Name: real-time detection and capture of invasive cell subpopulations from co-cultures
Uploaded: 2022-03-30T14:00:00
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我们要感谢犹他大学亨斯迈癌症研究所的Alana Welms博士为我们提供患者来源的异种移植物（HCI-010）。这项工作得到了NIH拨款R01CA205632，R21CA226542的支持，部分得到了安捷伦科技公司的资助。

该研究被乔治城大学机构审查委员会审查并认为是“豁免”（IRB # 2002-022）。新鲜收获的骨髓组织是从废弃的健康人类骨髓收集过滤器中收集的，这些过滤器已被去识别化。
1. 新的腔室设计（图2）
<ol><li>打开新的双室细胞分析仪板。将带有电极的顶部腔室放在一边。</li>
	<li>使用铣床，剃掉细胞分析仪板的U形底孔的2毫米。</li...

<ol>
	<li>Friedl, P., Gilmour, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collective+cell+migration+in+morphogenesis,+regeneration+and+cancer.">Collective cell migration in morphogenesis, regeneration and cancer.</a> Nature Reviews Molecular Cell Biology. 10 (7), 445-457 (2009).</li><li>Boyden, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chemotactic+effect+of+mixtures+of+antibody+and+antigen+on+polymorphonuclear+leucocytes.">The chemotactic effect of mixtures of antibody and antigen on polymorphonuclear leucocytes.</a> The Journal of Experimental Medicine. 115 (3), 453-466 (1962).</li><li>Xu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+impedance+measurements+of+whole+cells.">A review of impedance measurements of whole cells.</a> Biosensors &amp; Bioelectronics. 77, 824-836 (2016).</li><li>Stylianou, D. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Label-free,+real-time+monitoring+of+IgE-mediated+mast+cell+activation+on+microelectronic+cell+sensor+arrays.">Label-free, real-time monitoring of IgE-mediated mast cell activation on microelectronic cell sensor arrays.</a> Journal of Immunological Methods. 292 (1-2), 195-205 (2004).</li><li>Morton, C. L., Houghton, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+human+tumor+xenografts+in+immunodeficient+mice.">Establishment of human tumor xenografts in immunodeficient mice.</a> Nature Protocols. 2 (2), 247-250 (2007).</li><li>DeRose, Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+grafts+derived+from+women+with+breast+cancer+authentically+reflect+tumor+pathology,+growth,+metastasis+and+disease+outcomes.">Tumor grafts derived from women with breast cancer authentically reflect tumor pathology, growth, metastasis and disease outcomes.</a> Nature Medicine. 17 (11), 1514-1520 (2011).</li><li>Sharif, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+AIB1+isoform+alters+enhancer+access+and+enables+progression+of+early-stage+triple-negative+breast+cancer.">An AIB1 isoform alters enhancer access and enables progression of early-stage triple-negative breast cancer.</a> Cancer Research. 81 (16), 4230-4241 (2021).</li><li>Caileau, R., Olive, M., Cruciger, Q. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MCF10DCIS.com+xenograft+model+of+human+comedo+ductal+carcinoma+in+situ.">MCF10DCIS.com xenograft model of human comedo ductal carcinoma in situ.</a> Journal of the National Cancer Institute. 92 (14), 1185-1186 (2000).</li><li>Winkler, J., Abisoye-Ogunniyan, A., Metcalf, K. J., zenaa, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Concepts+of+extracellular+matrix+remodelling+in+tumour+progression+and+metastasis.">Concepts of extracellular matrix remodelling in tumour progression and metastasis.</a> Nature Communications. 11 (1), 1-19 (2020).</li><li>Nkosi, D., Sun, L., Duke, L. C., Meckes, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epstein-Barr+virus+LMP1+manipulates+the+content+and+functions+of+extracellular+vesicles+to+enhance+metastatic+potential+of+recipient+cells.">Epstein-Barr virus LMP1 manipulates the content and functions of extracellular vesicles to enhance metastatic potential of recipient cells.</a> PLoS Pathogens. 16 (12), 1009023 (2020).</li><li>Eisenberg, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+modeling+of+the+effects+of+myoferlin+on+tumor+cell+invasion.">Mechanistic modeling of the effects of myoferlin on tumor cell invasion.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (50), 20078-20083 (2011).</li></ol>

我们修改了双腔室阵列的设计，以包括第三个腔室，用于在基质细胞存在的情况下实时监测细胞侵袭。我们已经观察到共培养成纤维细胞对侵袭性和非侵袭性癌细胞的不同影响，这表明该阵列可用于区分对共培养基质细胞产生的因子反应不同的癌细胞亚群。该阵列还用于监测内皮细胞侵入基质组织，这是血管在存在具有不同侵袭潜力的癌细胞的情况下向血管生成刺激萌发的关键步骤。这些实验表?...

