Name: mouse abdominal aortic aneurysm model induced by perivascular application of elastase
Uploaded: 2022-02-11T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase at JoVE.com

نشكر وحدة طب المختبر بجامعة ميشيغان على مساعدتها في تغذية الحيوانات وتربيتها. هذه الدراسة مدعومة من قبل NIH RO1 HL138139 ، NIH RO1 HL153710 إلى J. Zhang ، NIH RO1 HL109946 ، RO1 HL134569 إلى Y.E. Chen ، ومنحة جمعية القلب الأمريكية 20POST35110064 إلى G. Zhao.

تمت الموافقة على بروتوكولات الحيوانات من قبل لجنة جامعة ميشيغان المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (PRO00010092). تم استخدام الفئران من النوع البري C57BL/6J من الذكور والإناث ، ~ 7 أسابيع من العمر ، لإجراء التجارب.
1. إعداد الحيوان
<ol><li>إطعام الفئران مع النظام الغذائي تشاو...

<ol>
	<li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice:+Abdominal+aortic+aneurysms.">Clinical practice: Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371 (22), 2101-2108 (2014).</li><li>Karthikesalingam, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mortality+from+ruptured+abdominal+aortic+aneurysms:+Clinical+lessons+from+a+comparison+of+outcomes+in+England+and+the+USA.">Mortality from ruptured abdominal aortic aneurysms: Clinical lessons from a comparison of outcomes in England and the USA.</a> Lancet. 383 (9921), 963-969 (2014).</li><li>Noel, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ruptured+abdominal+aortic+aneurysms:+The+excessive+mortality+rate+of+conventional+repair.">Ruptured abdominal aortic aneurysms: The excessive mortality rate of conventional repair.</a> Journal of Vascular Surgery. 34 (1), 41-46 (2001).</li><li>Lederle, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rupture+rate+of+large+abdominal+aortic+aneurysms+in+patients+refusing+or+unfit+for+elective+repair.">Rupture rate of large abdominal aortic aneurysms in patients refusing or unfit for elective repair.</a> JAMA. 287 (22), 2968-2972 (2002).</li><li>Kochanek, K. D., Xu, J., Murphy, S. L., Minino, A. M., Kung, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deaths:+Final+data+for+2009.">Deaths: Final data for 2009.</a> National Vital Statistics Reports. 60 (3), 1 (2011).</li><li>Daugherty, A., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+abdominal+aortic+aneurysm+formation.">Mechanisms of abdominal aortic aneurysm formation.</a> Current Atherosclerosis Reports. 4 (3), 222-227 (2002).</li><li>Quintana, R. A., Taylor, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+mechanisms+of+aortic+aneurysm+formation.">Cellular mechanisms of aortic aneurysm formation.</a> Circulation Research. 124 (4), 607-618 (2019).</li><li>Kuivaniemi, H., Ryer, E. J., Elmore, J. R., Tromp, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Understanding+the+pathogenesis+of+abdominal+aortic+aneurysms.">Understanding the pathogenesis of abdominal aortic aneurysms.</a> Expert Review of Cardiovascular Therapy. 13 (9), 975-987 (2015).</li><li>Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+abdominal+aortic+aneurysm+and+their+role+in+furthering+management+of+human+disease.">Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease.</a> Cardiovascular Pathology. 20 (2), 114-123 (2011).</li><li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development.">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li><li>Senemaud, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+relevance+and+recent+advances+of+animal+models+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Translational relevance and recent advances of animal models of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (3), 401-410 (2017).</li><li>Lysgaard Poulsen, J., Stubbe, J., Lindholt, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+used+to+explore+abdominal+aortic+aneurysms:+A+systematic+review.">Animal models used to explore abdominal aortic aneurysms: A systematic review.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 52 (4), 487-499 (2016).</li><li>Tsui, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+abdominal+aortic+aneurysms.">Experimental models of abdominal aortic aneurysms.