Name: using a cell-tracer injection to investigate the origin of neointima-forming cells in a rat saccular side wall model
Uploaded: 2022-03-16T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using a Cell-Tracer Injection to Investigate the Origin of Neointima-Forming Cells in a Rat Saccular Side Wall Model at JoVE.com

يشكر المؤلفون أليساندرا بيرجادانو ، DVM ، دكتوراه ، على الإشراف المتفاني على صحة الحيوان على المدى الطويل. تم دعم هذا العمل من قبل صناديق البحوث التابعة لمجلس البحوث ، Kantonsspital Aarau ، Aarau ، سويسرا ، والمؤسسة الوطنية السويسرية للعلوم SNF (310030_182450).

تم تنفيذ الدعم البيطري وفقا للمبادئ التوجيهية المؤسسية. تمت الموافقة على التجارب من قبل لجنة الأخلاقيات المحلية ، سويسرا (BE 60/19). تم اتباع إرشادات REACH ومبادئ 3R بدقة 6,7. تم تضمين واحد وثلاثين من ذكور فئران لويس ، يبلغ عمرها 12 أسبوعا وتزن 492 ± 8 جم. إيواء جميع الفئ?...

<ol>
	<li>Vergouwen, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+delayed+cerebral+ischemia+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage+as+an+outcome+event+in+clinical+trials+and+observational+studies:+proposal+of+a+multidisciplinary+research+group.">Definition of delayed cerebral ischemia after aneurysmal subarachnoid hemorrhage as an outcome event in clinical trials and observational studies: proposal of a multidisciplinary research group.</a> Stroke. 41 (10), 2391-2395 (2010).</li><li>Macdonald, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preventing+vasospasm+improves+outcome+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage:+rationale+and+design+of+CONSCIOUS-2+and+CONSCIOUS-3+trials.">Preventing vasospasm improves outcome after aneurysmal subarachnoid hemorrhage: rationale and design of CONSCIOUS-2 and CONSCIOUS-3 trials.</a> Neurocritical Care. 13 (3), 416-424 (2010).</li><li>Wanderer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Levosimendan+as+a+therapeutic+strategy+to+prevent+neuroinflammation+after+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Levosimendan as a therapeutic strategy to prevent neuroinflammation after aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Neurointerventional Surgery. , (2021).</li><li>Wanderer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspirin+treatment+prevents+inflammation+in+experimental+bifurcation+aneurysms+in+New+Zealand+White+rabbits.">Aspirin treatment prevents inflammation in experimental bifurcation aneurysms in New Zealand White rabbits.</a> Journal of Neurointerventional Surgery. 14 (2), 189-195 (2021).</li><li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patterns+of+neointima+formation+after+coil+or+stent+treatment+in+a+rat+saccular+sidewall+aneurysm+model.">Patterns of neointima formation after coil or stent treatment in a rat saccular sidewall aneurysm model.</a> Stroke. 52 (3), 1043-1052 (2021).</li><li>Kilkenny, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+research:+reporting+in+vivo+experiments:+the+ARRIVE+guidelines.">Animal research: reporting in vivo experiments: the ARRIVE guidelines.</a> British Journal of Pharmacology. 160 (7), 1577-1579 (2010).</li><li>Tornqvist, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategic+focus+on+3R+principles+reveals+major+reductions+in+the+use+of+animals+in+pharmaceutical+toxicity+testing.">Strategic focus on 3R principles reveals major reductions in the use of animals in pharmaceutical toxicity testing.</a> PLoS One. 9 (7), 101638 (2014).</li><li>Nevzati, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneurysm+wall+cellularity+affects+healing+after+coil+embolization:+assessment+in+a+rat+saccular+aneurysm+model.">Aneurysm wall cellularity affects healing after coil embolization: assessment in a rat saccular aneurysm model.</a> Journal of Neurointerventional Surgery. 12 (6), 621-625 (2020).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Helsinki+rat+microsurgical+sidewall+aneurysm+model.">The Helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (92), e51071 (2014).</li><li>Nevzati, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+magnesium+stent+treatment+of+saccular+aneurysms+in+a+rt+model+-+introduction+of+the+surgical+technique.">Biodegradable magnesium stent treatment of saccular aneurysms in a rt model - introduction of the surgical technique.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e56359 (2017).</li><li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testing+bioresorbable+stent+feasibility+in+a+rat+aneurysm+model.">Testing bioresorbable stent feasibility in a rat aneurysm model.</a> Journal of Neurointerventional Surgery. 11 (10), 1050-1054 (2019).</li><li>Kadirvel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+of+aneurysm+occlusion+after+treatment+with+a+flow+diverter.">Cellular mechanisms of aneurysm occlusion after treatment with a flow diverter.