Name: evaluation of a reliable biomarker in a cecal ligation and puncture-induced mouse model of sepsis
Uploaded: 2022-12-09T12:30:00
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Wir danken Professor Wang Wei und Dr. Liu Shuai für die Hilfe bei den Experimenten. Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse der Young Research Funding des Xiangya Hospital, Central South University (Nr. 2019Q10), der National and Science Foundation der Provinz Hunan (Nr. 2020JJ4902) und der National Natural Science Foundation of China (Nr. 82202394) finanziert.

Alle Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien durchgeführt, die vom Animal Review Committee am Xiangya Hospital und der Central South University (Nr. 202103149) genehmigt wurden.
1. Vorbereitung
<ol><li>Wählen Sie männliche C57BL / 6J-Mäuse aus (Gewicht: 20-25 g; Alter: 8-12 Wochen) und halten Sie 3 Tage lang unter, bevor Sie irgendwelche Eingriffe durchführen.</li>
	<li>Wiegen Sie die Maus.</li>
	<li>Betäuben Sie die Maus mit 1,5% Isofluran durch Ei...

<ol>
	<li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+international+consensus+definitions+for+sepsis+and+septic+shock+(Sepsis-3).">The third international consensus definitions for sepsis and septic shock (Sepsis-3).</a> JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).</li><li>Shankar-Hari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+a+new+definition+and+assessing+new+clinical+criteria+for+septic+shock:+For+the+Third+International+Consensus+Definitions+for+Sepsis+and+Septic+Shock+(Sepsis-3).">Developing a new definition and assessing new clinical criteria for septic shock: For the Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3).</a> JAMA. 315 (8), 775-787 (2016).</li><li>Fleischmann-Struzek, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+mortality+of+hospital-+and+ICU-treated+sepsis:+results+from+an+updated+and+expanded+systematic+review+and+meta-analysis.">Incidence and mortality of hospital- and ICU-treated sepsis: results from an updated and expanded systematic review and meta-analysis.</a> Intensive Care Medicine. 46 (8), 1552-1562 (2020).</li><li>Evans, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surviving+sepsis+campaign:+international+guidelines+for+management+of+sepsis+and+septic+shock+2021.">Surviving sepsis campaign: international guidelines for management of sepsis and septic shock 2021.</a> Intensive Care Medicine. 47 (11), 1181-1247 (2021).</li><li>Hughes, J. A., Cabilan, C. J., Williams, J., Ray, M., Coyer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effectiveness+of+interventions+to+reduce+peripheral+blood+culture+contamination+in+acute+care:+a+systematic+review+protocol.">The effectiveness of interventions to reduce peripheral blood culture contamination in acute care: a systematic review protocol.</a> Systematic Reviews. 7 (1), 216 (2018).</li><li>Kibe, S., Adams, K., Barlow, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+and+prognostic+biomarkers+of+sepsis+in+critical+care.">Diagnostic and prognostic biomarkers of sepsis in critical care.</a> The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 66, 33-40 (2011).</li><li>Dejager, L., Pinheiro, I., Dejonckheere, E., Libert, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cecal+ligation+and+puncture:+the+gold+standard+model+for+polymicrobial+sepsis.">Cecal ligation and puncture: the gold standard model for polymicrobial sepsis.</a> Trends in Microbiology. 19 (4), 198-208 (2011).</li><li>Hotchkiss, R., Karl, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+and+treatment+of+sepsis.">The pathophysiology and treatment of sepsis.</a> The New England Journal of Medicine. 348 (2), 138-150 (2003).</li><li>Madhi, R., Rahman, M., Taha, D., Morgelin, M., Thorlacius, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+peptidylarginine+deiminase+reduces+neutrophil+extracellular+trap+formation+and+tissue+injury+in+severe+acute+pancreatitis.">Targeting peptidylarginine deiminase reduces neutrophil extracellular trap formation and tissue injury in severe acute pancreatitis.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (7), 11850-11860 (2019).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Liang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+peptidylarginine+deiminase+alleviates+LPS-induced+pulmonary+dysfunction+and+improves+survival+in+a+mouse+model+of+lethal+endotoxemia.">Inhibition of peptidylarginine deiminase alleviates LPS-induced pulmonary dysfunction and improves survival in a mouse model of lethal endotoxemia.</a> European Journal of Pharmacology. 833, 432-440 (2018).</li><li>Deng, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Citrullinated+histone+H3+as+a+therapeutic+target+for+endotoxic+shock+in+mice.">Citrullinated histone H3 as a therapeutic target for endotoxic shock in mice.</a> Frontiers in Immunology. 10, 2957 (2019).</li><li>Li, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+citrullinated+histone+H3+as+a+potential+serum+protein+biomarker+in+a+lethal+model+of+lipopolysaccharide-induced+shock.">Identification of citrullinated histone H3 as a potential serum protein biomarker in a lethal model of lipopolysaccharide-induced shock.</a> Surgery. 150 (3), 442-451 (2011).</li><li>Pan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CitH3:+a+reliable+blood+biomarker+for+diagnosis+and+treatment+of+endotoxic+shock.">CitH3: a reliable blood biomarker for diagnosis and treatment of endotoxic shock.</a> Scientific Reports. 7 (1), 8972 (2017).</li><li>Park, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+plasmo-photoelectronic+nanostructure+biosensor+detects+an+infection+biomarker+accompanying+cell+death+in+neutrophils.">An integrated plasmo-photoelectronic nanostructure biosensor detects an infection biomarker accompanying cell death in neutrophils.</a> Small. 16 (1), 1905611 (2020).</li><li>Harikrishnan, V. S., Hansen, A. K., Abelson, K. S. P., Sorensen, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+various+methods+of+blood+sampling+in+mice+and+rats:+Effects+on+animal+welfare.">A comparison of various methods of blood sampling in mice and rats: Effects on animal welfare.</a> Laboratory Animals. 52 (3), 253-264 (2018).</li><li>Brook, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+controlled+mouse+model+for+neonatal+polymicrobial+sepsis.">A controlled mouse model for neonatal polymicrobial sepsis.</a> Journal of Visualized Experiments. (143), e58574 (2019).</li><li>Rittirsch, D., Huber-Lang, M., Flierl, M., Ward, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodesign+of+experimental+sepsis+by+cecal+ligation+and+puncture.">Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture.</a> Nature Protocols. 4 (1), 31-36 (2009).</li><li>Baker, C. C., Chaudry, I. H., Gaines, H. O., Baue, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+factors+affecting+mortality+rate+after+sepsis+in+a+murine+cecal+ligation+and+puncture+model.">Evaluation of factors affecting mortality rate after sepsis in a murine cecal ligation and puncture model.</a> Surgery. 94 (2), 331-335 (1983).</li></ol>

