Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

تم دعم هذه الدراسة بمنح للبحث العلمي (P01 HL116264 ، RO1 HL137748). يود المؤلفون أن يشكروا تيريزا كورث على نصائحها ومساعدتها في الحفاظ على البيئة التجريبية كمديرة للمختبر.

تمت الموافقة على البروتوكول من قبل كلية الطب في ويسكونسن لرعاية واستخدام الحيوان المؤسسي. تم استخدام فئران دال الحساسة للملح (ذكور وإناث) ، ~ 8 أسابيع من العمر ، 200-350 جم ، في التجارب.
1. إعداد الحيوانات
<ol><li>قم بتركيب نظام قفص استجابة الحركة للفأر ، ووحدة تدفق حول الأو...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

يصف البروتوكول الحالي تقنية تستخدم الأجهزة المتاحة تجاريا لتسجيل RBF والضغط الشرياني بشكل مستمر على مدى عدة أسابيع. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن جمع البول باستخدام الجهاز الموضح في الخطوة 1.1. يمكن استخدامه أيضا لتقييم المستقلبات في البول ، وعندما يتم زرع قسطرة شريانية ، أخذ عينات الدم لتحليلها.<...

الكلى هي فقط 0.5 ٪ من وزن الجسم ولكنها غنية بتدفق الدم ، وتتلقى 20 ٪ -25 ٪ من إجمالي النتاج القلبي1. يعد تنظيم تدفق الدم الكلوي (RBF) أمرا أساسيا لوظائف الكلى وسوائل الجسم وتوازن الكهارل. تتضح أهمية تنظيم تدفق الدم إلى الكلى بشكل جيد من خلال الزيادة الكبيرة في RBF في الكلى المتبقية بعد استئصال الكلية من جانب واحد2،3،4 ومن خلال تخفيضات RBF التي تحدث في الفشل الكلوي5،6،7. ما إذا كانت هذه التغييرات في RBF تحدث استجابة للتغيرات في وظائف الكلى أو انخفاض في الوظيفة بسبب انخفاض RBF كان من الصعب التأكد من الحيوانات المخدرة المعدة جراحيا أو البشر. هناك حاجة إلى دراسات زمنية يمكن فيها تحديد الأحداث قبل وبعد تغيير محدد وملاحظتها في نفس الحيوان أثناء تقدم الأحداث. في الدراسات الحيوانية والبشرية ، تم تقدير RBF بشكل غير مباشر من خلال إزالة حمض الهيبوريك شبه الأميني (PAH) 8،9،10 وفي الآونة الأخيرة عن طريق تقنيات التصوير مثل الموجات فوق الصوتية 9،11،12 ، التصوير بالرنين المغناطيسي4،13 ، و PET-CT14،15 التي تعطي صورا مفيدة لكل كلية والتي يمكن أن تتبع تطور المرض. من الصعب تقييم RBF في الحيوانات الصغيرة عن طريق الموجات فوق الصوتية أو التصوير بالرنين المغناطيسي دون تخدير. كان من المستحيل قياس RBF باستمرار في ظل ظروف واعية في نفس الجرذ على مدى فترات طويلة.
لذلك ، طور البروتوكول الحالي تقنيات تمكن من إجراء قياسات متزامنة مستمرة على مدار 24 ساعة / يوم ل RBF ، والتي تم دمجها مع طرق قياس ضغط الدم المستمر للفئران التي تتحرك بحرية كما هو موضح سابقا16،17،18،19،20،21 . تسمح هذه التقنية بالتقييم الزمني ل RBF في نماذج مختلفة من الفئران لدراسة العلاقات بين السبب والنتيجة في مختلف الاضطرابات الكلوية في المستقبل.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