细胞侵袭是一个重要的过程，它允许细胞根据基质细胞提供的环境线索穿过基底膜屏障。它是免疫反应、伤口愈合、组织修复和恶性肿瘤发展的几个阶段的关键步骤，这些肿瘤可以从局部病变进展为浸润性和转移性癌症1。早期开发的用于测量细胞群侵入潜力的测定通常产生单个终点测量或需要对侵入性细胞进行预标记2。现在开发了微电子学和微流体技术的集成，以使用微电极上活细胞的电阻抗来检测细胞生物学的不同方面，例如活力，运动和附着力3，4。阻抗测量允许对细胞状态进行无标记、无创和定量评估3.在这里，我们描述了一个基于Abassi等人开发的实时蜂窝分析（RTCA）系统设计的三腔阵列。三腔阵列允许评估共培养细胞的细胞侵袭和侵袭细胞的恢复，以进行额外的分析或扩增。
在细胞分析仪系统中，细胞通过包被到多孔膜上的细胞外基质侵入，并到达位于屏障另一侧的叉指电极阵列。随着侵入细胞继续附着并占据该电极阵列，电阻抗平行变化。目前的系统包括一个细胞侵袭和迁移（CIM）16孔板，带有两个腔室。RTCA-DP（双用途）（以下称为双用途电池分析仪）仪器包含用于阻抗测量的传感器和用于分析和处理阻抗数据的集成软件。基线阻抗值取决于孔中介质的离子强度，并且随着细胞附着在电极上而变化。阻抗的变化取决于细胞的数量，它们的形态以及细胞附着在电极上的程度。在添加细胞之前用培养基测量孔被认为是背景信号。在电池附着并扩散到电极上达到平衡后，从阻抗测量中减去背景。电极上称为细胞指数（CI）的电极状态的无单位参数计算如下：CI =（平衡后的阻抗 -无电池时的阻抗）/标称阻抗值6。当比较不同细胞系的迁移速率时，Delta CI可用于比较细胞状态，而不管前几次测量中表示的附着差异如何。
新设计的三腔室阵列建立在现有设计的基础上，并使用包含电极的双用途细胞分析仪系统的顶部腔室。改进的中腔室和底部腔室经过调整，可将组件安装到双用途单元分析仪中，以便使用集成软件进行阻抗测量和分析。与现有的双室CIM板（以下称为细胞分析仪板）相比，新设计提供的两个主要进步是：i）恢复能力，然后分析存在于异质细胞混合物中的侵入性细胞亚群，以及ii）评估共培养基质或免疫细胞分泌因子对细胞侵袭的影响的选项（图1）。
该技术可用于研究具有不同侵入能力的细胞亚群。这包括（a）侵入周围组织或血液和淋巴管或在远处器官的转移接种部位外渗的侵袭癌细胞，（b）来自免疫系统的细胞侵入组织以处理病原体或患病细胞，（c）内皮细胞在组织重组或伤口愈合期间侵入组织以形成新血管， 以及来自肿瘤微环境的（d）基质细胞，它们与癌细胞一起支持和入侵。该方法允许包含可以调节细胞运动和侵袭的基质串扰。这里显示的可行性研究使用这种专注于癌细胞侵袭和与基质相互作用的修饰阵列作为模型系统，包括内皮侵袭以响应来自癌细胞的差异信号。可以推断出这种方法来分离癌细胞和其他细胞类型，例如免疫细胞，成纤维细胞或内皮细胞的亚群。我们测试了侵入性和非侵入性已建立的乳腺癌细胞系作为原理证明。我们还使用来自患者来源的异种移植物（PDX）侵袭的细胞来响应来自人类骨髓的免疫细胞，以显示未来在临床诊断环境中使用的可行性。PDX是植入免疫功能低下或人源化小鼠模型中的患者肿瘤组织，以允许研究原始患者的生长，进展和治疗方案7，8。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.05% Trypsin-EDTA</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>25300-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhesive</td>
			<td>Norland Optical Adhesive</td>
			<td>NOA63</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9418</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell lifter</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83.1832</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cholera Toxin from Vibrio cholerae</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>12585-014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CIM-plate</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>5665817001</td>
			<td>Cell analyzer plate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase from Clostridium histolyticum</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C0130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispase</td>
			<td>StemCell</td>
			<td>7913</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>11995-065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM-F12</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>11875-093</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS), Heat Inactivated</td>
			<td>Omega Scientific</td>
			<td>FB-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>15630106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Horse serum (HS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>16050-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human EGF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-100-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human umbilical Vein endothelail cells (HUVEC)</td>
			<td>LONZA (RRID:CVCL_2959)</td>
			<td>C-2517A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HUVEC media</td>
			<td>LONZA</td>
			<td>CC-3162</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrocortisone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Transferrin Selenium Ethanolamine (ITSX) (100x)</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>51500056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin, Human Recombinant, Zinc Solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C8052</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>J2 Fibroblasts</td>
			<td>Stemcell (RRID:CVCL_W667)</td>
			<td>100-0353</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LymphoPrep</td>
			<td>Stemcell</td>
			<td>7851</td>
			<td>Density gradient medium for the isolation of mononuclear cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>354230</td>
			<td>Basement membrane matrix</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCFDCIS.com cells ( DCIS)</td>
			<td>RRID:CVCL_5552</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MDA-MB-231 cells</td>
			<td>RRID:CVCL_0062</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milling machine</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Bridgeport Series 1 Vertical</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline (1x)</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>10010049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethersulfone (PES) membrane</td>
			<td>Sterlitech</td>
			<td>PCTF029030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RBC lysis solution</td>
			<td>Stemcell</td>
			<td>7800</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy Micro Kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RTCA DP analyzer</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>3X16</td>
			<td>Dual purpose cell analyzer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T4799</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

