Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Deze studie werd ondersteund door subsidies voor wetenschappelijk onderzoek (P01 HL116264, RO1 HL137748). De auteurs willen Theresa Kurth bedanken voor haar advies en hulp bij het onderhouden van de experimentele omgeving als laboratoriummanager.

Het protocol is goedgekeurd door het Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Dahl zoutgevoelige ratten (mannetjes en vrouwtjes), ~ 8 weken oud, 200-350 g, werden gebruikt voor de experimenten.
1. Voorbereiding van dieren
<ol><li>Installeer een bewegingsresponssysteem voor de rat, een perivasculaire flowmodule, spuitpomp, opnameapparaat en software (zie materiaaltabel) in de dierenkamer.</li>
	<li>Plaats de ratten in de kooi om vertrou...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

Het huidige protocol beschrijft een techniek die gebruik maakt van commercieel beschikbare instrumentatie om RBF en arteriële druk continu gedurende vele weken te registreren. Bovendien kan urine worden verzameld met behulp van het apparaat dat wordt beschreven in stap 1.1. Het kan ook worden gebruikt om metabolieten in de urine te evalueren en, wanneer een arteriële katheter wordt geïmplanteerd, bloedafname voor analyse.
Traditioneel worden RBF-metingen acuut verkregen bij chirurgisch bere...

De nieren zijn slechts 0,5% van het lichaamsgewicht, maar rijk aan bloedstroom, het ontvangen van 20% -25% van de totale cardiale output1. De regulatie van de renale bloedstroom (RBF) staat centraal in de nierfunctie, lichaamsvloeistof en elektrolytenhomeostase. Het belang van de regulatie van de bloedstroom naar de nier wordt mooi geïllustreerd door de aanzienlijke toename van RBF in de resterende nier na unilaterale nefrectomie 2,3,4 en door de reducties van RBF die optreden bij nierfalen 5,6,7. Of dergelijke veranderingen in RBF optreden als reactie op veranderingen in de nierfunctie of een afname van de functie als gevolg van vermindering van RBF is een uitdaging om vast te stellen bij verdoofde chirurgisch bereide dieren of menselijke proefpersonen. Er zijn temporele studies nodig waarin de gebeurtenissen vóór en na een gedefinieerde verandering kunnen worden bepaald en bij hetzelfde dier kunnen worden waargenomen tijdens de progressie van gebeurtenissen. In de dier- en mensstudies is RBF indirect geschat door de klaring van para-amino hippuurzuur (PAK)8,9,10 en in recentere tijd door beeldvormingstechnieken zoals echografie 9,11,12, MRI 4,13 en PET-CT14,15 die nuttige momentopnamen van elke nier geven en die de progressie van de ziekte kunnen volgen. Het is een uitdaging om RBF bij kleine dieren te evalueren door middel van echografie of MRI-scans zonder anesthesie. Het was onmogelijk om RBF onder bewuste omstandigheden continu te meten bij dezelfde rat gedurende langere perioden.
Het huidige protocol heeft daarom technieken ontwikkeld die gelijktijdige continue 24 uur/dag metingen van RBF mogelijk maken, die is gecombineerd met continue bloeddrukmeetmethoden voor vrij bewegende ratten zoals eerder beschreven 16,17,18,19,20,21 . Deze technologie maakt de temporele evaluatie van RBF in verschillende modellen van ratten mogelijk om oorzaak-gevolgrelaties in verschillende nieraandoeningen in de toekomst te bestuderen.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

