Name: rose bengal-mediated photodynamic therapy to inhibit candida albicans
Uploaded: 2022-03-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans at JoVE.com

Detta arbete har fått finansiering från Center of Applied Nanomedicine, National Cheng Kung University från Featured Areas Research Center Program inom ramen för Higher Education Sprout Project av utbildningsministeriet (MOE) och ministeriet för vetenskap och teknik, Taiwan [MOST 109-2327-B-006-005] till TW Wong. J.H. Hung erkänner finansiering från National Cheng Kung University Hospital, Taiwan [NCKUH-11006018] och [MOST 110-2314-B-006-086-MY3].

1. Förberedelse av aPDT-system
<ol><li>Skär fyra gröna ljusdioder (LED) från en LED-remsa (se Materialtabell) och rikta in dem mot fyra brunnar på en 96-brunnsplatta (figur 1). OBS: Lysdioderna arrangerades i en 4 x 3-matris. Lysdiodens baksida fästes på en kylfläns för att sprida värme under bestrålning.</li>
	<li>Mätlysdiodens flytande hastighet 11 vid 540 nm med en ljuseffektmätare (se Materialtabell</stro...

<ol>
	<li>Naglik, J. R., Challacombe, S. J., Hube, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+secreted+aspartyl+proteinases+in+virulence+and+pathogenesis.">Candida albicans secreted aspartyl proteinases in virulence and pathogenesis.</a> Microbiology and Molecular Biology Reviews. 67 (3), 400-428 (2003).</li><li>Pappas, P. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice+guideline+for+the+management+of+candidiasis:+2016+update+by+the+Infectious+Diseases+Society+of+America.">Clinical practice guideline for the management of candidiasis: 2016 update by the Infectious Diseases Society of America.</a> Clinical Infectious Diseases. 62 (4), 1-50 (2016).</li><li>Ricotta, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+candidiasis+species+distribution+and+trends,+United+States,+2009-2017.">Invasive candidiasis species distribution and trends, United States, 2009-2017.</a> Journal of Infectious Diseases. 223 (7), 1295-1302 (2021).</li><li>Koehler, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morbidity+and+mortality+of+candidaemia+in+Europe:+an+epidemiologic+meta-analysis.">Morbidity and mortality of candidaemia in Europe: an epidemiologic meta-analysis.</a> Clinical Microbiology and Infection. 25 (10), 1200-1212 (2019).</li><li>Toda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Population-based+active+surveillance+for+culture-confirmed+candidemia+-+four+sites,+United+States,+2012-2016.">Population-based active surveillance for culture-confirmed candidemia - four sites, United States, 2012-2016.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report Surveillance Summaries. 68 (8), 1-15 (2019).</li><li>Lee, C. N., Hsu, R., Chen, H., Wong, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Daylight+photodynamic+therapy:+an+update.">Daylight photodynamic therapy: an update.</a> Molecules. 25 (21), 5195 (2020).</li><li>Wainwright, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+antimicrobial+chemotherapy+(PACT).">Photodynamic antimicrobial chemotherapy (PACT).</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 42 (1), 13-28 (1998).</li><li>Wong, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indocyanine+green-mediated+photodynamic+therapy+reduces+methicillin-resistant+staphylococcus+aureus+drug+resistance.">Indocyanine green-mediated photodynamic therapy reduces methicillin-resistant staphylococcus aureus drug resistance.</a> Journal of Clinical Medicine. 8 (3), 411 (2019).</li><li>Kim, M. M., Darafsheh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Light+sources+and+dosimetry+techniques+for+photodynamic+therapy.">Light sources and dosimetry techniques for photodynamic therapy.</a> Photochemistry and Photobiology. 96 (2), 280-294 (2020).</li><li>Wong, T. W., Sheu, H. M., Lee, J. Y., Fletcher, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+therapy+for+Bowen's+disease+(squamous+cell+carcinoma+in+situ)+of+the+digit.">Photodynamic therapy for Bowen's disease (squamous cell carcinoma in situ) of the digit.