real-time detection and capture of invasive cell subpopulations from co-cultures

癌细胞的侵袭和转移扩散是癌症死亡的主要原因。早期开发的用于测量癌细胞群侵袭潜力的测定通常产生单一终点测量，不区分具有不同侵袭潜力的癌细胞亚群。此外，肿瘤微环境由不同的常驻基质和免疫细胞组成，这些细胞改变和参与癌细胞的侵袭行为。侵入组织在免疫细胞亚群中也起作用，在组织重塑和血管生成期间抵御微生物或从薄壁和内皮细胞中消除患病细胞。实时细胞分析（RTCA）利用阻抗生物传感器来监测细胞侵袭是超越侵袭终点测量的重要一步：这提供了随时间推移的连续测量，因此可以揭示终点测定中丢失的侵袭率的差异。使用目前的RTCA技术，我们通过添加另一个可以包含基质和/或免疫细胞的腔室来扩展双室阵列，并允许随着时间的推移测量在共培养基质或免疫细胞分泌因子的影响下的侵袭速率。除此之外，独特的设计允许随时分离腔室并分离最具侵入性的癌细胞，或存在于测试的肿瘤分离物的异质混合物中的其他细胞亚群。这些最具侵袭性的癌细胞和其他细胞亚群推动恶性进展为转移性疾病，其分子特征对于深入的机理研究，用于检测它们的诊断探针的开发以及脆弱性的评估非常重要。因此，小分子或大分子药物的纳入可用于测试靶向癌症和/或基质细胞亚群的疗法的潜力，目的是抑制（例如，癌细胞）或增强（例如，免疫细胞）侵袭行为。

使用新设计的三腔阵列，在存在或不存在基质细胞（如成纤维细胞）的情况下测试细胞的侵袭。当辐照的瑞士3T3成纤维细胞（J2菌株）接种在底部腔室中时，MDA-MB-231细胞侵袭增强，允许两个细胞系之间的因子交换。有趣的是，当3T3-J2细胞数量增加一倍时，MDA-MB-231入侵增加（图3A）。另一方面，MCFDCIS细胞侵入性克隆（DCIS-Δ4）9 的侵袭率似乎受到与3T3-J2细胞?...

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Real-Time Detection and Capture of Invasive Cell Subpopulations from Co-Cultures

我们描述了一种实时检测和捕获侵袭性细胞亚群的方法。实验设计使用实时细胞分析，通过监测细胞电阻抗的变化。可以捕获复杂组织中的浸润性癌症，免疫，内皮或基质细胞，并且可以评估共培养物的影响。

实时检测和捕获共培养物中的侵袭细胞亚群

Invasion and metastatic spread of cancer cells are the major cause of death from cancer. Assays developed early on to measure the invasive potential of ...

