Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Denne studien ble støttet av tilskudd til vitenskapelig forskning (P01 HL116264, RO1 HL137748). Forfatterne vil takke Theresa Kurth for hennes råd og hjelp til å opprettholde det eksperimentelle miljøet som laboratorieleder.

Protokollen er godkjent av Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Dahl saltfølsomme rotter (hanner og hunner), ~8 ukers alder, 200-350 g, ble brukt til forsøkene.
1. Forberedelse av dyr
<ol><li>Installer et bevegelsesrespons-caging system for rotte, en perivaskulær strømningsmodul, sprøytepumpe, opptaksenhet og programvare (se Materialtabell) i dyrerommet.</li>
	<li>Plasser rottene i buret for å bli kjent med miljøet, maten og...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

Denne protokollen beskriver en teknikk som benytter kommersielt tilgjengelig instrumentering for å registrere RBF og arterielt trykk kontinuerlig over mange uker. I tillegg kan urin samles ved hjelp av enheten beskrevet i trinn 1.1. Det kan også brukes til å evaluere metabolitter i urinen, og når et arterielt kateter er implantert, blodprøvetaking for analyse.
Tradisjonelt har RBF-målinger blitt oppnådd akutt i kirurgisk tilberedte bedøvede dyr eller estimert ved PAH-clearance. Imidler...

Nyrene er bare 0,5% av kroppsvekten, men rike på blodstrøm, og mottar 20% -25% av den totalehjerteutgangen1. Reguleringen av nyreblodstrøm (RBF) er sentral for nyrefunksjon, kroppsvæske og elektrolytthomeostase. Betydningen av blodstrømsregulering for nyrene illustreres fint av den betydelige økningen av RBF i den gjenværende nyren etter ensidig nefrektomi 2,3,4 og av reduksjonene av RBF som oppstår ved nyresvikt 5,6,7. Hvorvidt slike endringer i RBF oppstår som svar på endringer i nyrefunksjon eller nedsatt funksjon på grunn av reduksjon av RBF, har vært utfordrende å fastslå hos bedøvede kirurgisk forberedte dyr eller mennesker. Temporale studier er nødvendige der hendelsene kan bestemmes før og etter en definert endring og observeres hos samme dyr under progresjonen av hendelser. I dyre- og menneskestudier har RBF blitt estimert indirekte ved clearance av para-amino hippurinsyre (PAH) 8,9,10 og i nyere tid ved avbildningsteknikker som ultralyd9,11,12, MR4,13 og PET-CT 14,15 som gir nyttige øyeblikksbilder av hver nyre og som kan følge sykdomsprogresjonen. Det er utfordrende å evaluere RBF hos små dyr ved ultralyd eller MR-skanning uten anestesi. Det har vært umulig å kontinuerlig måle RBF under bevisste forhold hos samme rotte over lengre perioder.
Den nåværende protokollen utviklet derfor teknikker som muliggjør samtidige kontinuerlige 24 timers / dag målinger av RBF, som har blitt kombinert med kontinuerlige blodtrykksmålingsmetoder for fritt bevegelige rotter som beskrevet tidligere 16,17,18,19,20,21 . Denne teknologien muliggjør tidsmessig evaluering av RBF i ulike modeller av rotter for å studere årsakssammenheng i ulike nyresykdommer i fremtiden.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

Nyrene spiller en avgjørende rolle i å opprettholde homeostase av kroppsvæsker. Reguleringen av nyreblodstrømmen (RBF) er avgjørende for vitale funksjoner av filtrering og metabolisme i nyrefunksjonen. Mange akutte studier har blitt utført på bedøvede dyr for å måle RBF under ulike forhold for å bestemme mekanismer som er ansvarlige for regulering av nyreperfusjon. Av tekniske årsaker har det imidlertid ikke vært mulig å måle RBF kontinuerlig (24 timer/dag) hos hemningsløse ubedøvede rotter over lengre perioder. Disse metodene tillater kontinuerlig bestemmelse av RBF over mange uker, samtidig som blodtrykket (BP) registreres med implanterte katetre (væskefylt eller ved telemetri). RBF-overvåking utføres med rotter plassert i et sirkulært servokontrollert rottebur som muliggjør uhemmet bevegelse av rotten gjennom hele studien. Samtidig forhindres sammenfletting av kabler fra strømningssonden og arterielle katetre. Rotter blir først instrumentert med en ultralyd strømningssonde plassering på venstre nyrearterie og et arterielt kateter implantert i høyre lårarterie. Disse rutes subkutant til nakken, og kobles til henholdsvis strømningsmåleren og trykktransduseren for å måle RBF og BP. Etter kirurgisk implantasjon plasseres rotter umiddelbart i buret for å gjenopprette i minst en uke og stabilisere ultralydssondeopptakene. Urin samling er også mulig i dette systemet. De kirurgiske og postkirurgiske prosedyrene for kontinuerlig overvåking er vist i denne protokollen.

Gjennomsnittlige arterielle trykkdata (figur 1A) og blodstrømsdata (figur 1B) fra en representativ mannlig Dahl saltfølsom rotte er vist. De Dahl saltfølsomme rottene opprettholdes i en koloni og avles ved Medical College of Wisconsin. Operasjonen ble gjort i en alder av 8 uker, og kroppsvekten var 249 g på operasjonstidspunktet. Rotter ble matet med en 0,4% NaCl diett, og dietten ble endret til en 4% NaCl diett i en alder av 10 uker. Målingene ble fortsatt...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Denne protokollen beskriver en langvarig kontinuerlig måling av nyreblodstrøm hos bevisste rotter og samtidig registrering av blodtrykk med implanterte katetre (væskefylt eller ved telemetri).