</a> Open Cardiovascular Medicine Journal. 4, 221-230 (2010).</li><li>Manning, M. W., Cassi, L. A., Huang, J., Szilvassy, S. J., Daugherty, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Abdominal+aortic+aneurysms:+Fresh+insights+from+a+novel+animal+model+of+the+disease.">Abdominal aortic aneurysms: Fresh insights from a novel animal model of the disease.</a> Vascular Medicine. 7 (1), 45-54 (2002).</li><li>Chiou, A. C., Chiu, B., Pearce, W. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+aortic+aneurysm+produced+by+periarterial+application+of+calcium+chloride.">Murine aortic aneurysm produced by periarterial application of calcium chloride.</a> Journal of Surgical Research. 99 (2), 371-376 (2001).</li><li>Allaire, E., Guettier, C., Bruneval, P., Plissonnier, D., Michel, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-free+arterial+grafts:+Morphologic+characteristics+of+aortic+isografts,+allografts,+and+xenografts+in+rats.">Cell-free arterial grafts: Morphologic characteristics of aortic isografts, allografts, and xenografts in rats.</a> Journal of Vascular Surgery. 19 (3), 446-456 (1994).</li><li>Anidjar, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastase-induced+experimental+aneurysms+in+rats.">Elastase-induced experimental aneurysms in rats.</a> Circulation. 82 (3), 973-981 (1990).</li><li>Sun, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mast+cells+modulate+the+pathogenesis+of+elastase-induced+abdominal+aortic+aneurysms+in+mice.">Mast cells modulate the pathogenesis of elastase-induced abdominal aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 117 (11), 3359-3368 (2007).</li><li>Bhamidipati, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+novel+murine+model+of+aortic+aneurysms+using+peri-adventitial+elastase.">Development of a novel murine model of aortic aneurysms using peri-adventitial elastase.</a> Surgery. 152 (2), 238-246 (2012).</li><li>Pyo, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+gene+disruption+of+matrix+metalloproteinase-9+(gelatinase+B)+suppresses+development+of+experimental+abdominal+aortic+aneurysms.">Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms.</a> Journal of Clinical Investigation. 105 (11), 1641-1649 (2000).</li><li>Tanaka, A., Hasegawa, T., Chen, Z., Okita, Y., Okada, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rat+model+of+abdominal+aortic+aneurysm+using+a+combination+of+intraluminal+elastase+infusion+and+extraluminal+calcium+chloride+exposure.">A novel rat model of abdominal aortic aneurysm using a combination of intraluminal elastase infusion and extraluminal calcium chloride exposure.</a> Journal of Vascular Surgery. 50 (6), 1423-1432 (2009).</li><li>Busch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Four+surgical+modifications+to+the+classic+elastase+perfusion+aneurysm+model+enable+haemodynamic+alterations+and+extended+elastase+perfusion.">Four surgical modifications to the classic elastase perfusion aneurysm model enable haemodynamic alterations and extended elastase perfusion.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 56 (1), 102-109 (2018).</li><li>Liang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=KLF11+protects+against+venous+thrombosis+via+suppressing+tissue+factor+expression.">KLF11 protects against venous thrombosis via suppressing tissue factor expression.</a> Thrombosis and Haemostasis. , (2021).</li><li>Marinov, G. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Can+the+infusion+of+elastase+in+the+abdominal+aorta+of+the+Yucatan+miniature+swine+consistently+produce+experimental+aneurysms.">Can the infusion of elastase in the abdominal aorta of the Yucatan miniature swine consistently produce experimental aneurysms.</a> Journal of Investigative Surgery. 10 (3), 129-150 (1997).</li><li>Shannon, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porcine+model+of+infrarenal+abdominal+aortic+aneurysm.">Porcine model of infrarenal abdominal aortic aneurysm.</a> Journal of Visualized Experiments. (153), e60169 (2019).</li></ol>

