorine tablets 
			C1 bead 
			 
			2.3 Sequencing Materials: 
			Reagent Tube II 
			Reagent tube cap 
			Reagent tube sipper&#160; II 
			Reagent bottle sipper 
			Reagent bottles 
			 
			3. Chip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>72068-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermal Cycler</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>4375786</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

pre-implantation genetic testing for aneuploidy on a semiconductor based next-generation sequencing platform

اكتسب تسلسل الجيل التالي أهمية متزايدة في التطبيق السريري في تحديد المتغيرات الوراثية. في الاختبار الجيني قبل الزرع ، تتمتع هذه التقنية بمزاياها الفريدة في قابلية التوسع والإنتاجية والتكلفة. بالنسبة للاختبار الجيني قبل الزرع لتحليل اختلال الصيغة الصبغية ، يوفر نظام تسلسل الجيل التالي (NGS) القائم على أشباه الموصلات المعروض هنا نهجا شاملا لتحديد المتغيرات الجينية الهيكلية بدقة لا تقل عن 8 ميجا بايت. من الحصول على العينات إلى التقرير النهائي ، تتطلب عملية العمل خطوات متعددة مع الالتزام الوثيق بالبروتوكولات. وبما أن الخطوات الحرجة المختلفة يمكن أن تحدد نتيجة التضخيم، وجودة المكتبة، وتغطية القراءات، ومخرجات البيانات، فإن المعلومات الوصفية مع العرض المرئي بخلاف الكلمات يمكن أن تقدم المزيد من التفاصيل للتشغيل والتلاعب، مما قد يكون له تأثير كبير على نتائج جميع الخطوات الحرجة. ستعرض الطرق المعروضة هنا الإجراءات التي ينطوي عليها تضخيم الجينوم الكامل (WGA) لخلايا Trophectoderm الخزعة (TE) ، وبناء المكتبة الجينومية ، وإدارة التسلسل ، وأخيرا ، إنشاء تقارير متغيرات عدد النسخ.

مع انتهاء خطة التسلسلات بعد عملية التشغيل في الجهاز، يقوم نظام خادم التسلسل بالإبلاغ عن الملخص مع المعلومات الوصفية للبيانات التي تم إنشاؤها، وحالة الشريحة، ومعدل تحميل مزود خدمة الإنترنت، وجودة المكتبة، كما هو موضح في الشكل 2. في هذا العرض التوضيحي للنتائج ، تم الحصول عل...

Watch this Scientific Journal Video about Pre-Implantation Genetic Testing for Aneuploidy on a Semiconductor Based Next-Generation Sequencing Platform at JoVE.com

Pre-Implantation Genetic Testing for Aneuploidy on a Semiconductor Based Next-Generation Sequencing Platform

يعرض البروتوكول الإجراءات الشاملة داخل المختبر المطلوبة في الاختبارات الجينية قبل الزرع لاختلال الصيغة الصبغية على منصة تسلسل الجيل التالي القائمة على أشباه الموصلات. نقدم هنا الخطوات التفصيلية لتضخيم الجينوم الكامل ، واختيار جزء الحمض النووي ، وبناء المكتبة ، وإعداد القالب ، وتسلسل تدفق العمل مع نتائج تمثيلية.

الاختبار الجيني قبل الزرع لمرض الصبغيات العدلية على منصة تسلسل الجيل التالي القائمة على أشباه الموصلات

Next-generation sequencing has gained increasing importance in the clinical application in the determination of genetic variants. In the pre-implantation ...