CLP führt Krankheitserreger in den Bauch ein, um ein präklinisches Modell der Sepsis zu erstellen. Bei der Durchführung von CLP ist es wichtig, sterile Bedingungen zu verwenden, um die Interferenz exogener Bakterien zu beseitigen und genaue Dosierungen von Anästhetika zu verwenden16. Die drei technischen Aspekte von CLP, die den Schweregrad und die Replizierbarkeit des Sepsismodells beeinflussen, sind der Prozentsatz des gebundenen Blinddarms, die Größe der Nadel, die für die Stuhlpunktion ...

Sepsis ist definiert als lebensbedrohliche Organfunktionsstörung, die durch eine fehlregulierte Wirtsreaktion auf Infektionverursacht wird 1, und septischer Schock ist die häufigste Todesursache in schweren Fällen von Sepsis2. Sepsis und septischer Schock verursachen jedes Jahr weltweit Millionen von Todesfällen3. Der Schlüssel zur Verbesserung des Ergebnisses von Patienten mit Sepsis ist die sofortige Einleitung von Behandlungen wie Antibiotika4. Die Goldstandardmethode für die Diagnose von Sepsis ist die mikrobielle Kultur; Die mikrobielle Kultur ist jedoch zeitaufwendig und kann zu falsch-positiven und falsch-negativen Ergebnissen führen, was die klinische Signifikanz stark einschränkt5. Daher ist es sehr wünschenswert, einen Blutbiomarker für Sepsis zu identifizieren. Procalcitonin gilt als idealer Sepsis-Biomarker, hat aber eine begrenzte diagnostische Wirksamkeit, da es Sepsis nicht von sterilen Erkrankungen unterscheiden kann6. 
Die Ligatur und Punktion im Stuhl der Maus (CLP) wird häufig verwendet, um ein Modell der Sepsis in der wissenschaftlichen Forschung zu erstellen. CLP ist eines der am weitesten verbreiteten Sepsismodelle, da es die polymikrobielle Peritonitis nachahmt und sowohl entzündungsfördernde als auch entzündungshemmende Immunantworten aktiviert7. Es ist allgemein anerkannt, dass CLP ein klinisch relevanteres Sepsismodell schafft als alternative Techniken wie die Injektion von bakteriellem Endotoxin. Daher gilt CLP als das klassische Sepsis-Modell für den Einsatz in der Forschung8. Ein großer Nachteil von CLP ist jedoch seine Reproduzierbarkeit, da der Schweregrad des Modells von mehreren Faktoren wie dem Prozentsatz der Blinddarmligierung, der Nadelgröße, der Anzahl der Punktionen und der Laparotomietechnik beeinflusst wird. Daher ist es notwendig, das CLP-induzierte Sepsis-Modell zu standardisieren. Die vorliegende Studie beschreibt die Protokolldetails des CLP-induzierten Sepsismodells, um das standardisierte Verfahren aufzuzeigen und seine Reproduzierbarkeit zu erhöhen.
Die Entzündungsreaktion tritt im frühen Stadium der Sepsis auf, wobei Neutrophile übermäßige Mengen an Oxidationsmitteln und Proteasen freisetzen, die Organschäden verursachen8. Ein Schlüsselfaktor in der Pathophysiologie der Sepsis ist die Bildung von neutrophilen extrazellulären Fallen (NETs), die nukleäre und zytosolische Komponenten wie DNA, citrullinierte Histone und antimikrobielle Proteinasen freisetzen9. Neuere Studien deuten darauf hin, dass eine übermäßige Erzeugung von NETs die Pathologie der Sepsis vermittelt; In der Zwischenzeit übt eine Abnahme der NETs durch enzymatische Hemmung der Peptidylarginin-Deiminase (PAD) durch Chemikalien wie YW3-56 oder Cl-Amidin einen Pro-Überlebenseffekt in Mausmodellen der Sepsis10,11 aus. Citrulliniertes Histon H3 (CitH3) wurde 2011 als Sepsis-spezifisches Protein identifiziert12, und nachfolgende Publikationen haben gezeigt, dass die zirkulierende CitH3-Konzentration ein zuverlässiger diagnostischer Biomarker für Sepsis13,14 ist. CitH3 gilt als empfindlicherer und langlebigerer Biomarker als Procalcitonin und ist spezifischer bei der Unterscheidung von Sepsis als entzündliche Zytokine13.
