Name: flexible organic electronic devices for pulsed electric field therapy of glioblastoma
Uploaded: 2022-08-09T13:00:00
Duration: 11 min 2 s
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这里报告的工作得到了法国国家研究机构（ANR-18-CE19-0029）的支持。作者热烈感谢S.M. Bardet对产生稳定的GCaMP6f细胞系的贡献，并感谢D. O'Connor对 卵内 模型的帮助。

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	<li>Koshy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+survival+time+trends+for+glioblastoma+using+the+SEER+17+population-based+registries.">Improved survival time trends for glioblastoma using the SEER 17 population-based registries.</a> Journal of Neuro-Oncology. 107 (1), 207-212 (2012).</li><li>Davis, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glioblastoma:+Overview+of+disease+and+treatment.">Glioblastoma: Overview of disease and treatment.</a> Clinical Journal of Oncology Nursing. 20, 2-8 (2016).</li><li>Edd, J. F., Horowitz, L., Davalos, R. V., Mir, L. M., Rubinsky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+results+of+a+new+focal+tissue+ablation+technique:+irreversible+electroporation.">In vivo results of a new focal tissue ablation technique: irreversible electroporation.</a> IEEE transactions on Bio-Medical Engineering. 53 (7), 1409-1415 (2006).</li><li>Breton, M., Mir, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microsecond+and+nanosecond+electric+pulses+in+cancer+treatments.">Microsecond and nanosecond electric pulses in cancer treatments.</a> Bioelectromagnetics. 33 (2), 106-123 (2012).</li><li>Frandsen, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+therapeutic+applications+of+calcium+electroporation+to+effectively+induce+tumor+necrosis.">Direct therapeutic applications of calcium electroporation to effectively induce tumor necrosis.</a> Cancer Research. 72 (6), 1336-1341 (2012).</li><li>Lee, J. H., Kim, H., Kim, J. H., Lee, S. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Soft+implantable+microelectrodes+for+future+medicine:+prosthetics,+neural+signal+recording+and+neuromodulation.">Soft implantable microelectrodes for future medicine: prosthetics, neural signal recording and neuromodulation.</a> Lab on a Chip. 16 (6), 959-976 (2016).</li><li>Lee, H., Bellamkonda, R. V., Sun, W., Levenston, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+analysis+of+silicon+microelectrode-induced+strain+in+the+brain.">Biomechanical analysis of silicon microelectrode-induced strain in the brain.</a> Journal of Neural Engineering. 2 (4), 81-89 (2005).</li><li>Fattahi, P., Yang, G., Kim, G., Abidian, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+organic+and+inorganic+biomaterials+for+neural+interfaces.">A review of organic and inorganic biomaterials for neural interfaces.</a> Advanced Materials. 26 (12), 1846-1885 (2014).</li><li>Lecomte, A., Degache, A., Descamps, E., Dahan, L., Bergaud, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+in+vivo+biostability+assessment+of+chronically-implanted+Parylene+C+neural+sensors.">In vitro and in vivo biostability assessment of chronically-implanted Parylene C neural sensors.</a> Sensors and Actuators B: Chemical. 251, 1001-1008 (2017).</li><li>Dijk, G., Ruigrok, H. J., O'Connor, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PEDOT:PSS-coated+stimulation+electrodes+attenuate+irreversible+electrochemical+events+and+reduce+cell+electropermeabilization.">PEDOT:PSS-coated stimulation electrodes attenuate irreversible electrochemical events and reduce cell electropermeabilization.</a> Advanced Materials Interfaces. 8 (19), 2100214 (2021).</li><li>Chen, T. -. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-sensitive+fluorescent+proteins+for+imaging+neuronal+activity.">Ultra-sensitive fluorescent proteins for imaging neuronal activity.</a> Nature. 499 (7458), 295-300 (2013).</li><li>Ribatti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+5+Chick+embryo+chorioallantoic+membrane+as+a+useful+tool+to+study+angiogenesis.">Chapter 5 Chick embryo chorioallantoic membrane as a useful tool to study angiogenesis.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. 270, 181-224 (2008).</li><li>Valdes, T. I., Kreutzer, D., Moussy, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+chick+chorioallantoic+membrane+as+a+novel+in+vivo+model+for+the+testing+of+biomaterials.">The chick chorioallantoic membrane as a novel in vivo model for the testing of biomaterials.</a> Journal of Biomedical Materials Research. 62 (2), 273-282 (2002).</li><li>Ricard, C., Stanchi, F., Rougon, G., Debarbieux, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+orthotopic+glioblastoma+mouse+model+maintaining+brain+parenchymal+physical+constraints+and+suitable+for+intravital+two-photon+microscopy.">An orthotopic glioblastoma mouse model maintaining brain parenchymal physical constraints and suitable for intravital two-photon microscopy.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (86), e51108 (2014).</li><li>Lefevre, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrating+flexible+electronics+for+pulsed+electric+field+delivery+in+a+vascularized+3D+glioblastoma+model.">Integrating flexible electronics for pulsed electric field delivery in a vascularized 3D glioblastoma model.</a> npj Flexible Electronics. 5, 19 (2021).</li><li>Perry, J. L., Ramachandran, N. K., Utama, B., Hyser, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+genetically-encoded+calcium+indicators+for+live+cell+calcium+imaging+and+localization+in+virus-infected+cells.">Use of genetically-encoded calcium indicators for live cell calcium imaging and localization in virus-infected cells.</a> Methods. 90, 28-38 (2015).</li><li>Bl&#246;mer, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+efficient+and+sustained+gene+transfer+in+adult+neurons+with+a+lentivirus+vector.">Highly efficient and sustained gene transfer in adult neurons with a lentivirus vector.</a> Journal of Virology. 71 (9), 6641-6649 (1997).</li><li>Lenting, K., Verhaak, R., ter Laan, M., Wesseling, P., Leenders, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glioma:+experimental+models+and+reality.">Glioma: experimental models and reality.</a> Acta Neuropathologica. 133 (2), 263-282 (2017).</li><li>Hickman, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+models+of+cancer+for+pharmacology+and+cancer+cell+biology:+Capturing+tumor+complexity+in+vitro/ex+vivo.">Three-dimensional models of cancer for pharmacology and cancer cell biology: Capturing tumor complexity in vitro/ex vivo.</a> Biotechnology Journal. 9 (9), 1115-1128 (2014).</li><li>Tay, S. L. M., Heng, P. W. S., Chan, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+CAM-LDPI+method:+a+novel+platform+for+the+assessment+of+drug+absorption.">The CAM-LDPI method: a novel platform for the assessment of drug absorption.</a> Journal of Pharmacy and Pharmacology. 64 (4), 517-529 (2012).</li><li>Kundekov&#225;, B., M&#225;&#269;ajov&#225;, M., Meta, M., &#268;avarga, I., Bil&#269;&#237;k, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chorioallantoic+Membrane+Models+of+Various+Avian+Species:+Differences+and+Applications.">Chorioallantoic Membrane Models of Various Avian Species: Differences and Applications.</a> Biology. 10 (4), 301 (2021).</li><li>Ricard, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phenotypic+dynamics+of+microglial+and+monocyte-derived+cells+in+glioblastoma-bearing+mice.">Phenotypic dynamics of microglial and monocyte-derived cells in glioblastoma-bearing mice.</a> Scientific Reports. 6 (1), 26381 (2016).</li></ol>

