Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Questo studio è stato sostenuto da sovvenzioni per la ricerca scientifica (P01 HL116264, RO1 HL137748). Gli autori desiderano ringraziare Theresa Kurth per i suoi consigli e l'aiuto nel mantenere l'ambiente sperimentale come responsabile del laboratorio.

Il protocollo è approvato dal Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Per gli esperimenti sono stati utilizzati ratti sensibili al sale di Dahl (maschi e femmine), ~ 8 settimane di età, 200-350 g.
1. Preparazione degli animali
<ol><li>Installare un sistema di ingabbiamento della risposta al movimento per il ratto, un modulo di flusso perivascolare, una pompa a siringa, un dispositivo di registrazione e un software (vedi Tabella dei materiali...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

Il presente protocollo descrive una tecnica che utilizza strumentazione disponibile in commercio per registrare RBF e pressione arteriosa in modo continuo per molte settimane. Inoltre, l'urina può essere raccolta utilizzando il dispositivo descritto al punto 1.1. Può anche essere utilizzato per valutare i metaboliti nelle urine e, quando viene impiantato un catetere arterioso, il prelievo di sangue per l'analisi.
Tradizionalmente, le misurazioni dei globuli rossi sono state ottenute in modo ...

I reni sono solo lo 0,5% del peso corporeo ma ricchi di flusso sanguigno, ricevendo il 20% -25% della gittata cardiaca totale1. La regolazione del flusso sanguigno renale (RBF) è fondamentale per la funzione renale, il fluido corporeo e l'omeostasi elettrolitica. L'importanza della regolazione del flusso sanguigno per il rene è ben illustrata dal sostanziale aumento di RBF nel rene rimanente dopo nefrectomia unilaterale 2,3,4 e dalle riduzioni di RBF che si verificano nell'insufficienza renale 5,6,7. Se tali cambiamenti in RBF si verificano in risposta ad alterazioni della funzione renale o una diminuzione della funzione dovuta alla riduzione di RBF è stato difficile da accertare in animali anestetizzati preparati chirurgicamente o soggetti umani. Sono necessari studi temporali in cui gli eventi possono essere determinati prima e dopo un cambiamento definito e osservati nello stesso animale durante la progressione degli eventi. Negli studi sugli animali e sull'uomo, la RBF è stata stimata indirettamente dalla clearance dell'acido ippurico para-amminico (IPA)8,9,10 e in tempi più recenti da tecniche di imaging come ultrasuoni9,11,12, MRI4,13 e PET-CT 14,15 che forniscono utili immagini istantanee di ciascun rene e che possono seguire la progressione della malattia. È difficile valutare RBF in piccoli animali mediante ecografia o risonanza magnetica senza anestesia. È stato impossibile misurare continuamente RBF in condizioni coscienti nello stesso ratto per periodi prolungati.
Il presente protocollo, quindi, ha sviluppato tecniche che consentono misurazioni simultanee continue 24 ore al giorno di RBF, che è stato combinato con metodi di misurazione continua della pressione sanguigna per ratti che si muovono liberamente come descritto in precedenza 16,17,18,19,20,21 . Questa tecnologia consente la valutazione temporale di RBF in vari modelli di ratti per studiare le relazioni causa-effetto in vari disturbi renali in futuro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

I reni svolgono un ruolo cruciale nel mantenimento dell'omeostasi dei fluidi corporei. La regolazione del flusso sanguigno renale (RBF) è essenziale per le funzioni vitali di filtrazione e metabolismo nella funzione renale. Molti studi acuti sono stati condotti su animali anestetizzati per misurare la RBF in varie condizioni per determinare i meccanismi responsabili della regolazione della perfusione renale. Tuttavia, per ragioni tecniche, non è stato possibile misurare i RBF in modo continuo (24 ore al giorno) in ratti non anestetizzati non trattenuti per periodi prolungati. Questi metodi consentono la determinazione continua dei globuli rossi per molte settimane, registrando contemporaneamente la pressione sanguigna (BP) con cateteri impiantati (riempiti di liquido o mediante telemetria). Il monitoraggio RBF viene effettuato con ratti collocati in una gabbia circolare servocomandata che consente il movimento sfrenato del ratto durante lo studio. Allo stesso tempo, viene impedito l'aggrovigliamento dei cavi dalla sonda di flusso e dai cateteri arteriosi. I ratti vengono prima strumentati con un posizionamento di una sonda a flusso ultrasonico sull'arteria renale sinistra e un catetere arterioso impiantato nell'arteria femorale destra. Questi sono instradati per via sottocutanea alla nuca e collegati rispettivamente al flussometro e al trasduttore di pressione per misurare RBF e BP. Dopo l'impianto chirurgico, i ratti vengono immediatamente messi nella gabbia per recuperare per almeno una settimana e stabilizzare le registrazioni della sonda ad ultrasuoni. Anche la raccolta delle urine è fattibile in questo sistema. Le procedure chirurgiche e post-chirurgiche per il monitoraggio continuo sono dimostrate in questo protocollo.

Sono mostrati i dati sulla pressione arteriosa media (Figura 1A) e i dati sul flusso sanguigno (Figura 1B) di un ratto rappresentativo maschio di Dahl sensibile al sale. I ratti sensibili al sale di Dahl sono mantenuti in una colonia e allevati presso il Medical College of Wisconsin. L'intervento è stato eseguito all'età di 8 settimane e il peso corporeo era di 249 g al momento dell'intervento. I ratti sono stati nutriti con una dieta NaCl allo 0,4% e la dieta...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Il presente protocollo descrive una misurazione continua a lungo termine del flusso sanguigno renale in ratti coscienti e contemporaneamente la registrazione della pressione sanguigna con cateteri impiantati (riempiti di liquido o per telemetria).

