Name: long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats
Uploaded: 2022-02-08T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Denna studie stöddes av bidrag för vetenskaplig forskning (P01 HL116264, RO1 HL137748). Författarna vill tacka Theresa Kurth för hennes råd och hjälp med att upprätthålla den experimentella miljön som labbchef.

Protokollet är godkänt av Medical College of Wisconsin Institutional Animal Care and Use. Dahl saltkänsliga råttor (hanar och honor), ~8 veckors ålder, 200-350 g, användes för experimenten.
1. Beredning av djur
<ol><li>Installera ett rörelseresponssystem för råttan, en perivaskulär flödesmodul, sprutpump, inspelningsanordning och programvara (se materialförteckning) i djurrummet.</li>
	<li>Placera råttorna i buren för att bli bekanta med milj?...

<ol>
	<li>Chonchol, M., Smogorzewski, M., Stubbs, J., Yu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Brenner &amp; Rector's The Kidney. 11, (2019).</li><li>Chen, J. -. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatidylinositol+3-kinase+signaling+determines+kidney+size.">Phosphatidylinositol 3-kinase signaling determines kidney size.</a> Journal of Clinical Investigation. 125 (6), 2429-2444 (2015).</li><li>Sigmon, D. H., Gonzalez-Feldman, E., Cavasin, M. A., Potter, D. L., Beierwaltes, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+nitric+oxide+in+the+renal+hemodynamic+response+to+unilateral+nephrectomy.">Role of nitric oxide in the renal hemodynamic response to unilateral nephrectomy.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 15 (6), 1413-1420 (2004).</li><li>Romero, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+measurement+of+renal+blood+flow+by+magnetic+resonance+imaging+in+rats.">Noninvasive measurement of renal blood flow by magnetic resonance imaging in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 314 (1), 99-106 (2018).</li><li>Basile, D. P., Anderson, M. D., Sutton, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+acute+kidney+injury.">Pathophysiology of acute kidney injury.</a> Comprehensive Physiology. 2 (2), 1303-1353 (2012).</li><li>Regan, M. C., Young, L. S., Geraghty, J., Fitzpatrick, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+renal+blood+flow+in+normal+and+disease+states.">Regional renal blood flow in normal and disease states.</a> Urological Research. 23 (1), 1-10 (1995).</li><li>Ter Wee, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+calcium+antagonists+on+renal+hemodynamics+and+progression+of+nondiabetic+chronic+renal+disease.">Effects of calcium antagonists on renal hemodynamics and progression of nondiabetic chronic renal disease.</a> Archives of Internal Medicine. 154 (11), 1185 (1994).</li><li>Mazze, R. I., Cousins, M. J., Barr, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+effects+and+metabolism+of+isoflurane+in+man.">Renal effects and metabolism of isoflurane in man.</a> Anesthesiology. 40 (6), 536-542 (1974).</li><li>Corrigan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PAH+extraction+and+estimation+of+plasma+flow+in+human+postischemic+acute+renal+failure.">PAH extraction and estimation of plasma flow in human postischemic acute renal failure.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 277 (2), 312-318 (1999).</li><li>Laroute, V., Lefebvre, H. P., Costes, G., Toutain, P. -. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+and+effective+renal+plasma+flow+in+the+conscious+beagle+dog+by+single+intravenous+bolus+of+iohexol+and+p-aminohippuric+acid.">Measurement of glomerular filtration rate and effective renal plasma flow in the conscious beagle dog by single intravenous bolus of iohexol and p-aminohippuric acid.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 41 (1), 17-25 (1999).</li><li>Wei, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+renal+blood+flow+with+contrast-enhanced+ultrasound.">Quantification of renal blood flow with contrast-enhanced ultrasound.</a> Journal of the American College of Cardiology. 37 (4), 1135-1140 (2001).</li><li>Cao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+ultrasound+for+assessing+renal+perfusion+impairment+and+predicting+acute+kidney+injury+to+chronic+kidney+disease+progression.">Contrast-enhanced ultrasound for assessing renal perfusion impairment and predicting acute kidney injury to chronic kidney disease progression.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 27 (17), 1397-1411 (2017).</li><li>Markl, M., Frydrychowicz, A., Kozerke, S., Hope, M., Wieben, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=4D+flow+MRI.">4D flow MRI.</a> Journal of Magnetic Resonance Imaging. 