该技术能够在共培养基质细胞分泌因子的影响下鉴定具有不同侵袭能力的细胞。该技术评估来自共培养基质或免疫细胞的分泌因子对细胞侵袭的影响。它还允许恢复和分析异质细胞混合物中存在的侵袭细胞亚群。该技术可以确定哪些肿瘤含有导致转移的侵袭性细胞亚群。侵袭性癌细胞的捕获和分析可以为治疗决策提供信息。为了开始细胞培养，洗涤粘附细胞培养物与1X磷酸盐缓冲盐水的约70%汇合度。然后加入0.05%胰蛋白酶和EDTA溶液以去除细胞。用含有血清的细胞培养基中和胰蛋白酶溶液，并使用细胞悬浮液的等分试样计数细胞。将所有三个无菌室放在组织培养罩中。将旋钮定位在下腔室的短侧，并定向下腔室，使旋钮面向实验者。从下腔室向每个孔中加入90微升培养基中的30，000至50，000个细胞，而不会形成任何气泡。在两个下腔室中使用5%的胎牛血清补充培养基作为细胞运动的阳性对照，并使用0%血清补充培养基作为阴性对照。将下腔室旋转90度，使其在引擎盖中沉降10至15分钟。然后将中间腔室放在顶部，以便下腔室上的旋钮滑入中间腔室的凹口。垂直向下推动腔室，直到从组件的每个长边听到咔嗒声。向中室的所有孔中加入160微升无血清培养基。确保在填充孔后可以看到圆顶形的半月板，并将顶部腔室中的电极朝下放置在中间室上，以对齐中间和顶部室上的蓝点。垂直向下推腔室，直到从组件的每个长边都能听到咔嗒声。向顶部腔室中加入 20 至 50 微升无血清培养基。将组件安装在组织培养箱中的两用细胞分析仪上，等待30分钟，然后再测量背景。打开细胞分析仪软件，然后选择要使用的底座，然后单击消息选项卡，并确保它显示“连接正常”，以确保阵列放置在底座中，电极与传感器对齐良好。单击实验注释选项卡，然后填写有关实验的所有可能信息。然后单击布局选项卡并填写数组布局的说明。然后单击计划选项卡，从步骤菜单中添加两个步骤，一个具有一次扫描的后台步骤和一个包含 100 次扫描的测试步骤。一旦阵列在两用细胞分析仪培养箱中放置30分钟，单击播放按钮开始后台测量。背景测量完成后，从底座上取下阵列并将其放回细胞培养罩中。然后将100微升无血清培养基中的30， 000至50， 000个细胞加入顶室的每个孔中。这些是电极在成功通过膜迁移后将检测到的细胞。让组件在烟罩中静置 30 分钟，然后安装在用于阻抗测量的双用电池分析仪上。将数组放回两用单元分析器中，并检查消息选项卡中的“连接正常”消息。单击播放按钮开始阻抗测量，然后单击绘图选项卡以监视信号的进度。如果在 25 小时之前到达终结点，请单击执行下拉菜单中的中止步骤。若要导出数据，请右键单击图形，选择“以列表格式复制”，然后将数据粘贴到电子表格中。在双用途细胞分析仪上实时监测迁移速率，以确定停止兴趣点。完成后，从两用细胞分析仪上卸下组件并将其放入组织培养罩中。准备适当数量的1.5毫升微量离心管，以从感兴趣的孔中收集细胞。将组件放在10厘米的培养皿中，以便在腔室分离时容纳液体。将中间腔室长边上的柔性卡扣端向内推，直到听到咔嗒声，然后拆卸顶部腔室并将其倒置到新的10厘米盘中。使用带有13毫米刀片的细胞提升器从具有相同实验条件的所有孔中收集细胞。将刀片冲洗或浸入1X磷酸盐缓冲盐水中，以将细胞收集在1.5毫升微量离心管中。然后将细胞以500倍G旋转5分钟，并繁殖这些收集的细胞或进行终点分析，如单细胞RNA测序。对存在或不存在基质细胞侵袭细胞的评估表明，当辐照的Swiss-3T3成纤维细胞J2菌株位于底部腔室中以交换两个细胞系之间的因子时，MDA-MB-231细胞侵袭增强。有趣的是，当3T3 J2细胞数量增加一倍时，MDA-MB-231入侵增加。另一方面，MCFDCIS细胞的侵入克隆DCIS-Delta Four的侵袭率似乎受到与3T3 J2细胞串扰的抑制，这表明三室阵列的价值应用来测量基质的不同作用。在这种情况下，成纤维细胞对细胞进行侵袭。与DCIS细胞分泌的因子不同，人脐静脉内皮细胞对MDA-MB-231细胞分泌的因子的侵入性更强，这与侵袭性肿瘤招募内皮细胞用于血管形成并随后扩散到循环中的能力一致。患者来源的异种移植物细胞从顶部腔室侵袭增加，以响应于共培养的人骨髓免疫细胞。有趣的是，与人骨髓免疫细胞的底部腔室中存在2%的血清对于患者来源的异种移植物入侵至关重要。孔可以涂覆细胞外基质以模仿基底膜屏障。可以将治疗剂添加到孔中的培养基中以监测其对入侵的影响。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Capture and Release of Viable Circulating Tumor Cells from Blood