يقدم هذا البروتوكول الإجراء من تضخيم الخلية الواحدة إلى بيانات الإبلاغ النهائية في الاختبار الجيني قبل الزرع لاختلال الصيغة الصبغية على منصة تسلسل الجيل التالي القائمة على أشباه الموصلات. يمكن أن يساعد هذا الإجراء المشاهدين على فهم جيد لسير العمل التجريبي لتسلسل PGT-A وتكرار هذه التقنية في مختبر تشخيصي باستخدام منصة NGS القائمة على أشباه الموصلات. ابدأ بسحب 25 ميكرولتر من منتجات تضخيم الجينوم بأكملها ونقلها إلى أنبوب طرد مركزي سعة 1.5 ملليلتر محمل مسبقا ب 25 ميكرولتر من الماء الخالي من النوكلياز.دوامة وخلط حبات تنقية الحمض النووي. Aliquot 50 ميكرولتر من هذا الحل في كل أنبوب عينة. دوامة وأجهزة الطرد المركزي لفترة وجيزة لمدة خمس ثوان.اضبط الأنبوب لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة لعملية ربط الحمض النووي. أدخل أنبوب جهاز الطرد المركزي سعة 1.5 ملليلتر في رف مغناطيسي. ثم انتظر حتى تنجذب جميع الخرز المغناطيسي إلى الجدار الجانبي للأنبوب.انقل المادة الفائقة بعناية إلى أنبوب طرد مركزي جديد سعة 1.5 ملليلتر. تجنب سحب الخرز. وفقا لحجم العينة الأصلي.ماصة 30 ميكرولتر من الخرز المغناطيسي والدوامة وأجهزة الطرد المركزي لفترة وجيزة لمدة خمس ثوان. اضبط الأنبوب لمدة خمس دقائق في درجة حرارة الغرفة لعملية ربط الحمض النووي. أدخل أنابيب أجهزة الطرد المركزي مقاس 1.5 ملم في الرف المغناطيسي.ثم ، انتظر حتى تنجذب جميع الخرز المغناطيسي إلى الجدار الجانبي للأنبوب. قم بإزالة والتخلص بعناية من supernatant. تجنب سحب الخرز.ماصة 300 ميكرولتر من 70٪ الإيثانول في أنبوب الطرد المركزي 1.5 ملليلتر. ثم قم بتدوير الأنبوب برفق مرتين بزاوية 180 درجة وحرك الخرز على طول جدار الأنبوب لغسل شامل. ماصة وتجاهل supernatant.تجنب سحب الخرز. كرر إجراء الغسيل مرة واحدة. ضع لوحة تضخيم جديدة في النظام بمجرد اكتمال البرنامج النظيف.أدخل أنابيب التجميع ، كل منها مملوء مسبقا ب 150 ميكرولتر لكسر المحلول الثاني في الدوار ، ثم ضع الجسر على أنابيب التجميع. أضف زيت التفاعل إلى نصف الأنبوب ومحلول كسر المستحلب إلى ثلث الأنبوب. ضع مرشحا جديدا لإعداد القالب على رف أنبوب مع وضع مدخل العينة لأعلى.دوامة الحل لمدة خمس ثوان وأجهزة الطرد المركزي لفترة وجيزة لمدة خمس ثوان. ثم انقل المحلول إلى بوابة عينة المرشح بعد سحب 800 ميكرولتر ثلاث مرات. جهاز طرد مركزي للأنبوب لتقليل الفقاعات قبل الحقن الأخير.تجنب حقن الهواء في الفلتر. حقن 200 ميكرولتر من زيت التفاعل اثنين ، بعد المحلول المختلط. اقلب بوابة العينة الخاصة بالفلتر لأسفل واستبدل تكيف الغسيل بالفلتر.أدخل إبرة العينة في الفتحة المركزية لغطاء الدوار ثم اضغط على الإبرة في الأسفل. انقر فوق الزر "تشغيل" على الشاشة واختر البرنامج وفقا للمجموعة المقابلة. ثم حدد مساعدة للتحقق من جميع الخطوات.انقر فوق التالي حتى يبدأ التشغيل. سيستغرق الجري حوالي 4.5 ساعة حتى ينتهي. حدد التالي عند انتهاء البرنامج.سيبدأ النظام عملية طرد مركزي مدتها 10 دقائق. بعد الطرد المركزي ، انقر فوق الزر فتح الغطاء وحرك أنابيب التجميع إلى الرفوف. إذا لم ينتقل الإجراء إلى الخطوة التالية في غضون 15 دقيقة ، فاضغط على الدوران النهائي لإعادة الطرد المركزي.قم بإزالة supernatant في أنبوب التجميع ، مع ترك 100 ميكرولتر من المحلول في الأنبوب. امزج العينة المتبقية عن طريق السحب وانقل العينة إلى أنبوب الطرد المركزي الجديد الذي تبلغ سعته 1.5 ملليلتر والذي يحمل علامة OT. عند سحب السوبرناتانت، تجنب لمس الجزء السفلي من الأنبوب على طول الجانبين. ماصة 100 ميكرولتر من الماء الحر نوكليز في كل أنبوب تجميع ونقل الحل إلى أنبوب OT غسلها عن طريق السحب المتكرر.