Name: evaluation of a reliable biomarker in a cecal ligation and puncture-induced mouse model of sepsis
Uploaded: 2022-12-09T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of a Reliable Biomarker in a Cecal Ligation and Puncture-Induced Mouse Model of Sepsis at JoVE.com

Profesör Wang Wei ve Doktor Liu Shuai'ye deneylere yardımcı oldukları için teşekkür ederiz. Bu çalışma, Xiangya Hastanesi, Central South University Genç Araştırma Fonu (No. 2019Q10), Hunan Eyaleti Ulusal ve Bilim Vakfı'ndan (No. 2020JJ4902) ve Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı'ndan (No. 82202394) hibelerle finanse edilmiştir.

Tüm hayvan deneyleri, Xiangya Hastanesi ve Central South Üniversitesi'ndeki Hayvan İnceleme Komitesi (No. 202103149) tarafından onaylanan kılavuzlara uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
1. Hazırlık
<ol><li>Erkek C57BL/6J farelerini (ağırlık: 20-25 g; yaş: 8-12 hafta) seçin ve herhangi bir işlem yapmadan önce 3 gün boyunca evde konaklayın.</li>
	<li>Fareyi tartın.</li>
	<li>Fareyi soluyarak% 1.5 izofluran ile uyuşturun ve anestezi derinliğini kontrol etme...

