Name: engineering antiviral agents via surface plasmon resonance
Uploaded: 2022-06-14T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Engineering Antiviral Agents via Surface Plasmon Resonance at JoVE.com

Автор благодарит доктора Кристиана Дернтля из Департамента биотехнологии и микробиологии в Венском университете и Департамента медицины III, Отделения нефрологии и диализа в Медицинском университете Вены, особенно доктора Маркуса Варманна за техническую и научную поддержку. Экспрессия белка в клетках млекопитающих была поддержана кафедрой биотехнологии в Университете природных ресурсов и наук о жизни (BOKU) в Вене. Автор хочет выразить свое глубокое признание доктору Нико Данкбару из XanTec bioanalytics в Дюссельдорфе, Германия, за полезные научные дискуссии по выполнению анализов связывания SPR.

Для настоящего исследования CVN-малый убиквитин-подобный модификатор (SUMO) слитый белок был использован в иммуноферментных анализах вместо CV-N и подходит для клеточных анализов. Рекомбинантный полноразмерный белок вируса гриппа А HA H3 получают коммерчески (см. Таблицу материалов...

Сродство привязки CV-N коррелирует с количеством функциональных сайтов привязки [2H на доменах B и 2L на домене (доменах) A при проектировании как димер с заменой домена]. Вариант с измененным сродством связывания (CVN2L0-V2, гомодимерная стабильная складка CV-N, содержащая нокаут дисульфидного мо...

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#196;kta primeplus</td>
			<td>Cytiva</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amicon tubes</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C7715</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampillicin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A5354</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beckmann Coulter Cooler Allegra X-30R centrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>B06320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell spreader</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HS86655</td>
			<td>silver stainless steel, bar L 33&#160;mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custom DNA Oligos</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>OLIGO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custom Gensynthesis</td>
			<td>GenScript</td>
			<td>#1390661&#160;</td>
			<td>cloning vector: pET27b(+)&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytiva&#160;HBS-EP+ Buffer 10, 4x50mL</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>50-105-5354</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dionex UlitMate 3000</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>IQLAAAGABHFAPBMBFB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dpn I restriction enzyme (10 U/&#956;L)&#160;</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>ER1701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DTT</td>
			<td>Merck</td>
			<td>DTT-RO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDC</td>
			<td>Merck</td>
			<td>39391</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Merck</td>
			<td>E9884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Safe-Lock Tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30120086</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Safe-Lock Tubes</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>30120094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf&#160;Minispin&#160;and MiniSpin Plus personal microcentrifuge</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>Z606235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>51976</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanolamine HCl</td>
			<td>Merck</td>
			<td>E6133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 50mL Conical Centrifuge Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-432-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Falcon 14 mL Round Bottom Polystyrene Test Tube, with Snap Cap, Sterile, 25/Pack</td>
			<td>Corning</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose</td>
			<td>Merck</td>
			<td>G8270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycine HCl</td>
			<td>Merck</td>
			<td>55097</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HA H3 protein</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab69751</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>His-select Ni2+</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H0537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imidazole</td>
			<td>Merck</td>
			<td>I2399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IPTG</td>
			<td>Merck</td>
			<td>I6758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kanamycin A</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>K1377</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kromasil 300-5-C4</td>
			<td>Nouryon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB agar</td>
			<td>Merck</td>
			<td>52062</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB agar</td>
			<td>Merck</td>
			<td>19344</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Lennox</td>
			<td>Merck</td>
			<td>L3022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lysozyme</td>
			<td>Merck</td>
			<td>10837059001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride</td>
			<td>Merck</td>
			<td>M8266</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium sulfate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>M7506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2P04</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S0751</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoDrop UV-Vis2000c spectrophotometer</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>ND2000CLAPTOP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S5881</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NHS</td>
			<td>Merck</td>
			<td>130672</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NZ amine (casein hydrolysate)</td>
			<td>Merck</td>
			<td>C0626</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Merck</td>
			<td>806552</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD MidiTrap G-10</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>GE28-9180-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peptone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>70171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pET11a</td>
			<td>Merck Millipore (Novagen)</td>
			<td>69436&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PMSF</td>
			<td>Merck</td>
			<td>PMSF-RO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAprep Spin Miniprep Kit (1000)</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>27106X4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reichert Software Package Autolink1-1-9</td>
			<td>Reichert</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reichert SPR SR7500DC Dual Channel System</td>
			<td>Reichert</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scrubber2-2012-09-04 for data analysis</td>
			<td>Reichert</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS</td>
			<td>Merck</td>
			<td>11667289001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Site-directed mutagenesis kit incl pUC18 control plasmid</td>
			<td>Stratagene</td>
			<td>#200518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodim chloride</td>
			<td>Merck</td>
			<td>S9888</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium acetate.Trihydrate</td>
			<td>Merck</td>
			<td>236500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPR sensor chip C19RBDHC30M</td>
			<td>XanTec bioanalytics</td>
			<td>SCR C19RBDHC30M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPR sensor chip CMD500D</td>
			<td>XanTec bioanalytics</td>
			<td>SCR CMD500D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilin Standard 90mm Petri Dishes</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>101R20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TBS</td>
			<td>Merck</td>
			<td>T5912</td>
			<td>10x, solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton-X100</td>
			<td>Merck</td>
			<td>T8787</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptone</td>
			<td>Merck</td>
			<td>93657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tween20</td>
			<td>Merck</td>
			<td>P1379</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex-Genie 2 Mixer</td>
			<td>Merck</td>
			<td>Z258423</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-gal</td>
			<td>Merck</td>
			<td>XGAL-RO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XL1-Blue Supercompetent Cells</td>
			<td>Stratagene</td>
			<td>#200236</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast extract</td>
			<td>Merck</td>
			<td>Y1625</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