In dieser Studie haben wir einen zuverlässigen diagnostischen Biomarker für Sepsis in einem CLP-induzierten Mausmodell der Sepsis evaluiert.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>21G needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3,3&#8217;,5,5&#8217;-tetramethylbenzidine&#160;</td>
			<td>R&#38;D Systems Inc</td>
			<td>DY999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-CitH3 monoclonal antibody</td>
			<td>laboratory self developed</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-CitH3 polyclonal antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-rabbit secondary antibody</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td>111-035-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 mice</td>
			<td>Xiangya School of Medicine, Central South University</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cl-amidine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>SML2250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>depilatory cream</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dnase I</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>26675-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketoprofen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>PHR1375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silk sutures (4-0 &#38; 6-0)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical instruments&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YW3-56</td>
			<td>GLPBIO</td>
			<td>GC48263</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of a reliable biomarker in a cecal ligation and puncture-induced mouse model of sepsis

Sepsis ist eine schwere lebensbedrohliche und sich schnell entwickelnde Krankheit, die jährlich weltweit Millionen von Todesfällen verursacht. Forscher haben enorme Anstrengungen unternommen, um die Pathophysiologie der Sepsis anhand verschiedener Tiermodelle aufzuklären. Das Mausmodell der durch Cekalligatur und Punktion induzierten Sepsis (CLP) ist in Laboratorien weit verbreitet. Die drei technischen Aspekte, die den Schweregrad und die Replizierbarkeit des CLP-Modells beeinflussen, sind der Prozentsatz des gebundenen Blinddarms, die Größe der für die Stuhlpunktion verwendeten Nadel und das Volumen des in die Bauchhöhle gepressten Kots. Die schnelle und spezifische Diagnose einer Sepsis ist ein entscheidender Faktor, der das Ergebnis beeinflusst. Der Goldstandard für die Sepsis-Diagnose ist die mikrobielle Kultur; Dieser Prozess ist jedoch zeitaufwendig und manchmal ungenau. Der Nachweis von Sepsis-spezifischen Biomarkern ist schnell, aber die vorhandenen Biomarker sind aufgrund einer kurzen Halbwertszeit, Nicht-Spezifität und unzureichender Sensitivität unbefriedigend. Daher besteht ein dringender Bedarf an einem zuverlässigen Biomarker für Sepsis in den frühen Stadien. Frühere Publikationen deuten darauf hin, dass exzessive neutrophile extrazelluläre Fallen (NETs) bei Sepsis auftreten. Citrulliniertes Histon H3 (CitH3) als NET-Komponente ist sowohl bei septischen Tieren als auch bei Patienten erhöht, und das Vorhandensein von CitH3 ist ein zuverlässiger diagnostischer Biomarker für Sepsis. Die vorliegende Studie zielte darauf ab, ein standardisiertes Mausmodell der CLP-induzierten Sepsis zu beschreiben und einen zuverlässigen Blutbiomarker für Sepsis zu etablieren. Unsere Arbeit kann in Zukunft zur frühzeitigen und genauen Diagnose einer Sepsis beitragen.