提交人声明，他们没有相互竞争的经济利益。

这项工作中描述的方法使具有集成PEF递送系统的脑肿瘤模型能够研究PEF在不同生物组织水平上的影响。微细加工方案由标准的薄膜工艺组成，这些工艺在电极设计中提供了很大的自由度，可以适应特定的应用。有时，在制造结束时，额外的热退火步骤可能很有用，以减少制造过程中发生的电极弯曲。
使用表达荧光钙指示剂的稳定胶质母细胞瘤细胞系可避免与染料递送和保留相关的所有并发症，特别是在非常致密的3D肿瘤中16。事实上，与标准化学荧光钙指示剂相比，在很长一段时间内观察到高表达水平17。该协议可以应用于各种细胞系，因为它通常用于成像神经活动11。在这里，使用人和鼠细胞系（U87和Gl261分别用于植入免疫缺陷或免疫功能正常的小鼠）。事实上，最近的研究表明，U87细胞系与原始细胞不同，因为许多突变是在多年的细胞培养中获得的，影响了实验重现性18。用于制备3D肿瘤的方法具有高通量，可重复性，并且允许根据细胞系，接种时的细胞数量和生长时间产生特定大小的球状体19。然而，这些球状体是致密的，这在肿瘤核心成像时是一个缺点。
卵内模型是研究PEF对3D肿瘤及其脉管系统影响的第一种方法，而不与大脑中存在的其他细胞类型相互作用。这种模型价格低廉，速度快，通量高，并且比动物模型引起的伦理问题更少。在整个实验过程中保持胚胎的完整性很重要，因为它可能会影响其存活和成像质量。打开鹌鹑蛋时必须特别小心，以免损坏胚胎膜。移植和柔性电极的放置也必须小心进行，以避免可能杀死胚胎的出血。在血管中注射荧光染料可以通过荧光显微镜同时观察肿瘤细胞和血管形成。必须小心进行眼内注射，以避免染料泄漏到胚胎液中，这可能会导致背景中残留荧光，从而降低成像质量。该模型也可用于跟踪药物摄取，因为它允许进入循环系统。然而，实验受到胚胎12天存活时间的限制，因此允许7天的观察，这明显短于体内模型21。
体内脑肿瘤模型可以在动物达到由突然减轻20%的体重确定的伦理实验终点之前监测4至5周。耐受性良好，如果电极的连接尾部不太长，则保持原位。否则，动物往往会刮擦翻转连接器，最终可能会被撕裂，从而阻止随后连接到刺激器。然而，这 4 周的时间对于涵盖胶质母细胞瘤发展的不同阶段很有价值。当在不同时间间隔比较相同感兴趣体积的肿瘤细胞密度时，可以观察到肿瘤生长动力学的演变。特别地，在免疫开关22时观察到增强的肿瘤生长。在存在刺激电极的情况下进行类似的研究将告知PEF对肿瘤增殖速率和肿瘤对免疫消除敏感性的影响。与卵内模型相比，体内模型可以被视为研究免疫细胞对肿瘤进展的影响及其对PEF治疗效果的贡献的有价值的临床前模型。该方案改编自前一篇文章，在放置颅窗14之前在肿瘤上增加了柔性电极装置。肿瘤的急性和慢性生物电治疗都可以通过双光子显微镜的直接和后续观察来表征，因为初始刺激有望诱导细胞死亡并引发免疫反应的持久失调。
柔性探头的连接在双光子显微镜下很容易接近。因此，可以根据观察到的对神经组织和/或靶细胞的影响实时调整电刺激参数，类似于医生在观察患者的MRI或CT图像时执行介入程序的方式。最后一个考虑因素是用强力胶和硅胶小心密封大脑上的电极以防止组织再生的重要性。
总之，这里描述的方案代表了一种创新模型，用于研究使用柔性有机聚合物电极进行PEF治疗胶质母细胞瘤肿瘤模型的效果。这两种模型表现出不同程度的复杂性，因此可以分离细胞，血管或免疫效应，以便更好地了解作用机制。适形的浅表电极可减少医源性损伤，同时破坏肿瘤微环境，引发血管收缩或细胞内钙失调15。