تم الإبلاغ عن نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز لأول مرة من قبل Anidjar et al. باستخدام الفئران في عام 199017. تم تقديم مجموعة متنوعة من الإصدارات المعدلة في السنوات الثلاثين الماضية ، إلى جانب تحسن كبير في التقنيات الجراحية19،20،21،22....

يعرف تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) بأنه توسع قطاعي للشريان الأورطي البطني مع زيادة بنسبة 50٪ على الأقل في قطر الوعاء1. AAA من المحتمل أن تكون قاتلة ، حيث يمكن أن يؤدي التمزق إلى معدل وفيات مرتفع للغاية ، حتى مع التدخل2،3،4. وقد أفيد أن AAA مسؤولة عن ما يقرب من 13000 حالة وفاة سنويا في الولايات المتحدة الأمريكية ، مما يجعلها السبب الرئيسيالعاشر للوفاة 1,5.
لم يتم بعد فهم التسبب في AAA بالكامل 6,7,8. للتحقيق في الآلية الجزيئية ل AAA واختبار الأهداف العلاجية المحتملة ، تم إنشاء العديد من نماذج AAA التجريبية 9,10. تشمل نماذج القوارض من AAA نماذج الإيلاستاز وكلوريد الكالسيوم والأنجيوتنسين II و xenograft ، من بينها نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز هو ثاني أكثر النماذج استخداما 10،11،12،13،14،15،16،17. يتضمن هذا النموذج التسريب المباشر أو تطبيق elastase البنكرياس الخنازير (PPE) على الجزء الرقيق من الشريان الأورطي. سيؤدي تغلغل الإيلاستاز في الطبقة الإنسية من الشريان الأورطي إلى تدهور الصفائح المرنة وتسلل الخلايا الالتهابية ، مما يؤدي إلى فقدان سلامة جدار الأبهر والتمدد اللاحق للشريان الأورطي البطني 7,18. تم الإبلاغ عن نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز لأول مرة من قبل Anidjar et al. في عام 1990 باستخدام الفئران ، حيث تم اختراق جزء معزول من الشريان الأورطي مع elastase17. في وقت لاحق من عام 2012 ، تم الإبلاغ عن نموذج معدل باستخدام تطبيق حول المعاصرة لمعدات الوقاية الشخصية من قبل Bhamidipati et al.19. في الوقت الحاضر ، فإن معظم العمليات الجراحية لنموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز مستوحاة من مجموعة Bhamidipati ويتم إجراؤها باستخدام التطبيق الخارجي بدلا من التروية داخل اللمعان لمعدات الوقاية الشخصية. على الرغم من أن التطبيق الخارجي لديه متطلبات أقل على المهارات الجراحية الدقيقة ، إلا أن معدل حدوث AAA أقل نسبيا وحجم أصغر إلى حد ما من التروية داخل اللمعان11,19.
على الرغم من استخدامه على نطاق واسع في دراسات AAA ، إلا أن نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز يمتلك قيودا معينة. أحد التحذيرات من هذا النموذج هو الاختلافات الحتمية في كيفية إجراء الجراحة ، والتي يمكن أن تؤدي إلى مسألة التكاثر. على سبيل المثال ، قد يوجد اختلاف في الإجراء الجراحي فيما يتعلق بكيفية عزل الجزء اللعابي من الشريان الأورطي وأي جزء من الجزء يتم اختياره لتطبيق معدات الوقاية الشخصية بين المختبرات المختلفة. يمكن أن يختلف النشاط الأنزيمي لمعدات الوقاية الشخصية والمدة الزمنية لحضانة معدات الوقاية الشخصية. ومع ذلك ، فإن هذه كلها محددات أساسية تؤثر على معدل تكوين AAA النهائي وقطر تمدد الأوعية الدموية. إن اختلاف هذه المحددات الحرجة يجعل مقارنة بيانات دراسات AAA من مجموعات مختلفة باستخدام هذا النموذج صعبة للغاية. لذلك ، هناك حاجة إلى إجراء جراحي موحد كأداة للحصول على نتائج قابلة للمقارنة من مختلف المؤسسات.
توضح هذه المقالة بروتوكولا جراحيا موحدا لنموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز من خلال التطبيق المباشر لمعدات الوقاية الشخصية على Adventitia من الشريان الأورطي البطني داخل الكلوي في الفئران. كما ستتم مناقشة التفاصيل حول المواد الجراحية والإجراءات الضرورية لتوليد AAA بنجاح وقوة في الفئران باستخدام هذا النموذج.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>6-0 non-absorbable monofilament suture</td>
			<td>Pro Advantage</td>
			<td>P420697</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carprofen</td>
			<td>Zoetis Inc.</td>
			<td>NDC: 54771-8507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chow Diet</td>
			<td>LabDiet</td>
			<td>3005659-220</td>
			<td>PicoLab 5L0D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Applicator</td>
			<td>Dynarex</td>
			<td>4303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Pad</td>
			<td>Rael</td>
			<td>UPC: 810027130969</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism 8</td>
			<td>GraphPad Software Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Version 8.4.3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grarfe Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11051-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Halsted Mosquito Hemostats</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>13009-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Par Pharmaceutical</td>
			<td>NDC: 42023-0115-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrile gloves</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td>19-130-1597</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>15140122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Porcine pancreatic elastase</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E1250-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14068-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile 0.9% saline solution</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2B1324X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Akorn</td>
			<td>NDC: 59399-110-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mouse abdominal aortic aneurysm model induced by perivascular application of elastase

تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني (AAA) ، على الرغم من أنه بدون أعراض في المقام الأول ، يحتمل أن يهدد الحياة لأن تمزق AAA عادة ما يكون له نتيجة مدمرة. حاليا ، هناك العديد من النماذج التجريبية المتميزة ل AAA ، كل منها يؤكد على جانب مختلف في التسبب في AAA. نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز هو ثاني أكثر نماذج AAA استخداما للقوارض. يتضمن هذا النموذج التسريب المباشر أو تطبيق elastase البنكرياس الخنازير (PPE) على الجزء الرقيق من الشريان الأورطي. نظرا للتحديات التقنية ، يتم تنفيذ معظم نماذج AAA التي يسببها الإيلاستاز في الوقت الحاضر باستخدام التطبيق الخارجي بدلا من التسريب داخل اللمعان لمعدات الوقاية الشخصية. سيؤدي تسلل الإيلاستاز إلى تدهور الصفائح المرنة في الطبقات الإنسية ، مما يؤدي إلى فقدان سلامة جدار الأبهر والتمدد اللاحق للشريان الأورطي البطني. ومع ذلك ، فإن أحد عيوب نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز هو الاختلاف الحتمي لكيفية إجراء الجراحة. على وجه التحديد ، يمكن أن تكون التقنية الجراحية لعزل الجزء اللعابي من الشريان الأورطي ، والمواد المستخدمة في تغليف الشريان الأورطي وحضانة معدات الوقاية الشخصية ، والنشاط الأنزيمي لمعدات الوقاية الشخصية ، والمدة الزمنية لتطبيق معدات الوقاية الشخصية ، كلها محددات مهمة تؤثر على معدل تكوين AAA النهائي وقطر تمدد الأوعية الدموية. والجدير بالذكر أن الاختلاف في هذه العوامل من الدراسات المختلفة حول AAA يمكن أن يؤدي إلى قضايا التكاثر. توضح هذه المقالة عملية جراحية مفصلة لنموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز من خلال التطبيق المباشر لمعدات الوقاية الشخصية على أدفنتيتيا الشريان الأورطي البطني اللعابي في الماوس. بعد هذا الإجراء ، يمكن تحقيق معدل تكوين AAA مستقر يبلغ حوالي 80٪ في الفئران الذكور والإناث. يمكن تعزيز اتساق وقابلية تكرار دراسات AAA باستخدام نموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز بشكل كبير من خلال إنشاء إجراء جراحي قياسي.

تم تشغيل ما مجموعه ثلاثة وعشرين فأرا من النوع البري (WT) عمرها 7 أسابيع ، بما في ذلك 12 أنثى و 11 ذكرا ، وفقا للبروتوكول المعروض. كان معدل البقاء على قيد الحياة 100٪ (باستثناء الوفيات الجراحية). تم قياس أقصى قطر للشريان الأورطي البطني بواسطة الفرجار.
تم تعريف AAA على أنه توسيع الشريان...

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase at JoVE.com

Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model Induced by Perivascular Application of Elastase

يصف هذا البروتوكول طريقة جراحية موحدة لنموذج AAA الناجم عن الإيلاستاز من خلال التطبيق المباشر للإيلاستاز على أدفينتيتيا الشريان الأورطي البطني اللعينى في الفئران.

نموذج تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني للفأر الناجم عن التطبيق المحيطي للإيلاستيز

Abdominal aortic aneurysm (AAA), although primarily asymptomatic, is potentially life-threatening as the rupture of AAA usually has a devastating outcome. ...