</a> Radiology. 270 (2), 394-399 (2014).</li><li>Li, Z. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+progenitor+cells+contribute+to+neointima+formation+in+rabbit+elastase-induced+aneurysm+after+flow+diverter+treatment.">Endothelial progenitor cells contribute to neointima formation in rabbit elastase-induced aneurysm after flow diverter treatment.</a> CNS Neuroscience &amp; Therapeutics. 19 (5), 352-357 (2013).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraluminal+cell+transplantation+prevents+growth+and+rupture+in+a+model+of+rupture-prone+saccular+aneurysms.">Intraluminal cell transplantation prevents growth and rupture in a model of rupture-prone saccular aneurysms.</a> Stroke. 45 (12), 3684-3690 (2014).</li><li>Frosen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+mural+and+bone+marrow-derived+neointimal+cells+to+thrombus+organization+and+wall+remodeling+in+a+microsurgical+murine+saccular+aneurysm+model.">Contribution of mural and bone marrow-derived neointimal cells to thrombus organization and wall remodeling in a microsurgical murine saccular aneurysm model.</a> Neurosurgery. 58 (5), 936-944 (2006).</li><li>Marbacher, S., Niemela, M., Hernesniemi, J., Frosen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recurrence+of+endovascularly+and+microsurgically+treated+intracranial+aneurysms-review+of+the+putative+role+of+aneurysm+wall+biology.">Recurrence of endovascularly and microsurgically treated intracranial aneurysms-review of the putative role of aneurysm wall biology.</a> Neurosurgical Review. 42 (1), 49-58 (2019).</li><li>Frosen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Smooth+muscle+cells+and+the+formation,+degeneration,+and+rupture+of+saccular+intracranial+aneurysm+wall--a+review+of+current+pathophysiological+knowledge.">Smooth muscle cells and the formation, degeneration, and rupture of saccular intracranial aneurysm wall--a review of current pathophysiological knowledge.</a> Translational Stroke Research. 5 (3), 347-356 (2014).</li><li>Fang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+marrow-derived+endothelial+progenitor+cells+are+involved+in+aneurysm+repair+in+rabbits.">Bone marrow-derived endothelial progenitor cells are involved in aneurysm repair in rabbits.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 19 (9), 1283-1286 (2012).</li><li>Morel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-related+differences+in+wall+remodeling+and+intraluminal+thrombus+resolution+in+a+rat+saccular+aneurysm+model.">Sex-related differences in wall remodeling and intraluminal thrombus resolution in a rat saccular aneurysm model.</a> Journal of Neurosurgery. , 1-14 (2019).</li><li>Gruter, B. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+video+angiography+for+evaluation+of+dynamic+perfusion+status+in+an+aneurysm+preclinical+experimental+setting.">Fluorescence video angiography for evaluation of dynamic perfusion status in an aneurysm preclinical experimental setting.</a> Operative Neurosurgery. 17 (4), 432-438 (2019).</li><li>Marbacher, S., Strange, F., Frosen, J., Fandino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+extracranial+aneurysm+models+for+the+study+and+treatment+of+brain+aneurysms:+A+systematic+review.">Preclinical extracranial aneurysm models for the study and treatment of brain aneurysms: A systematic review.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 40 (5), 922-938 (2020).</li><li>Ravindran, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+action+and+biology+of+flow+diverters+in+the+treatment+of+intracranial+aneurysms.">Mechanism of action and biology of flow diverters in the treatment of intracranial aneurysms.</a> Neurosurgery. 86, 13-19 (2020).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+mural+cells+leads+to+wall+degeneration,+aneurysm+growth,+and+eventual+rupture+in+a+rat+aneurysm+model.">Loss of mural cells leads to wall degeneration, aneurysm growth, and eventual rupture in a rat aneurysm model.</a> Stroke. 45 (1), 248-254 (2014).</li><li>Morosanu, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurosurgical+cadaveric+and+in+vivo+large+animal+training+models+for+cranial+and+spinal+approaches+and+techniques+-+systematic+review+of+current+literature.">Neurosurgical cadaveric and in vivo large animal training models for cranial and spinal approaches and techniques - systematic review of current literature.</a> Neurologia i Neurochirurgia Polska. 53 (1), 8-17 (2019).</li><li>Wanderer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+pouch+microsurgical+bifurcation+aneurysm+model+in+the+rabbit.">Arterial pouch microsurgical bifurcation aneurysm model in the rabbit.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (159), e61157 (2020).</li></ol>