多形性胶质母细胞瘤（GBM）是一种高度浸润的肿瘤，因此很难通过切除、放疗和化疗等标准治疗根除。尽管进行了多模式治疗，但预后仍然非常差，大多数患者在诊断后 1 年内出现疾病进展1，2。最近，生物电疗法的发展显示出改善现有疗法的巨大潜力。这些疗法使用脉冲电场（PEF）的传递，通常在一次治疗中，破坏细胞膜完整性和肿瘤的微环境。这种细胞膜破碎，也称为电穿孔，可以是可逆的，也可以是不可逆的，具体取决于电场强度和脉冲数。不可逆电穿孔（IRE）作为一种非热组织消融技术应用，其中电脉冲对细胞膜造成致命损伤，导致细胞死亡3。可逆电穿孔应用于电化学疗法（ECT），这是一种成熟的技术，包括将PEF与化疗药物联合使用以增强癌细胞的药物摄取4。此外，最近的研究表明，钙电穿孔作为ECT的替代品，对癌症治疗效率高，而且价格低廉，副作用更少5。尽管取得了这些有希望的进展，但PEF通常使用刚性的金属电极进行应用，已知这些电极会对软组织造成损害6。大脑对这种侵入性装置特别敏感，其中机械不匹配会引起炎症和星形胶质细胞瘢痕形成7。
在这种情况下，提出了一种灵活的PEF递送系统，结合胶质母细胞瘤肿瘤的3D模型，从微加工到小鼠模型。保形电极采用标准的薄膜微细加工工艺制成，包括使用柔软和生物相容性材料，如聚对二甲苯-C、金和 PEDOT：PSS8，9。叉指电极设计用于覆盖较大的表面积，同时保持足够的透明度，以便在电极手指10之间成像。对于肿瘤模型，使用液体覆盖96孔板方法11的变体产生表达遗传编码荧光报告基因的胶质母细胞瘤细胞的3D球状体。将球状体移植到鹌鹑胚胎的脉络膜尿囊膜中，产生卵 内 模型，该模型已被广泛用于研究血管生成或药物毒理学12，13。在胚胎发育的这个阶段，在没有免疫系统的情况下，肿瘤可以通过胚胎的脉管系统移植和血管化12。然后将柔性电极放置在血管化肿瘤的顶部，以研究PEF递送对球状体及其脉管系统的影响。最后，通过将工程球体植入小鼠模型的脑实质中，对完整的生物体（包括肿瘤微环境和免疫系统）研究了这些影响14。将柔性电极放置在插入部位的顶部，并用玻璃窗密封开颅术，允许在数周内重复双光子成像。
这些方法对于对从微电子工程到肿瘤学应用等各个领域感兴趣的人很有用。微细加工方案可用于和适用于任何需要涂有PEDOT：PSS的薄膜金属电极的应用。此外，为评估抗肿瘤电治疗而开发的生物学模型对于研究细胞、血管和免疫对植入材料的分化将具有普遍兴趣。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>(3-Glycidyloxypropyl)trimethoxysilane</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>440167</td>
			<td>GOPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25% Trypsin-EDTA (1X)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25200-056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-Dodecylbenzenesulfonic acid</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>44198</td>
			<td>DBSA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353075</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Technic</td>
			<td>530</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic resin</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>NC1455685</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>agarose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>autoclave</td>
			<td>Tuttnauer</td>
			<td>3150 EL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AZ 10XT</td>
			<td>Microchemicals</td>
			<td></td>
			<td>Positive photoresist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AZ 826 MIF Developer</td>
			<td>Merck</td>
			<td>10056124960</td>
			<td>Metal-ion-free developer for the negative photoresist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AZ Developer</td>
			<td>Merck</td>
			<td>10054224960</td>
			<td>Metal-ion-free developer for the positive photoresist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AZ nLof 2070</td>
			<td>Microchemicals</td>
			<td></td>
			<td>Negative photoresist</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Axience</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Rimadyl</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge Sorvall Legend X1R</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>75004260</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMOS camera Prime 95B</td>
			<td>Photometrics</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator HERAcell 150i</td>
			<td>Thermo scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAC board</td>
			<td>National Instruments</td>
			<td>USB 6259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D&#233;co spray P&#233;b&#233;o</td>
			<td>Cultura</td>
			<td>3167860937307</td>
			<td>Black acrylic paint</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran Texas Red 70.000</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>D1830</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Die bonding paste &#34;Epinal&#34;</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>EN-4900GC</td>
			<td>Silver paste</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dispensing machine</td>
			<td>Tianhao</td>
			<td>TH-2004C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium + GlutaMAX&#8482;-I</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10567-014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D6429</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Egg incubator COUVAD&#39;OR 160</td>
			<td>lafermedemanon.com</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene glycol</td>
			<td>Carl Roth</td>
			<td>6881.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fertilized eggs of Japanese quail</td>
			<td>Japocaille</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>VWR</td>
			<td>S181BH</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flask</td>
			<td>Greiner</td>
			<td>658170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence macroscope</td>
			<td>Leica MZFLIII</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gl261</td>
			<td>DSMZ</td>
			<td>ACC 802</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold pellets - Dia 3 mm x 6 mm th</td>
			<td>Neyco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handheld automated cell counter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>PHCC00000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating and drying oven</td>
			<td>Memmert</td>