36 (5), 1015-1036 (2012).</li><li>Juillard, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+renal+blood+flow+measurement+by+positron+emission+tomography+in+patients+with+CRF.">Dynamic renal blood flow measurement by positron emission tomography in patients with CRF.</a> American Journal of Kidney Diseases. 40 (5), 947-954 (2002).</li><li>Ju&#225;rez-Orozco, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+cardiac+and+renal+perfusion+in+a+rat+model+with+13N-NH3+micro-PET.">Imaging of cardiac and renal perfusion in a rat model with 13N-NH3 micro-PET.</a> The International Journal of Cardiovascular Imaging. 31 (1), 213-219 (2015).</li><li>Mori, T., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+pressure+in+angiotensin+II-induced+renal+injury.">Role of pressure in angiotensin II-induced renal injury.</a> Hypertension. 43 (4), 752-759 (2004).</li><li>Mori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+perfusion+pressure+accelerates+renal+injury+in+salt-sensitive+hypertension.">High perfusion pressure accelerates renal injury in salt-sensitive hypertension.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 19 (8), 1472-1482 (2008).</li><li>Polichnowski, A. J., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressure-induced+renal+injury+in+angiotensin+II+versus+norepinephrine-induced+hypertensive+rats.">Pressure-induced renal injury in angiotensin II versus norepinephrine-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 54 (6), 1269-1277 (2009).</li><li>Polichnowski, A. J., Jin, C., Yang, C., Cowley, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+renal+perfusion+pressure+versus+angiotensin+II+renal+oxidative+stress+in+angiotensin+II-induced+hypertensive+rats.">Role of renal perfusion pressure versus angiotensin II renal oxidative stress in angiotensin II-induced hypertensive rats.</a> Hypertension. 55 (6), 1425-1430 (2010).</li><li>Evans, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+perfusion+pressure+drives+renal+T-cell+infiltration+in+the+dahl+salt-sensitive+rat.">Increased perfusion pressure drives renal T-cell infiltration in the dahl salt-sensitive rat.</a> Hypertension. 70 (3), 543-551 (2017).</li><li>Shimada, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+perfusion+pressure+determines+infiltration+of+leukocytes+in+the+kidney+of+rats+with+angiotensin+II-induced+hypertension.">Renal perfusion pressure determines infiltration of leukocytes in the kidney of rats with angiotensin II-induced hypertension.</a> Hypertension. 76 (3), 849-858 (2020).</li><li>Cousins, M. J., Mazze, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia,+surgery+and+renal+function:+Immediate+and+delayed+effects.">Anaesthesia, surgery and renal function: Immediate and delayed effects.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 1 (5), 355-373 (1973).</li><li>Cousins, M. J., Skowronski, G., Plummer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anaesthesia+and+the+kidney.">Anaesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and Intensive Care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Schiffer, T. A., Christensen, M., Gustafsson, H., Palm, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+inactin+on+kidney+mitochondrial+function+and+production+of+reactive+oxygen+species.">The effect of inactin on kidney mitochondrial function and production of reactive oxygen species.</a> PLOS ONE. 13 (11), 0207728 (2018).</li><li>Evans, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+renal+blood+flow+measurement+in+dogs+by+transit-time+ultrasound+flowmetry.">Chronic renal blood flow measurement in dogs by transit-time ultrasound flowmetry.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (1), 33-39 (1997).</li><li>Bell, T. D., DiBona, G. F., Biemiller, R., Brands, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuously+measured+renal+blood+flow+does+not+increase+in+diabetes+if+nitric+oxide+synthesis+is+blocked.">Continuously measured renal blood flow does not increase in diabetes if nitric oxide synthesis is blocked.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (5), 1449-1456 (2008).</li></ol>

Det nuvarande protokollet beskriver en teknik som använder kommersiellt tillgänglig instrumentering för att registrera RBF och arteriellt tryck kontinuerligt under många veckor. Dessutom kan urin samlas in med hjälp av den anordning som beskrivs i steg 1.1. Det kan också användas för att utvärdera metaboliter i urinen och, när en arteriell kateter implanteras, blodprovtagning för analys.
Traditionellt har RBF-mätningar erhållits akut hos kirurgiskt beredda bedövade djur eller upp...