Misurazione continua a lungo termine del flusso sanguigno renale nei ratti coscienti

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

La registrazione continua del flusso sanguigno renale nei ratti strumentati ci consente di determinare temporaneamente la sequenza di eventi che portano al processo patologico che stiamo studiando. Nel nostro caso, è ipertensione e stiamo cercando di determinare se una riduzione del flusso sanguigno renale, che si verifica nell'ipertensione, precede o è una conseguenza dell'ipertensione. Il sistema che dimostreremo oggi e la preparazione dell'animale è davvero progettato per consentire una determinazione continua 24 ore su 24 del flusso sanguigno renale per molte settimane alla volta per studiare eventi cronici e per studiare il ratto nel loro ambiente domestico, le gabbie.Come per tutte le tecniche chirurgiche, la pratica, la pazienza e l'attenzione ai dettagli, saremo tenuti a padroneggiare queste procedure fino a quando l'implementazione può essere eseguita in tempo. Per iniziare a radersi l'intero addome in una regione sul pisolino intorno alla settima vertebra cervicale di un ratto anestetizzato con un tagliacapelli elettrico. Dopo la rasatura, pulire l'area tre volte alternando con 10% di iodio povidone e etanolo al 70%.Metti il topo in posizione prona. Fai un taglio di un centimetro con il bisturi sul pisolino e sul fianco sinistro. Quindi eseguire una dissezione smussata con pinza emostatica nello spazio sottocutaneo chiaro dall'incisione del fianco alla parte posteriore del collo.Attaccare il pulsante della pelle alla sonda di flusso e far passare la sonda di flusso attraverso questo tunnel sottocutaneo dal collo all'incisione del fianco con una pinza emostatica. Quindi posizionare il ratto in posizione supina e fare un'incisione addominale mediana da quattro a cinque centimetri. Sezionare l'area intorno all'arteria renale sinistra con una pinza curva microdissecante esponendo lo spazio sufficiente per posizionare la sonda di flusso.Quindi, senza mezzi termini, perforare il muscolo lombare quadratus sinistro con il forcipe emostatico e tirare la testa della sonda di flusso attraverso l'arteria renale sotto il tessuto adiposo nella cavità addominale. Posizionare la rete in fibra di poliestere sulla parete addominale. Agganciare la punta della sonda di flusso all'arteria renale sinistra e collegarla al flussometro.Aggiungi un po 'di gel intorno alla punta della sonda e il valore della portata apparirà sul flussometro. Incollare la rete in fibra di poliestere attaccata alla sonda alla parete addominale utilizzando adesivo tissutale e tenere premuto fino a quando asciutto e incollato. Una volta che la sonda è in posizione, scollegare la sonda di flusso dal flussometro e coprire l'addome con una garza imbevuta di soluzione salina.Per suturare la sonda, girare il ratto in posizione prona. Collegare il pulsante della pelle alla sonda di flusso e fare un anello circolare della sonda di flusso sottocutanea sul fianco. Sutura l'incisione al collo e il bottone sulla pelle.Quindi suturare il fianco con quattro suture chirurgiche ott. Collegare nuovamente la sonda di flusso al flussometro e riportare il ratto in posizione dorsale per controllare il flusso sanguigno renale. Effettuare le regolazioni finali della sonda di flusso per ottimizzare la sua posizione sull'arteria renale.Infine, suturare il muscolo con tre ott seta nella pelle con quattro ott sutura chirurgica. Quando il ratto è completamente recuperato dall'anestesia, riportare il ratto a un sistema di gabbia di risposta al movimento collegare la sonda di flusso al misuratore di flusso sanguigno e consentire un periodo di recupero di circa una settimana per stabilizzare la sonda e la misurazione del flusso. La pressione arteriosa media e il flusso sanguigno sono stati misurati continuamente in ratti opachi sensibili al sale durante il passaggio da una dieta a basso contenuto di sale ad alta sala.Questi dati rappresentativi di un ratto maschio sono stati registrati per un periodo di quattro settimane e sono mostrati con una media minima. Una chiara differenza diurna è stata osservata nella pressione arteriosa media e nel flusso sanguigno. Mentre la pressione sanguigna aumenta con una dieta ricca di sale, il flusso sanguigno tende a diminuire piuttosto che aumentare, suggerendo una maggiore resistenza vascolare renale.Il grande vantaggio di questa tecnica è che può studiare il flusso sanguigno renale per lunghi periodi di tempo e, soprattutto, in condizioni non anestetizzate. Questo è di grande importanza quando si studia la risposta a vari stimoli in cui è possibile utilizzare lo stesso animale in condizioni controllate non anestetizzatezzate, e seguire lo stesso animale per brevi periodi o periodi molto lunghi per vedere qual è la risposta a qualche particolare stimolo o malattia patologica.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Automated Misura di microcircolatorio Portata in polmonare Metastasi di Ratti

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Ricerca

Medicina

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

La diagnosi precoce del farmaco-indotta renale emodinamica erettile Utilizzando ecografica Technology di ratti

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

La valutazione transcutanea della funzione renale nei roditori Conscious

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Posizionamento chirurgico di cateteri per durata Esercizio cardiovascolare test in Swine

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Misurazione della pressione sanguigna a lungo termine in topi liberi di muoversi utilizzando la telemetria

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nuovo approccio per la registrazione simultanea di attività simpatica renale del nervo e pressione del sangue con l'infusione endovenosa in consapevole, topi sfrenati.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Elettrocardiografia simultanea registrazione e invasiva sangue pressione misura in ratti

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

Il campionamento continuo del sangue nella tomografia a emissione di positroni di piccole dimensioni/tomografia computerizzata consente la misurazione della funzione di input arteriosa

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...