engineering antiviral agents via surface plasmon resonance

Поверхностный плазмонный резонанс (SPR) используется для измерения связывания гемагглютинина (HA) с димером циановирина-N (CV-N) с заменой домена и для мониторинга взаимодействия между маннозилированными пептидами и сайтом связывания CV-N с высоким сродством. Сообщалось, что всплески оболочки вируса gp120, HA и гликопротеин Эболы (GP) 1,2 связывают как высоко-, так и низкоаффинные сайты связывания на димерном CVN2. Диманнозилированный пептид HA также связывается в двух низкоаффинных сайтах связывания с инженерной молекулой CVN2, которая несет высокоаффинный сайт для соответствующего лиганда и мутирует, чтобы заменить стабилизирующую дисульфидную связь в углеводсвязывающем кармане, тем самым подтверждая поливалентное связывание. Показано связывание ГК с одним высокоаффинным сайтом связывания псевдоантител CVN2 при константе диссоциации (KD) 275 нМ, что дополнительно нейтрализует вирус иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) посредством олигомеризации. Корреляция числа дисульфидных мостиков в CVN2 с заменой домена, которые уменьшаются с 4 до 2 путем подстановки цистинов в полярные пары остатков глутаминовой кислоты и аргинина, приводит к снижению сродства связывания с ГК. Среди самых сильных взаимодействий Ebola GP1,2 связан CVN2 с двумя высокоаффинными сайтами связывания в нижнем наномолярном диапазоне с использованием гликана оболочки без трансмембранного домена. В настоящем исследовании связывание мультиспецифического мономерного CV-N с тяжелым острым респираторным синдромом коронавируса 2 (SARS-CoV-2) спайка (S) гликопротеина измеряется при KD = 18,6 мкМ по сравнению с наномолярным KD с этими другими вирусными всплесками и через его рецептор-связывающий домен в среднем μ-молярном диапазоне.

Молекула CVN2L0 с димерной заменой домена тестируется на связывание с верхней областью ГК в трех отдельных экспериментах SPR, и сродство связывания представлено в значениях KD. Предполагается, что домен B содержит Н-связывающие участки, на которые воздействует замена дисульфидной свя?...

Watch this Scientific Journal Video about Engineering Antiviral Agents via Surface Plasmon Resonance at JoVE.com

Engineering Antiviral Agents via Surface Plasmon Resonance

Настоящий протокол описывает новые инструменты для анализов связывания SPR для изучения связывания CV-N с ГК, гликопротеином S, родственными гликанами гибридного типа и олигосахаридами с высоким содержанием маннозы. SPR используется для определения KD для связывания димерного или мономерного CV-N с этими гликанами.