Njurarna är bara 0,5% av kroppsvikten men rika på blodflödet och får 20%-25% av den totala hjärtminutvolymen1. Regleringen av njurblodflödet (RBF) är central för njurfunktion, kroppsvätska och elektrolythomeostas. Betydelsen av blodflödesreglering för njuren illustreras fint av den betydande ökningen av RBF i den återstående njuren efter ensidig nefrektomi 2,3,4 och av minskningarna av RBF som uppstår vid njursvikt 5,6,7. Huruvida sådana förändringar i RBF inträffar som svar på förändringar i njurfunktionen eller en minskning av funktionen på grund av minskning av RBF har varit utmanande att fastställa hos sövda kirurgiskt beredda djur eller människor. Tidsstudier krävs där händelserna kan bestämmas före och efter en definierad förändring och observeras hos samma djur under händelseförloppet. I djur- och humanstudierna har RBF uppskattats indirekt genom clearance av para-amino hippurinsyra (PAH)8,9,10 och på senare tid genom avbildningstekniker som ultraljud9,11,12, MRI4,13 och PET-CT 14,15 som ger användbara ögonblicksbilder av varje njure och som kan följa sjukdomsprogressionen. Det är utmanande att utvärdera RBF hos små djur genom ultraljud eller MR-skanningar utan anestesi. Det har varit omöjligt att kontinuerligt mäta RBF under medvetna förhållanden hos samma råtta under längre perioder.
Detta protokoll utvecklade därför tekniker som möjliggör samtidiga kontinuerliga 24 h/dag mätningar av RBF, vilket har kombinerats med kontinuerliga blodtrycksmätningsmetoder för fritt rörliga råttor som beskrivits tidigare 16,17,18,19,20,21 . Denna teknik möjliggör tidsmässig utvärdering av RBF i olika modeller av råttor för att studera orsakseffektrelationer vid olika njursjukdomar i framtiden.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1RB probe</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>1RB</td>
			<td>ultrasonic flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Avrio Health</td>
			<td></td>
			<td>povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR-LAB</td>
			<td>ZooPharm</td>
			<td></td>
			<td>Buprenorphine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin</td>
			<td>APOTEX</td>
			<td>NDC 60505</td>
			<td>Cefazolin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crile Hemostats</td>
			<td>Fine Surgical Instruments</td>
			<td>13004-14</td>
			<td>Hemostats for blunt dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794</td>
			<td>Isoflurane</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium Clear PVC cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td></td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mersilene polyester fiber mesh</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td></td>
			<td>polyester fiber mesh</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MetriCide28</td>
			<td>Metrex</td>
			<td>SKU 10-2805</td>
			<td>2.5% glutaraldehyde</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Renathane 0.025 x 0.012</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>MRE 025</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MINI HYPE-WIPE</td>
			<td>Current Technologies</td>
			<td>#9803</td>
			<td>1% sodium hypochlorite</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oatey Medium Clear PVC Cement</td>
			<td>Oatey</td>
			<td>#31018</td>
			<td>PVC cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHD2000 syringe pump</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>71-2000</td>
			<td>syringe pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ponemah software</td>
			<td>DSI</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision 3630 Tower</td>
			<td>Dell</td>
			<td></td>
			<td>Computer for recording</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Raturn Stand-Alone System</td>
			<td>BASi</td>
			<td>MD-1407</td>
			<td>a movement response caging system</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RenaPulse High Fidelity Pressure Tubing 0.040 x 0.025</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RPT 040</td>
			<td>use for catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone cuff</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>AAPC102</td>
			<td>skin button</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical lubricant sterile bacteriostatic</td>
			<td>Fougera</td>
			<td>0168-0205-36</td>
			<td>gell for flow probe</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tergazyme</td>
			<td>Alconox</td>
			<td></td>
			<td>protease contained anionic detergent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TS420 Perivascular Flow Module</td>
			<td>Transonic</td>
			<td>TS420</td>
			<td>perivascular flow module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vetbond</td>
			<td>3M</td>
			<td>1469SB</td>
			<td>tissue adhesive</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>WinDaq software</td>
			<td>DATAQ</td>
			<td></td>
			<td>recording software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