<ol>
	<li>Singer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+third+international+consensus+definitions+for+sepsis+and+septic+shock+(Sepsis-3).">The third international consensus definitions for sepsis and septic shock (Sepsis-3).</a> JAMA. 315 (8), 801-810 (2016).</li><li>Shankar-Hari, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developing+a+new+definition+and+assessing+new+clinical+criteria+for+septic+shock:+For+the+Third+International+Consensus+Definitions+for+Sepsis+and+Septic+Shock+(Sepsis-3).">Developing a new definition and assessing new clinical criteria for septic shock: For the Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3).</a> JAMA. 315 (8), 775-787 (2016).</li><li>Fleischmann-Struzek, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+mortality+of+hospital-+and+ICU-treated+sepsis:+results+from+an+updated+and+expanded+systematic+review+and+meta-analysis.">Incidence and mortality of hospital- and ICU-treated sepsis: results from an updated and expanded systematic review and meta-analysis.</a> Intensive Care Medicine. 46 (8), 1552-1562 (2020).</li><li>Evans, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surviving+sepsis+campaign:+international+guidelines+for+management+of+sepsis+and+septic+shock+2021.">Surviving sepsis campaign: international guidelines for management of sepsis and septic shock 2021.</a> Intensive Care Medicine. 47 (11), 1181-1247 (2021).</li><li>Hughes, J. A., Cabilan, C. J., Williams, J., Ray, M., Coyer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effectiveness+of+interventions+to+reduce+peripheral+blood+culture+contamination+in+acute+care:+a+systematic+review+protocol.">The effectiveness of interventions to reduce peripheral blood culture contamination in acute care: a systematic review protocol.</a> Systematic Reviews. 7 (1), 216 (2018).</li><li>Kibe, S., Adams, K., Barlow, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+and+prognostic+biomarkers+of+sepsis+in+critical+care.">Diagnostic and prognostic biomarkers of sepsis in critical care.</a> The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 66, 33-40 (2011).</li><li>Dejager, L., Pinheiro, I., Dejonckheere, E., Libert, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cecal+ligation+and+puncture:+the+gold+standard+model+for+polymicrobial+sepsis.">Cecal ligation and puncture: the gold standard model for polymicrobial sepsis.</a> Trends in Microbiology. 19 (4), 198-208 (2011).</li><li>Hotchkiss, R., Karl, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+and+treatment+of+sepsis.">The pathophysiology and treatment of sepsis.</a> The New England Journal of Medicine. 348 (2), 138-150 (2003).</li><li>Madhi, R., Rahman, M., Taha, D., Morgelin, M., Thorlacius, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+peptidylarginine+deiminase+reduces+neutrophil+extracellular+trap+formation+and+tissue+injury+in+severe+acute+pancreatitis.">Targeting peptidylarginine deiminase reduces neutrophil extracellular trap formation and tissue injury in severe acute pancreatitis.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (7), 11850-11860 (2019).</li><li>Brinkmann, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+extracellular+traps+kill+bacteria.">Neutrophil extracellular traps kill bacteria.</a> Science. 303 (5663), 1532-1535 (2004).</li><li>Liang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+peptidylarginine+deiminase+alleviates+LPS-induced+pulmonary+dysfunction+and+improves+survival+in+a+mouse+model+of+lethal+endotoxemia.">Inhibition of peptidylarginine deiminase alleviates LPS-induced pulmonary dysfunction and improves survival in a mouse model of lethal endotoxemia.</a> European Journal of Pharmacology. 833, 432-440 (2018).</li><li>Deng, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Citrullinated+histone+H3+as+a+therapeutic+target+for+endotoxic+shock+in+mice.">Citrullinated histone H3 as a therapeutic target for endotoxic shock in mice.</a> Frontiers in Immunology. 10, 2957 (2019).</li><li>Li, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+citrullinated+histone+H3+as+a+potential+serum+protein+biomarker+in+a+lethal+model+of+lipopolysaccharide-induced+shock.">Identification of citrullinated histone H3 as a potential serum protein biomarker in a lethal model of lipopolysaccharide-induced shock.</a> Surgery. 150 (3), 442-451 (2011).</li><li>Pan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CitH3:+a+reliable+blood+biomarker+for+diagnosis+and+treatment+of+endotoxic+shock.">CitH3: a reliable blood biomarker for diagnosis and treatment of endotoxic shock.</a> Scientific Reports. 7 (1), 8972 (2017).</li><li>Park, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+plasmo-photoelectronic+nanostructure+biosensor+detects+an+infection+biomarker+accompanying+cell+death+in+neutrophils.">An integrated plasmo-photoelectronic nanostructure biosensor detects an infection biomarker accompanying cell death in neutrophils.</a> Small. 16 (1), 1905611 (2020).</li><li>Harikrishnan, V. S., Hansen, A. K., Abelson, K. S. P., Sorensen, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+various+methods+of+blood+sampling+in+mice+and+rats:+Effects+on+animal+welfare.">A comparison of various methods of blood sampling in mice and rats: Effects on animal welfare.</a> Laboratory Animals. 52 (3), 253-264 (2018).</li><li>Brook, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+controlled+mouse+model+for+neonatal+polymicrobial+sepsis.">A controlled mouse model for neonatal polymicrobial sepsis.</a> Journal of Visualized Experiments. (143), e58574 (2019).</li><li>Rittirsch, D., Huber-Lang, M., Flierl, M., Ward, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunodesign+of+experimental+sepsis+by+cecal+ligation+and+puncture.">Immunodesign of experimental sepsis by cecal ligation and puncture.</a> Nature Protocols. 4 (1), 31-36 (2009).</li><li>Baker, C. C., Chaudry, I. H., Gaines, H. O., Baue, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+factors+affecting+mortality+rate+after+sepsis+in+a+murine+cecal+ligation+and+puncture+model.">Evaluation of factors affecting mortality rate after sepsis in a murine cecal ligation and puncture model.</a> Surgery. 94 (2), 331-335 (1983).</li></ol>

CLP, preklinik bir sepsis modeli oluşturmak için karın içine patojenler sokar. CLP yaparken, eksojen bakterilerin girişimini ortadan kaldırmak ve doğru anestezik dozajlarını kullanmak için steril koşullar kullanmak önemlidir16. CLP'nin sepsis modelinin ciddiyetini ve tekrarlanabilirliğini etkileyen üç teknik yönü, bağlı çekumun yüzdesi, çekal ponksiyon için kullanılan iğnenin büyüklüğü ve karın boşluğuna sıkılan dışkı hacmidir. Çekumun yaklaşık% 75'inin ba?...