Разработка противовирусных агентов с помощью поверхностного плазмонного резонанса

Surface plasmon resonance (SPR) is used to measure hemagglutinin (HA) binding to domain-swapped Cyanovirin-N (CV-N) dimer and to monitor interactions ...

Установлена поверхностно-плазмонная резонансная спектроскопия для определения белкового лиганда способом средней пропускной способности. Представлены различные сродства к вариантам сайта связывания одной и той же молекулы, а именно к железосвязывающим высоким манерам олигосахаридов на вирусах. SPR - это метод без меток для изучения макромолекулярного связывания поверхностных иммобилизованных рецепторов в режиме реального времени.Мультисайтовые взаимодействия распознаются в кинетическом анализе путем конкурентного связывания независимо от размера специфических областей в исследованиях, в которых используются SPR для разработки лекарств для поиска ингибиторов или характеристик антител. Кинетические константы и сродства вычисляются непосредственно по отклику датчика. Для начала переложите 100 микролитров раствора на пластины LB-агара и аккуратно распределите его с помощью стерильного клеточного распределителя.Начните серию реакций с образцами, используя несколько концентраций двухцепочечного шаблона ДНК в диапазоне от пяти до 50 нанограммов, сохраняя при этом постоянную концентрацию праймера. Затем добавьте фермент рестрикции DpnI ниже наложения минерального масла и сразу же инкубируйте при 37 градусах Цельсия в течение одного часа для переваривания родительской суперспиральной двухцепочечной ДНК. Чтобы разморозить XL1-Blue Supercompetent Cells, аликвотируйте клетки в предварительно охлажденную, маленькую, круглую нижнюю трубку.Затем перенесите один микролитр обработанной DpnI одноцепочечной ДНК из каждой контрольной и пробной реакции в отдельные аликвоты суперкомпетентных клеток, которые синтезируют комплементарную цепь. После закручивания реакций трансформации тщательно перемешать, инкубировать реакции на льду в течение 30 минут. Примените тепловой импульс к реакциям превращения при 42 градусах Цельсия в течение 45 секунд, а затем поместите реакции на лед на две минуты.Затем добавляют 0,5 миллилитра NZY+Broth и инкубируют реакции трансформации при 37 градусах Цельсия с встряхиванием при 225-250 об/мин в течение одного часа. После этого наносится правильный объем каждой реакции трансформации на пластинах LB Ampicillin Agar, как показано ранее. Для посевной культуры привить небольшое количество ампициллина, содержащего LB-среду, одной колонией из преобразованной пластины.Используя культуру на ночь, инокулируют экспрессионную культуру добавками, включающими 10 миллимоляров хлорида магния, 10 миллимоляров сульфата магния и 20 миллимоляров глюкозы, разбавляя посев семян до одного на 100. Затем вырастите клетки с энергичным встряхиванием при 37 градусах Цельсия до абсорбента 600 нанометров от 0,4 до 0,6 до охлаждения клеток до 20 градусов Цельсия и индуцируйте с помощью одного миллимоляра IPTG и расти в течение ночи. Затем собирают клетки путем центрифугирования при 4000 г в течение 15 минут при четырех градусах Цельсия и выбрасывают супернатант.После повторного использования клеточной гранулы в фосфатно-буферном солевом буфере, недавнее укрытие в 4000 г в течение 15 минут при четырех градусах Цельсия. Затем выбросьте супернатант пипеткой. Далее повторно суспендируют оставшуюся гранулу в 10 миллилитрах лизисного буфера и инкубируют суспензию в течение одного часа при 37 градусах Цельсия.Затем разделяют растворимые и нерастворимые фракции методом центрифугирования по 4 000 г в течение 15 минут при четырех градусах Цельсия. Кроме того, используйте HIS-Select Ni2+Affinity Gel в 14 миллилитрах для связывания и повторного суспендирования его меченого рекомбинантно экспрессированного циановирина-N в буферных растворах с 20 миллимолярным имидазолом и 250 миллимолярным имидазолом соответственно. Инкубируйте в партии в течение не менее 30 минут между этими этапами.Добавление буфера элюирования, содержащего 250 миллимоляров имидазола, к белку элюции. Переложите белковые растворы в центрифугирующие трубки с помощью отсечного фильтра Дальтона весом 10 кг и концентрируйте их путем центрифугирования в течение 10 минут при 4, 500 г и четырех градусах Цельсия. Добавьте рабочий буфер SPR к коэффициенту разбавления от одного до 10 и центрифугу четыре раза к исходному объему в течение 10 минут при 4 500 г и четырех градусах Цельсия.После этого определите концентрацию белка на 280 нанометрах с помощью УФ-видимого спектрофотометра NanoDrop на основе расчетного коэффициента вымирания для основного белка CVN2L0, показывающего размер 23 474 Дальтона. Для двухканальной системы SPR используйте HBSCP plus в качестве рабочего буфера, 10-миллимолярную глициновую соляную кислоту pH от 1,5 до 1,6 в качестве буфера регенерации и включите дегазатор прибора, автосамплер и насос. Затем промыть всю систему двойной дистиллированной водой в течение одного часа.