long-term continuous measurement of renal blood flow in conscious rats

Njurarna spelar en avgörande roll för att upprätthålla homeostas av kroppsvätskor. Regleringen av njurblodflödet (RBF) är avgörande för de vitala funktionerna för filtrering och metabolism i njurfunktionen. Många akuta studier har utförts på bedövade djur för att mäta RBF under olika förhållanden för att bestämma mekanismer som är ansvariga för regleringen av njurperfusion. Av tekniska skäl har det dock inte varit möjligt att mäta RBF kontinuerligt (24 h/dag) hos ohämmade oestetiserade råttor under längre perioder. Dessa metoder möjliggör kontinuerlig bestämning av RBF under många veckor samtidigt som blodtrycket (BP) registreras med implanterade katetrar (vätskefyllda eller genom telemetri). RBF-övervakning utförs med råttor placerade i en cirkulär servokontrollerad råttbur som möjliggör råttans ohämmade rörelse under hela studien. Samtidigt förhindras trassel av kablar från flödessonden och arteriella katetrar. Råttor är först instrumenterade med en ultraljud flöde sond placering på vänster njurartär och en arteriell kateter implanteras i den högra lårbensartären. Dessa dirigeras subkutant till nacken och ansluts till flödesmätaren respektive tryckgivaren för att mäta RBF och BP. Efter kirurgisk implantation placeras råttor omedelbart i buret för att återhämta sig i minst en vecka och stabilisera ultraljudssondinspelningarna. Urinuppsamling är också möjlig i detta system. De kirurgiska och postkirurgiska ingreppen för kontinuerlig övervakning demonstreras i detta protokoll.

Medelvärdet för arteriella tryckdata (figur 1A) och blodflödesdata (figur 1B) från en representativ Dahl-saltkänslig råtta visas. De Dahl saltkänsliga råttorna hålls i en koloni och föds upp vid Medical College of Wisconsin. Operationen gjordes vid 8 veckors ålder och kroppsvikten var 249 g vid operationen. Råttor matades med en 0,4% NaCl-diet, och kosten ändrades till en 4% NaCl-diet vid 10 års ålder. Mätningarna fortsatte i 3 veckor på en 4% N...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats at JoVE.com

Long-Term Continuous Measurement of Renal Blood Flow in Conscious Rats

Detta protokoll beskriver en långsiktig kontinuerlig mätning av njurblodflödet hos medvetna råttor och samtidigt registrering av blodtryck med implanterade katetrar (vätskefyllda eller genom telemetri).

Långsiktig kontinuerlig mätning av njurblodflödet hos medvetna råttor

The kidneys play a crucial role in maintaining the homeostasis of body fluids. The regulation of renal blood flow (RBF) is essential to the vital ...