			<td>UF110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexadimethrine Bromide Sequa-brene</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S2667</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hot plate Delta 6 HP 350</td>
			<td>S&#252;ss Microtec</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Illumination system pE-4000</td>
			<td>CoolLed</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Infrared tunable femtosecond laser (Ma&#239;-Ta&#239;)</td>
			<td>Spectra Physics (USA)</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ionomycin calcium salt</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I3909</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kapton tape SCOTCH 92 33x19</td>
			<td>3M</td>
			<td></td>
			<td>Polyimide protection tape</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab made pulse generator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Labcoter 2 Parylene Deposition system PDS 2010</td>
			<td>SCS</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lenti-X 293 T cell line</td>
			<td>Takara Bio</td>
			<td>63218</td>
			<td>HEK 293T-derived cell line optimized for lentivirus production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lenti-X GoStix Plus</td>
			<td>Takara Bio</td>
			<td>631280</td>
			<td>Quantitative lentiviral titer test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mask aligner MJB4</td>
			<td>S&#252;ss Microtec</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-90 Concentrated cleaning solution</td>
			<td>International Products</td>
			<td>M9050-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides 76 x 52 x 1 mm</td>
			<td>Marienfeld</td>
			<td>1100420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needles 30G</td>
			<td>BD Microlance 3</td>
			<td>304000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PalmSens4 potentiostat</td>
			<td>PalmSens</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>parylene-c : dichloro-p-cyclophane</td>
			<td>SCS</td>
			<td>300073</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCB Processing Tanks</td>
			<td>Mega Electronics</td>
			<td>PA104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEDOT:PSS Clevios PH 1000</td>
			<td>Heraeus</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin / streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>351029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pGP-CMV-GCaMP6f</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>40755</td>
			<td>plasmid</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline solution</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasma treatment system PE-100</td>
			<td>Plasma Etch</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PlasmaLab 80 Reactive Ion Etcher</td>
			<td>Oxford Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic mask</td>
			<td>Selba</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic weigh boat 64 x 51 x 19 mm</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10770-454</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-dimethylsiloxane: SYLGARD 184 Silicone Elastomer Kit</td>
			<td>Dow chemicals</td>
			<td>1673921</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyimide copper film 60 &#181;m (Kapton)</td>
			<td>Goodfellow</td>
			<td>IM301522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propan-2-ol</td>
			<td>Technic</td>
			<td>574</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protolaser S</td>
			<td>LPKF</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>puromycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A11103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round cover glass 5 mm diameter</td>
			<td>Fischer scientific</td>
			<td>50-949-439</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scepter Sensors - 60 &#181;m</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>PHCC60050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone adhesive Kwik-Sil</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>spin coater</td>
			<td>S&#252;ss Microtec</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spin Coater</td>
			<td>Laurell</td>
			<td>WS-650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Super glue</td>
			<td>Office depot</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tetracycline-free f&#339;tal bovine Serum</td>
			<td>Takara Bio</td>
			<td>631105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermal evaporator Auto 500</td>
			<td>Boc Edwards</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two-photon microscope</td>
			<td>Zeiss LSM 7MP</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>U87-MG</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>HTB-14</td>
			<td>Human glioblastoma cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasonic cleaner</td>
			<td>VWR</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex VTX-3000L</td>
			<td>LMS</td>
			<td>VTX100323410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xfect single shots reagent</td>
			<td>Takara Bio</td>
			<td>631447</td>
			<td>Transfection reagent</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