De nieren spelen een cruciale rol bij het handhaven van de homeostase van lichaamsvloeistoffen. De regulatie van de renale bloedstroom (RBF) is essentieel voor de vitale functies van filtratie en metabolisme in de nierfunctie. Veel acute studies zijn uitgevoerd bij verdoofde dieren om RBF onder verschillende omstandigheden te meten om mechanismen te bepalen die verantwoordelijk zijn voor de regulatie van nierperfusie. Om technische redenen was het echter niet mogelijk om RBF continu (24 uur per dag) te meten bij ongeremde ongedoofde ratten gedurende langere perioden. Deze methoden maken de continue bepaling van RBF gedurende vele weken mogelijk, terwijl tegelijkertijd de bloeddruk (BP) wordt geregistreerd met geïmplanteerde katheters (vloeistof gevuld of door telemetrie). RBF-monitoring wordt uitgevoerd met ratten die in een cirkelvormige servogestuurde rattenkooi worden geplaatst die de ongeremde beweging van de rat gedurende het hele onderzoek mogelijk maakt. Tegelijkertijd wordt het in de knoop raken van kabels van de stroomsonde en arteriële katheters voorkomen. Ratten worden eerst geïnstrumenteerd met een ultrasone flow probe plaatsing op de linker nierslagader en een arteriële katheter geïmplanteerd in de rechter femorale slagader. Deze worden subcutaan naar de nekgeleid en verbonden met respectievelijk de flowmeter en de druktransducer om RBF en BP te meten. Na chirurgische implantatie worden ratten onmiddellijk in de kooi geplaatst om minstens een week te herstellen en de ultrasone sonde-opnames te stabiliseren. Urine opvang is ook haalbaar in dit systeem. De chirurgische en postoperatieve procedures voor continue monitoring worden in dit protocol gedemonstreerd.

De gemiddelde arteriële drukgegevens (figuur 1A) en bloedstroomgegevens (figuur 1B) van een representatieve mannelijke Dahl-zoutgevoelige rat worden weergegeven. De zoutgevoelige ratten van Dahl worden in een kolonie gehouden en gefokt aan het Medical College of Wisconsin. De operatie werd uitgevoerd op de leeftijd van 8 weken en het lichaamsgewicht was 249 g op het moment van de operatie. Ratten kregen een 0,4% NaCl-dieet en het dieet werd op de leeftijd van 1...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Het huidige protocol beschrijft een langdurige continue meting van de renale bloedstroom bij bewuste ratten en tegelijkertijd het registreren van de bloeddruk met geïmplanteerde katheters (met vloeistof gevuld of door telemetrie).

