Name: a tnbs-induced rodent model to study the pathogenic role of mechanical stress in crohn's disease
Uploaded: 2022-03-01T14:30:00
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이 작업은 NIH (R01 DK124611에서 XZS로)와 미국 국방부 (W81XWH-20-1-0681에서 XZS로)의 보조금으로 부분적으로 지원됩니다. 조직학 작업은 UTMB 외과 병리학 연구소의 도움으로 수행되었습니다.

모든 동물 실험은 텍사스 대학 의료 지부 (#0907051C)의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 따라 수행되었습니다. ∼8-9주령의 수컷 또는 암컷 Sprague-Dawley 래트를 연구에 사용하였다.
1. 동물 준비
<ol><li>24 시간 동안 빠른 쥐를 하룻밤 동안 완하제 (장 클렌저, 재료 표 참조)로 치료하십시오.</li>
	<li>다음날, 마취 시스템을 사용하여 쥐를 마취 ( 재료 표...

<ol>
	<li>Kappelman, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+and+geographic+distribution+of+Crohn's+disease+and+ulcerative+colitis+in+the+United+States.">The prevalence and geographic distribution of Crohn's disease and ulcerative colitis in the United States.</a> Clinical Gastroenterology and Hepatology. 5 (12), 1424-1429 (2007).</li><li>Hwang, J. M., Varma, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+for+inflammatory+bowel+disease.">Surgery for inflammatory bowel disease.</a> World Journal of Gastroenterology. 14 (17), 2678-2690 (2008).</li><li>Latella, G., Rieder, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+fibrosis:+Ready+to+be+reversed.">Intestinal fibrosis: Ready to be reversed.</a> Current Opinion in Gastroenterology. 33 (4), 239-245 (2017).</li><li>Rieder, F., Fiocchi, C., Rogler, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms,+management,+and+treatment+of+fibrosis+in+patients+with+inflammatory+bowel+diseases.">Mechanisms, management, and treatment of fibrosis in patients with inflammatory bowel diseases.</a> Gastroenterology. 152 (2), 340-350 (2017).</li><li>Bettenworth, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Crohn's+disease-associated+small+bowel+strictures+and+fibrosis+on+cross-sectional+imaging:+A+systematic+review.">Assessment of Crohn's disease-associated small bowel strictures and fibrosis on cross-sectional imaging: A systematic review.</a> Gut. 68 (6), 1115-1126 (2019).</li><li>Chen, W., Lu, C., Hirota, C., Iacucci, M., Ghosh, S., Gui, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smooth+muscle+hyperplasia/hypertrophy+is+the+most+prominent+histological+change+in+Crohn's+fibrostenosing+bowel+strictures:+A+semiquantitative+analysis+by+using+a+novel+histological+grading+scheme.">Smooth muscle hyperplasia/hypertrophy is the most prominent histological change in Crohn's fibrostenosing bowel strictures: A semiquantitative analysis by using a novel histological grading scheme.</a> Journal of Crohn's and Colitis. 11 (1), 92-104 (2017).</li><li>Olaison, G., Smedh, K., Sj&#246;dahl, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Natural+course+of+Crohn's+disease+after+ileocolic+resection:+Endoscopically+visualised+ileal+ulcers+preceding+symptoms.">Natural course of Crohn's disease after ileocolic resection: Endoscopically visualised ileal ulcers preceding symptoms.</a> Gut. 33 (3), 331-335 (1992).</li><li>Lin, Y. M., Li, F., Shi, X. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stress+is+a+pro-inflammatory+stimulus+in+the+gut:+In+vitro,+in+vivo+and+ex+vivo+evidence.">Mechanical stress is a pro-inflammatory stimulus in the gut: In vitro, in vivo and ex vivo evidence.</a> PLoS One. 9, 106242 (2014).</li><li>Gabella, G., Yamey, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+collagen+by+smooth+muscle+in+the+hyertrophic+intestine.">Synthesis of collagen by smooth muscle in the hyertrophic intestine.</a> Experimental Physiology. 62 (3), 257-264 (1977).</li><li>Katsanos, K. H., Tsianos, V. E., Maliouki, M., Adamidi, M., Vagias, I., Tsianos, E. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Obstruction+and+pseudo-obstruction+in+inflammatory+bowel+disease.">Obstruction and pseudo-obstruction in inflammatory bowel disease.</a> Annals of Gastroenterology. 23 (4), 243-256 (2010).</li><li>Johnson, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+stiffness+corresponding+to+strictured+bowel+induces+a+fibrogenic+response+in+human+colonic+fibroblasts.">Matrix stiffness corresponding to strictured bowel induces a fibrogenic response in human colonic fibroblasts.</a> Inflammatory Bowel Disease. 19 (5), 891-903 (2013).</li><li>Gayer, C. P., Basson, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+mechanical+forces+on+intestinal+physiology+and+pathology.">The effects of mechanical forces on intestinal physiology and pathology.