Затем капните погружное масло на детектор и установите стеклянный чип датчика, покрытый тонкой золотой пленкой. А на верхней стороне функционализированный карбоксиметилдекстран гидрогелем непосредственно на детекторе под трехпортовой проточной ячейкой. Затем исправьте настройку, потянув вниз обработку.Чтобы обездвижить белковые лиганды в сенсорные чипы, откройте таблицу выполнения, нажав на Форму в строке меню, и запустите редактор таблиц в интегрированном программном обеспечении SPP auto link. Затем выберите и нажмите «Базовая иммобилизация» из списка доступных таблиц запуска и следуйте шагам экспериментальной процедуры на экране компьютера. Затем нажмите на Sample Set Editor в разделе формы, чтобы заполнить список реагентов для двух стоек, размещенных в автосамплере для дальнейшего анализа.Нажмите на Autosampler Direct Control в качестве инструмента в строке меню, чтобы переместить стойки вперед или домой и выбрать четыре градуса Цельсия в качестве рабочей температуры. Запустите насос для вливания двойной дистиллированной воды, щелкнув по инструментам и прямому управлению насосом. И записывайте данные, нажав на SPR Instrument Direct Control.И каждый раз начинайте с вновь открывающегося окна. После добавления реагентов связи в 300 микролитровых флаконах поместите их в стойки автопробоотборника и запустите таблицу запуска, нажав кнопку Выполнить. Для простого белково-белкового взаимодействия после заправки насоса со скоростью 25 000 микролитров в минуту выполните базовую настройку в течение 30 секунд.Обеспечьте последующую корректировку исходного уровня двойной дистиллированной водой в течение 1,5 минут перед закалкой активированной поверхности чипа одним молярным этаноламина гидрохлоридом, рН 8,5. Затем переключите трубки с пробоотборника жидкости на дегазатор из двойной дистиллированной воды в бутылку с помощью HBS-EP + Нажмите на форму, прокрутите вниз и перейдите на Постобработка, щелкнув этот режим работы. Затем нажмите кнопку Добавить, чтобы выбрать кривые привязки, сгенерированные с течением времени в платформе данных для каждой проточной ячейки, и экспортировать наложение в виде файла скруббера.Затем нажмите «Файл», чтобы открыть параметры сохранения файла и получить кривые отклика, выровняв левую и правую кривые и вычитая сигналы второго опорного канала из сигналов лигандного канала. Одиночные инъекции CVN2L0 и дисперсии V2 и V5 были впервые протестированы на связывание с чипом датчика, связанным с гемагглютинином, для оценки емкости связывания с использованием автосэмплера и редактора работающих таблиц. Повторные инъекции были автоматизированы при различных концентрациях в наномолярном и микромолярном диапазоне в системе с течением времени, демонстрируя, что не было достигнуто ни насыщения на поверхности чипа, ни равновесного связывания.Концентрация и реакция были построены для связывания CVN дикого типа с RBD, предполагая конкретное нацеливание на возможно сохраненные углеводы на субъединице RBD S1 с более слабым сродством, имеющей константу скорости диссоциации 260 мкмоль. Тот же график сродства для связывания CVN2L0-V4 с DM становится более неанализуемым из-за замены дисульфидных связей, которые препятствуют высокоаффинному связыванию с небольшими гликозилированными пептидами и дают более высокий отклик, чем максимальное значение ответа. Связывание CVN дикого типа с RBD на SARS-CoV-2 показывает связывание с S-белком и RBD с константой ярости диссоциации 18,6 мкмоль и 260 микромолей соответственно.Хотя реакция SPR для концентраций анализируемого вещества приводит к высоким единицам отклика и типичным сенсорграммам SPR для CVN дикого типа и связывания E41A. Однако мутант нестабилен при разбавлении. Биозондирование SPR направлено на высокоаффинное и низкоаффинное связывание очищенных белков и их вариантов с лигандами.В нашем случае гликопротеины, использующие оптические показания и двухканальную систему потока на поверхности чипа датчика. Иммуноферментный анализ представляет собой альтернативный иммунологический метод, распознающий белковые эпитопы, а также предоставляющий данные о концентрации пептидов и малых молекул из сложных матриц. Тестирование рекомбинантно экспрессированных белков с помощью SPR-связывающих анализов включало биозондирование подтверждающих изменений, что полезно для проверки и прогнозирования стабильности белка вычислительной стороной белка.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Engineering Antiviral Agents via Surface Plasmon Resonance