هذا بروتوكول موحد لتمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني الناجم عن الإيلاستاز ، والذي من شأنه أن يعزز بشكل كبير قابلية التكاثر واتساق الدراسات باستخدام هذا النموذج. هذه التقنية لديها معدل تحريض ثابت من تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني. كما أنها تمتلك ميزة انخفاض النفقات ووقت التشغيل القصير ، مما سيؤدي إلى قوة إحصائية أقوى وقابلية للتكرار.تحتاج إلى التأكد من إزالة الأنسجة الضامة التي تغطي الشريان الأورطي بحيث يكون للإيلاستاز فرصة أفضل للاختراق ، ولكن احرص على عدم إتلاف الأوعية. للبدء ، قم بإعطاء خمسة ملليغرام لكل كيلوغرام من الكاربروفين تحت الجلد ، قبل 30 دقيقة من تحريض التخدير. اختبر الماوس المخدر لعدم استجابة قرصة إصبع القدم قبل شق الجلد.قم بعمل شق طولي 2.5 سم على الجلد ، على طول خط الوسط من البطن الأوسط والسفلي. اسحب العضلات الأساسية بلطف وقم بعمل شق طولي 2.5 سم على طول خط ألبا. استخدم أدوات تطبيق ذات رؤوس قطنية مبللة لتحريك الأمعاء والمعدة إلى الجانب الأيمن من الماوس ، والوصول إلى تجويف البطن.استخدم الملقط لإزالة النسيج الضام الذي يغطي الشريان الأورطي البطني والوريد الأجوف السفلي برفق. استخدم الملقط لتشريح الجانب الخلفي من الشريان الأورطي البطني والوريد الأجوف السفلي بلطف من العضلات الكامنة. ضع قطعة من أربعة سنتيمترات في شريط قفاز أربعة ملليمترات عبر الجانب الخلفي من الشريان الأورطي البطني والوريد الأجوف السفلي ، وقم بتصويب الشريط.ضع الشريط على بعد حوالي 0.5 سم من الشريان الكلوي الأيمن. فوق الشريط ، ضع قطعة من ثلاثة سنتيمترات في وسادة قطنية بمليمترين من خلال الجانب الخلفي من الشريان الأورطي البطني والوريد الأجوف السفلي. ثم ، قم بتصويب وسادة القطن.لاحتضان الإيلاستاز ، استخدم ماصة لإسقاط 30 ميكرولتر من elastase البنكرياس الخنزير على جزء الشريان الأورطي فوق وسادة القطن. لف وسادة القطن والشريط حول الشريان الأورطي والوريد الأجوف السفلي. شطف قطعة من 10 سم × 10 سم الشاش مع معقمة 0.9 ٪ المالحة ووضعها على البطن.بعد 30 دقيقة ، قم بإزالة الشريط ووسادة القطن باستخدام الملقط. ري الشريان الأورطي وتجويف البطن مع 500 ميكرولتر من محلول ملحي معقم بنسبة 0.9٪. استخدم الشاش لامتصاص المياه المالحة المتبقية.أعد تقريب طبقات العضلات باستخدام خياطة أحادية الخيوط غير قابلة للامتصاص 6-0. ثم ، أغلق الجلد بثلاثة إلى أربعة متقطعة عند 6-0 خيوط أحادية غير قابلة للامتصاص. بلغ معدل الإصابة بتمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني في اليوم 14 بعد الجراحة 91.7٪ للحيوانات الإناث ، في حين كان معدل الإصابة بالحيوانات الذكور 72.7٪ من بين الحيوانات ال 19 التي تم فيها تطوير تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني ، لوحظ زيادة بمقدار 1.7 ضعف و 1.6 ضعف في الحد الأقصى لقطر الأبهر البطني ، في الإناث والذكور على التوالي ، مقارنة بالضوابط غير الجراحية.يتم عرض صور تمثيلية للشريان الأورطي من المجموعات غير الجراحية والجراحية في اليوم 14 بعد الجراحة. كانت هذه التقنية بمثابة أداة محتملة للمساعدة في تشريح الفيزيولوجيا المرضية للثلاثي A والمساعدة في اكتشاف أهداف علاجية محتملة جديدة.

Research

JoVE Journal

Biology

Creation of Murine Experimental Abdominal Aortic Aneurysms with Elastase 

خلق الفئران التجريبية تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني مع إيلاستاز

Transient intraluminal infusion of porcine pancreatic elastase into the infrarenal segment of the abdominal aorta is the most widely used animal model of ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

في الجسم الحي التصوير والعلاجات العلاجية في الفأر نموذج مثلي من سرطان المبيض

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

جيل من الفئران المستمدة من الخلايا الجذعية المحفزة المستحثة

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

في فيفو تتبع 4 الأبعاد للالجذعية المكونة للدم والسلف الكبار في خلايا الفأر قبي نخاع العظم

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

العزلة والثقافة الابتدائية من خلايا الفأر الأورطي غشائي

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

برازي تحليل جلايكورتيكود: رصد الغدة الكظرية غير الغازية في الخيليات

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

حقن الخلية الداخلية عبر كتلة من الخلايا الجذعية الجنينية يؤدي إلى ارتفاع في أسعار تشيميريسم

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

Differentiation Capacity of Human Aortic Perivascular Adipose Progenitor Cells

قدرة التمايز للخلايا الدهنية ارتشاح الابهري البشرية السلف

Adipose tissue is a rich source of multi-potent mesenchymal stem cells (MSC) capable of differentiating into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic ...