Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
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Cette étude a été financée par des subventions pour la recherche scientifique (P01 HL116264, RO1 HL137748). Les auteurs tiennent à remercier Theresa Kurth pour ses conseils et son aide dans le maintien de l’environnement expérimental en tant que gestionnaire du laboratoire.

Le protocole est approuvé par le Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Des rats sensibles au sel Dahl (mâles et femelles), âgés de ~8 semaines, 200-350 g, ont été utilisés pour les expériences.
1. Préparation des animaux
<ol><li>Installez un système de cage de réponse au mouvement pour le rat, un module de flux périvasculaire, une pompe à seringue, un appareil d’enregistrement et un logiciel (voir le tableau des matériaux</st...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

Le présent protocole décrit une technique qui utilise des instruments disponibles dans le commerce pour enregistrer la FBR et la pression artérielle en continu pendant plusieurs semaines. De plus, l’urine peut être recueillie à l’aide du dispositif décrit à l’étape 1.1. Il peut également être utilisé pour évaluer les métabolites dans l’urine et, lorsqu’un cathéter artériel est implanté, le prélèvement de sang pour analyse.
Traditionnellement, les mesures de FBR ont ...

Les reins ne représentent que 0,5% du poids corporel mais sont riches en flux sanguin, recevant 20% à 25% du débit cardiaque total1. La régulation du débit sanguin rénal (FBR) est essentielle à la fonction rénale, aux fluides corporels et à l’homéostasie électrolytique. L’importance de la régulation du flux sanguin vers le rein est bien illustrée par l’augmentation substantielle de la FBR dans le rein restant après néphrectomie unilatérale 2,3,4 et par les réductions de FBR qui se produisent dans l’insuffisance rénale 5,6,7. Il a été difficile de déterminer si de tels changements dans le FBR se produisent en réponse à des altérations de la fonction rénale ou à une diminution de la fonction due à une réduction de la FBR chez des animaux ou des sujets humains anesthésiés préparés chirurgicalement. Des études temporelles sont nécessaires dans lesquelles les événements peuvent être déterminés avant et après un changement défini et observés chez le même animal au cours de la progression des événements. Dans les études animales et humaines, la FBR a été estimée indirectement par la clairance de l’acide para-amino hippurique (HAP)8,9,10 et, plus récemment, par des techniques d’imagerie telles que l’échographie9,11,12, l’IRM4,13 et la TEP-TDM 14,15 qui donnent des images instantanées utiles de chaque rein et qui peuvent suivre la progression de la maladie. Il est difficile d’évaluer la FBR chez les petits animaux par échographie ou IRM sans anesthésie. Il a été impossible de mesurer en continu la FBR dans des conditions conscientes chez le même rat sur des périodes prolongées.
Le présent protocole a donc mis au point des techniques permettant des mesures simultanées en continu 24 heures sur 24 de la FBR, qui ont été combinées à des méthodes de mesure continue de la pression artérielle pour les rats en mouvement libre, comme décrit précédemment 16,17,18,19,20,21 . Cette technologie permet l’évaluation temporelle de la FBR dans divers modèles de rats afin d’étudier les relations de cause à effet dans divers troubles rénaux à l’avenir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

Les reins jouent un rôle crucial dans le maintien de l’homéostasie des fluides corporels. La régulation du débit sanguin rénal (FBR) est essentielle aux fonctions vitales de filtration et de métabolisme de la fonction rénale. De nombreuses études aiguës ont été réalisées chez des animaux anesthésiés pour mesurer le FBR dans diverses conditions afin de déterminer les mécanismes responsables de la régulation de la perfusion rénale. Cependant, pour des raisons techniques, il n’a pas été possible de mesurer la FBR en continu (24 h/jour) chez des rats non anesthésiés non retenus sur des périodes prolongées. Ces méthodes permettent la détermination continue de la FBR pendant plusieurs semaines tout en enregistrant simultanément la pression artérielle (PA) avec des cathéters implantés (remplis de liquide ou par télémétrie). La surveillance du FBR est effectuée avec des rats placés dans une cage à rats circulaire servo-contrôlée qui permet le mouvement sans retenue du rat tout au long de l’étude. Dans le même temps, l’emmêlement des câbles de la sonde d’écoulement et des cathéters artériels est empêché. Les rats sont d’abord instrumentés avec un placement de sonde d’écoulement ultrasonique sur l’artère rénale gauche et un cathéter artériel implanté dans l’artère fémorale droite. Ceux-ci sont acheminés par voie sous-cutanée vers la nuque et connectés au débitmètre et au transducteur de pression, respectivement, pour mesurer le FBR et la PA. Après l’implantation chirurgicale, les rats sont immédiatement placés dans la cage pour récupérer pendant au moins une semaine et stabiliser les enregistrements de la sonde à ultrasons. La collecte d’urine est également réalisable dans ce système. Les procédures chirurgicales et post-chirurgicales pour la surveillance continue sont démontrées dans ce protocole.

Les données sur la pression artérielle moyenne (figure 1A) et les données sur le débit sanguin (figure 1B) d’un rat mâle Dahl sensible au sel sont présentées. Les rats sensibles au sel Dahl sont maintenus dans une colonie et élevés au Medical College of Wisconsin. La chirurgie a été effectuée à l’âge de 8 semaines et le poids corporel était de 249 g au moment de la chirurgie. Les rats ont été nourris avec un régime NaCl à 0,4%, et le régi...

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Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Le présent protocole décrit une mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez des rats conscients et l’enregistrement simultané de la pression artérielle avec des cathéters implantés (remplis de liquide ou par télémétrie).