توضح هذه الدراسة أن تكوين neointima يتم بوساطة الخلايا البطانية التي تنشأ في الشريان الأم لمجمع تمدد الأوعية الدموية ولكن يتم دعمها من خلال توظيف الخلايا المشتقة من جدار تمدد الأوعية الدموية في تمدد الأوعية الدموية الحيوي. ومع ذلك ، فإن دور الخلايا السلفية المتداولة في شفاء تمدد الأوعية الدم?...

نزيف تحت العنكبوتية الناجم عن تمزق تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة (IA) هو حالة جراحية عصبية مدمرة مرتبطة بارتفاع معدلات المراضة والوفيات1،2،3،4. بالإضافة إلى قصاصات الجراحة المجهرية ، التي توفر اتصالا مباشرا من البطانة إلى البطانة ، اكتسبت الأجهزة داخل الأوعية الدموية أهمية متزايدة على مدى العقود الماضية لعلاج IAs الممزقة والمكتشفة بالصدفة. تعتمد استجابة الشفاء في IAs المعالجة داخل الأوعية الدموية بشكل أساسي على تكوين neointima وتنظيم الجلطة. كلاهما عمليتان تآزريتان ، اعتمادا على هجرة الخلايا من الوعاء المجاور وجدار تمدد الأوعية الدموية. 5 حتى الآن ، لا يزال أصل الخلايا البطانية في تكوين neointima من تمدد الأوعية الدموية المعالجة داخل الأوعية الدموية غير واضح. هناك نقاش مستمر في الأدبيات حول المصدر الذي يتم من خلاله تجنيد الخلايا المكونة للنيوينتيما.
باستخدام حقن تتبع الخلايا من صبغة CM-Dil (انظر جدول المواد) في الشريان الأورطي البطني للفئران ، كنا نهدف إلى تحليل دور الخلايا البطانية ، التي تنشأ في الشريان الأم ، في تكوين neointima في نقطتين زمنيتين مختلفتين FU (اليوم 7 واليوم 21) (الشكل 1). ميزة النموذج هي حضانة تتبع الخلايا المحلية المباشرة في الجسم الحي في الشريان الأم قبل خياطة تمدد الأوعية الدموية ، مما يسمح ب FU في نقاط زمنية لاحقة. لم يتم وصف تقنيات الحقن في الجسم الحي ، مثل حضانة تتبع الخلايا ، في الأدبيات. ميزة هذه التقنية هي الحقن المباشر ، من نقطة واحدة ، أثناء العملية الجراحية ، في الجسم الحي ، مما يجعل النموذج قويا وقابلا للتكرار.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>3-0 resorbable suture</td>
			<td>Ethicon Inc., USA</td>
			<td>VCP428G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 non-absorbable suture</td>
			<td>B. Braun, Germany</td>
			<td>G0762563</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 non-absorbable suture</td>
			<td>B. Braun, Germany</td>
			<td>C0766070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>9-0 non-absorbable suture</td>
			<td>B. Braun, Germany</td>
			<td>G1111140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atipamezol</td>
			<td>Arovet AG, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bandpass filter blue</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>FD1B</td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bandpass filter green</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>FGV9</td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bipolar forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bicycle spotlight</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Board (20 x 10 cm)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Indivior, Switzerland</td>
			<td>1014197</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Sony NEX-5R, Sony, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannula (27-1/2 G)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell count software</td>
			<td>Image-J version 1.52n, U.S. National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, USA, https://imagej.nih.gov/ij/</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellTracker CM-Dil dye</td>
			<td>ThermoFisher SCIENTIFIC, USA</td>
			<td>C7000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coil-Device</td>
			<td>Styker, Kalamazoo, MI, USA</td>
			<td></td>
			<td>2 cm of Target 360 TM Ultra, 2-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Desinfection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye-lubricant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl</td>
			<td>Sintetica, S.A., Switzerland</td>
			<td>98683</td>
			<td>any generic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flumazenil</td>
			<td>Labatec-Pharma, Switerzland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluoresceine</td>
			<td>Curatis AG</td>
			<td>5030376</td>
			<td>any generic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence microscope</td>
			<td>Olympus BX51, Hamburg, Germany; Cell Sens Dimension Imaging software v1.8</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Foil mask</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose (5%)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Homeothermic Control Unit, Harvard, Edenbridge, England</td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isotonic sodium chloride solution (0.9%)</td>
			<td>Fresenius KABI</td>
			<td>336769</td>
			<td>any generic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any generic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Longuettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Boehringer Ingelheim</td>
			<td>P7626406</td>
			<td>any generic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine</td>
			<td>Virbac, Switzerland</td>
			<td>QN05CM91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro needle holder</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Midazolam</td>
			<td>Roche, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monitoring-system</td>
			<td>Starr Life Sciences Corp., 333 Allegheny Ave, Oakmont, PA 15139, United States</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O2-Face mask</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operation microscope</td>
			<td>OPMI, Carl Zeiss AG, Oberkochen, Germany</td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectal temperature probe</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpell</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>210</td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal shaver</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smartphone</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium dodecyl sulfate (0.1%)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>11667289001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft feed</td>
			<td>Emeraid Omnivore</td>
			<td></td>
			<td>any generic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft tissue forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft tissue spreader</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel sponge bowls</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stent-Device</td>
			<td>Biotroni, B&#252;lach, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td>modified magmaris device, AMS with polymer coating, 6-mm length, 2-mm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile micro swabs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight and curved microforceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight and curved microscissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight and curved forceps</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgery drape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes 1 mL, 2 mL, and 5 mL</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>any other</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clip applicator</td>
			<td>B. Braun, Germany</td>
			<td>FT495T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Yasargil titan standard clip (2x)</td>
			<td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td>
			<td>FT242T</td>
			<td>temporary</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using a cell-tracer injection to investigate the origin of neointima-forming cells in a rat saccular side wall model