Sepsis, enfeksiyon1'e karşı düzensiz konakçı yanıtının neden olduğu hayatı tehdit eden organ disfonksiyonu olarak tanımlanır ve septik şok, ciddi sepsis2 vakalarında önde gelen ölüm nedenidir. Sepsis ve septik şok her yıl dünya çapında milyonlarca ölüme nedenolmaktadır 3. Sepsisli hastaların sonuçlarını iyileştirmenin anahtarı, antibiyotik4 gibi tedavilerin derhal başlatılmasıdır. Sepsis tanısında altın standart yöntem mikrobiyal kültürdür; Bununla birlikte, mikrobiyal kültür zaman alıcıdır ve klinik önemi büyük ölçüde sınırlayan yanlış pozitif ve yanlış negatif sonuçlara yol açabilir5. Bu nedenle, sepsisin bir kan biyobelirtecini tanımlamak oldukça arzu edilir. Prokalsitonin ideal bir sepsis biyobelirteci olarak kabul edilir, ancak sepsisi steril hastalıklardan ayırt edemediği için tanısal etkinliği sınırlıdır6. 
Fare çekal ligasyonu ve ponksiyonu (CLP), bilimsel araştırmalarda bir sepsis modeli oluşturmak için yaygın olarak kullanılır. CLP en yaygın kullanılan sepsis modellerinden biridir, çünkü polimikrobiyal peritoniti taklit eder, hem proinflamatuar hem de antienflamatuar immün yanıtları aktive eder7. CLP'nin bakteriyel endotoksin enjeksiyonu gibi alternatif tekniklerden daha klinik olarak ilgili bir sepsis modeli oluşturduğu kabul edilmektedir. Bu nedenle, CLP, araştırma8'de kullanılmak üzere klasik sepsis modeli olarak kabul edilir. Bununla birlikte, CLP'nin en büyük dezavantajı, model şiddeti, çekum bağlanmış yüzdesi, iğne boyutu, delinme sayısı ve laparotomi tekniği gibi çeşitli faktörlerden etkilendiğinden, tekrarlanabilirliğidir. Bu nedenle, CLP kaynaklı sepsis modelinin standartlaştırılmasına ihtiyaç vardır. Bu çalışmada, standartlaştırılmış prosedürü göstermek ve tekrarlanabilirliğini artırmak için CLP kaynaklı sepsis modelinin protokol detayları açıklanmaktadır.
Enflamatuar yanıt, sepsisin erken evresinde ortaya çıkar ve nötrofiller, organ hasarına neden olan aşırı miktarda oksidan ve proteaz salgılar8. Sepsisin patofizyolojisinde anahtar bir faktör, DNA, sitrülinlenmiş histonlar ve antimikrobiyal proteinazlar gibi nükleer ve sitozolik bileşenleri serbest bırakan nötrofil hücre dışı tuzakların (NET'ler) oluşumudur9. Son zamanlarda yapılan çalışmalar, aşırı NET oluşumunun sepsis patolojisine aracılık ettiğini; Bu arada, peptidil arginin deiminazın (PAD) YW3-56 veya Cl-amidin gibi kimyasallar tarafından enzimatik inhibisyonu yoluyla NET'lerin azalması, sepsis10,11'in fare modellerinde hayatta kalma yanlısı bir etki göstermektedir. Sitrüllinlenmiş histon H3 (CitH3) 2011 yılında sepsise özgü bir protein olarak tanımlanmıştır12 ve sonraki yayınlar dolaşımdaki CitH3 konsantrasyonunun sepsis 13,14'ün güvenilir bir tanısal biyobelirteci olduğunu göstermiştir. CitH3, prokalsitoninden daha hassas ve uzun ömürlü bir biyobelirteç olarak kabul edilir ve sepsisi ayırt etmede inflamatuar sitokinlerden daha spesifiktir13.
Bu çalışmada, CLP ile indüklenen bir sepsis fare modelinde sepsisin güvenilir bir tanısal biyobelirtecini değerlendirdik.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>21G needle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3,3&#8217;,5,5&#8217;-tetramethylbenzidine&#160;</td>
			<td>R&#38;D Systems Inc</td>
			<td>DY999</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-CitH3 monoclonal antibody</td>
			<td>laboratory self developed</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-CitH3 polyclonal antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab5103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-rabbit secondary antibody</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td>111-035-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 mice</td>
			<td>Xiangya School of Medicine, Central South University</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cl-amidine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>SML2250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>depilatory cream</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dnase I</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>11284932001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isoflurane</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>26675-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ketoprofen</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>PHR1375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>silk sutures (4-0 &#38; 6-0)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>surgical instruments&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YW3-56</td>
			<td>GLPBIO</td>
			<td>GC48263</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