أضف 600 ميكرولتر من الماء الخالي من النوكليز إلى أنبوب OT لتكوين الحجم الإجمالي البالغ ملليلتر واحد. دوامة لمدة 30 ثانية في جهاز الطرد المركزي في 15 ، 500 مرة G لمدة ثماني دقائق. قم بإزالة السوبرناتانت بلطف تاركا 100 ميكرولتر من المحلول في أنبوب OT.استخدم الطرف للتخلص من طبقة الزيت تماما. أضف 900 ميكرولتر من الماء الخالي من النوكليز ، دوامة لمدة 30 ثانية وأجهزة طرد مركزي عند 15،500 مرة G لمدة ثماني دقائق. قم بإزالة supernatant حتى يبقى 20 ميكرولتر من المحلول وأضف حل تعليق القالب لتكوين حجم 100 ميكرولتر.ثم دوامة لمدة 30 ثانية ولفترة وجيزة أجهزة الطرد المركزي لمدة ثانيتين. انتقل إلى الخطوة التالية في غضون 12 ساعة من معالجة العينات قم بتحميل 100 ميكرولتر من المكتبة المخففة ، و 130 ميكرولتر من حبات C1 ، و 300 ميكرولتر من محلول غسل القالب x x ، و 300 ميكرولتر من محلول الذوبان إلى شرائط الآبار الثمانية. قم بتثبيت شرائط الآبار الثمانية على وحدة التخصيب ، وقم بتحميل طرف السحب ، واضبط أنبوب الطرد المركزي سعة 200 ميكرولتر في موضع التجميع.انقر فوق ابدأ لتشغيل البرنامج. ماصة 55 ميكرولتر من محلول العينة وحقنها في ثقب عينة الشريحة. اضبط الشريحة على جهاز الطرد المركزي.احتفظ بالشق نحو الخارج وبوابة العينة في الداخل. ثم قم بموازنته مع شريحة أخرى مستخدمة وأجهزة طرد مركزي لمدة 10 دقائق. قم بإعداد حل التحميل كما هو موضح في مخطوطة النص.نفخ 100 ميكرولتر من الهواء في محلول الرغوة. قم بتميض المحلول بشكل متكرر حتى تصبح الفقاعات في حالة رغوة كثيفة وحافظ على حجم الرغوة إلى حوالي 250 ميكرولتر. ضع الشريحة على المقعد بعد جهاز الطرد المركزي.حقن 100 ميكرولتر من الرغوة في ثقب العينة وإزالة المحلول المبثوق في البوابة الخارجية. ثم ، الطرد المركزي للرقاقة لفترة وجيزة لمدة 30 ثانية. كرر هذه العملية مرة واحدة.حقن 100 ميكرولتر في 50٪ غسل المخزن المؤقت مرتين وإزالة المحلول المبثوق في البوابة الخارجية بعد كل حقن. ثم حقن 100 ميكرولتر في 50٪ من المخزن المؤقت التلدين ثلاث مرات وإزالة المحلول المبثوق في البوابة الخارجية بعد كل حقنة. حقن 65 ميكرولتر في 50٪ من المخزن المؤقت لتفاعل الإنزيم ، وتجنب الفقاعات وإزالة المحلول المبثوق في البوابة الخارجية.قم بتثبيت الشريحة المحملة في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس دقائق وقم بتثبيت الشريحة على بوابة رقاقة التسلسل. اختر البرنامج المخطط تحقق من المعلومات وابدأ التشغيل. حصل التشغيل التمثيلي على ما مجموعه 17.6 غيغابايت من البيانات وكان معدل التحميل الإجمالي لجسيم الكرة الأيونية 88٪ في إجمالي آبار الشريحة.أكدت الخريطة الحرارية حتى تحميل العينة على إجمالي مساحة الشريحة. 77٪ من إجمالي القراءات كانت قابلة للاستخدام. أظهرت جميع الآبار المحملة بمزود خدمة الإنترنت إثراء القوالب بنسبة 100٪ حيث كانت 78٪ نسلية.من بين جميع القوالب النسيلة ، تم تأهيل 97٪ كمكتبة نهائية. كان متوسط طول القراءة 177 زوجا أساسيا بينما كان الوسيط والوضع 176 و 174 زوجا أساسيا ، على التوالي. كانت الأعداد القصوى للثيمين والسيتوزين والأدينين في القوالب حوالي 76 على خط القطع المؤهل البالغ 50.وفي جميع الآبار القابلة للعنونة التي تضم مزودي خدمات الإنترنت المباشرين، تمت تصفية 99.5 في المائة من المكتبات المبنية و 20 في المائة من المكتبات المتعددة النسيلة والمنخفضة الجودة في حين تم تأهيل 76.6 في المائة من مقدمي خدمات الإنترنت لمزيد من التحليل. أظهرت نتيجة تباين عدد النسخ من عينة واحدة 182.16 زوجا من الفسيفساء الصبغية من P 16.3 إلى Q 35.2 على الكروموسوم أربعة وأزواج أحادية القاعدة من 33 نقطة 13 من الجزء الأحادي من Q 11.1 إلى Q 13.33 على الكروموسوم 22. عند إجراء اختيار الشظايا ، يجب تعديل الفترات الزمنية بين الخطوات وفقا لحجم العينات في نفس الدفعة لمنع التعرض الزائد ونقص العينات الأمامية والخلفية.