يخلق القطع الجراحي المجهري حاجزا لاحقا لتدفق الدم إلى تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة ، في حين يعتمد العلاج داخل الأوعية الدموية على تكوين النيوينتيما والجلطة. لا يزال مصدر الخلايا البطانية التي تغطي الطبقة الداخلية من neointima غير واضح. لذلك ، كان الهدف من هذه الدراسة هو التحقيق في أصل الخلايا المكونة للنيوينتيما بعد حقن تتبع الخلايا في نموذج تمدد الأوعية الدموية الجانبي المجهري للفئران في هلسنكي الراسخ بالفعل.
تم إنشاء تمدد الأوعية الدموية على الجدار الجانبي عن طريق خياطة أكياس شريانية ثنائية أو حيوية من طرف إلى آخر في ذكور الفئران لويس. قبل استئصال الشرايين مع خياطة تمدد الأوعية الدموية ، تم إجراء حقن تتبع الخلايا التي تحتوي على صبغة CM-Dil في الشريان الأورطي المثبت لتسمية الخلايا البطانية في الوعاء المجاور وتتبع انتشارها أثناء المتابعة (FU). العلاج يليه اللف (n = 16) أو الدعامات (n = 15). في FU (7 أيام أو 21 يوما) ، خضعت جميع الفئران لتصوير الأوعية الدموية الفلوري ، تليها حصاد تمدد الأوعية الدموية والتقييم العياني والنسيجي مع تعداد الخلايا المناعية النسيجية لمناطق محددة من الاهتمام.
لم يتمزق أي من تمدد الأوعية الدموية ال 31 عند المتابعة. ماتت أربعة قبل الأوان. لوحظ التروية المتبقية عيانية في 75.0٪ ملفوفة و 7.0٪ من الفئران الدعامات. كانت كمية الخلايا الإيجابية لتتبع الخلايا مرتفعة بشكل كبير في الدعامات غير الخلوية مقارنة بتمدد الأوعية الدموية الملفوف فيما يتعلق بالجلطة في اليوم 7 (p = 0.01) و neointima في اليوم 21 (p = 0.04). لم يتم العثور على اختلافات كبيرة في الجلطة أو neointima في تمدد الأوعية الدموية الحيوية.
تؤكد هذه النتائج أنماط شفاء أسوأ في الملفات مقارنة بتمدد الأوعية الدموية الدعامات. يبدو أن تكوين Neointima يعتمد بشكل خاص على الشريان الأم في تمدد الأوعية الدموية المنزوع الخلايا ، في حين أنه مدعوم بالتجنيد من خلايا جدار تمدد الأوعية الدموية في الجدران الحيوية الغنية بالخلايا. من حيث الترجمة، قد يكون العلاج بالدعامات أكثر ملاءمة لتمدد الأوعية الدموية شديد التدهور، في حين أن اللف وحده قد يكون كافيا لتمدد الأوعية الدموية مع جدران الأوعية الدموية الصحية في الغالب.