</a> Dermatologic Surgery. 27 (5), 452-456 (2001).</li><li>Wong, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photodynamic+inactivation+of+methicillin-resistant+Staphylococcus+aureus+by+indocyanine+green+and+near+infrared+light.">Photodynamic inactivation of methicillin-resistant Staphylococcus aureus by indocyanine green and near infrared light.</a> Dermatologica Sinica. 36 (1), 8-15 (2018).</li><li>Stasko, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visible+blue+light+inhibits+infection+and+replication+of+SARS-CoV-2+at+doses+that+are+well-tolerated+by+human+respiratory+tissue.">Visible blue light inhibits infection and replication of SARS-CoV-2 at doses that are well-tolerated by human respiratory tissue.</a> Scientific Reports. 11 (1), 20595 (2021).</li><li>Crosbie, J., Winser, K., Collins, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mapping+the+light+field+of+the+Waldmann+PDT+1200+lamp:+potential+for+wide-field+low+light+irradiance+aminolevulinic+acid+photodynamic+therapy.">Mapping the light field of the Waldmann PDT 1200 lamp: potential for wide-field low light irradiance aminolevulinic acid photodynamic therapy.</a> Photochemistry and Photobiology. 76 (2), 204-207 (2002).</li><li>Feenstra, R. P., Tseng, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+fluorescein+and+rose+bengal+staining.">Comparison of fluorescein and rose bengal staining.</a> Ophthalmology. 99 (4), 605-617 (1992).</li><li>Demidova, T. N., Hamblin, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cell-photosensitizer+binding+and+cell+density+on+microbial+photoinactivation.">Effect of cell-photosensitizer binding and cell density on microbial photoinactivation.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 49 (6), 2329-2335 (2005).</li><li>Shahid, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Duclauxin+derivatives+from+fungi+and+their+biological+activities.">Duclauxin derivatives from fungi and their biological activities.</a> Frontiers in Microbiology. 12, 766440 (2021).</li><li>Arendrup, M. C., Park, S., Brown, S., Pfaller, M., Perlin, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+CLSI+M44-A2+disk+diffusion+and+associated+breakpoint+testing+of+caspofungin+and+micafungin+using+a+well-characterized+panel+of+wild-type+and+fks+hot+spot+mutant+Candida+isolates.">Evaluation of CLSI M44-A2 disk diffusion and associated breakpoint testing of caspofungin and micafungin using a well-characterized panel of wild-type and fks hot spot mutant Candida isolates.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 55 (5), 1891-1895 (2011).</li><li>Mukaremera, L., Lee, K. K., Mora-Montes, H. M., Gow, N. A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candida+albicans+yeast,+pseudohyphal,+and+hyphal+morphogenesis+differentially+affects+immune+recognition.">Candida albicans yeast, pseudohyphal, and hyphal morphogenesis differentially affects immune recognition.</a> Frontiers in Immunology. 8, 629 (2017).</li><li>Hung, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+photodynamic+therapy+against+fungal+keratitis.">Recent advances in photodynamic therapy against fungal keratitis.</a> Pharmaceutics. 13 (12), 2011 (2021).</li><li>Martinez, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rose+Bengal+photodynamic+antimicrobial+therapy:+a+pilot+safety+study.">Rose Bengal photodynamic antimicrobial therapy: a pilot safety study.</a> Cornea. 40 (8), 1036-1043 (2021).</li></ol>

Uppmuntrande resultat av kliniska tillämpningar av RB-PDT för svampkeratit har nyligen rapporterats19. Absorptionstoppen för RB är vid 450-650 nm. Det är viktigt att bestämma ljuskällans flythastighet för en framgångsrik aPDT. En hög fluens (vanligtvis >100 J / cm2) krävs för att behandla cancerceller, medan en lägre fluens förväntas behandla infekterade lesioner6. En hög fluens innebär en lång exponeringstid som kanske inte är praktisk i en kl...