</a> Cell Signalling. 21 (8), 1237-1244 (2009).</li><li>Cox, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertonic+saline+modulation+of+intestinal+tissue+stress+and+fluid+balance.">Hypertonic saline modulation of intestinal tissue stress and fluid balance.</a> Shock. 29 (5), 598-602 (2008).</li><li>Shi, X. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+regulation+of+gene+expression+in+gut+smooth+muscle+cells.">Mechanical regulation of gene expression in gut smooth muscle cells.</a> Frontiers in Physiology. 8, 1000 (2017).</li><li>Shi, X. Z., Lin, Y. M., Powell, D. W., Sarna, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+motility+dysfunction+in+bowel+obstruction:+Role+of+stretch-induced+COX-2.">Pathophysiology of motility dysfunction in bowel obstruction: Role of stretch-induced COX-2.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 300 (1), 99-108 (2011).</li><li>Gutierrez, J. A., Perr, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+stretch+modulates+TGF-beta1+and+alpha1(I)+collagen+expression+in+fetal+human+intestinal+smooth+muscle+cells.">Mechanical stretch modulates TGF-beta1 and alpha1(I) collagen expression in fetal human intestinal smooth muscle cells.</a> American Journal of Physiology. 277 (5), 1074-1080 (1999).</li><li>Lipson, K. E., Wong, C., Teng, Y., Spong, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CTGF+is+a+central+mediator+of+tissue+remodeling+and+fibrosis+and+its+inhibition+can+reverse+the+process+of+fibrosis.">CTGF is a central mediator of tissue remodeling and fibrosis and its inhibition can reverse the process of fibrosis.</a> Fibrogenesis Tissue Repair. 5, 24 (2012).</li><li>Chaqour, B., Goppelt-Struebe, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+regulation+of+the+Cyr61/CCN1+and+CTGF/CCN2+proteins.">Mechanical regulation of the Cyr61/CCN1 and CTGF/CCN2 proteins.</a> The FEBS Journal. 273 (16), 3639-3649 (2006).</li><li>Shi, X. Z., Winston, J. H., Sarna, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+immune+and+genetic+responses+in+rat+models+of+Crohn's+colitis+and+ulcerative+colitis.">Differential immune and genetic responses in rat models of Crohn's colitis and ulcerative colitis.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 300 (1), 41-51 (2011).</li><li>Antoniou, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TNBS-induced+colitis+animal+model:+An+overview.">The TNBS-induced colitis animal model: An overview.</a> Annals of Medicine and Surgery (London). 11, 9-15 (2016).</li><li>Shi, X. Z., Sarna, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+of+Cav1.2+channel+with+VIP+and+VIP+receptor+agonists+and+antagonists:+A+novel+approach+to+designing+promotility+and+antimotility+agents.">Gene therapy of Cav1.2 channel with VIP and VIP receptor agonists and antagonists: A novel approach to designing promotility and antimotility agents.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 295 (1), 187-196 (2008).</li><li>Lin, Y. M., Sarna, S. K., Shi, X. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prophylactic+and+therapeutic+benefits+of+COX-2+inhibitor+on+motility+dysfunction+in+bowel+obstruction:+Roles+of+PGE2+and+EP+receptors.">Prophylactic and therapeutic benefits of COX-2 inhibitor on motility dysfunction in bowel obstruction: Roles of PGE2 and EP receptors.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver. 302 (2), 267-275 (2012).</li><li>Morris, G. P., Beck, P. L., Herridge, M. S., Depew, W. T., Szewczuk, M. R., Wallace, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hapten-induced+model+of+chronic+inflammation+and+ulceration+in+the+rat+colon.">Hapten-induced model of chronic inflammation and ulceration in the rat colon.</a> Gastroenterology. 96 (3), 795-803 (1989).</li><li>Mudter, J., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Il-6+signaling+in+inflammatory+bowel+disease:+Pathophysiological+role+and+clinical+relevance.">Il-6 signaling in inflammatory bowel disease: Pathophysiological role and clinical relevance.</a> Inflammatory Bowel Disease. 13 (8), 1016-1023 (2007).</li><li>Geesala, R., Lin, Y. M., Zhang, K., Shi, X. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+mechano-transcription+process+as+therapeutic+intervention+in+gastrointestinal+disorders.">Targeting mechano-transcription process as therapeutic intervention in gastrointestinal disorders.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 809350 (2021).</li></ol>

