Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
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Este estudio fue apoyado por subvenciones para investigación científica (P01 HL116264, RO1 HL137748). Los autores desean agradecer a Theresa Kurth por sus consejos y ayuda para mantener el entorno experimental como gerente del laboratorio.

El protocolo está aprobado por el Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Para los experimentos se utilizaron ratas Dahl sensibles a la sal (machos y hembras), ~ 8 semanas de edad, 200-350 g.
1. Preparación de animales
<ol><li>Instale un sistema de jaula de respuesta de movimiento para la rata, un módulo de flujo perivascular, una bomba de jeringa, un dispositivo de grabación y un software (consulte la Tabla de materiales) en la s...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

El presente protocolo describe una técnica que utiliza instrumentación disponible comercialmente para registrar RBF y presión arterial continuamente durante muchas semanas. Además, la orina se puede recoger utilizando el dispositivo descrito en el paso 1.1. También se puede utilizar para evaluar metabolitos en la orina y, cuando se implanta un catéter arterial, muestreo de sangre para su análisis.
Tradicionalmente, las mediciones de RBF se han obtenido de forma aguda en animales anestes...

Los riñones son sólo el 0,5% del peso corporal pero ricos en flujo sanguíneo, recibiendo el 20%-25% del gasto cardíaco total1. La regulación del flujo sanguíneo renal (RBF) es fundamental para la función renal, los fluidos corporales y la homeostasis electrolítica. La importancia de la regulación del flujo sanguíneo para el riñón está muy bien ilustrada por el aumento sustancial de RBF en el riñón restante después de la nefrectomía unilateral 2,3,4 y por las reducciones de RBF que ocurren en la insuficiencia renal 5,6,7. Si tales cambios en RBF ocurren en respuesta a alteraciones en la función renal o una disminución en la función debido a la reducción de RBF ha sido difícil de determinar en animales anestesiados preparados quirúrgicamente o sujetos humanos. Se requieren estudios temporales en los que los eventos puedan determinarse antes y después de un cambio definido y observarse en el mismo animal durante la progresión de los eventos. En los estudios en animales y humanos, la RBF se ha estimado indirectamente por el aclaramiento del ácido para-amino hipúrico (HAP)8,9,10 y en tiempos más recientes por técnicas de imagen como ultrasonido9,11,12, MRI4,13 y PET-CT 14,15 que proporcionan imágenes instantáneas útiles de cada riñón y que pueden seguir la progresión de la enfermedad. Es difícil evaluar RBF en animales pequeños mediante ultrasonido o resonancias magnéticas sin anestesia. Ha sido imposible medir continuamente RBF en condiciones conscientes en la misma rata durante períodos prolongados.
El presente protocolo, por lo tanto, desarrolló técnicas que permiten mediciones simultáneas continuas de 24 h / día de RBF, que se ha combinado con métodos de medición continua de la presión arterial para ratas en movimiento libre como se describió anteriormente 16,17,18,19,20,21 . Esta tecnología permite la evaluación temporal de RBF en varios modelos de ratas para estudiar las relaciones causa-efecto en diversos trastornos renales en el futuro.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

Los riñones juegan un papel crucial en el mantenimiento de la homeostasis de los fluidos corporales. La regulación del flujo sanguíneo renal (RBF) es esencial para las funciones vitales de filtración y metabolismo en la función renal. Se han llevado a cabo muchos estudios agudos en animales anestesiados para medir la RBF en diversas condiciones para determinar los mecanismos responsables de la regulación de la perfusión renal. Sin embargo, por razones técnicas, no ha sido posible medir RBF continuamente (24 h / día) en ratas no restringidas no anestesiadas durante períodos prolongados. Estos métodos permiten la determinación continua de RBF durante muchas semanas mientras que también registran simultáneamente la presión arterial (PA) con catéteres implantados (llenos de líquido o por telemetría). El monitoreo de RBF se lleva a cabo con ratas colocadas en una jaula circular servocontrolada para ratas que permite el movimiento sin restricciones de la rata durante todo el estudio. Al mismo tiempo, se evita el enredo de cables de la sonda de flujo y catéteres arteriales. Las ratas se instrumentan primero con una sonda de flujo ultrasónica colocada en la arteria renal izquierda y un catéter arterial implantado en la arteria femoral derecha. Estos se dirigen por vía subcutánea a la nuca y se conectan al medidor de flujo y al transductor de presión, respectivamente, para medir RBF y BP. Después de la implantación quirúrgica, las ratas se colocan inmediatamente en la jaula para recuperarse durante al menos una semana y estabilizar las grabaciones de la sonda ultrasónica. La recolección de orina también es factible en este sistema. Los procedimientos quirúrgicos y postquirúrgicos para el monitoreo continuo se demuestran en este protocolo.

Se muestran los datos de presión arterial media (Figura 1A) y los datos de flujo sanguíneo (Figura 1B) de una rata Dahl sensible a la sal macho representativa. Las ratas Dahl sensibles a la sal se mantienen en una colonia y se crían en el Colegio Médico de Wisconsin. La cirugía se realizó a la edad de 8 semanas, y el peso corporal era de 249 g en el momento de la cirugía. Las ratas fueron alimentadas con una dieta de NaCl al 0,4%, y la dieta se cambió a ...

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Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

El presente protocolo describe una medición continua a largo plazo del flujo sanguíneo renal en ratas conscientes y el registro simultáneo de la presión arterial con catéteres implantados (llenos de líquido o por telemetría).