flexible organic electronic devices for pulsed electric field therapy of glioblastoma

胶质母细胞瘤由于其高度的侵袭性而难以通过标准肿瘤学治疗根除。基于脉冲电场（PEF）的生物电处理有望提高处理效率。然而，它们依赖于导致急性和慢性损伤的刚性电极，特别是在大脑等软组织中。在这项工作中，使用柔性电子设备将PEF递送到肿瘤，并用荧光显微镜评估生物学反应。在薄而透明的Parylene-C基板上的叉指金电极涂有导电聚合物PEDOT：PSS，从而形成顺应且生物相容的器件。使用各种生物学模型研究了PEFs对肿瘤及其微环境的影响。首先，在电极顶部培养单层胶质母细胞瘤细胞以研究 体外现象。作为中间步骤，开发了一种 卵中 模型，其中工程肿瘤球体被移植到鹌鹑的胚胎膜中。由于缺乏免疫系统，这导致了高度血管化的肿瘤。在这个发育的早期阶段，胚胎没有免疫系统，肿瘤不被认为是异物。因此，他们可以快速发育，同时从现有的胚胎血管系统开发自己的血管，这代表了有价值的3D癌症模型。最后，使用同源直立移植（颅内）小鼠模型，在具有功能性免疫系统的完整生物体中评估PEF的柔性电极递送。在植入柔性有机电极装置之前，将肿瘤球状体移植到转基因多荧光小鼠的大脑中。密封的颅窗能够在数周内用PEFs治疗期间对肿瘤及其微环境进行多光子成像。