Continue meting op lange termijn van de renale bloedstroom bij bewuste ratten

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

De continue registratie van de renale bloedstroom bij geïnstrumenteerde ratten stelt ons in staat om tijdelijk de volgorde van gebeurtenissen te bepalen die leiden tot het ziekteproces dat we bestuderen. In ons geval is het hypertensie en we proberen te bepalen of een vermindering van de renale bloedstroom, die optreedt bij hypertensie, voorafgaat aan of een gevolg is van de hoge bloeddruk. Het systeem dat we vandaag zullen demonstreren en de voorbereiding van het dier is echt ontworpen om een continue 24-uurs bepaling van de renale bloedstroom gedurende vele weken achter elkaar mogelijk te maken om chronische gebeurtenissen te bestuderen en de rat in hun thuisomgeving, kooien, te bestuderen.Zoals met alle chirurgische technieken, oefening, geduld en aandacht voor detail, zullen we deze procedures onder de knie moeten krijgen totdat het werktuig op tijd kan worden uitgevoerd. Om te beginnen met het scheren van de hele buik in een regio op het dutje rond de zevende nekwervels van een verdoofde rat met een elektrische tondeuse. Veeg na het scheren het gebied drie keer af afwisselend met 10% povidonjodium en 70% ethanol.Plaats de rat in buikligging. Maak een snede van een centimeter met het scalpel op het dutje en de linkerflank. Voer vervolgens een stompe dissectie uit met hemostatische tang in een duidelijke onderhuidse ruimte van de flankincisie tot de achterkant van de nek.Bevestig de huidknop aan de stroomsonde en laat de stroomsonde door deze onderhuidse tunnel van de nek naar de flankincisie met hemostatische tang lopen. Plaats de rat vervolgens in rugligging en maak een buikincisie van vier tot vijf centimeter in het midden van de lijn. Ontleed het gebied rond de linker nierslagader met een gebogen microdissecterende tang die de ruimte blootlegt die voldoende is om de stroomsonde te plaatsen.Doorboort vervolgens botweg de linker quadratus lumbale spier met de hemostatische tang en trek de kop van de stroomsonde door de nierslagader onder het vetweefsel in de buikholte. Plaats het polyestervezelgaas op de buikwand. Haak de punt van de stroomsonde op de linker nierslagader en sluit deze aan op de flowmeter.Voeg wat gel toe rond de punt van de sonde en de waarde van het debiet verschijnt op de stroommeter. Lijm het polyestervezelgaas dat aan de sonde aan de buikwand is bevestigd met behulp van weefsellijm en houd vast tot het droog en gebonden is. Zodra de sonde op zijn plaats is, koppelt u de stroomsonde los van de stroommeter en bedekt u de buik met zout doordrenkt gaas.Om de sonde te hechten, draait u de rat in de buikligging. Bevestig de huidknop aan de stroomsonde en maak een cirkelvormige lus van de stroomsonde subcutaan op de flank. Hecht de incisie in de nek en de knop aan de huid.Hecht vervolgens de flank met vier ott chirurgische hechtingen. Sluit de stroomsonde opnieuw aan op de stroommeter en draai de rat terug naar de dorsale positie om de renale bloedstroom te controleren. Breng de laatste stroomsonde aanpassingen aan om de positie op de nierslagader te optimaliseren.Hecht ten slotte de spier met drie ott-zijde in de huid met vier ott-chirurgische hechtingen. Wanneer de rat volledig hersteld is van anesthesie, keert de rat terug naar een bewegingsrespons-cagingsysteem en sluit u de stroomsonde aan op de bloedstroommeter en staat u een herstelperiode van ongeveer een week toe om de sonde en stroommeting te stabiliseren. De gemiddelde arteriële druk en bloedstroom werden continu gemeten bij doffe zoutgevoelige ratten tijdens het overschakelen van een zoutarm naar een zoutrijk dieet.Deze representatieve gegevens van een mannelijke rat werden geregistreerd over een periode van vier weken en worden weergegeven met een miniem gemiddelde. Een duidelijk dagverschil werd waargenomen in de gemiddelde arteriële druk en bloedstroom. Terwijl de bloeddruk stijgt met een hoog zoutdieet, heeft de bloedstroom de neiging om te dalen in plaats van toe te nemen, wat wijst op een verhoogde renale vasculaire weerstand.Het grote voordeel van deze techniek is dat het de renale bloedstroom gedurende lange perioden kan bestuderen, en vooral in niet-verdoofde omstandigheden. Dit is van groot belang bij het bestuderen van de reactie op verschillende stimuli waarbij je hetzelfde dier onder gecontroleerde, niet-verdoofde omstandigheden kunt gebruiken en datzelfde dier gedurende korte perioden of zeer lange perioden kunt volgen om te zien wat de reactie is op een bepaalde stimulus of pathologische ziekte.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Geautomatiseerde Meting van Microcirculatoire snelheid van de bloedstroom in longmetastasen van Rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Vroege opsporing van drugs geïnduceerde renale hemodynamische Dysfunction Met behulp van echografische Technologie in Ratten

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Transcutane beoordeling van de nierfunctie in Conscious Knaagdieren

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Chirurgische plaatsing van katheters naar Lange termijn Cardiovascular Exercise Testing in Swine

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Langdurige Bloeddruk meten in vrij bewegende muizen met behulp van telemetrie

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nieuwe benadering voor gelijktijdige opname van renale sympathiek zenuw activiteit en bloeddruk met intraveneuze infusie in de bewuste, ongebreidelde muizen.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Gelijktijdige electrocardiografie opname en invasieve bloed druk meting bij ratten

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

Continue bloedafname in kleine dierlijke positron emissie tomografie/computertomografie maakt de meting van de arteriële ingangsfunctie mogelijk

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...