evaluation of a reliable biomarker in a cecal ligation and puncture-induced mouse model of sepsis

Sepsis, dünya çapında her yıl milyonlarca ölüme neden olan, hayatı tehdit eden ve hızla gelişen ciddi bir hastalıktır. Araştırmacılar, çeşitli hayvan modellerini kullanarak sepsisin patofizyolojisini aydınlatmak için muazzam çaba sarf etmişlerdir; çekal ligasyon ve ponksiyon (CLP) ile indüklenen sepsisin fare modeli laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılmaktadır. CLP modelinin ciddiyetini ve tekrarlanabilirliğini etkileyen üç teknik husus, bağlı çekum yüzdesi, çekal ponksiyon için kullanılan iğnenin boyutu ve karın boşluğuna sıkılan dışkı hacmidir. Sepsisin hızlı ve spesifik tanısı sonucu etkileyen çok önemli bir faktördür. Sepsis tanısında altın standart mikrobiyal kültürdür; ancak, bu işlem zaman alıcıdır ve bazen yanlıştır. Sepsise özgü biyobelirteçlerin tespiti hızlıdır, ancak mevcut biyobelirteçler kısa yarı ömür, özgüllük ve yetersiz duyarlılık nedeniyle tatmin edici değildir. Bu nedenle, erken evrelerde güvenilir bir sepsis biyobelirtecine acil ihtiyaç vardır. Önceki yayınlar, sepsiste aşırı nötrofil hücre dışı tuzakların (NET'ler) meydana geldiğini göstermektedir. NET bileşeni olarak sitrülinlenmiş histon H3 (CitH3), hem septik hayvanlarda hem de hastalarda yükselir ve CitH3'ün varlığı sepsisin güvenilir bir tanısal biyobelirtecidir. Bu çalışmada CLP kaynaklı sepsisin standartlaştırılmış fare modelini tanımlamayı ve sepsisin güvenilir bir kan biyobelirtecini oluşturmayı amaçlamıştır. Çalışmalarımız gelecekte sepsisin erken ve doğru teşhisine katkıda bulunabilir.

Şekil 2A'da gösterildiği gibi, batı lekelenmesi ile sahte grupta CitH3 tespit edilmemiştir. CLP'den sonra serum CitH3 konsantrasyonu önemli ölçüde artmıştır ve bu artış, bir PAD inhibitörü10 olan YW3-56'nın uygulanması yoluyla NET oluşumunun inhibisyonu ile bloke edilmiştir. Şekil 2B, ELISA tarafından belirlenen serumCitH3 konsantrasyonlarını göstermektedir. CLP'den 24 saat sonra, CLP gruplarında CitH3'?...

Watch this Scientific Journal Video about Evaluation of a Reliable Biomarker in a Cecal Ligation and Puncture-Induced Mouse Model of Sepsis at JoVE.com

Evaluation of a Reliable Biomarker in a Cecal Ligation and Puncture-Induced Mouse Model of Sepsis

Bu protokol, bir fare sepsis modelinde çekal ligasyon ve ponksiyonun (CLP) operatif ayrıntılarını sunar. CLP, sepsisin hayvan modelini oluşturmak için en yaygın kullanılan tekniklerden biridir. Bu nedenle, güvenilir araştırma sonuçlarının elde edilmesi için standartlaştırılmış bir CLP protokolü gereklidir.