تلعب الكلى دورا مهما في الحفاظ على توازن سوائل الجسم. تنظيم تدفق الدم الكلوي (RBF) ضروري للوظائف الحيوية للترشيح والتمثيل الغذائي في وظائف الكلى. تم إجراء العديد من الدراسات الحادة على الحيوانات المخدرة لقياس RBF في ظل ظروف مختلفة لتحديد الآليات المسؤولة عن تنظيم تروية الكلى. ومع ذلك ، لأسباب فنية ، لم يكن من الممكن قياس RBF بشكل مستمر (24 ساعة / يوم) في الفئران غير المقيدة غير المخدرة على مدى فترات طويلة. تسمح هذه الطرق بالتحديد المستمر ل RBF على مدى عدة أسابيع مع تسجيل ضغط الدم (BP) في نفس الوقت مع القسطرة المزروعة (مملوءة بالسوائل أو عن طريق القياس عن بعد). يتم إجراء مراقبة RBF مع الفئران الموضوعة في قفص دائري يتم التحكم فيه بواسطة مؤازر للفئران والذي يمكن من الحركة غير المقيدة للفئران طوال فترة الدراسة. في الوقت نفسه ، يتم منع تشابك الكابلات من مسبار التدفق والقسطرة الشريانية. يتم تزويد الفئران أولا بوضع مسبار تدفق بالموجات فوق الصوتية على الشريان الكلوي الأيسر وقسطرة شريانية مزروعة في الشريان الفخذي الأيمن. يتم توجيهها تحت الجلد إلى مؤخرة الرقبة ، وتوصيلها بمقياس التدفق ومحول الضغط ، على التوالي ، لقياس RBF و BP. بعد الزرع الجراحي ، يتم وضع الفئران على الفور في القفص للتعافي لمدة أسبوع واحد على الأقل وتحقيق الاستقرار في تسجيلات التحقيق بالموجات فوق الصوتية. جمع البول ممكن أيضا في هذا النظام. يتم عرض الإجراءات الجراحية وما بعد الجراحة للمراقبة المستمرة في هذا البروتوكول.

يتم عرض متوسط بيانات الضغط الشرياني (الشكل 1 أ) وبيانات تدفق الدم (الشكل 1 ب) من ذكر تمثيلي لفأر دال حساس للملوحة. يتم الحفاظ على الفئران الدال الحساسة للملح في مستعمرة ويتم تربيتها في كلية الطب في ويسكونسن. أجريت الجراحة في عمر 8 أسابيع ، وكان وزن الجسم 249 جرام?...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

يصف البروتوكول الحالي قياسا مستمرا طويل الأجل لتدفق الدم الكلوي في الفئران الواعية وتسجيل ضغط الدم في نفس الوقت باستخدام القسطرة المزروعة (المملوءة بالسوائل أو عن طريق القياس عن بعد).

