Purification of Ubiquitinated Proteins under Nondenaturing Conditions
5:01
Purification of Ubiquitinated Proteins under Denaturing Conditions
7:49
Detection of Purified Ubiquitinated Proteins by Western Blotting
8:29
Results: Ubiquitinated p53 Proteins Purified under Nondenaturing and Denaturing Conditions
10:22
Conclusion
Transcript
이 프로토콜을 사용하면 주어진 단백질의 유비퀴틴화 된 형태를 포유류 세포로부터 효율적으로 정제하여 단백질 기능을 조절하는 유비퀴틴화의 역할에 대한 연구를 용이하게 할 수 있습니다. 시험관내 정제와 비교하여 포유동물 세포에서 유비퀴틴화된 단백질의 정제는 보다 방사선학적 조건 하에서 표적 단백질의 유비퀴틴 결합 모드를 유지합니다. 3 개의 15 밀리리터 원심 분리 튜브에 1.5 밀리리터의 감소 된 혈청 배지를 추가하여 시작하십시오.
Sign in or start your free trial to access this content
프로토콜은 p53 종양 억제 단백질을 예로 사용하여 포유류 세포로부터 유비퀴틴화된 단백질을 정제하는 단계별 방법을 설명합니다. 유비퀴틴화된 p53 단백질은 엄격한 비변성 및 변성 조건 하에서 세포로부터 정제하였다.