Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Denne undersøgelse blev støttet af tilskud til videnskabelig forskning (P01 HL116264, RO1 HL137748). Forfatterne vil gerne takke Theresa Kurth for hendes råd og hjælp til at opretholde det eksperimentelle miljø som laboratorieleder.

Protokollen er godkendt af Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Dahl saltfølsomme rotter (hanner og hunner), ~8 uger gamle, 200-350 g, blev brugt til forsøgene.
1. Tilberedning af dyr
<ol><li>Installer et bevægelsesresponsbursystem til rotten, et perivaskulært flowmodul, sprøjtepumpe, optageenhed og software (se Materialetabel) i dyrerummet.</li>
	<li>Placer rotterne i buret for at blive fortrolige med miljø, mad og vandsyste...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

Den nuværende protokol beskriver en teknik, der bruger kommercielt tilgængelig instrumentering til at registrere RBF og arterielt tryk kontinuerligt over mange uger. Derudover kan urin opsamles ved hjælp af enheden beskrevet i trin 1.1. Det kan også bruges til at evaluere metabolitter i urinen og, når et arterieltateter implanteres, blodprøvetagning til analyse.
Traditionelt er RBF-målinger opnået akut i kirurgisk fremstillede bedøvede dyr eller estimeret ved PAH-clearance. Det har im...

Nyrerne er kun 0,5% af kropsvægten, men rige på blodgennemstrømning og modtager 20% -25% af den samlede hjerteudgang1. Reguleringen af renal blodgennemstrømning (RBF) er central for nyrefunktion, kropsvæske og elektrolythomeostase. Betydningen af blodgennemstrømningsregulering for nyrerne illustreres pænt af den betydelige stigning i RBF i den resterende nyre efter ensidig nefrektomi 2,3,4 og af reduktionerne af RBF, der forekommer ved nyresvigt 5,6,7. Hvorvidt sådanne ændringer i RBF forekommer som reaktion på ændringer i nyrefunktionen eller et fald i funktion på grund af reduktion af RBF har været udfordrende at fastslå hos bedøvede kirurgisk fremstillede dyr eller mennesker. Der kræves tidsmæssige undersøgelser, hvor hændelserne kan bestemmes før og efter en defineret ændring og observeres hos det samme dyr under begivenhedernes udvikling. I dyre- og humanstudierne er RBF blevet estimeret indirekte ved clearance af para-amino hippurinsyre (PAH)8,9,10 og i nyere tid ved billeddannelsesteknikker såsom ultralyd9,11,12, MR4,13 og PET-CT 14,15 som giver nyttige snapshotbilleder af hver nyre, og som kan følge sygdommens progression. Det er udfordrende at evaluere RBF hos små dyr ved ultralyd eller MR-scanninger uden anæstesi. Det har været umuligt løbende at måle RBF under bevidste forhold på den samme rotte over længere perioder.
Den nuværende protokol udviklede derfor teknikker, der muliggør samtidige kontinuerlige 24 timers / dag målinger af RBF, som er blevet kombineret med kontinuerlige blodtryksmålingsmetoder til frit bevægelige rotter som beskrevet tidligere 16,17,18,19,20,21 . Denne teknologi giver mulighed for tidsmæssig evaluering af RBF i forskellige modeller af rotter for at studere årsagssammenhænge i forskellige nyresygdomme i fremtiden.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

Nyrerne spiller en afgørende rolle i at opretholde homeostase af kropsvæsker. Reguleringen af renal blodgennemstrømning (RBF) er afgørende for de vitale funktioner af filtrering og metabolisme i nyrefunktionen. Mange akutte undersøgelser er blevet udført i bedøvede dyr for at måle RBF under forskellige betingelser for at bestemme mekanismer, der er ansvarlige for reguleringen af nyreperfusion. Af tekniske årsager har det imidlertid ikke været muligt at måle RBF kontinuerligt (24 timer/dag) hos uhæmmede ubedøvede rotter over længere perioder. Disse metoder tillader kontinuerlig bestemmelse af RBF over mange uger, samtidig med at blodtryk (BP) registreres med implanterede katetre (væskefyldt eller ved telemetri). RBF-overvågning udføres med rotter placeret i et cirkulært servostyret rottebur, der muliggør rottens uhæmmede bevægelse gennem hele undersøgelsen. Samtidig forhindres sammenfiltring af kabler fra strømningssonden og arteriellekatetre. Rotter instrumenteres først med en ultralydsstrømssondeplacering på venstre nyrearterie og et arterieltateter implanteret i højre lårarterie. Disse føres subkutant til nakken og forbindes til flowmåleren og tryktransduceren for at måle RBF og BP. Efter kirurgisk implantation placeres rotter straks i buret for at komme sig i mindst en uge og stabilisere ultralydssondeoptagelserne. Urinopsamling er også mulig i dette system. De kirurgiske og postkirurgiske procedurer til kontinuerlig overvågning er demonstreret i denne protokol.

De gennemsnitlige arterielle trykdata (figur 1A) og blodgennemstrømningsdata (figur 1B) fra en repræsentativ mandlig Dahl-saltfølsom rotte er vist. Dahl saltfølsomme rotter opretholdes i en koloni og opdrættes på Medical College of Wisconsin. Operationen blev udført i en alder af 8 uger, og kropsvægten var 249 g på tidspunktet for operationen. Rotter blev fodret med en 0,4% NaCl diæt, og kosten blev ændret til en 4% NaCl diæt i en alder af 10 uger. M...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Denne protokol beskriver en langsigtet kontinuerlig måling af renal blodgennemstrømning hos bevidste rotter og samtidig registrering af blodtryk med implanterede katetre (væskefyldt eller ved telemetri).