القياس المستمر طويل الأجل لتدفق الدم الكلوي في الفئران الواعية

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

يسمح لنا التسجيل المستمر لتدفق الدم الكلوي في الفئران الآلية بتحديد تسلسل الأحداث التي تؤدي إلى عملية المرض التي ندرسها مؤقتا. في حالتنا ، إنه ارتفاع ضغط الدم ونحاول تحديد ما إذا كان انخفاض تدفق الدم الكلوي ، الذي يحدث في ارتفاع ضغط الدم ، يسبق أو ينتج عن ارتفاع ضغط الدم. النظام الذي سنعرضه اليوم وإعداد الحيوان مصمم حقا لتمكين تحديد مستمر على مدار 24 ساعة لتدفق الدم الكلوي لعدة أسابيع في كل مرة لدراسة الأحداث المزمنة ودراسة الفئران في بيئتهم المنزلية ، الأقفاص.كما هو الحال مع جميع التقنيات الجراحية والممارسة والصبر والاهتمام بالتفاصيل ، سنحتاج إلى إتقان هذه الإجراءات حتى يمكن تنفيذ التنفيذ في الوقت المحدد. لبدء حلق البطن بالكامل في منطقة على القيلولة حول الفقرات العنقية السابعة من الفئران المخدرة مع المقص الكهربائية. بعد الحلاقة ، امسح المنطقة ثلاث مرات بالتناوب مع 10٪ بوفيدون اليود و 70٪ من الإيثانول.ضع الجرذ في وضعية الانبطاح. اصنع قطعا سنتيمترا واحدا باستخدام المشرط الموجود في القيلولة والجناح الأيسر. ثم إجراء تشريح حاد مع ملقط مرقئ في مساحة واضحة تحت الجلد من شق الجناح إلى الجزء الخلفي من الرقبة.قم بتوصيل زر الجلد بمسبار التدفق ومرر مسبار التدفق عبر هذا النفق تحت الجلد من الرقبة إلى شق الجناح باستخدام ملقط مرقئ. ثم ضع الجرذ في وضع الاستلقاء وقم بعمل شق في البطن من أربعة إلى خمسة سنتيمترات. تشريح المنطقة المحيطة بالشريان الكلوي الأيسر باستخدام ملقط تشريح دقيق منحني يعرض المساحة الكافية لوضع مسبار التدفق.ثم بصراحة ، اخترق العضلة القطنية الرباعية اليسرى بالملقط المرقئ واسحب رأس مسبار التدفق عبر الشريان الكلوي تحت الأنسجة الدهنية إلى تجويف البطن. ضع شبكة ألياف البوليستر على جدار البطن. قم بتوصيل طرف مسبار التدفق بالشريان الكلوي الأيسر وقم بتوصيله بمقياس التدفق.أضف بعض الجل حول طرف المسبار وستظهر قيمة معدل التدفق على مقياس التدفق. قم بلصق شبكة ألياف البوليستر المرفقة بالمسبار على جدار البطن باستخدام مادة لاصقة للأنسجة وامسكها حتى تجف وتستعبد. بمجرد وضع المسبار في مكانه ، افصل مسبار التدفق عن مقياس التدفق وقم بتغطية البطن بشاش منقوع بالمحلول الملحي.لخياطة المسبار ، أدر الجرذ إلى وضعية الانبطاح. قم بتوصيل زر الجلد بمسبار التدفق وقم بعمل حلقة دائرية لمسبار التدفق تحت الجلد على الجناح. خياطة شق في الرقبة وزر على الجلد.ثم خياطة الجناح بأربعة خيوط جراحية. قم بتوصيل مسبار التدفق بمقياس التدفق مرة أخرى ، وأعد الجرذ إلى الوضع الظهري للتحقق من تدفق الدم الكلوي. قم بإجراء تعديلات مسبار التدفق النهائي لتحسين موضعه على الشريان الكلوي.أخيرا ، قم بخياطة العضلات بثلاثة حرير أوت في الجلد بأربعة خيوط جراحية. عندما يتعافى الجرذ تماما من التخدير ، أعد الجرذ إلى نظام قفص استجابة الحركة ، قم بتوصيل مسبار التدفق بمقياس تدفق الدم والسماح بفترة نقاهة مدتها أسبوع تقريبا لتثبيت المسبار وقياس التدفق. تم قياس متوسط الضغط الشرياني وتدفق الدم بشكل مستمر في الفئران الحساسة للملح الباهت أثناء التحول من نظام غذائي منخفض إلى نظام غذائي عالي الملح.تم تسجيل هذه البيانات التمثيلية من ذكر الفئران على مدى أربعة أسابيع ويتم عرضها بمتوسط دقيقة. لوحظ اختلاف نهاري واضح في متوسط الضغط الشرياني وتدفق الدم. بينما يزداد ضغط الدم مع اتباع نظام غذائي عالي الملح ، يميل تدفق الدم إلى الانخفاض بدلا من الزيادة مما يشير إلى زيادة مقاومة الأوعية الدموية الكلوية.الميزة الكبيرة لهذه التقنية هي أنها يمكن أن تدرس تدفق الدم الكلوي على مدى فترات طويلة من الزمن ، والأهم من ذلك في الظروف غير المخدرة. هذا له أهمية كبيرة عند دراسة الاستجابة للمحفزات المختلفة حيث يمكنك استخدام نفس الحيوان في ظل ظروف غير مخدرة خاضعة للرقابة ومتابعة نفس الحيوان على مدى فترات قصيرة أو فترات طويلة جدا لمعرفة ما هي الاستجابة لبعض المحفزات أو الأمراض المرضية المعينة.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

القياس الآلي من الأوعية الدقيقة سرعة تدفق الدم في الرئة الانبثاث من الجرذان

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

الكشف المبكر عن المخدرات التي يسببها الفشل الكلوي الدورة الدموية الجنسي لدى الرجال عن طريق سنوغرفيك] تكنولوجيا في الفئران

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

تقييم عبر الجلد من وظيفة الكلى في القوارض واعية

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

الموضع الجراحي القسطرة على المدى الطويل القلب والأوعية الدموية ممارسة اختبار في الخنازير

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

على المدى الطويل قياس ضغط الدم في الانتقال بحرية الفئران عن طريق القياس

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

نهج جديد للتسجيل المتزامن لنشاط العصب متعاطفة مع الكلي وضغط الدم مع التسريب الوريدي في واعية، الفئران غير المقيد.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

تسجيل كهربية متزامنة والدم الغازية الضغط القياس في الفئران

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

أخذ عينات الدم المستمر في التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني الحيواني الصغير/التصوير المقطعي المحوسب يمكّن من قياس وظيفة الإدخال الشرياني

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...