该协议允许应用于两个胶质母细胞瘤模型，其中集成了灵活的PEF输送系统。在微细加工和封装步骤之后，通过电化学阻抗谱（EIS）在盐溶液中表征柔性电极，以评估和验证其性能。PEDOT：PSS涂层电极显示出典型的电容和电阻主导区域，由截止频率隔开，而未涂层电极仅显示电容行为（图2）。
液体覆盖96孔板方法的变体用于生长由转染的胶质母细胞瘤细胞组成的3D肿瘤，该细胞稳定表达荧光细胞内钙报告基因。可以用明场显微镜观察微球的生长（图3;ED 0）。至少需要 2 或 3 天才能获得球形和致密球状体，具体取决于细胞系和接种的细胞数量。
在 卵中 模型中，球状体被移植在鹌鹑胚胎的脉络膜尿囊膜中（图3;第6版）。几天后可以通过荧光显微镜评估移植的成功，因为活细胞具有细胞内钙，因此具有荧光（图3;第9版）。通过将荧光染料注入血管，可以在荧光显微镜下观察到肿瘤的血管化（图3;ED9）。然而，由于球体非常密集，可能并不总是能够可视化肿瘤内的血管。将柔性指间电极放置在血管化肿瘤的顶部（图3;ED 9）并连接到脉冲发生器。探针必须轻轻放置以避免胚胎出血;否则，荧光染料会扩散，从而阻碍任何成像观察。通过测量通过电路的电流，可以验证脉冲是否正确传递到生物环境。 在卵模型中对这些 进行成像可以实时监测PEF对3D胶质母细胞瘤肿瘤中细胞内钙的影响，以及对肿瘤脉管系统诱导的血管收缩，避免包括免疫系统在内的其他细胞类型的任何影响15。
PEF对胶质母细胞瘤的影响研究也可以在更完整和预测的模型中进行。实际上，上述14描述的体内模型包括在小鼠的脑实质中移植3D胶质母细胞瘤肿瘤（图4）。肿瘤的注射部位被交联的葡聚糖凝胶半珠堵塞，以概括肿瘤生长过程中的生理生物物理限制。尽管在参考文献14 中进行了描述，但值得再次强调的是，将葡聚糖半珠精确地粘合到硬脑膜上至关重要;否则，肿瘤可以通过开放的硬脑膜逸出并完全覆盖大脑，使成像变得不可能。对于任何慢性成像，颅窗愈合时发生的组织向内生长构成了严重的障碍，因为新组织是不透明的，并且使图像起雾或无法使用。因此，在插入和粘合半珠后，需要用一层薄薄的强力胶密封，精心放置在腔壁周围，不要让强力胶滑落或流到硬膜上。当柔性探针放置在肿瘤注射部位的顶部时，探针下方不会留下气泡，原因有两个。首先，当存在气泡时，成像无法进行。其次，气泡充当绝缘体，从而改变电刺激特性。采取上述预防措施后，用粘合在颅骨上的玻璃窗密封开颅术，以便在数周内进行慢性成像。由于肿瘤由GCaMP或DsRed表达细胞组成，因此可以用荧光显微镜确认注射。必须测量电极的电化学阻抗以验证植入后的性能。与盐溶液中的阻抗相比，由于生物环境的存在，预计体内阻抗在频率高于100 Hz时会增加（图5）。血管化神经实质和肿瘤浸润可以通过透明底物在数周内通过双光子显微镜观察和表征（图6）。例如，在感兴趣的细胞（免疫细胞和神经元）中使用表达荧光蛋白的转基因动物可以证明单独电极植入诱导的最小炎症过程（图6A），或者在植入生长的GBM肿瘤顶部的PEF刺激电极26天后显示小胶质细胞和单核细胞的存在（图6B1).在后一种情况下，在肿瘤周围和内部发现了外周单核细胞衍生细胞和脑驻留小胶质细胞（图6B2）。在PEF递送当天，柔性电极的接触垫可以直接在双光子显微镜下连接到脉冲发生器。总体而言，该模型可用于研究生物电治疗的效果，使用参与脑肿瘤发展的各种类型的细胞，深度可达约500μm。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63527/63527fig01.jpg"> 图 1：柔性电极的微细加工 。 （A） 金电极图案和聚对二甲苯 C 基板。（二）大纲开口。（C）PEDOT：PSS涂层。（d） 连接和包装。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63527/63527fig01large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的大图。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63527/63527fig02.jpg"> 图 2：柔性金电极和 PEDOT：PSS 涂层冷电极在盐溶液中的电化学阻抗谱。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63527/63527fig02large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的大图。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63527/63527fig03.jpg"> 图3：胶质母细胞瘤的 卵内 模型。 ED 0：用明场显微镜观察球体。ED 3：开封后3天对鹌鹑胚胎进行无壳培养。ED 6：用明场显微镜观察植入CAM中的肿瘤。ED 9：放置在血管化肿瘤上的柔性装置（绿色肿瘤和红色血管）。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63527/63527fig03large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的大图。</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63527/63527fig04.jpg"> 图4： 体内 应用 。 （A） 体内 实验方案。（B）盖板玻璃和丙烯酸树脂应用前的探头放置。（C）探针植入完成。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63527/63527fig04large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的大图。</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63527/63527fig05.jpg"> 图 5：盐溶液中柔性金电极与植入探针的电化学阻抗谱比较。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63527/63527fig05large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的大图。</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63527/63527fig06.jpg"> 图 6：通过电极的活体多光谱双光子成像 。 （A）电极植入后3天对照多荧光AMU-Neuroinflam小鼠中健康大脑表面的平铺图像。青色显示第 5 层锥体神经元的树突状树状树化，绿色显示募集的粒细胞和单核细胞，黄色显示活化的小胶质细胞和树突状细胞。粉红色表示由于热量积聚引起的红外扩散。（地下一）与 A 相似的图像，但在肿瘤球状体植入皮层200μm后26天，紧接着进行电极植入。注意绿色和黄色免疫细胞的积累。（地下2层）图像与 B1 相似，但在电极表面以下100μm。注意红色肿瘤肿块本身被黄色小胶质细胞和树突状细胞浸润的外围存在蓝色神经元树突状树状树状化。深蓝色显示来自肿瘤周围胶原蛋白的二次谐波信号。（地下3层） B2 的放大视图显示肿瘤附近存在中间神经元体细胞（用箭头表示）。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63527/63527fig06large.jpg" target="_blank">请点击此处查看此图的大图。</a>