C. albicans koloniserar i mag-tarmkanalen och könsorganen hos friska individer och kan detekteras som normal mikrobiota hos cirka 50 procent av individerna1. Om en obalans skapas mellan värden och patogenen kan C. albicans invadera och orsaka sjukdom. Infektionen kan sträcka sig från lokala slemhinnor till multipel organsvikt2. I en övervakningsstudie med flera center i USA är ungefär hälften av isolaten från patienter med invasiv candidiasis mellan 2009 och 2017 C. albicans3. Candidemi kan associeras med hög sjuklighet, dödlighet, långvarig sjukhusvistelse4. US Centers of Disease Control and Prevention rapporterade att cirka 7% av alla Candida blodprover som testats är resistenta mot det svampdödande läkemedlet flukonazol5. Framväxten av läkemedelsresistenta Candida-arter väcker oro för att utveckla en alternativ eller adjuvansbehandling till antimykotiska medel.
Antimikrobiell fotodynamisk terapi (aPDT) innebär att man aktiverar en specifik fotosensibiliserare (PS) med ljus vid PS6: s högsta absorptionsvåglängd. Efter excitation överför den exciterade PS sin energi eller elektroner till de närliggande syremolekylerna och återgår till marktillståndet. Under denna process bildas reaktiva syrearter och singlet syre och orsakar cellskador. aPDT har använts i stor utsträckning för att döda mikroorganismer sedan 1990-talet7. En av fördelarna med aPDT är att flera organeller skadas i en cell av singlet syre och / eller reaktiva syrearter (ROS) under bestrålning; således har motstånd mot aPDT inte hittats förrän idag. Dessutom rapporterade en ny studie att bakterierna som överlevde efter aPDT blev känsligare för antibiotika8.
Ljuskällorna som används i aPDT inkluderar lasrar, metallhalogenlampor med filter, nära infrarött ljus och ljusdiod (LED) 9,10,11,12. Lasern ger en hög ljuseffekt, vanligtvis större än 0,5 W / cm2, som möjliggör leverans av en hög ljusdos på mycket kort tid. Det har använts i stor utsträckning i fall där en längre behandlingstid är obekvämt, såsom aPDT för orala infektioner. Nackdelen med en laser är att dess fläckstorlek på belysningen är liten, allt från några hundra mikrometer till 10 mm med en diffusor. Dessutom är laserutrustning dyr och behöver särskild utbildning för att fungera. Å andra sidan är bestrålningsområdet för en metallhalogenlampa med filter relativt större13. Lampan är dock för rejäl och dyr. LED-ljuskällor har blivit vanliga av aPDT inom det dermatologiska området eftersom det är litet och billigare. Bestrålningsområdet kan vara relativt stort med ett matrisarrangemang av LED-glödlampan. Hela ansiktet kan belysas samtidigt9. Ändå, de flesta, om inte alla, LED-ljuskällor som finns tillgängliga idag är utformade för klinisk användning. Det kanske inte är lämpligt för experiment i ett laboratorium eftersom det är rymdupptåt och dyrt. Vi utvecklade en billig LED-matris som är mycket liten och kan klippas och monteras från en LED-remsa. Lysdioderna kan monteras i olika arrangemang för olika experimentella konstruktioner. Olika förhållanden för aPDT kan slutföras i en 96-brunnsplatta eller till och med en 384-brunnsplatta i ett experiment.
Rose bengal (RB) är ett färgat färgämne som ofta används för att förbättra visualiseringen av hornhinneskador i mänskliga ögon14. RB-medierad aPDT har visat dödande effekter på Staphylococcus aureus, Escherichia coli och C. albicans med ungefär jämförbar effektivitet med toluidinblåO15. Denna studie visar en metod för att validera effekten av RB-aPDT på multiresistenta C. albicans.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.5 mL microfuge tube</td>
			<td>Neptune, San Diego, USA</td>
			<td>#3745.x</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL round-bottom tube with cell strainer cap</td>
			<td>Falcon, USA</td>
			<td>#352235</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Alpha plus, Taoyuan Hsien, Taiwan</td>
			<td>#16196</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminum foil</td>
			<td>sunmei, Tainan, Taiwan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminum heat sink</td>
			<td>Nanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan</td>
			<td>BK-T220-0051-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Eppendorf, UK</td>
			<td>5415R</td>
			<td>disperses heat from the LED array</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graph pad prism software</td>
			<td>GraphPad 8.0, San Diego, California, USA</td>
			<td></td>
			<td>graphing and statistics software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Green light emitting diode (LED) strip</td>
			<td>Nanyi electronics Co., Ltd., Tainan, Taiwan</td>
			<td>2835</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Yihder, Taipei, Taiwan</td>
			<td>LM-570D (R)</td>
			<td>Emission peak wavelength: 525 nm, Viewing angle: 150&#176;; originated from https://www.aliva.com.tw/product.php?id=63</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light power meter</td>
			<td>Ophir, Jerusalem, Israel</td>
			<td>PD300-3W-V1-SENSOR,</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex 0.22 &#956;m filter</td>
			<td>Merck, NJ, USA</td>
			<td>SLGVR33RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multidrug-resistant Candida albicans</td>
			<td>Bioresource Collection and Research CenterBioresource, Hsinchu, Taiwan</td>
			<td>BCRC 21538/ATCC 10231</td>
			<td>http://catalog.bcrc.firdi.org.tw/BcrcContent?bid=21538</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OD600 spectrophotometer</td>
			<td>Biochrom, London, UK</td>
			<td>Ultrospec 10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose Bengal</td>
			<td>Sigma-Aldrich, MO, USA</td>
			<td>330000</td>
			<td>stock concentration 40 mg/mL = 4%, prepare in PBS, stored at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilized glass tube</td>
			<td>Sunmei Co., Ltd., Tainan, Taiwan</td>
			<td>AK45048-16100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yeast Extract Peptone Dextrose Medium</td>
			<td>HIMEDIA, India</td>
			<td>M1363</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rose bengal-mediated photodynamic therapy to inhibit candida albicans