Sepsisin Çekal Ligasyonu ve Delinmeye Bağlı Fare Modelinde Güvenilir Bir Biyobelirtecin Değerlendirilmesi

Sepsis is a severe life-threatening and rapidly developing disease that causes millions of deaths annually worldwide. Researchers have made tremendous ...

Bu çalışmanın temel amacı, sepsisin güvenilir kan biyobelirteçlerini değerlendirmek için çekal ligasyon ve delinmeye bağlı sepsisin fare modelini kullanmaktır. Çekal ligasyon ve ponksiyon veya kısaca CLP, klinik olarak ilgili bir sepsis modelidir. CLP, sepsis araştırmalarında yaygın olarak kullanılan bir modeldir.Sitrüllinlenmiş histon H3 veya CitH3, sepsis kaynaklı NETosis'ten kaynaklanır. Önceki çalışmamız, CitH3'ün sepsisin güvenilir bir tanısal biyobelirteci olduğunu göstermektedir. Erkek C57BL/6 fareleri seçin.Fareyi tartın ve% 1.5 izofluran soluyarak fareyi anestezi altına alın. Fareyi bir ısıtma yastığına sabitleyin. Karnına tüy dökücü krem uygulayın ve kremi ve saçları çıkarmadan önce bir dakikadan fazla bekletmeyin.Kemirgen hayvan cerrahisi için uygun steril cerrahi aletler hazırlayın. Karın derisini iyotla en az üç kez dezenfekte edin. Ameliyat bölgesini uygun steril cerrahi perde ile örtün.Karın duvarında, linea alba boyunca yaklaşık iki santimetrelik bir kesi yapmak için steril cerrahi makas kullanın. Çekumu peritoneal boşluktan steril cımbızla tanımlayın ve izole edin. Çekumun 75 hacmini 4-0 ipek dikişle bağlayın.Mezenterik kan damarlarını yağlamayın. Dikkat edilmesi gereken, çekum ligatının farklı yüzdesi sepsisin şiddetini belirler. %25'i düşük dereceli sepsise, %50'si orta dereceli sepsise ve %75'i yüksek dereceli sepsise yol açar.Çekumu, kuyruk ucu ile ligasyon arasındaki orta noktada 21 gauge iğne ile bir kez içinden ve içinden delin. Dışkıyı nüfuz deliklerinden çekumdan yavaşça sıkın. Dikkat edilmesi gereken, periton boşluğuna sıkılan dışkı miktarı tutarlı olmalıdır, çünkü dışkı aynı zamanda sepsisin şiddetini de belirler.Çekumu ve dışkıyı karın boşluğuna nazikçe değiştirin. Karın kas tabakasını ve cilt tabakasını 6-0 ipek dikişle kapatın. Kesini iyotla dezenfekte edin.Ketoprofen enjeksiyonu, kilogram başına beş miligram, çekumu önlemek için karnın sol alt çeyreğinde yapılmalıdır. Tamamen iyileşene kadar fareyi bir ısıtma yastığına yerleştirin. Fare, sıcaklık kontrollü bir odaya yerleştirilir ve yiyecek ve suya ücretsiz erişim sağlanır.Hayvanlar, sunulan çalışmamıza dayanarak önceden tanımlanmış son noktalarımızla ilgili sepsis semptomları ile aşırı dozda karbondioksit ile ötenazi yapılacaktır. Fareler rastgele sahte grup, CLP grubu ve CLP artı Cl-amidin veya YW3-56 tedavi grubuna ayrılır. Sahte gruptaki fareler, çekum ligasyonu ve delinmesi hariç tüm CLP prosedürlerini alırlar.Periferik kanı ameliyat sonrası 24 saatte toplayın ve santrifüjleme yoluyla serum hazırlayın. CitH3 konsantrasyonu, batı lekelenmesi ve kendi geliştirdiği bir ELISA kiti ile belirlendi. Şekil ikide gösterildiği gibi, sahte grupta CitH3 saptanmadı.CLP sokulmasından sonra CitH3 seviyeleri yükseldi ve PAD inhibisyonu ile önemli ölçüde zayıfladı. Verilerimize dayanarak, dolaşımdaki CitH3'ün sepsisin güvenilir bir tanısal biyobelirteci olduğu sonucuna vardık.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Colon Ascendens Stent Peritonitis (CASP) - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