Wie in Abbildung 2A gezeigt, wurde in der Scheingruppe kein CitH3 durch Western Blotting nachgewiesen. Die Serumkonzentration von CitH3 stieg nach CLP signifikant an, und dieser Anstieg wurde durch die Hemmung der NET-Bildung durch die Verabreichung von YW3-56, einem pAVK-Inhibitor10, blockiert. Abbildung 2B zeigt die SerumCitH3-Konzentrationen, die durch ELISA bestimmt wurden. 24 h nach CLP war die Serumkonzentration von CitH3 i...

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Evaluation of a Reliable Biomarker in a Cecal Ligation and Puncture-Induced Mouse Model of Sepsis

Dieses Protokoll stellt die operativen Details der Stuhlligatur und -punktion (CLP) in einem Mausmodell der Sepsis dar. CLP ist eine der am weitesten verbreiteten Techniken, um ein Tiermodell für Sepsis zu erstellen. Daher ist ein standardisiertes CLP-Protokoll erforderlich, um zuverlässige Forschungsergebnisse zu erzielen.

Bewertung eines zuverlässigen Biomarkers in einem Stuhlligatur- und Punktions-induzierten Mausmodell der Sepsis

Sepsis is a severe life-threatening and rapidly developing disease that causes millions of deaths annually worldwide. Researchers have made tremendous ...

Der Hauptzweck dieser Studie ist die Verwendung des Mausmodells der Stuhlligatur und der punktionierten Sepsis, um einen zuverlässigen Blutbiomarker für Sepsis zu bewerten. Die Ligatur und Punktion des Stuhls, kurz CLP, ist ein klinisch relevantes Modell der Sepsis. CLP ist ein häufig verwendetes Modell in der Sepsisforschung.Citrulliniertes Histon H3 oder CitH3 stammt aus Sepsis-induzierter NETose. Unsere vorherige Studie zeigt, dass CitH3 ein zuverlässiger diagnostischer Biomarker für Sepsis ist. Wählen Sie männliche C57BL/6-Mäuse aus.Wiegen Sie die Maus und betäuben Sie die Maus durch Einatmen von 1,5% Isofluran. Befestigen Sie die Maus auf einem Heizkissen. Tragen Sie die Enthaarungscreme auf den Bauch auf und lassen Sie sie nicht länger als eine Minute einwirken, bevor Sie die Creme und die Haare entfernen.Bereiten Sie sterile chirurgische Instrumente vor, die für die Chirurgie von Nagetieren geeignet sind. Desinfizieren Sie die Bauchhaut mindestens dreimal mit Jod. Bedecken Sie den operativen Operationsbereich mit dem richtigen sterilen chirurgischen Tuch.Verwenden Sie eine sterile chirurgische Schere, um einen etwa zwei Zentimeter großen Schnitt in die Bauchdecke entlang der Linea alba zu machen. Identifizieren und isolieren Sie den Blinddarm aus der Bauchhöhle mit einer sterilen Pinzette. Ligate 75 Volumen des Blinddarms mit 4-0 Seidennaht.Ligatur die mesenterialen Blutgefäße nicht. Zu beachten ist, dass ein unterschiedlicher Prozentsatz des Blinddarms die Schwere der Sepsis bestimmt. 25% führt zu einer niedriggradigen Sepsis, 50% führt zur mittelgradigen Sepsis und 75% zu einer hochgradigen Sepsis.Punktieren Sie den Blinddarm durch eine Durchgangsperforation mit einer 21-Gauge-Nadel in der Mitte zwischen dem Schwanzende und der Ligatur. Drücken Sie den Kot vorsichtig durch Eindringlöcher aus dem Blinddarm. Zu beachten ist, dass die Menge an Kot, die in die Peritonealhöhle gepresst wird, konsistent sein sollte, da Kot auch die Schwere der Sepsis bestimmt.Ersetzen Sie den Blinddarm sowie Kot vorsichtig in die Bauchhöhle. Schließen Sie die Bauchmuskelschicht und die Hautschicht mit 6-0 Seidennaht. Desinfizieren Sie den Schnitt mit Jod.Die Injektion von Ketoprofen, fünf Milligramm pro Kilogramm, sollte im unteren linken Quadranten des Abdomens durchgeführt werden, um den Blinddarm zu vermeiden. Legen Sie die Maus bis zur vollständigen Genesung auf ein Heizkissen. Die Maus ist in einem temperaturkontrollierten Raum untergebracht und erhält freien Zugang zu Nahrung und Wasser.Die Tiere werden durch eine Überdosierung von Kohlendioxid mit Symptomen einer Sepsis eingeschläfert, die für unsere vordefinierten Endpunkte auf der Grundlage unserer vorgestellten Studie relevant ist. Die Mäuse werden nach dem Zufallsprinzip in die Scheingruppe, die CLP-Gruppe und die CLP plus Cl-Amidin- oder YW3-56-Behandlungsgruppe eingeteilt. Mäuse in der Scheingruppe erhalten alle CLP-Verfahren außer Blinddarmligatur und Punktion.Entnehmen Sie peripheres Blut 24 Stunden nach der Operation und bereiten Sie das Serum durch Zentrifugation vor. Die CitH3-Konzentration wurde durch Western Blotting und ein selbst entwickeltes ELISA-Kit bestimmt. Wie in Abbildung zwei gezeigt, wurde in der Scheingruppe kein CitH3 nachgewiesen.Die CitH3-Werte waren nach dem CLP-Einsetzen erhöht, was durch die PAD-Hemmung signifikant abgeschwächt wurde. Basierend auf unseren Daten schließen wir, dass zirkulierendes CitH3 ein zuverlässiger diagnostischer Biomarker für Sepsis ist.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Colon Ascendens Stent Peritonitis (CASP) - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

