Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
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Este estudo foi apoiado por bolsas de investigação científica (P01 HL116264, RO1 HL137748). Os autores gostariam de agradecer a Theresa Kurth por seus conselhos e ajuda na manutenção do ambiente experimental como gerente de laboratório.

O protocolo é aprovado pelo Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Ratos sensíveis ao sal de Dahl (machos e fêmeas), ~ 8 semanas de idade, 200-350 g, foram usados para os experimentos.
1. Preparação animal
<ol><li>Instale um sistema de gaiola de resposta ao movimento para o rato, um módulo de fluxo perivascular, bomba de seringa, dispositivo de gravação e software (consulte Tabela de Materiais) na sala de animais.</li>
	<li>C...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

O presente protocolo descreve uma técnica que utiliza instrumentação comercialmente disponível para registrar a RBF e a pressão arterial continuamente ao longo de muitas semanas. Além disso, a urina pode ser coletada usando o dispositivo descrito na etapa 1.1. Também pode ser usado para avaliar metabólitos na urina e, quando um cateter arterial é implantado, amostragem de sangue para análise.
Tradicionalmente, as medidas de RBF têm sido obtidas de forma aguda em animais anestesiados...

Os rins são apenas 0,5% do peso corporal, mas ricos em fluxo sanguíneo, recebendo 20%-25% do débito cardíaco total1. A regulação do fluxo sanguíneo renal (RBF) é fundamental para a função renal, fluido corporal e homeostase eletrolítica. A importância da regulação do fluxo sanguíneo para o rim é bem ilustrada pelo aumento substancial da IRC no rim remanescente após nefrectomia unilateral 2,3,4 e pelas reduções da IRC que ocorrem na insuficiência renal 5,6,7. Se tais alterações na RBF ocorrem em resposta a alterações na função renal ou uma diminuição na função devido à redução da RBF tem sido um desafio para determinar em animais anestesiados cirurgicamente preparados ou seres humanos. São necessários estudos temporais nos quais os eventos possam ser determinados antes e depois de uma mudança definida e observados no mesmo animal durante a progressão dos eventos. Nos estudos em animais e humanos, a RBF tem sido estimada indiretamente pela depuração do ácido para-aminohipúrico (HAP)8,9,10 e, em tempos mais recentes, por técnicas de imagem como ultrassonografia 9,11,12, RM4,13 e PET-CT14,15 que fornecem imagens instantâneas úteis de cada rim e que podem acompanhar a progressão da doença. É um desafio avaliar a RBF em animais de pequeno porte por ultrassonografia ou ressonância magnética sem anestesia. Tem sido impossível medir continuamente a RBF sob condições conscientes no mesmo rato durante períodos prolongados.
O presente protocolo, portanto, desenvolveu técnicas que possibilitam medidas contínuas simultâneas de 24 h/dia de eritrócitos, que foram combinadas com métodos de medida contínua da pressão arterial para ratos em movimento livre, conforme descrito anteriormente 16,17,18,19,20,21 . Esta tecnologia permite a avaliação temporal da RBF em vários modelos de ratos para estudar as relações de causa-efeito em vários distúrbios renais no futuro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

Os rins desempenham um papel crucial na manutenção da homeostase dos fluidos corporais. A regulação do fluxo sanguíneo renal (RBF) é essencial para as funções vitais da filtração e metabolismo na função renal. Muitos estudos agudos têm sido realizados em animais anestesiados para medir a RBF sob várias condições para determinar os mecanismos responsáveis pela regulação da perfusão renal. No entanto, por razões técnicas, não foi possível medir a RBF continuamente (24 h/dia) em ratos não anestesiados sem restrições durante períodos prolongados. Esses métodos permitem a determinação contínua da RBF ao longo de muitas semanas, ao mesmo tempo em que registram simultaneamente a pressão arterial (PA) com cateteres implantados (cheios de líquido ou por telemetria). O monitoramento de RBF é realizado com ratos colocados em uma gaiola de ratos servo-controlada circular que permite o movimento desenfreado do rato durante todo o estudo. Ao mesmo tempo, o emaranhamento de cabos da sonda de fluxo e cateteres arteriais é impedido. Os ratos são primeiro instrumentados com uma colocação de sonda de fluxo ultra-sônica na artéria renal esquerda e um cateter arterial implantado na artéria femoral direita. Estes são encaminhados por via subcutânea para a nuca e conectados ao medidor de vazão e ao transdutor de pressão, respectivamente, para medir a RBF e a PA. Após a implantação cirúrgica, os ratos são imediatamente colocados na gaiola para se recuperar por pelo menos uma semana e estabilizar as gravações da sonda ultra-sônica. A coleta de urina também é viável nesse sistema. Os procedimentos cirúrgicos e pós-cirúrgicos para monitoramento contínuo são demonstrados neste protocolo.

Os dados de pressão arterial média (Figura 1A) e os dados de fluxo sanguíneo (Figura 1B) de um rato macho representativo sensível ao sal de Dahl são mostrados. Os ratos sensíveis ao sal de Dahl são mantidos em uma colônia e criados no Medical College of Wisconsin. A cirurgia foi feita com a idade de 8 semanas, e o peso corporal era de 249 g no momento da cirurgia. Os ratos foram alimentados com uma dieta de NaCl de 0,4%, e a dieta foi alterada para uma d...

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Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

O presente protocolo descreve uma medida contínua a longo prazo do fluxo sanguíneo renal em ratos conscientes e o registro simultâneo da pressão arterial com cateteres implantados (cheios de líquido ou por telemetria).