Colon Ascendens Stent Peritonitis CASP - a Standardized Model for Polymicrobial Abdominal Sepsis

Kolon Peritonit Stent Ascendens (CASP) - polimikrobik Abdominal Sepsis için bir Standart Model

Sepsis remains a persistent problem on intensive care units all over the world. Understanding the complex mechanisms of sepsis is the precondition for ...

Cecal Ligation and Puncture-induced Sepsis as a Model To Study Autophagy in Mice

Çekal ligasyon ve Farelerde Autophagy incelemek için bir model olarak Sepsis Patamaya kaynaklı

Experimental sepsis can be induced in mice using the cecal ligation and puncture (CLP) method, which causes polymicrobial sepsis. Here, a protocol is ...

Influenza A Virus Studies in a Mouse Model of Infection

Grip A virüs enfeksiyonu bir fare modeli çalışmalarda

Influenza viruses cause over 500,000 deaths worldwide1 and are associated with an annual cost of 12 - 14 billion USD in the United States alone ...

A Controlled Mouse Model for Neonatal Polymicrobial Sepsis

Yenidoğan Polymicrobial Sepsis için kontrollü fare modeli

Neonatal sepsis remains a global burden. A preclinical model to screen effective prophylactic or therapeutic interventions is needed. Neonatal mouse ...

Design of Cecal Ligation and Puncture and Intranasal Infection Dual Model of Sepsis-Induced Immunosuppression

Sepsis kaynaklı bağışıklık bastırma, çekal ligasyon ve delinme ve Intranasal enfeksiyon çift model tasarımı

Sepsis, a severe and complicated life-threatening infection, is characterized by an imbalance between pro- and anti-inflammatory responses in multiple ...

Isolation and Quantitative Evaluation of Brush Cells from Mouse Tracheas

Fırça hücrelerinin Mouse tracheas 'tan izolasyon ve nicel değerlendirilmesi

Tracheal brush cells are cholinergic chemosensory epithelial cells poised to transmit signals from the airway lumen to the immune and nervous systems. ...

A Neonatal Imaging Model of Gram-Negative Bacterial Sepsis

Gram-Negatif Bakteriyel Sepsisin Yenidoğan Görüntüleme Modeli

Neonates are at an increased risk of bacterial sepsis due to the unique immune profile they display in the first months of life. We have established a ...

A Contemporary Warming/Restraining Device for Efficient Tail Vein Injections in a Murine Fungal Sepsis Model

Murine Mantar Sepsis Modelinde Verimli Kuyruk Damarı Enjeksiyonları için Çağdaş Isınma/Kısıtlama Cihazı

In rodent models, tail vein injections are important methods for intravenous administration of experimental agents. Tail vein injections typically involve ...

A Mouse Model of Chronic Liver Fibrosis for the Study of Biliary Atresia

Biliyer atrezi çalışması için kronik karaciğer fibrozisinin bir fare modeli

Biliary atresia (BA) is a fatal disease involving obstructive jaundice, and it is the most common indication for liver transplantation in children. Due to ...

A Mouse Ear Model for Allergic Contact Dermatitis Evaluation

Alerjik Kontakt Dermatit Değerlendirmesi için Fare Kulak Modeli

Skin is the human body&#39;s first line of defense and one of the most exposed organs to environmental chemicals. Allergic contact dermatitis (ACD) is a ...