Mesure continue à long terme du débit sanguin rénal chez les rats conscients

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

L’enregistrement continu du flux sanguin rénal chez les rats instrumentés nous permet de déterminer temporairement la séquence des événements qui mènent au processus pathologique que nous étudions. Dans notre cas, c’est l’hypertension et nous essayons de déterminer si une réduction du débit sanguin rénal, qui se produit dans l’hypertension, précède ou est une conséquence de l’hypertension artérielle. Le système que nous allons démontrer aujourd’hui et la préparation de l’animal est vraiment conçu pour permettre une détermination continue 24 heures sur 24 du débit sanguin rénal pendant plusieurs semaines à la fois pour étudier les événements chroniques et étudier le rat dans son environnement domestique, les cages.Comme pour toutes les techniques chirurgicales, la pratique, la patience et le souci du détail, nous devrons maîtriser ces procédures jusqu’à ce que l’outil puisse être effectué à temps. Pour commencer à raser tout l’abdomen dans une région de la sieste autour de la septième vertèbre cervicale d’un rat anesthésié avec une tondeuse électrique. Après le rasage, essuyez la zone trois fois en alternant avec 10% de povidone iode et 70% d’éthanol.Placez le rat en position couchée. Faites une coupe d’un centimètre avec le scalpel sur la sieste et le flanc gauche. Ensuite, effectuez une dissection contondante avec une pince hémostatique dans un espace sous-cutané dégagé de l’incision du flanc à l’arrière du cou.Fixez le bouton cutané à la sonde d’écoulement et passez la sonde d’écoulement à travers ce tunnel sous-cutané du cou à l’incision du flanc avec une pince hémostatique. Ensuite, placez le rat en décubitus dorsal et faites une incision abdominale médiane de quatre à cinq centimètres. Disséquer la zone autour de l’artère rénale gauche à l’aide d’une pince à microdissection incurvée exposant l’espace suffisant pour placer la sonde d’écoulement.Ensuite, franchement, percez le muscle lombaire quadratus gauche avec la pince hémostatique et tirez la tête de la sonde d’écoulement à travers l’artère rénale sous le tissu adipeux dans la cavité abdominale. Placez le filet de fibre de polyester sur la paroi abdominale. Accrochez l’extrémité de la sonde d’écoulement à l’artère rénale gauche et connectez-la au débitmètre.Ajoutez un peu de gel autour de la pointe de la sonde et la valeur du débit apparaîtra sur le débitmètre. Collez le treillis de fibres de polyester attaché à la sonde à la paroi abdominale à l’aide d’un adhésif tissulaire et maintenez-le jusqu’à ce qu’il soit sec et collé. Une fois la sonde en place, débranchez la sonde de débit du débitmètre et couvrez l’abdomen avec de la gaze imbibée de solution saline.Pour suturer la sonde, tournez le rat en position couchée. Fixez le bouton de peau à la sonde d’écoulement et faites une boucle circulaire de la sonde d’écoulement par voie sous-cutanée sur le flanc. Suturer l’incision au niveau du cou et le bouton à la peau.Ensuite, suturez le flanc avec quatre sutures chirurgicales ott. Reconnectez la sonde de débit au débitmètre et retournez le rat en position dorsale pour vérifier le débit sanguin rénal. Effectuer les derniers ajustements de la sonde de débit pour optimiser sa position sur l’artère rénale.Enfin, suturez le muscle avec trois soies ott dans la peau avec quatre sutures chirurgicales ott. Lorsque le rat est complètement rétabli de l’anesthésie, il retourne à un système de cage de réponse au mouvement, connectez la sonde de débit au débitmètre sanguin et laissez une période de récupération d’environ une semaine pour stabiliser la sonde et la mesure du débit. La pression artérielle moyenne et le débit sanguin ont été mesurés en continu chez des rats sensibles au sel terne tout en passant d’un régime pauvre en sel à un régime riche en sel.Ces données représentatives d’un rat mâle ont été enregistrées sur une période de quatre semaines et sont présentées avec une moyenne infime. Une nette différence diurne a été observée dans la pression artérielle moyenne et le débit sanguin. Alors que la pression artérielle augmente avec un régime riche en sel, le flux sanguin a tendance à diminuer plutôt qu’à augmenter, ce qui suggère une résistance vasculaire rénale accrue.Le grand avantage de cette technique est qu’elle peut étudier le débit sanguin rénal sur de longues périodes de temps, et surtout dans des conditions non anesthésiées. Ceci est d’une grande importance lorsque vous étudiez la réponse à divers stimuli où vous pouvez utiliser le même animal dans des conditions contrôlées non anesthésiées et suivre ce même animal sur de courtes périodes ou de très longues périodes pour voir quelle est la réponse à un stimulus particulier ou à une maladie pathologique.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Mesure automatisée du flux sanguin Microcirculatory vitesse dans métastases pulmonaire des rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Recherche

Médecine

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Détection précoce du médicament-Induced rénale hémodynamique Dysfonction Utilisation de échographique Technology chez le rat

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Évaluation transcutanée de la fonction rénale dans Rongeurs Conscious

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Mise en place chirurgicale de cathéters pour épreuve d&#39;effort cardiovasculaire à long terme chez le porc

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Mesure la pression artérielle à long terme chez la souris Librement mobile à l&#39;aide de télémesure

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nouvelle approche pour l’enregistrement simultané de l’activité nerveuse sympathique rénale et de la pression artérielle avec une perfusion intraveineuse, conscients, souris sans retenue.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Enregistrement simultané de l’électrocardiographie et envahissantes sang pression mesure chez les Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

L'échantillonnage continu de sang dans la tomographie d'émission de positron de petit animal/tomographie calculée permet la mesure de la fonction d'entrée artérielle

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...