Invasiv Candida albicans-infektion är en signifikant opportunistisk svampinfektion hos människor eftersom det är en av de vanligaste kolonisatörerna i tarmen, munnen, slidan och huden. Trots tillgången på svampdödande läkemedel förblir dödligheten för invasiv candidiasis ~ 50%. Tyvärr ökar förekomsten av läkemedelsresistenta C. albicans globalt. Antimikrobiell fotodynamisk terapi (aPDT) kan erbjuda en alternativ eller adjuvant behandling för att hämma C. albicans biofilmbildning och övervinna läkemedelsresistens. Rose bengal (RB) -medierad aPDT har visat effektiv celldödande av bakterier och C. albicans. I denna studie beskrivs effekten av RB-aPDT på multiresistenta C. albicans . En hemlagad grön ljusdiod (LED) ljuskälla är utformad för att anpassa sig till mitten av en brunn på en 96-brunnsplatta. Jästen inkuberades i brunnarna med olika koncentrationer av RB och upplystes med varierande flytande grönt ljus. De dödande effekterna analyserades med plattutspädningsmetoden. Med en optimal kombination av ljus och RB uppnåddes 3-log tillväxthämning. Det drogs slutsatsen att RB-aPDT potentiellt kan hämma läkemedelsresistenta C. albicans.

Figur 1 visar det aPDT-system som används i föreliggande studie. Eftersom höga temperaturer kan orsaka betydande celldöd kyls LED-matrisen av en elektrisk fläkt och en kylfläns används under bestrålning för att upprätthålla en konstant temperatur vid 25 ± 1 ° C. Värmeeffekten kan diskonteras. Att ha en jämn ljusfördelning är också en viktig avgörande faktor för en framgångsrik aPDT; därför, Det är viktigt att rikta in LED-glödlampan till brunnen exakt under belysnin...

Watch this Scientific Journal Video about Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans at JoVE.com

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

Den ökande förekomsten av läkemedelsresistenta Candida albicans är ett allvarligt hälsoproblem över hela världen. Antimikrobiell fotodynamisk terapi (aPDT) kan erbjuda en strategi för att bekämpa läkemedelsresistenta svampinfektioner. Det föreliggande protokollet beskriver Rose bengal-medierad aPDT-effekt på en multiresistent C. albicans-stam in vitro.

Rose Bengal-medied fotodynamisk terapi för att hämma Candida albicans

Invasive Candida albicans infection is a significant opportunistic fungal infection in humans because it is one of the most common colonizers of the gut, ...