TNBS 유발 대장염은 1989년에 도입되었으며 그 후 19,20,23년 이후 크론병의 실험 모델로 사용되어 왔다. 설치류에서이 모델의 중요한 특징은 인간 크론 병19,20에서 개발 된 조직 병리학 적 병변과 매우 유사한 경벽 염증의 발달을 포함합니다. 모델에 대한 이전의 연구는 주로 눈에 보이?...

궤양성 대장염(UC) 및 크론병(CD)을 포함하는 염증성 장 질환(IBD)은 위장관(GI) 관에서 만성 염증을 특징으로 한다. 그것은 ~ 1-2 백만 명의 미국인에게 영향을 미칩니다1. 미국의 IBD 치료에 대한 예상 연간 비용은 $ 11.8 억입니다. UC와는 달리, CD는 경막 염증 및 협착 형성 2,3을 특징으로 한다. 협착 형성(stenosis)은 CD 환자3의 최대 70%에서 발생하며, 경막 염증(염증성 협착) 또는 장 섬유증(fibrotic stenosis)4,5에 의해 유발될 수 있다. 장 섬유증은 공정 3,4에 관여하는 주요 중간엽 세포 유형 중 하나로서 평활근 세포 (SMC)와 함께 과도한 콜라겐 침착 및 기타 세포외 매트릭스 (ECM)를 특징으로합니다. 비대와 관련된 평활근 과형성은CD6에서 섬유성 협착증의 또 다른 중요한 조직학적 변화이다. CD의 협착 형성은 만성 염증과 관련이 있지만, 외과 적 치료 2,6을 제외하고는 항 염증 치료가 효과적이지 않습니다. 그러나 수술 후 재발은 충분한 시간 2,7을 감안할 때 거의 100 %입니다. 염증 반응으로서, 섬유증 및 SMC 증식은 또한 장8,9에서 비염증성 상태 (즉, 장 폐쇄)에서 발생할 수 있다; 염증-의존적 및 독립적인 메카니즘 둘 모두가 협착 형성에 관여하는 것으로 여겨진다 3,4. 염증 의존성 메커니즘에 대한 광범위한 연구가 협착 형성을위한 효과적인 치료법으로 번역되지 않았 음을 감안할 때, 장 섬유증에서 염증 독립적 인 메커니즘의 가능한 역할에 대한 연구가 필요합니다.
비염증성 인자로서, 부종, 염증성 세포 침윤, 조직 변형, 섬유증, 및 협착증과 관련된 기계적 스트레스 (MS)10,11,12,13은 IBD, 특히 경막 염증을 특징으로 하는 CD에서 흔히 마주친다. 기계적 스트레스는 협착 CD에서 가장 현저하며, 염증 부위의 협착 (염증 또는 섬유성)은 국소 조직에 기계적 스트레스를 제공하고 폐색 부위10,14에 근접한 세그먼트에서 내강 팽창을 유도합니다. 이전의 시험관내 연구는 기계적 스트레스가 위장 조직, 특히 장 평활근 세포 (SMC)16에서 특정 염증 매개체 (즉, COX-2, IL-6)8,14,15 및 성장 인자 (즉, TGF-β)의 유전자 발현을 변화시킨다는 것을 입증했다. 최근의 연구는 또한 결합 조직 성장 인자 (CTGF)와 같은 특정 친 섬유성 매개체의 발현이 기계적 스트레스에 매우 민감하다는 것을 발견했다17,18. 기계적 스트레스가 CD 관련 염증, 섬유증 및 조직 리모델링에서 독립적 인 병원성 역할을 할 수 있다는 가설이 제기되었습니다. 그러나 CD에서 장 염증, 섬유증 및 평활근 증식증에서 기계적 스트레스의 병원성 중요성은 크게 탐구되지 않은 채로 남아 있습니다. 이것은 부분적으로 염증이 기계적 스트레스보다 더 눈에 띄고 더 잘 연구 된 과정이기 때문일 수 있습니다. 더 중요한 것은, 기계적 스트레스의 효과와 염증의 효과를 구별하기 위해 IBD의 잘 정의 된 동물 모델이 없다는 것입니다.
현재의 연구는 CD에서 기계적 스트레스의 역할을 연구하는 목적을 달성 할 수있는 합텐 시약 2,4,6-트리니트로벤젠 설폰산 (TNBS) 19,20의 결장 내 주사에 의해 유도 된 크론과 같은 대장염의 설치류 모델을 설명합니다. TNBS 점안이 원위 결장에서의 내강 협착(stenosis)과 함께 국소적인(~2 cm 길이) 경막 염증을 유도한다는 것이 밝혀졌다. 협착증은 현저한 장 팽만감 (기계적 스트레스)14,15로 이어지지만 점안 부위에 인접한 결장 세그먼트에서는 눈에 보이지 않는 염증을 일으킨다. 반대로, 협착 부위의 원위 결장 세그먼트는 염증이나 기계적 스트레스를 나타내지 않습니다. 유전자 발현, 염증, 섬유증, 및 SMC 과형성의 유의한 부위-특이적 변화가 세 개의 상이한 부위에서 관찰되었다. 결과는 기계적 스트레스, 특히 기계적 스트레스로 인한 유전자 발현이 크론 대장염에서 섬유증과 과형성을 일으키는 데 중요한 역할을 할 수 있음을 시사합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>ACT-1 Control Software Ver2.63</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DXM1200F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C1000 Touch Thermal Cycler with 96-Well Fast Reaction Module</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>1851196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFX96 Optical Reaction Module for Real-Time PCR Systems</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>1845097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako Agilent Artisan Link Pro Special stainer</td>
			<td>Dako</td>
			<td>AR310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dako-Agilent Masson&#39;s Trichrome Kit ref# AR173</td>
			<td>Dako</td>
			<td>AR173</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DXM1200 Digital Color HR Camera</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DXM1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eukaryotic 18S rRNA Endogenous Control</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4352930E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E-Z Anesthesia</td>