وأدرج ما مجموعه 31 حيوانا في بيئة المختبر: 27 فأرا في التحليل الإحصائي النهائي؛ و 27 فأرا في التحليل الإحصائي النهائي؛ و 27 فأرا في التحليل الإحصائي النهائي؛ و 27 فأرا في التحليل الإحصائي النهائي؛ و 27 فأرا في التحليل ال توفي 4 فئران قبل الأوان (معدل وفيات 12.9٪). أثناء العملية الجراحية ، انخفض انتف?...

Watch this Scientific Journal Video about Using a Cell-Tracer Injection to Investigate the Origin of Neointima-Forming Cells in a Rat Saccular Side Wall Model at JoVE.com

Using a Cell-Tracer Injection to Investigate the Origin of Neointima-Forming Cells in a Rat Saccular Side Wall Model

أجرينا حقنة تتبع الخلايا المحبة للدهون من نقطة واحدة لتتبع الخلايا البطانية ، تليها بضع الشرايين وخياطة تمدد الأوعية الدموية في الجدار الجانبي على الشريان الأورطي للفئران البطنية. بدا أن تكوين Neointima يعتمد على الشريان الأم في تمدد الأوعية الدموية المنزوع الخلايا وتم تعزيزه من خلال التوظيف من خلايا جدار تمدد الأوعية الدموية في الجدران الحيوية الغنية بالخلايا.

استخدام حقن تتبع الخلايا للتحقيق في أصل الخلايا المكونة للنيوينتيما في نموذج الجدار الجانبي العجزي للفئران

Microsurgical clipping creates a subsequent barrier of blood flow into intracranial aneurysms, whereas endovascular treatment relies on neointima and ...