Procedure for Lung Engineering

Порядок легких инженерных

Lung tissue, including lung cancer and chronic lung diseases such as chronic obstructive pulmonary disease, cumulatively account for some 280,000 deaths ...

Plasma Lithography Surface Patterning for Creation of Cell Networks

Плазменные литографии поверхности паттернов для создания сотовых сетей

Systematic manipulation of a cell microenvironment with micro- and nanoscale resolution is often required for deciphering various cellular and molecular ...

Magnetic Resonance Elastography Methodology for the Evaluation of Tissue Engineered Construct Growth

Магнитно резонансная Эластография методологии по оценке тканей Разработан Construct роста

Traditional mechanical testing often results in the destruction of the sample, and in the case of long term tissue engineered construct studies, the use ...

Attaching Biological Probes to Silica Optical Biosensors Using Silane Coupling Agents

Установка биологической зонды для кварцевых оптических биосенсоров использованием силана связующие вещества

In order to interface with biological environments, biosensor platforms, such as the popular Biacore system (based on the Surface Plasmon Resonance (SPR) ...

Quantitative FRET (F&#246;rster Resonance Energy Transfer) Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination

Quantitative FRET FÃƒÆ’Ã‚Â¶rster Resonance Energy Transfer Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination

Количественные FRET (Ферстер резонансный перенос энергии) анализ для определения протеазы SENP1 кинетики

Reversible posttranslational modifications of proteins with ubiquitin or ubiquitin-like proteins (Ubls) are widely used to dynamically regulate protein ...

Capillary Force Lithography for Cardiac Tissue Engineering

Капиллярная сила Литография для сердечной тканевой инженерии

Cardiovascular disease remains the leading cause of death worldwide1. Cardiac tissue engineering holds much promise to deliver groundbreaking medical ...

Self-reporting Scaffolds for 3-Dimensional Cell Culture

Строительные леса Self-отчетности для 3-Dimensional культуре клеток

Culturing cells in 3D on appropriate scaffolds is thought to better mimic the in vivo microenvironment and increase cell-cell interactions. The resulting ...

ECM Protein Nanofibers and Nanostructures Engineered Using Surface-initiated Assembly

ECM Белковые Нановолокон и наноструктуры Инженерная Использование Поверхность по инициативе Ассамблеи

The extracellular matrix (ECM) in tissues is synthesized and assembled by cells to form a 3D fibrillar, protein network with tightly regulated fiber ...

Surface Potential Measurement of Bacteria Using Kelvin Probe Force Microscopy

Поверхностный потенциал Измерение бактерий с помощью зонда Кельвина силовой микроскопии

Surface potential is a commonly overlooked physical characteristic that plays a dominant role in the adhesion of microorganisms to substrate surfaces. ...

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

Тканевая инженерия по искробезопасности васкуляризации<em&gt; В Vivo</em&gt; Tissue Engineering палата

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and ...