Denna studie är ett enkelt, mångsidigt och enkelt system för att undersöka olika fotodynamiska effekter på olika mikroorganismer och celler. I detta system kan lysdioden passa in i olika arrangemang beroende på experimentdesign. Olika tillstånd av PDT kan beräknas i en 96-brunnsplatta eller till och med en 384-brunnsplatta i ett experiment.Denna teknik kan användas för att behandla svampkeratit på grund av vilken globalt cirka 150 000 personer förlorar ögonen trots intensiva behandlingar. Till att börja med, skär fyra gröna lysdioder från en LED-remsa och rikta in dem med tre brunnar på en 96-brunnsplatta. Mät lysdiodens fluenshastighet vid 540 nanometer med en ljuseffektmätare.Håll konstant temperatur vid 25 grader Celsius med en elektrisk fläkt som monterades bredvid plattan under bestrålning. Med en steril slinga, välj en enda koloni av Candida albicans från en agarplatta och tillsätt den till ett steriliserat glasrör som innehåller tre milliliter YPD-medium. Inkubera röret vid 25 grader Celsius med en rotationshastighet på 155 RPM i 14 till 16 timmar för att odla jästkulturen.Späd sedan övernattningskulturen med YPD-medium till ett OD 600-värde på 0,5. Inkubera vid 30 grader Celsius med rotation vid 155 rpm i fyra timmar för att uppnå loggtillväxtfasen. Upprepa utspädningen av loggfaskulturen med färskt YPD-medium till ett OD 600-värde på 0,65, för att få ungefär en gånger 10 till den sjunde kolonibildande enheten per milliliter.Förbered samtidigt en 4% lagerlösning av rosenbengal i 1X PBS. Filtrera sterilisera med ett 0,22 mikrometerfilter. Tillsätt 111 mikroliter 2% rosenbengallösning till en milliliter loggfasodling och samodling vid olika tidpunkter vid rumstemperatur för att förstå absorptionen av RB i cellerna.Centrifug vid 16 100 gånger G i 2 1/2 minuter vid rumstemperatur och tvätta samkulturen tre gånger med en milliliter 1X PBS. Efter tvättning, återuppliva Candida albicans-kulturen i en milliliter 1X PBS. För varje tillstånd, fördela kulturen i tre olika brunnar i en 96-brunnsplatta.Rikta in brunnarna mot LED-matrisen. I de ljusexponerade grupperna, slå på den elektriska fläkten och ljuset. Efter bestrålning, utför tiofaldiga seriella utspädningar två gånger genom att ta 20 mikroliter av samodlingslösningen från en brunn och tillsätt den till ett rör innehållande 180 mikroliter 1X PBS.Släpp sedan 20 mikroliter av varje seriell utspädning i en kvadrant av en YPD-agarplatta för att erhålla räknebara kolonier på plattan. Fluorescerande mikroskopi visade omedelbar färgning av Candida albicans med rosenbengal under röd fluorescens. Efter 15 minuters inkubation färgades de flesta cellerna med rosenbengal, vilket indikerar att den kommer in i cellerna på ett tidsberoende sätt.Vidare genererar aktivering av rosenbengal med ljus fria radikaler och singlet syre i cellerna, vilket resulterar i celldöd. I avsaknad av rosenbengal eller bestrålning observerades ingen celldöd. Candida albicans hämmades efter bestrålning med grönt ljus i närvaro av 0,2 % rosenbengal på ett lätt dosberoende sätt.Det är viktigt att först 96-brunnsplattan måste vara i linje med lysdiodens mitt. För det andra måste den använda agarplattan torkas noggrant för att förhindra blandning av separata kolonier. Candida albicans som växte på plattan kan skickas vidare för genanalys, vilket kan svara på hur PDT påverkar genuttryck av cellerna.Dessa tekniker banar väg för att undersöka hur PDT fungerar på olika celltyper, antingen cancerceller, bakterier, svampar eller virus med en enkel, billig och mångsidig plattform.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Rose Bengal-Mediated Photodynamic Therapy to Inhibit Candida albicans

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

A 96 Well Microtiter Plate-based Method for Monitoring Formation and Antifungal Susceptibility Testing of Candida albicans Biofilms

En 96 Väl mikrotiterplatta-baserad metod för övervakning Bildning och svampdödande resistensbestämning av Candida albicans Biofilmer

Candida albicans remains the most frequent cause of fungal infections in an expanding population of compromised patients and candidiasis is now the third ...

Visualization of Biofilm Formation in Candida albicans Using an Automated Microfluidic Device

Visualization of Biofilm Formation in Candida albicans Using an Automated Microfluidic Device

Visualisering av Biofilm bildning i Candida albicans med en automatiserad mikroflödessystem enhet

Candida albicans is the most common fungal pathogen of humans, causing about 15% of hospital-acquired sepsis cases. A major virulence attribute of C. ...

Deep Dermal Injection As a Model of Candida albicans Skin Infection for Histological Analyses

Deep Dermal Injection As a Model of Candida albicans Skin Infection for Histological Analyses

Djup Dermal injektion som en modell av Candida albicans hudinfektion för histologiska analyser

The skin is an extremely extended organ of the body and, due to this large surface, it is continuously exposed to microorganisms. Skin damage can easily ...

Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

Daily Phototherapy with Red Light to Regulate Candida albicans Biofilm Growth

Dagliga ljusbehandling med rött ljus att reglera Candida albicans Biofilm tillväxt

Here, we present a protocol to assess the outcomes of per diem red light treatment on the growth of Candida albicans biofilm. To increase the planktonic ...

Visualization of Candida albicans in the Murine Gastrointestinal Tract Using Fluorescent In Situ Hybridization

Visualization of Candida albicans in the Murine Gastrointestinal Tract Using Fluorescent In Situ Hybridization

Visualisering av Candida albicans i murin mag-tarmkanalen med fluorescerande in situ hybridisering

Candida albicans is a fungal component of the gut microbiota in humans and many other mammals. Although C. albicans does not cause symptoms in most ...

Clarifying and Imaging Candida albicans Biofilms

Clarifying and Imaging Candida albicans Biofilms

Förtydligande och Imaging Candida albicans Biofilms

The microbial fungus Candida albicans can undergo a change from commensal colonization to virulence that is strongly correlated with its ability to switch ...

An Ex vivo Assay to Study Candida albicans Hyphal Morphogenesis in the Gastrointestinal Tract

An Ex vivo Assay to Study Candida albicans Hyphal Morphogenesis in the Gastrointestinal Tract

En Ex vivo-analys att studera Candida albicans Hyphal Morphogenesis i mag-tarmkanalen

Candida albicans hyphal morphogenesis in the gastrointestinal (GI) tract is tightly controlled by various environmental signals, and plays an important ...

Use of In Vivo Imaging to Screen for Morphogenesis Phenotypes in Candida albicans Mutant Strains During Active Infection in a Mammalian Host

Use of In Vivo Imaging to Screen for Morphogenesis Phenotypes in Candida albicans Mutant Strains During Active Infection in a Mammalian Host

Användning av in vivo-avbildning för att screena för morfogenesfenotyper i Candida albicans mutanta stammar under aktiv infektion hos en däggdjursvärd

Candida albicans is an important human pathogen. Its ability to switch between morphologic forms is central to&#160;its pathogenesis; these morphologic ...

Effective aPDT Using Curcuminoids for Oral Candidiasis in Mice

Curcuminoid-Mediated Antimicrobial Photodynamic Therapy on a Murine Model of Oral Candidiasis

Author Spotlight: Exploring Photodynamic Therapy with Curcumin in a Murine Model for Oral Candidiasis

Antimicrobial Photodynamic Therapy (aPDT) has been extensively investigated in vitro, and preclinical animal models of infections are suitable for ...

Establishing a Mouse Model for Candida albicans Biofilm-Related PJI

A Periprosthetic Joint Candida albicans Infection Model in Mouse

Advancing Research on Candida albicans Biofilm-Associated Prosthetic Joint Infections (Video) | JoVE

En periprotetisk ledinfektionsmodell för Candida albicans hos mus

Periprosthetic joint infection (PJI) is one of the common infections caused by Candida albicans (C. albicans), which increasingly concerns surgeons and ...