باستخدام تطبيق مباشر لتتبع الخلايا داخل الشريان الأبهري ، يمكننا تحليل دور الخلايا البطانية الناشئة من الشريان الأم في تكوين neointima في نقطتين زمنيتين مختلفتين. ميزة كبيرة لهذه التقنية هي حقن مباشر من نقطة واحدة وتفسيرية في الجسم الحي مما يجعل هذا النموذج تقنية قوية وقابلة للتكرار. قبل الجراحة ، احتضن الحقائب الشريانية من الفئران المانحة في 0.1٪ كبريتات دوديسيل الصوديوم لمدة 10 ساعات عند 37 درجة مئوية للحصول على تمدد الأوعية الدموية منزوع الخلايا.اجمع هذه الحقائب من الحيوانات المانحة قبل أيام قليلة من الجراحة. للبدء ، قم بتحليل سلوك الحيوان وفحص الأغشية المخاطية والتورجور كجزء من الفحص السريري قبل الجراحة. سجل وزن كل.لتحريض التخدير ، ضع جميع الفئران في صندوق نظيف مزود بالأكسجين حتى فقدان الوعي بعد خمس إلى 10 دقائق. تحقق من عمق التخدير من خلال عدم وجود منعكس سحب الدواسة. ضع الفئران في وضع ضعيف واحلق منطقة الصدر والبطن باستخدام ماكينة حلاقة كهربائية.باستخدام الشريط ، قم بتثبيت مخالب الفئران على لوحة مغطاة بوسادة تدفئة متصلة بمسبار مستقيمي ذاتي التنظيم. أدخل مسبار المستقيم في فتحة شرج الفئران للحفاظ على درجة الحرارة المطلوبة البالغة 37 درجة مئوية بمساعدة وسادة التدفئة. ثم قم بتثبيت مستشعر على الساق الخلفية اليمنى متصلا بنظام محوسب للتحقق من العلامات الحيوية أثناء الجراحة.للعناية بالفترة المحيطة بالتخدير، ضع مادة تشحيم عيون معقمة على العينين، وقم بتغطيتها بقناع رقائق غير شفاف لمنع الجفاف والتلف الناتج عن المصباح الجراحي. تطهير المجال الجراحي باليود البوفيدون ، ولف المجال الجراحي بطريقة معقمة. ضع مسحة صغيرة مع حشوة أرجوانية تحت الأجزاء القريبة والبعيدة من الشريان الأورطي لتصور الشريان بشكل أفضل بمجرد فصله عن الوريد التجويفي.ثم حماية البطن مع الشاش الأبيض. في يوم التشغيل ، قم بإذابة ميكرولترين من مقتفي الخلايا عن طريق السحب في ملليلتر واحد من PBS. انقل الخليط إلى حقنة سعة ملليلتر واحد مزودة بقنية.أطفئ الضوء في غرفة العمليات. باستخدام المجهر ، قم بإجراء الحقن من نقطة واحدة في الجزء البطني الأوسط من الشريان الأورطي باستخدام ملقط دقيق ، وحقن بعناية ملليلتر واحد من محلول ملحي هيبارين 0.9٪. حقن مقتفي الخلايا بعناية ، وقم بإيقاف تشغيل المجهر التشغيلي على الفور أيضا.حماية البطن مع الشاش الرطب مرة أخرى. دع الصبغة تحضن لمدة 15 دقيقة على الأقل. ثم قم بتشغيل المجهر وأضواء غرفة العمليات.استخدم الملقط الدقيق والمقص الدقيق لإجراء بضع الشرايين الطولي بحيث يبلغ طوله متوسط قطر تمدد الأوعية الدموية المحصود. ضع تمدد الأوعية الدموية بجانب الشريان الأورطي قبل إجراء بضع الشرايين لضمان الطول الصحيح. خياطة تمدد الأوعية الدموية مع ثمانية إلى 10 غرز واحدة باستخدام خياطة 10-0 غير قابلة للامتصاص.قبل الغرزة النهائية ، قم بتسليم الملف بكثافة تعبئة تبلغ سنتيمترا واحدا. يمكن إجراء علاج الملف أو الدعامة في هذا النموذج. ثم قم بإزالة المشابك المؤقتة بعناية ، بدءا من بعيد ، تحت الري المستمر بمحلول ملحي هيبارين.أغلق الجرح بطريقة طبقات. في نهاية الجراحة ، عكس التخدير عن طريق الحقن تحت الجلد. دع كل يعمل يتعافى في قفص نظيف حتى يستيقظ تماما ودافئ حسب الحاجة باستخدام مصباح تدفئة.لم تختلف أحجام تمدد الأوعية الدموية الأساسية المسحوبة لليوم السابع واليوم 21 اختلافا كبيرا بالنسبة لتمدد الأوعية الدموية الخلوي أو الحيوي بين مجموعات علاج الملف أو الدعامة. أظهرت أحجام FU المسحوبة لتمدد الأوعية الدموية المنزوعة الخلايا نموا غير كبير في تمدد الأوعية الدموية الملفوف مقارنة بتمدد الأوعية الدموية الدعامات. كان حجم FU المسحوب أكبر بكثير في الملف الحيوي منه في مجموعة الدعامات.لم تختلف كميات الخلايا الإيجابية المتتبعة للخلايا في neointima من تمدد الأوعية الدموية منزوع الخلايا اختلافا كبيرا بين المجموعات المعالجة بالدعامات أو الملفات في اليوم السابع FU ولكنها كانت أعلى بكثير في الفئران ذات الدعامات في اليوم 21 FU.No لوحظت اختلافات كبيرة في الفئران المخيطة بتمدد الأوعية الدموية الحيوية في سبعة أيام أو 21 يوما FU.In تمدد الأوعية الدموية المنزوعة الخلايا في سبعة أيام FU، بقيت خلايا إيجابية أكثر بكثير في خثرة الدعامة المعالجة مقارنة بالمجموعة المعالجة باللفائف. لم يلاحظ هذا الاختلاف في تمدد الأوعية الدموية الحيوية في سبعة أيام FU. تذكر دائما إطفاء الأنوار في غرفة العمليات قبل حقن متتبع الخلايا لمنع التلاشي. أيضا ، دع احتضان الصبغة لمدة 15 دقيقة على الأقل.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Gene Delivery to Postnatal Rat Brain by Non-ventricular Plasmid Injection and Electroporation