Langsiktig kontinuerlig måling av nyreblodstrøm hos bevisste rotter

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

Den kontinuerlige registreringen av nyreblodstrømmen hos instrumenterte rotter gjør at vi midlertidig kan bestemme sekvensen av hendelser som fører opp til sykdomsprosessen som vi studerer. I vårt tilfelle er det hypertensjon, og vi prøver å avgjøre om en reduksjon av nyreblodstrømmen, som oppstår i hypertensjon, går foran eller er en konsekvens av høyt blodtrykk. Systemet som vi skal demonstrere i dag og forberedelsen av dyret, er virkelig designet for å muliggjøre en kontinuerlig 24-timers bestemmelse av nyreblodstrømmen i mange uker om gangen for å studere kroniske hendelser og studere rotten i hjemmemiljøet, burene.Som med alle kirurgiske teknikker, praksis, tålmodighet og oppmerksomhet på detaljer, vil vi måtte mestre disse prosedyrene til implementeringen kan utføres i tide. For å begynne barbere hele magen i en region på lur rundt den syvende livmorhvirvelene til en bedøvet rotte med en elektrisk klipper. Etter barbering, tørk området tre ganger vekslende med 10% povidonjod og 70% etanol.Plasser rotta i utsatt stilling. Lag en centimeter kutt med skalpellen på lur og venstre flanke. Utfør deretter en stump disseksjon med hemostatiske tang i klart subkutant rom fra flankesnittet til baksiden av nakken.Fest hudknappen til strømningssonden og før strømningssonden gjennom denne subkutane tunnelen fra nakken til flankesnittet med hemostatiske tang. Plasser deretter rotta i den bakre posisjonen og gjør et fire til fem centimeter midtlinje abdominal snitt. Disseker området rundt venstre nyrearterie med buede mikrodissekerende tang som utsetter rommet tilstrekkelig til å plassere strømningssonden.Deretter stikker du den venstre quadratus lumbale muskelen med hemostatiske tang og trekker hodet på strømningssonden gjennom nyrearterien under fettvevet inn i bukhulen. Plasser polyesterfibernettet på bukveggen. Koble spissen av strømningssonden til venstre nyrearterie og koble den til strømningsmåleren.Tilsett litt gel rundt sondespissen, og verdien av strømningshastigheten vises på strømningsmåleren. Lim polyesterfibernettet festet til sonden til bukveggen ved hjelp av vevslim og hold til det er tørt og bundet. Når sonden er på plass, kobler du strømningssonden fra strømningsmåleren og dekker magen med saltvann gjennomvåt gasbind.For å suturere sonden, vri rotten til utsatt stilling. Fest hudknappen til strømningssonden og lag en sirkulær sløyfe av strømningssonden subkutant på flanken. Sutur snittet i nakken og knappen til huden.Deretter sutur flanken med fire ott kirurgiske suturer. Koble strømningssonden til strømningsmåleren igjen, og vri rotta tilbake til dorsalstilling for å kontrollere nyreblodstrømmen. Gjør endelige strømningssondejusteringer for å optimalisere sin posisjon på nyrearterien.Til slutt sutur muskelen med tre ott silke i huden med fire ott kirurgisk sutur. Når rotta er fullstendig gjenopprettet fra anestesi, returnerer rotten til et bevegelsesrespons-caging-system, kobler strømningssonden til blodstrømsmåleren og tillater en gjenopprettingsperiode på omtrent en uke for å stabilisere sonden og strømningsmålingen. Gjennomsnittlig arterielt trykk og blodstrøm ble kontinuerlig målt hos kjedelige saltfølsomme rotter mens de byttet fra et lavt til høyt salt diett.Disse representative dataene fra en hannrotte ble registrert over en periode på fire uker og vises med et minutts gjennomsnitt. En klar døgnforskjell ble observert i gjennomsnittlig arterielt trykk og blodstrøm. Mens blodtrykket øker med et høyt salt diett, har blodstrømmen en tendens til å redusere i stedet for å øke, noe som tyder på økt renal vaskulær motstand.Den store fordelen med denne teknikken er at den kan studere nyreblodstrømmen over lange perioder, og viktigst i ubedøvede forhold. Dette er av stor betydning når du studerer respons på ulike stimuli der du kan bruke det samme dyret under kontrollerte ubedøvede forhold og følge det samme dyret over korte perioder eller svært lange perioder for å se hva responsen er på en bestemt stimulans eller patologisk sykdom er.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Automatisert Måling av microcirculatory Blood Flow Velocity i lungemetastaser av Rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Tidlig påvisning av Drug-Induced Nedsatt hemodynamisk Dysfunction Bruke sonografiske Technology i rotter

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Transkutan vurdering av nyrefunksjonen hos bevisste Gnagere

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Kirurgisk Plassering av katetre for langsiktig kardiovaskulær trening Testing i Swine

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Langsiktig blodtrykksmåling i fritt bevegelige Mus Bruke Telemetri

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Ny tilnærming for samtidig opptak av nyre sympatiske Nerve aktivitet og blodtrykk med intravenøs infusjon i bevisst, uhemmet mus.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Samtidige Electrocardiography opptak og invasiv blod trykk måling i rotter

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

Kontinuerlig blodprøve i små dyr positron utslipp tomografi/beregnet tomografi muliggjør måling av arteriell input-funksjonen

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...