Medición continua a largo plazo del flujo sanguíneo renal en ratas conscientes

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

El registro continuo del flujo sanguíneo renal en ratas instrumentadas nos permite determinar temporalmente la secuencia de eventos que conducen al proceso de la enfermedad que estamos estudiando. En nuestro caso, es hipertensión y estamos tratando de determinar si una reducción del flujo sanguíneo renal, que ocurre en la hipertensión, precede o es una consecuencia de la presión arterial alta. El sistema que demostraremos hoy y la preparación del animal está realmente diseñado para permitir una determinación continua de 24 horas del flujo sanguíneo renal durante muchas semanas a la vez para estudiar eventos crónicos y estudiar a la rata en su entorno doméstico, jaulas.Al igual que con todas las técnicas quirúrgicas, la práctica, la paciencia y la atención al detalle, tendremos que dominar estos procedimientos hasta que el implemento se pueda llevar a cabo a tiempo. Para comenzar a afeitarse todo el abdomen en una región en la siesta alrededor de la séptima vértebra cervical de una rata anestesiada con un cortapelos eléctrico. Después del afeitado, limpie el área tres veces alternando con 10% de povidona yodada y 70% de etanol.Coloque la rata en posición prona. Haz un corte de un centímetro con el bisturí en la siesta y el flanco izquierdo. Luego realice una disección contundente con fórceps hemostáticos en un espacio subcutáneo libre desde la incisión del flanco hasta la parte posterior del cuello.Conecte el botón de piel a la sonda de flujo y pase la sonda de flujo a través de este túnel subcutáneo desde el cuello hasta la incisión del flanco con pinzas hemostáticas. Luego coloque la rata en posición supina y haga una incisión abdominal de cuatro a cinco centímetros en la línea media. Diseccionar el área alrededor de la arteria renal izquierda con pinzas microdisectadoras curvas que expongan el espacio suficiente para colocar la sonda de flujo.Luego, sin rodeos, perfore el músculo lumbar cuadrado izquierdo con los fórceps hemostáticos y tire de la cabeza de la sonda de flujo a través de la arteria renal debajo del tejido graso hacia la cavidad abdominal. Coloque la malla de fibra de poliéster en la pared abdominal. Enganche la punta de la sonda de flujo a la arteria renal izquierda y conéctela al medidor de flujo.Agregue un poco de gel alrededor de la punta de la sonda y el valor del caudal aparecerá en el medidor de flujo. Pegue la malla de fibra de poliéster unida a la sonda a la pared abdominal con adhesivo tisular y manténgala hasta que esté seca y adherida. Una vez que la sonda esté en su lugar, desconecte la sonda de flujo del medidor de flujo y cubra el abdomen con una gasa salina empapada.Para suturar la sonda, gire la rata a la posición prona. Conecte el botón de piel a la sonda de flujo y haga un bucle circular de la sonda de flujo por vía subcutánea en el flanco. Suturar la incisión en el cuello y el botón en la piel.Luego suture el flanco con cuatro suturas quirúrgicas ott. Conecte la sonda de flujo al medidor de flujo nuevamente y vuelva a colocar la rata en la posición dorsal para verificar el flujo sanguíneo renal. Realice ajustes finales de la sonda de flujo para optimizar su posición en la arteria renal.Finalmente, suture el músculo con tres ott de seda en la piel con cuatro ott de sutura quirúrgica. Cuando la rata esté completamente recuperada de la anestesia, devuelva la rata a un sistema de jaula de respuesta de movimiento, conecte la sonda de flujo al medidor de flujo sanguíneo y permita un período de recuperación de aproximadamente una semana para estabilizar la sonda y la medición del flujo. La presión arterial media y el flujo sanguíneo se midieron continuamente en ratas sensibles a la sal mientras cambiaban de una dieta baja a alta en sal.Estos datos representativos de una rata macho se registraron durante un período de cuatro semanas y se muestran con un promedio de minutos. Se observó una clara diferencia diurna en la presión arterial media y el flujo sanguíneo. Mientras que la presión arterial aumenta con una dieta alta en sal, el flujo sanguíneo tiende a disminuir en lugar de aumentar, lo que sugiere un aumento de la resistencia vascular renal.La gran ventaja de esta técnica es que puede estudiar el flujo sanguíneo renal durante largos períodos de tiempo, y lo más importante en condiciones no anestesiadas. Esto es de gran importancia cuando se estudia la respuesta a diversos estímulos donde se puede utilizar el mismo animal bajo condiciones controladas no anestesiadas y seguir a ese mismo animal durante períodos cortos o períodos muy largos para ver cuál es la respuesta a algún estímulo particular o enfermedad patológica.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Medición Automatizada de la microcirculación de la sangre Velocidad del caudal en metástasis pulmonar de ratas

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Investigación

Medicina

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

La detección precoz de la disfunción renal hemodinámico inducido por medicamentos Usando tecnología ecográfica en ratas

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Evaluación transcutánea de la función renal en roedores Conscious

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

La colocación quirúrgica de catéteres de larga duración cardiovascular prueba de esfuerzo en los cerdos

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

A largo plazo de medida de la presión arterial en ratones con libertad de movimientos mediante telemetría

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nuevo enfoque para la grabación simultánea de la actividad nerviosa simpática Renal y presión arterial con la infusión intravenosa en consciente, libre de ratones.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Grabación simultánea de electrocardiografía y sangre invasiva presión medida en ratas

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

El muestreo sanguíneo continuo en tomografía por emisión de positrones de animales pequeños permite la medición de la función de entrada arterial

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...