تسليم الجينات إلى الدماغ الجرذ بعد الولادة من غير البطين حقن البلازميد وElectroporation

Creation of transgenic animals is a standard approach in studying functions of a gene of interest in vivo. However, many knockout or transgenic animals ...

Autologous Blood Injection to Model Spontaneous Intracerebral Hemorrhage in Mice

حقن الدم ذاتي النزيف الدماغي الداخلي النموذجي لالعفوي في الفئران

Investigation of the pathophysiology of injury after intracerebral
hemorrhage (ICH) requires a reproducible animal model.  While ICH
accounts for 10-15% ...

Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses

باستخدام المنهج المقارن الأنواع المعنية بالتحقيق في البيولوجيا العصبية للردود الأبوية

A goal of behavioral neuroscience is to identify underlying neurobiological factors that regulate specific behaviors.  Using animal models to accomplish ...

Fast Micro-iontophoresis of Glutamate and GABA: A Useful Tool to Investigate Synaptic Integration

سريع الصغرى، الرحلان الشاردي من الغلوتامات وGABA: أداة مفيدة لبحث تكامل متشابك

One of the fundamental interests in neuroscience is to understand the integration of excitatory and inhibitory inputs along the very complex structure of ...

A Method of Nodose Ganglia Injection in Sprague-Dawley Rat

وهناك طريقة العقداء العقد حقن في سبراغ داولي الفئران

Afferent signaling via the vagus nerve transmits important general visceral information to the central nervous system from many diverse receptors located ...

The Use of Trace Eyeblink Classical Conditioning to Assess Hippocampal Dysfunction in a Rat Model of Fetal Alcohol Spectrum Disorders

استخدام الاشراط الكلاسيكي اييبلينك تتبع لتقييم هيبوكامبال الخلل في نموذج الفئران من اضطرابات طيف الكحول الجنيني

Neonatal rats were administered a relatively high concentration of ethyl alcohol (11.9% v/v) during postnatal days 4-9, a time when the fetal brain ...

Biodegradable Magnesium Stent Treatment of Saccular Aneurysms in a Rat Model - Introduction of the Surgical Technique

العلاج تركيب دعامات المغنيسيوم للتحلل من الكييس تمدد الأوعية الدموية في نموذج الفئران-الأخذ بالأسلوب الجراحي

The steady progess in the armamentarium of techniques available for endovascular treatment of intracranial aneurysms requires affordable and reproducable ...

A Rat Model of Central Fatigue Using a Modified Multiple Platform Method

نموذج فأر من التعب المركزي تعديله باستخدام أسلوب منصة متعددة

In this article, we introduced a rat model of central fatigue using the modified multiple platform method (MMPM). The Multiple Platform box was designed ...

Direct Injection of a Lentiviral Vector Highlights Multiple Motor Pathways in the Rat Spinal Cord

الحقن المباشر لناقل لينتيفيرال يسلط الضوء على عدة مسارات الحركية في الحبل الشوكي الفئران

Introducing proteins of interest into cells in the nervous system is challenging due to innate biological barriers that limit access to most molecules. ...

Facial Nerve Surgery in the Rat Model to Study Axonal Inhibition and Regeneration

جراحة الأعصاب الوجه في نموذج الفئران لدراسة تثبيط أكسونال وتجديد

This protocol describes consistent and reproducible methods to study axonal regeneration and inhibition in a rat facial nerve injury model. The facial ...