捕获和血液中的活循环肿瘤细胞释放

We demonstrate a method for size based capture of viable circulating tumor cell (CTC) from whole blood, along with the release of these cells from chip ...

科研

癌症研究

Invasive Behavior of Human Breast Cancer Cells in Embryonic Zebrafish

在斑马鱼胚胎人乳腺癌细胞的侵袭行为

In many cases, cancer patients do not die of a primary tumor, but rather because of metastasis. Although numerous rodent models are available for studying ...

Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

档案福尔马林固定，石蜡包埋的人类口咽鳞状细胞癌样品中T细胞亚群的四色荧光免疫组织化学

The four-color fluorescence immunohistochemistry (IHC) technique is a method to quantify cell populations of interest while taking into account their ...

Preparation and Metabolic Assay of 3-dimensional Spheroid Co-cultures of Pancreatic Cancer Cells and Fibroblasts

3维球形共培养胰腺癌细胞和成纤维细胞的制备及代谢试验

Many cancer types, including pancreatic cancer, have a dense fibrotic stroma that plays an important role in tumor progression and invasion. Activated ...

Serum and Plasma Copy Number Detection Using Real-time PCR

应用实时 PCR 技术检测血清和血浆拷贝数

Serum and plasma cell free DNA (cfDNA) has been shown as an informative, non-invasive source of biomarkers for cancer diagnosis, prognosis, monitoring, ...

Real Time Detection of In Vitro Tumor Cell Apoptosis Induced by CD8+ T Cells to Study Immune Suppressive Functions of Tumor-infiltrating Myeloid Cells

Real Time Detection of In Vitro Tumor Cell Apoptosis Induced by CD8+ T Cells to Study Immune Suppressive Functions of Tumor-infiltrating Myeloid Cells

cd8+ t 细胞诱导体外肿瘤细胞凋亡的实时检测--研究肿瘤浸润髓内细胞的免疫抑制作用

Potentiation of the tumor-killing ability of CD8+ T cells in tumors, along with their efficient tumor infiltration, is a key element of successful ...

Real-Time Monitoring of Human Glioma Cell Migration on Dorsal Root Ganglion Axon-Oligodendrocyte Co-Cultures

多端根结核细胞迁移的实时监测

Glioblastoma is one of the most aggressive human cancers due to extensive cellular heterogeneity and the migration properties of hGCs. In order to better ...

Time-Lapse 2D Imaging of Phagocytic Activity in M1 Macrophage-4T1 Mouse Mammary Carcinoma Cells in Co-cultures

M1巨噬细胞-4T1小鼠乳腺癌细胞在共培养中噬菌体活性的时移2D成像

Tumor-associated macrophages (TAMs) have been identified as an important component for tumor growth, invasion, metastasis, and resistance to cancer ...

Combined Use of Tail Vein Metastasis Assays and Real-Time In Vivo Imaging to Quantify Breast Cancer Metastatic Colonization and Burden in the Lungs

结合使用尾静脉转移分析与实时 Vivo 成像，以量化乳腺癌转移殖民化和肺负担

Metastasis is the main cause of cancer-related deaths and there are limited therapeutic options for patients with metastatic disease. The identification ...

Impedance-based Real-time Measurement of Cancer Cell Migration and Invasion

基于阻抗的癌细胞迁移和入侵的实时测量

Cancer arises due to uncontrolled proliferation of cells initiated by genetic instability, mutations, and environmental and other stress factors. These ...