Medição Contínua a Longo Prazo do Fluxo Sanguíneo Renal em Ratos Conscientes

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

O registro contínuo do fluxo sanguíneo renal em ratos instrumentados nos permite determinar temporariamente a sequência de eventos que levam ao processo de doença que estamos estudando. No nosso caso, é hipertensão e estamos tentando determinar se uma redução do fluxo sanguíneo renal, que ocorre na hipertensão, precede ou é uma consequência da pressão alta. O sistema que demonstraremos hoje e a preparação do animal é realmente projetado para permitir uma determinação contínua de 24 horas do fluxo sanguíneo renal por muitas semanas de cada vez para estudar eventos crônicos e estudar o rato em seu ambiente doméstico, gaiolas.Tal como acontece com todas as técnicas cirúrgicas, prática, paciência e atenção aos detalhes, seremos obrigados a dominar esses procedimentos até que o implemento possa ser realizado a tempo. Para começar a raspar todo o abdômen em uma região no cochilo em torno da sétima vértebra cervical de um rato anestesiado com um cortador elétrico. Após o barbear, limpe a área três vezes alternando com iodopovidona a 10% e etanol a 70%.Coloque o rato na posição prona. Faça um corte de um centímetro com o bisturi na soneca e no flanco esquerdo. Em seguida, realize uma dissecção contundente com pinça hemostática no espaço subcutâneo claro da incisão do flanco até a parte de trás do pescoço.Anexe o botão da pele à sonda de fluxo e passe a sonda de fluxo através deste túnel subcutâneo do pescoço até a incisão do flanco com pinça hemostática. Em seguida, coloque o rato na posição supina e faça uma incisão abdominal de quatro a cinco centímetros na linha média. Dissecar a área ao redor da artéria renal esquerda com pinça de microdissecação curva expondo o espaço suficiente para colocar a sonda de fluxo.Em seguida, sem rodeios, perfure o músculo lombar quadrado esquerdo com a pinça hemostática e puxe a cabeça da sonda de fluxo através da artéria renal sob o tecido adiposo para a cavidade abdominal. Coloque a malha de fibra de poliéster na parede abdominal. Conecte a ponta da sonda de fluxo à artéria renal esquerda e conecte-a ao medidor de fluxo.Adicione um pouco de gel ao redor da ponta da sonda e o valor da taxa de fluxo aparecerá no medidor de vazão. Cole a malha de fibra de poliéster presa à sonda na parede abdominal usando adesivo de tecido e segure até secar e colar. Uma vez que a sonda esteja no lugar, desconecte a sonda de fluxo do medidor de vazão e cubra o abdômen com gaze embebida em solução salina.Para suturar a sonda, vire o rato para a posição prona. Anexe o botão de pele à sonda de fluxo e faça um loop circular da sonda de fluxo subcutaneamente no flanco. Suture a incisão no pescoço e o botão na pele.Em seguida, suture o flanco com quatro suturas cirúrgicas ott. Conecte a sonda de fluxo ao medidor de fluxo novamente e gire o rato de volta à posição dorsal para verificar o fluxo sanguíneo renal. Faça ajustes finais da sonda de fluxo para otimizar sua posição na artéria renal.Finalmente, suture o músculo com três ott seda na pele com quatro ott sutura cirúrgica. Quando o rato estiver totalmente recuperado da anestesia, o rato retornará a um sistema de enjaulamento de resposta ao movimento, conecte a sonda de fluxo ao medidor de fluxo sanguíneo e permita um período de recuperação de cerca de uma semana para estabilizar a sonda e a medição de fluxo. A pressão arterial média e o fluxo sanguíneo foram continuamente medidos em ratos sensíveis ao sal sem brilho, enquanto mudavam de uma dieta baixa para alta em sal.Estes dados representativos de um rato macho foram registados durante um período de quatro semanas e são apresentados com uma média de minutos. Observou-se clara diferença diurna na pressão arterial média e no fluxo sanguíneo. Enquanto a pressão arterial aumenta com uma dieta rica em sal, o fluxo sanguíneo tende a diminuir, em vez de aumentar, sugerindo aumento da resistência vascular renal.A grande vantagem desta técnica é que ela pode estudar o fluxo sanguíneo renal durante longos períodos de tempo e, mais importante, em condições não anestesiadas. Isso é de grande importância ao estudar a resposta a vários estímulos, onde você pode usar o mesmo animal sob condições controladas não anestesiadas e seguir esse mesmo animal por curtos períodos ou períodos muito longos para ver qual é a resposta a algum estímulo específico ou doença patológica.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Automated Medição da microcirculação sanguínea velocidade na Pulmonar Metástases of Rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Medicina

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Detecção precoce de Induzida por Medicamentos Renal hemodinâmica Disfunção Usando ultrassonografia Tecnologia em Ratos

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Avaliação transcutânea da função renal em roedores conscientes

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Cirurgia de colocação de cateteres para Cardiovascular Testes exercício de longo prazo em Suínos

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Longo prazo medição de pressão arterial em ratos movimentando-se livremente utilizar telemetria

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nova abordagem para gravação simultânea da atividade do nervo simpático Renal e pressão arterial com infusão intravenosa em consciente, ratos desenfreados.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Gravação simultânea de eletrocardiografia e sangue invasiva pressão medida em ratos

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

A amostragem contínua do sangue no tomography de emissão de Positron animal pequeno/tomography computado permite a medida da função de entrada arterial

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...