			<td>E-Z Systems Inc.</td>
			<td>EZ-155</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 9</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td>9.0.2 (161)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hard-Shell 96-Well PCR Plates, low profile, thin wall, skirted, white/clear</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>HSP9601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS (Corning Hank&#39;s Balanced Salt Solution, 1x without calcium and magnesium)</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>21-021-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HM 325 Microtome</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>23-900-667</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794-017-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LI-COR Odyssey Digital Imaging System</td>
			<td>LI-COR</td>
			<td>9120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mastercycler epGradient Thermal Cycler with Control Panel 5340 Thermal Cycler</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>5341</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical grade open end polyurethane catheter</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8890703013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop 2000/2000c Spectrophotometers</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>ND2000CLAPTOP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse E800 Upright Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>E800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrocellulose/Filter Paper Sandwiches Pkg of 50, 0.45 &#956;m, 7 x 8.5 cm</td>
			<td>BIO-RAD</td>
			<td>1620215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene Glycol 3350, Osmotic Laxative</td>
			<td>Miralax</td>
			<td>C8175</td>
			<td>Dose: 17g in 226 mL of water</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Mini Kit (250) 
			250 RNeasy Mini Spin Columns, Collection Tubes (1.5 mL and 2 mL), RNase-free Reagents and Buffers</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>74106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript III First-Strand Synthesis System</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>18080051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Gene Expression Assays Rn00573960_g1 CTGF Probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4331182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Gene Expression Assays Rn99999011_m1 IL6 Probe</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4331182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TaqMan Fast Advanced Master Mix</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>4444557</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek Prisma H&#38;E Stain Kit #1</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>6190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue-Tek Prisma Plus Automated Slide Stainer</td>
			<td>Sakura</td>
			<td>6171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TNBS (Picrylsulfonic acid solution)</td>
			<td>SIGMA-ALDRICH</td>
			<td>92822</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a tnbs-induced rodent model to study the pathogenic role of mechanical stress in crohn's disease