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Flexible Organic Electronic Devices for Pulsed Electric Field Therapy of Glioblastoma

这项工作描述了用于在3D脑肿瘤模型中实现的柔性指间电极的开发，即 体外 培养， 卵子 模型和 体内 小鼠模型。所提出的方法可用于评估不同复杂程度的脉冲电场对肿瘤的影响。

用于胶质母细胞瘤脉冲电场治疗的柔性有机电子器件

Glioblastoma is difficult to eradicate with standard oncology therapies due to its high degree of invasiveness. Bioelectric treatments based on pulsed ...

该协议允许通过柔性电子设备传递脉冲电场，以研究它们对胶质母细胞瘤的治疗效果。我们通过成像可视化体内肿瘤微环境来做到这一点。生物电子学正在使用几种日益复杂的不同模型集成到该协议中，以研究脉动场对癌症的影响。这项工作中提出的微细加工技术也可以作为治疗其他类型的癌症的手段进行测试，包括患者来源的异种移植物。这朝着为每个患者量身定制精准医疗的想法发展。这些探头采用标准的微细加工技术制成，因此制造非常简单，任何拥有洁净室的人都可以制造它们。对于金电极图案，通过将干净的载玻片放入沉积室中，将三微米的聚对二甲苯沉积系统沉积在聚对二甲苯沉积系统中。在铝舟中称取六克聚对二甲苯C，将其放入炉中，抽空机器，然后用手稿中描述的参数开始沉积。当沉积完成并且汽化器温度低于40摄氏度时，关闭冷却器，汽化器，炉子。放空机器并收集样品。用负光刻胶以1， 000倍G旋转涂覆等离子体处理过的样品40秒。通过具有叉指电极设计的掩模曝光光刻胶。然后将样品浸入无金属离子显影剂中三分钟，以去除未曝光的光刻胶。要用热蒸发器沉积20纳米的铬粘附层和300纳米的金层，请排气蒸发器机器并用金属螺钉将样品夹在上圆板上。分别用铬和金填充专用坩埚。密封并抽真空机器，并开始旋转样品架。选择含铬的坩埚，慢慢增加电流，直到沉积速率达到每秒0.2埃。打开快门，等到20纳米铬沉积，关闭快门，慢慢降低电流，直到零毫安。选择含金坩埚并缓慢增加电流，直到沉积速率达到每秒0.2埃。打开百叶窗蒸发金，等到沉积10纳米的金，然后将沉积速率增加到每秒1.5埃，直到沉积约300纳米。关闭快门，将电流缓慢降低至零毫安。将样品浸入含有丙酮的烧杯中。然后用异丙醇冲洗样品并用气枪干燥。在四层PEDOT：PSS溶液上以150倍G旋转35秒。通过将样品浸入水中来去除牺牲的Parylene C层。将样品浸入去离子水中30分钟，以去除PEDOT：PSS薄膜中剩余的肥皂和低分子量化合物，并将样品从玻璃基板上分离。在96孔板的每个孔中小心地加入75微升熔融的1%琼脂糖溶液，并在室温下凝固15分钟。分离在稳定细胞系生成期间获得的转导胶质母细胞瘤细胞。每孔加入 10， 000 个胶质母细胞瘤细胞，并使用含有每升 1 克葡萄糖、L-谷氨酰胺、丙酮酸钠和碳酸氢钠、10% 胎牛血清、每微升青霉素 100 单位和每微升链霉素 100 微克的 DMEM 将总体积补足至每孔 150 微升。每两天用新鲜培养基更换一半的培养基，直到进一步实验，同时将移液器尖端保持在孔的上部，以避免损坏琼脂糖或球体本身。将日本鹌鹑的受精卵，将日本鹌鹑的受精卵放在带有自动旋转器的托盘上的孵化器中，该托盘每两小时翻转一次鸡蛋。