Colon Ascendens Stent Peritonitis CASP - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

Colon ascendens Stent Peritonitis (CASP) - ein standardisiertes Modell für polymikrobiellen Abdominal Sepsis

Sepsis remains a persistent problem on intensive care units all over the world. Understanding the complex mechanisms of sepsis is the precondition for ...

Forschung

Immunologie und Infektion

Cecal Ligation and Puncture-induced Sepsis as a Model To Study Autophagy in Mice

Blinddarm-Ligation und Punktion-induzierten Sepsis als Modell zur Autophagie in Mäusen untersucht

Experimental sepsis can be induced in mice using the cecal ligation and puncture (CLP) method, which causes polymicrobial sepsis. Here, a protocol is ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

Influenza-A-Virus-Studien in einem Mausmodell der Infektion

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

A Controlled Mouse Model for Neonatal Polymicrobial Sepsis

Eine kontrollierte Mausmodell für neonatale Sepsis Biofilm

Neonatal sepsis remains a global burden. A preclinical model to screen effective prophylactic or therapeutic interventions is needed. Neonatal mouse ...

Design of Cecal Ligation and Puncture and Intranasal Infection Dual Model of Sepsis-Induced Immunosuppression

Design von Cecal Ligation und Punktion und Intranasal Infection Dual Model of Sepsis-Induced Immunosuppression

Sepsis, a severe and complicated life-threatening infection, is characterized by an imbalance between pro- and anti-inflammatory responses in multiple ...

Isolation and Quantitative Evaluation of Brush Cells from Mouse Tracheas

Isolierung und quantitative Auswertung von Bürstenzellen von Maustracheas

Tracheal brush cells are cholinergic chemosensory epithelial cells poised to transmit signals from the airway lumen to the immune and nervous systems. ...

A Neonatal Imaging Model of Gram-Negative Bacterial Sepsis

Ein neonatales Bildgebungsmodell der gramnegativen bakteriellen Sepsis

Neonates are at an increased risk of bacterial sepsis due to the unique immune profile they display in the first months of life. We have established a ...

A Contemporary Warming/Restraining Device for Efficient Tail Vein Injections in a Murine Fungal Sepsis Model

Ein modernes Erwärmungs-/Rückhaltegerät für effiziente Injektionen von Schwanzvenen in einem murinen Pilz-Sepsis-Modell

In rodent models, tail vein injections are important methods for intravenous administration of experimental agents. Tail vein injections typically involve ...

A Mouse Model of Chronic Liver Fibrosis for the Study of Biliary Atresia

Ein Mausmodell der chronischen Leberfibrose zur Untersuchung der Gallengangsatresie

Biliary atresia (BA) is a fatal disease involving obstructive jaundice, and it is the most common indication for liver transplantation in children. Due to ...

A Mouse Ear Model for Allergic Contact Dermatitis Evaluation

Ein Mausohrmodell zur Beurteilung der allergischen Kontaktdermatitis

Skin is the human body&#39;s first line of defense and one of the most exposed organs to environmental chemicals. Allergic contact dermatitis (ACD) is a ...