크론병(CD)과 같은 염증성 장 질환(IBD)은 유럽과 미국에서 1,00,000명당 약 20명에 영향을 미치는 위장관의 만성 염증성 질환이다. CD는 경막 염증, 장 섬유증 및 발광 협착증을 특징으로합니다. 항염증 요법은 염증을 조절하는 데 도움이 될 수 있지만 CD의 섬유증과 협착증에는 효능이 없습니다. CD의 병인은 잘 이해되지 않는다. 현재의 연구는 주로 조절되지 않는 장 면역 반응 메커니즘을 묘사하는 데 중점을 둡니다. CD 관련 경막 염증, 장 섬유증 및 발광 협착증은 모두 장 벽에 대한 기계적 스트레스를 나타내는 반면, CD에서 기계적 스트레스의 역할은 잘 정의되어 있지 않습니다. 기계적 스트레스가 CD에서 독립적 인 병원성 역할을하는지 여부를 결정하기 위해 설치류에서 TNBS 유도 CD 유사 대장염 모델의 프로토콜이 개발되었습니다. 이러한 TNBS-유도된 경막 염증 및 섬유증 모델은 결장에서의 CD의 병리학적 특징과 유사하다. 그것은 성인 Sprague-Dawley 래트의 원위 결장으로의 TNBS의 결장 내 점적에 의해 유도된다. 이 모델에서, 경막 염증은 TNBS 점안 부위 (부위 I)에서 협착을 일으킨다. 기계적 팽만감은 점적 부위(Site P)에 근접한 부분에서 관찰되며, 기계적 응력을 나타내지만 눈에 보이는 염증은 나타낸다. 염증에 원위 결장 부분 (사이트 D)은 염증이나 기계적 스트레스를 나타내지 않습니다. 다른 부위 (P, I 및 D)에서 유전자 발현, 면역 반응, 섬유증 및 평활근 성장의 독특한 변화가 관찰되어 기계적 스트레스의 중대한 영향을 강조했습니다. 따라서이 CD 유사 대장염 모델은 CD의 병원성 메커니즘, 특히 면역 조절 장애, 장 섬유증 및 CD의 조직 리모델링에서 기계적 스트레스 및 기계적 스트레스 유발 유전자 발현의 역할을 더 잘 이해하는 데 도움이 될 것입니다.

TNBS의 결장 내 점적에 의해 유발된 크론유사 대장염의 거시적 관점 도 1에 나타난 바와 같이, 래트에서 TNBS의 결장내 점안은 원위 결장에서의 점적 부위에서 두꺼운 창벽과 좁아진 내강(협착증)으로 국소화된 경막 염증(길이∼2 cm)을 유도하였다(도 1A). TNBS 점안의 부위는 부위 I로 지칭된다. 경막 염증 및 협착증의 결과로, 염증과 기계적 ?...

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A TNBS-Induced Rodent Model to Study the Pathogenic Role of Mechanical Stress in Crohn's Disease

본 프로토콜은 설치류에서 크론과 같은 대장염 모델의 개발을 설명합니다. 경막 염증은 TNBS 점안 부위에서 협착으로 이어지고, 협착증에 근접한 세그먼트에서 기계적 확대가 관찰됩니다. 이러한 변화는 대장염의 기계적 스트레스를 연구 할 수있게합니다.

크론병에서 기계적 스트레스의 병원성 역할을 연구하는 TNBS 유도 설치류 모델

Inflammatory bowel diseases (IBD) such as Crohn&#39;s disease (CD) are chronic inflammatory disorders of the gastrointestinal tract affecting ...