这一天被认为是胚胎的零日。在胚胎第三天，使用镊子轻轻打开鸡蛋，镊子的细尖端用70%乙醇预先清洗。将胚胎倒入塑料称量舟中，用另一张称量船盖住，并将其置于37摄氏度的标准加湿培养箱中三天。在胚胎第六天，用 23 号针在脉络膜尿囊膜上做一个小切口。使用移液管将七天的球体放在切口上，并将胚胎放回培养箱三天，直到进一步实验。放置一滴DPBS以覆盖开颅术。将柔性电极放在DPBS的液滴上，然后将带有接触垫的探头背面轻轻放在鼠标的背面。用一小张纸吸收DPBS液滴，直到探针可以平放在硬脑膜上并跟随大脑的曲率，确保小层盐水保持在电极下方，作为防止胶水溢出的屏障。将一小滴硅胶粘合剂滴在探头上，并用五毫米的圆形盖玻片覆盖。向下推盖玻片，直到硅胶均匀分布，盖玻片与探头之间的距离最小。然后等待 30 秒，让硅胶凝固。要固定盖玻片，请快速在其侧面涂上强力胶并将其向下推，直到胶水变实。使用牙签在探头的颈部涂抹强力胶，注意将强力胶拉到颈部下方以提供稳定的支撑。用牙科水泥覆盖颅骨以形成慢性帽，并特别注意仅覆盖盖玻片的边缘。抬起探头的背面，在探头颈部下方涂上水泥。在水泥固化之前，将探针的其余部分放在水泥上。在实验过程中，轻轻地向下推探头的颈部，使其表面与盖玻片处于同一水平，而不是妨碍显微镜物镜。用不超过1.5毫米的牙科水泥层覆盖探头颈部的顶部，以牢固地固定探头。在盖玻片周围一到两毫米处建造一个水泥井，呈现一个1.5毫米的脊，为两个光子成像的浸没液创建一个盆地。水泥固化后，进行术后镇痛，并通过用纸巾包裹动物并将其靠近红外灯泡来保持动物温暖直至恢复。PEDOT：PSS涂层电极显示出典型的电容和电阻主导区域，由截止频率隔开，而未涂层电极仅显示电容行为。用明场显微镜观察的球状体的生长表明，根据细胞系和接种的细胞数量，至少需要两到三天才能获得球形和致密球状体。在卵模型中，绒毛膜尿囊膜中的球状体移植可以通过荧光显微镜进行评估，因为活细胞具有细胞内钙，并且可以通过将荧光染料注射到血管中来评估肿瘤的血管化。与盐溶液中的阻抗相比，由于生物环境的存在，预计体内阻抗在频率高于100赫兹时会增加。血管化神经实质和肿瘤浸润可以通过两个光子显微镜在数周内通过透明底物观察和表征。使用在感兴趣的细胞中表达荧光蛋白的转基因动物可以证明仅通过电极植入诱导的最小炎症过程。它可以显示小胶质细胞和单核细胞在植入脉冲电场刺激电极26天后的存在。在肿瘤周围和内部都发现了外周单核细胞衍生和脑共振小胶质细胞。植入手术成功的关键点是确保颅窗的密封和平整度，并优化与探头接触的质量。除了活体成像之外，还可以考虑将我们的方案与其他措施和技术相结合，例如细胞因子的血液工作采样和测量，流式细胞术的免疫状态，甚至行为分析。这项工作为使用柔性植入式设备治疗癌症铺平了道路，并为生物电子医学用于这种慢性疾病开辟了新的前景。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

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科研

癌症研究

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Fluorescence Molecular Tomography for In Vivo Imaging of Glioblastoma Xenografts

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