Den kontinuerliga registreringen av njurblodflödet hos instrumenterade råttor gör att vi tillfälligt kan bestämma händelseförloppet som leder fram till sjukdomsprocessen som vi studerar. I vårt fall är det högt blodtryck och vi försöker avgöra om en minskning av njurblodflödet, som uppstår vid högt blodtryck, föregår eller är en följd av det höga blodtrycket. Systemet som vi kommer att demonstrera idag och förberedelsen av djuret är verkligen utformat för att möjliggöra en kontinuerlig 24-timmars bestämning av njurblodflödet under många veckor i taget för att studera kroniska händelser och för att studera råttan i deras hemmiljö, burar.Som med alla kirurgiska tekniker, övning, tålamod och uppmärksamhet på detaljer, kommer vi att behöva behärska dessa procedurer tills implementeringen kan utföras i tid. Att börja raka hela buken i en region på tuppluren runt den sjunde livmoderhalsen hos en bedövad råtta med en elektrisk klippare. Efter rakning, torka av området tre gånger alternerande med 10% povidonjod och 70% etanol.Placera råttan i benäget läge. Gör ett snitt på en centimeter med skalpellen på tuppluren och vänster flank. Utför sedan en trubbig dissektion med hemostatiska pincett i klart subkutant utrymme från flanksnittet till baksidan av nacken.Fäst hudknappen på flödessonden och för flödessonden genom denna subkutana tunnel från nacken till flanksnittet med hemostatiska pincett. Placera sedan råttan i ryggläge och gör ett snitt på fyra till fem centimeter mittlinjen i buken. Dissekera området runt den vänstra njurartären med böjda mikrodissekerande pincett som exponerar utrymmet som är tillräckligt för att placera flödessonden.Genomborra sedan trubbigt den vänstra quadratus ländryggsmuskeln med de hemostatiska tångarna och dra huvudet på flödessonden genom njurartären under fettvävnaden i bukhålan. Placera polyesterfibernätet på bukväggen. Haka spetsen på flödessonden till vänster njurartär och anslut den till flödesmätaren.Tillsätt lite gel runt sondspetsen och värdet på flödeshastigheten visas på flödesmätaren. Limma polyesterfibernätet som är fäst vid sonden på bukväggen med vävnadslim och håll det torrt och bundet. När sonden är på plats, koppla bort flödessonden från flödesmätaren och täck buken med saltlösningsindränkt gasväv.För att suturera sonden, vrid råttan till det benägna läget. Fäst skalknappen på flödessonden och gör en cirkulär slinga av flödessonden subkutant vid flanken. Suturera snittet i nacken och knappen till huden.Suturera sedan flanken med fyra ott kirurgiska suturer. Anslut flödessonden till flödesmätaren igen och vrid råttan tillbaka till dorsal läge för att kontrollera njurblodflödet. Gör justeringar av slutflödessonden för att optimera dess position på njurartären.Slutligen suturera muskeln med tre ottsilke i huden med fyra ott kirurgisk sutur. När råttan är helt återställd från anestesi återför råttan till ett rörelseresponssystem som ansluter flödessonden till blodflödesmätaren och tillåter en återhämtningsperiod på ungefär en vecka för att stabilisera sonden och flödesmätningen. Det genomsnittliga artärtrycket och blodflödet mättes kontinuerligt hos tråkiga saltkänsliga råttor medan de bytte från en låg till hög saltdiet.Dessa representativa data från en hanråtta registrerades under en period av fyra veckor och visas med ett minutmedelvärde. En tydlig daglig skillnad observerades i genomsnittligt arteriellt tryck och blodflöde. Medan blodtrycket ökar med en hög saltdiet tenderar blodflödet att minska snarare än att öka tyder på ökad renal vaskulär resistens.Den stora fördelen med denna teknik är att den kan studera njurblodflödet under långa tidsperioder, och viktigast av allt vid obedövade förhållanden. Detta är av stor betydelse när man studerar svar på olika stimuli där man kan använda samma djur under kontrollerade oestetiserade förhållanden och följa samma djur under korta perioder eller mycket långa perioder för att se vad svaret är på någon särskild stimulans eller patologisk sjukdom.

Research

JoVE Journal

Medicine

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Automatiserad Mätning av blodcirkulationens Blood Flow Velocity i Lung Metastaser av råttor

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Tidig upptäckt av läkemedelsinducerad njur hemodynamisk dysfunktion Använda sonografisk teknik i råttor

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Transkutan bedömning av njurfunktion i medvetna Gnagare

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

Kirurgisk placering av katetrar för långsiktigt konditionsträning Testning i svin

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

Långsiktig blodtrycksmätning i fritt rörliga Möss Använda Telemetry

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Ny metod för samtidig inspelning av nedsatt sympatisk nervaktivitet och blodtryck med intravenös Infusion i medveten, ohämmad möss.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Samtidiga EKG inspelning och invasiv blod tryck mätning hos råttor

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Continuous Blood Sampling in Small Animal Positron Emission Tomography/Computed Tomography Enables the Measurement of the Arterial Input Function

Kontinuerlig blodprovstagning i små djur positron emissions tomografi/datortomografi möjliggör mätning av arteriell input funktion

For quantitative analysis and bio-kinetic modeling of positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) data, the determination of the temporal ...