따라서 우리의 프로토콜에서 TNBS의 결장 내 점안은 점안 부위의 경막 염증과 염증에 근접한 세그먼트의 기계적 팽창을 유발합니다. 그래서 이것은 협착 크론 병을 모방합니다. 근위 세그먼트는 기계적으로 분산되어 있지만 눈에 보이는 염증을 나타내지 않기 때문에 근위 세그먼트와 염증 부위에 대한 비교 연구는 기계적 스트레스가 크론의 대장염에 중요한 역할을하는지 여부를 결정하는 데 도움이됩니다.이전 연구는 염증 부위에만 초점을 맞 춥니 다. 모델의 다른 사이트에서 작업하는 우리의 프로토콜은 크론 병, 특히 협착성 크론 병에서 기계적 스트레스의 중요한 역할을 강조합니다. 시작하려면 쥐를 마취 테이블에 수핀 위치에 놓습니다.대장염을 유도하기 위해, 항문 말단으로부터 약 일곱 내지 여덟 센티미터 동안 항문을 통해 의료용 등급의 개방형 폴리우레탄 카테터를 삽입하고, TNBS를 결장에 부드럽게 주입시킨다. 가짜 대조군 쥐를 250 마이크로 리터의 식염수로 투여하십시오. TNBS 또는 식염수의 분포를 돕고 유출을 피하려면 항문을 두 분 동안 닫은 상태에서 머리를 약 30도 각도로 아래쪽을 향하게하는 수핀 위치에 쥐를 유지하십시오.외과 용 가위와 집게를 사용하여 쥐 복부를 엽니 다. 항문 운하 위의 전체 결장을 조심스럽게 제거하고 즉시 결장을 얼음처럼 차가운 1x HBSS 버퍼로 옮깁니다. 버퍼에서 콜론을 곧게 펴고 눈금자를 사용하여 콜론 길이를 측정합니다.나일론 실을 취하고, 그것을 결장 주위에 동그라미로 돌려 대조군 및 TNBS 처리된 래트에서 결장 세그먼트의 외부 둘레를 측정한다. 조직학을 위해 전체 두께 조직을 가져 가라. 장간막 보드를 따라 결장을 열고 HBSS 버퍼로 결장을 철저히 청소하십시오.최소한의 수정으로 미리 정의된 기준에 기초하여 거시적 염증 점수에 대한 결장을 평가한다. TNBS 처리된 래트로부터 결장 조직 샘플을 수집하여 부위 P, I 및 D.Site P는 염증 부위의 경구 마진 전에 두세 센티미터 지점이다. 부위 I은 TNBS가 주입되는 염증 부위이며, 일반적으로 결장 끝에서 네 내지 여섯 센티미터이다.마지막으로, 부위 D는 염증 부위의 복부 마진에 원위 하나 내지 두 센티미터 부분이다. 래트에서 TNBS의 결장 내 점안은 원위 결장에 점적 부위의 두꺼운 장 벽과 좁아진 내강으로 약 두 센티미터 길이의 국소 경막 염증을 유도하였다. TNBS 점적의 부위는 경교 염증 및 협착의 결과 I.As 부위로 지칭되었고, 염증 및 기계적 스트레스 모두 부위 I에 존재하였다.부위의 협착은 부위 P로 지칭되는 TNBS 점안 부위에 근접한 세그먼트에서 현저한 내강 팽윤을 초래하였다.결장 둘레는 가짜 대조군 결장에 비해 부위 P 및 I에서 유의하게 증가하였다.기계적으로 흩어져있는 동안, 부위 P는 눈에 보이는 염증을 나타내지 않았다. 반대로, 부위 D로 지칭되는 TNBS 점적에 원위 결장 세그먼트는 염증이나 기계적 팽만감을 나타내지 않았다. TNBS 처리된 래트에서 염증 부위 I에서의 거시적 스코어는 대장염 래트의 부위 P 및 D에서의 가짜 대조군에 비해 극적으로 증가하였다.부위 P 및 D에서의 염증 점수는 sham에 비해 유의하게 증가하지 않았다. 따라서 사이트 I뿐만 아니라 모델에서 사이트 P 및 D를 연구하는 것이 중요하며, 이는 크론 병에서 기계적 스트레스의 병원성 중요성을 인식하는 데 도움이되기 때문입니다. 기계적 스트레스가 장 염증의 병원성 요인인지 여부를 더 결정하기 위해 동물에게 독점적으로 액체 식단을 공급하여 기계적 팽창을 풀어주고 이것이 염증과 장 기능에 도움이되는지 확인할 수도 있습니다.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Introducing Shear Stress in the Study of Bacterial Adhesion

세균성 접착 연구에 전단 응력을 소개합니다

During bacterial infections a sequence of interactions occur between the pathogen and its host. Bacterial adhesion to the host cell surface is often the ...