Research

JoVE Journal

Genetics

Assessment of DNA Contamination in RNA Samples Based on Ribosomal DNA

تقييم التلوث الحمض النووي في عينات الحمض النووي الريبي استناداً إلى ريبوسومال الحمض النووي

One method extensively used for the quantification of gene expression changes and transcript abundances is reverse-transcription quantitative real-time ...

Optimization and Comparative Analysis of Plant Organellar DNA Enrichment Methods Suitable for Next-generation Sequencing

الأمثل والتحليل المقارن لطرق التخصيب الحمض النووي النباتي أورغانيلار مناسبة للجيل القادم التسلسل

Plant organellar genomes contain large, repetitive elements that may undergo pairing or recombination to form complex structures and/or sub-genomic ...

G2-seq: A High Throughput Sequencing-based Technique for Identifying Late Replicating Regions of the Genome

G2-seq: عالية إنتاجية على أساس تسلسل تقنية لتحديد تكرار متأخر مناطق الجينوم

Numerous techniques have been developed to follow the progress of DNA replication through the S phase of the cell cycle. Most of these techniques have ...

Targeted Next-generation Sequencing and Bioinformatics Pipeline to Evaluate Genetic Determinants of Constitutional Disease

استهدفت تسلسل الجيل القادم وأنابيب المعلوماتية الحيوية لتقييم المحددات الوراثية للمرض الدستورية

Next-generation sequencing (NGS) is quickly revolutionizing how research into the genetic determinants of constitutional disease is performed. The ...

Amplification of Near Full-length HIV-1 Proviruses for Next-Generation Sequencing

التضخيم من القرب من كامل طول فيروس نقص المناعة البشرية-1 بروفيروسيس للجيل التالي التسلسل

The Full-Length Individual Proviral Sequencing (FLIPS) assay is an efficient and high-throughput method designed to amplify and sequence single, near ...

High-throughput Identification of Gene Regulatory Sequences Using Next-generation Sequencing of Circular Chromosome Conformation Capture (4C-seq)

High-throughput Identification of Gene Regulatory Sequences Using Next-generation Sequencing of Circular Chromosome Conformation Capture 4C-seq

تحديد تسلسل الجينات التنظيمية استخدام تسلسل الجيل المقبل من تكيف كروموسوم دائرية الفائق التقاط (ج 4-seq)

The identification of regulatory elements for a given target gene poses a significant technical challenge owing to the variability in the positioning and ...

Genetic Engineering of Dictyostelium discoideum Cells Based on Selection and Growth on Bacteria

Genetic Engineering of Dictyostelium discoideum Cells Based on Selection and Growth on Bacteria

الهندسة الوراثية ديسكويديوم ديكتيوستيليوم "الخلايا استناداً إلى" التحديد والنمو في البكتيريا

Dictyostelium discoideum is an intriguing model organism for the study of cell differentiation processes during development, cell signaling, and other ...

Semiconductor Sequencing for Preimplantation Genetic Testing for Aneuploidy

تسلسل أشباه الموصلات للاختبار الوراثي قبل الزرع للأنوبلويدي

Chromosomal aneuploidy, one of the main causes leading to embryonic development arrest, implantation failure, or pregnancy loss, has been well documented ...

Mass Spectrometry-Based Proteomics Analyses Using the OpenProt Database to Unveil Novel Proteins Translated from Non-Canonical Open Reading Frames

تحليلات البروتيوميات الجماعي القائم على قياس الطيف الكتلي باستخدام قاعدة البيانات أوبينبروت لكشف النقاب عن البروتينات رواية مترجمة من إطارات القراءة المفتوحة غير متعارف عليه

Genome annotation is central to today's proteomic research as it draws the outlines of the proteomic landscape. Traditional models of open reading frame ...

RNA Next-Generation Sequencing and a Bioinformatics Pipeline to Identify Expressed LINE-1s at the Locus-Specific Level

الجيش النيبالي الجديد الجيل التالي التسلسل وخط أنابيب المعلوماتية الحيوية لتحديد خط التعبير-1s في مستوي محدد الموضع

Long INterspersed Elements-1 (LINEs/L1s) are repetitive elements that can copy and randomly insert in the genome resulting in genomic instability and ...