Langsigtet kontinuerlig måling af nyreblodgennemstrømning hos bevidste rotter

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

Den kontinuerlige registrering af nyreblodgennemstrømning hos instrumenterede rotter giver os mulighed for midlertidigt at bestemme rækkefølgen af begivenheder, der fører op til den sygdomsproces, vi studerer. I vores tilfælde er det hypertension, og vi forsøger at afgøre, om en reduktion af nyreblodgennemstrømningen, som forekommer ved hypertension, går forud for eller er en konsekvens af det høje blodtryk. Det system, som vi demonstrerer i dag, og forberedelsen af dyret er virkelig designet til at muliggøre en kontinuerlig 24-timers bestemmelse af nyreblodgennemstrømningen i mange uger ad gangen for at studere kroniske hændelser og studere rotten i deres hjemmemiljø, bure.Som med alle kirurgiske teknikker, praksis, tålmodighed og opmærksomhed på detaljer, skal vi mestre disse procedurer, indtil implementeringen kan udføres til tiden. For at begynde at barbere hele maven i et område på luren omkring den syvende livmoderhvirvler af en bedøvet rotte med en elektrisk klipper. Efter barbering tørres området tre gange skiftevis med 10% povidonjod og 70% ethanol.Placer rotten i den udsatte position. Lav et snit på en centimeter med skalpellen på luren og venstre flanke. Udfør derefter en stump dissektion med hæmostatiske tang i klart subkutant rum fra flankesnittet til bagsiden af nakken.Fastgør hudknappen til strømningssonden og før strømssonden gennem denne subkutane tunnel fra halsen til flankesnittet med hæmostatisk tang. Placer derefter rotten i liggende stilling og lav et fire til fem centimeter midterlinje abdominal snit. Disseker området omkring venstre nyrearterie med buede mikrodissekerende tang, der udsætter pladsen tilstrækkelig til at placere strømningssonden.Derefter direkte gennembor venstre quadratus lændemuskel med de hæmostatiske tang og træk hovedet af strømningssonden gennem nyrearterien under fedtvævet ind i bukhulen. Placer polyesterfibernet på mavevæggen. Krog spidsen af strømningssonden til venstre nyrearterie, og tilslut den til flowmåleren.Tilsæt lidt gel omkring sondespidsen, og værdien af strømningshastigheden vises på flowmåleren. Lim polyesterfibernet, der er fastgjort til sonden, til bugvæggen ved hjælp af vævslim og hold, indtil det er tørt og bundet. Når sonden er på plads, skal du afbryde strømningssonden fra flowmåleren og dække maven med saltvand gennemblødt gasbind.For at suturere sonden skal du dreje rotten til den udsatte position. Fastgør hudknappen til strømningssonden og lav en cirkulær sløjfe af strømningssonden subkutant ved flanken. Sutur snittet ved nakken og knappen til huden.Sutur derefter flanken med fire ott kirurgiske suturer. Tilslut strømningssonden til flowmåleren igen, og drej rotten tilbage til rygpositionen for at kontrollere renal blodgennemstrømning. Foretag justeringer af den endelige flowsonde for at optimere dens position på nyrearterien.Til sidst sutureres musklen med tre ott silke i huden med fire ott kirurgisk sutur. Når rotten er helt genoprettet efter anæstesi, returnerer rotten til et bevægelsesresponsbursystem, tilslut strømssonden til blodgennemstrømningsmåleren og tillader en genopretningsperiode på ca. en uge for at stabilisere sonden og strømningsmålingen. Det gennemsnitlige arterielle tryk og blodgennemstrømning blev kontinuerligt målt hos kedelige saltfølsomme rotter, mens de skiftede fra en diæt med lavt til højt saltindhold.Disse repræsentative data fra en hanrotte blev registreret over en periode på fire uger og vises med et minutgennemsnit. En klar daglig forskel blev observeret i gennemsnitligt arterielt tryk og blodgennemstrømning. Mens blodtrykket stiger med en høj salt kost blodgennemstrømningen tendens til at falde snarere end at stige, tyder på øget renal vaskulær resistens.Den store fordel ved denne teknik er, at den kan studere nyreblodgennemstrømning over lange perioder, og vigtigst af alt under ubedøvede forhold. Dette er af stor betydning, når du studerer respons på forskellige stimuli, hvor du kan bruge det samme dyr under kontrollerede ubedøvede forhold og følge det samme dyr over korte perioder eller meget lange perioder for at se, hvad svaret er på en bestemt stimulus eller patologisk sygdom er.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Automatiseret Måling af mikrocirkulatorisk Blood Flow Velocity i lungemetastaser af rotter

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Tidlig påvisning af Drug-induceret Renal Hæmodynamisk dysfunktion Brug Sonografisk Technology i rotter

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Transkutan vurdering af nyrefunktionen i bevidste Gnavere

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Kirurgisk Placering af Katetre til Langsigtet motionsture Afprøvning i Swine

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Langsigtet blodtryksmåling i Frit Flytning Mus Brug Telemetri

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Romanen tilgang til simultan optagelse af Renal sympatiske Nerve aktivitet og blodtryk med intravenøs Infusion i bevidst, uhæmmet mus.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Samtidige Elektrokardiografi optagelse og Invasive blod pres måling i rotter

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

Kontinuerlig blodprøvetagning i små dyr Positron emission Tomography/computertomografi gør det muligt at måle den arterielle indgangsfunktion

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...