연구

면역학 및 감염병학

Cutaneous Leishmaniasis in the Dorsal Skin of Hamsters: a Useful Model for the Screening of Antileishmanial Drugs

햄스터의 지느러미 피부에 피부 Leishmaniasis : Antileishmanial 약물의 상영을위한 유용한 모델

Traditionally, hamsters are experimentally inoculated in the snout or the footpad. However in these sites an ulcer not always occurs, measurement of ...

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

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이식 - 대 - 호스트 질병의 유도 및<em&gt; 생체 내</emMHC 검색 손쥐 모델을 사용&gt; T 셀 모니터링

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Use of Artificial Sputum Medium to Test Antibiotic Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa in Conditions More Relevant to the Cystic Fibrosis Lung

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위반 항생제 효능을 테스트하는 인공 가래 매체의 사용<em&gt; 녹농균</em&gt; 낭성 섬유증의 폐 관련성이 높은 조건에서

There  is growing concern about the relevance of in vitro antimicrobial  susceptibility tests when applied to isolates of P. aeruginosa from  cystic ...

Examining the Role of Nasopharyngeal-associated Lymphoreticular Tissue (NALT) in Mouse Responses to Vaccines

Examining the Role of Nasopharyngeal-associated Lymphoreticular Tissue NALT in Mouse Responses to Vaccines

백신에 마우스 응답 Nasopharyngeal - 관련 Lymphoreticular 조직 (NALT)의 역할을 검토

The nasopharyngeal-associated lymphoreticular tissues (NALT) found in humans, rodents, and other mammals, contribute to immunity in the nasal sinuses1-3. ...

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

An In vitro Co-infection Model to Study Plasmodium falciparum-HIV-1 Interactions in Human Primary Monocyte-derived Immune Cells

<em&gt; 체외에서</em공부하기&gt; 공동 감염 모델<em&gt; Plasmodium falciparum</em인간의 기본 단핵구 파생 면역 세포에서&gt; - HIV-1 상호 작용

Plasmodium falciparum, the causative agent  of the deadliest form of malaria, and human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) are among the most important ...

An In vitro Model to Study Heterogeneity of Human Macrophage Differentiation and Polarization

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<em&gt; 체외</em인간 대식 세포의 분화와 양극화의 이질성을 연구&gt; 모델

Monocyte-derived macrophages represent an important cell type of the innate immune system. Mouse models studying macrophage biology suffer from the ...

The WinCF Model - An Inexpensive and Tractable Microcosm of a Mucus Plugged Bronchiole to Study the Microbiology of Lung Infections

WinCF 모델 - 폐렴의 미생물학을 연구하기 위해 점액으로 촘촘하게 밀집된 Bronchiole의 저렴하고 견고한 소우주

Many chronic airway diseases result in mucus plugging of the airways. Lungs of an individual with cystic fibrosis are an exemplary case where their ...

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

An Ex Vivo Chicken Primary Bursal-cell Culture Model to Study Infectious Bursal Disease Virus Pathogenesis

Bursal 전염병 바이러스 병 인을 공부 하는 Ex Vivo 닭 기본 Bursal 세포 배양 모델

Infectious bursal disease virus (IBDV) is a birnavirus of economic importance to the poultry industry. The virus infects B cells, causing morbidity, ...

Production of Pseudotyped Particles to Study Highly Pathogenic Coronaviruses in a Biosafety Level 2 Setting

Biosafety 수준 2 설정에 높게 병원 성 Coronaviruses 공부 Pseudotyped 입자의 생산

The protocol aims to generate coronavirus (CoV) spike (S) fusion protein pseudotyped particles with a murine leukemia virus (MLV) core and luciferase ...