Name: isolation, expansion, and differentiation of mesenchymal stem cells from the infrapatellar fat pad of the goat stifle joint
Uploaded: 2022-08-02T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation, Expansion, and Differentiation of Mesenchymal Stem Cells from the Infrapatellar Fat Pad of the Goat Stifle Joint at JoVE.com

एसएच आईआईटी कानपुर के इंस्टीट्यूट पोस्ट-डॉक्टोरल फैलोशिप और डीएसटी (सीड डिवीजन) (एसपी / वाईओ / 618/2018) से एसवाईएसटी अनुदान से समर्थन स्वीकार करता है। एएम ने इंस्टीट्यूट फैलोशिप के लिए भारतीय प्रौद्योगिकी संस्थान-कानपुर (आईआईटी-कानपुर) को स्वीकार किया। डीएसके ने गिरीश जानकीनाथ चेयर प्रोफेसरशिप और जैव प्रौद्योगिकी विभाग, भारत को वित्त पोषण (बीटी /पीआर 22445/ एमईडी / 32/571/2016) के लिए स्वीकार किया। एएम, एसएच और डीएसके ने आईआईटी-कानपुर में द मेहता फैमिली सेंटर फॉर इंजीनियरिंग इन मेडिसिन को उनके उदार समर्थन के लिए धन्यवाद दिया।

प्रोटोकॉल बकरियों से आईएफपी-एमएससी के अलगाव पर आधारित है। बकरी आईएफपी और रक्त एक स्थानीय बूचड़खाने से एकत्र किए गए थे। चूंकि इस तरह के ऊतक संग्रह एक संस्थागत पशु आचार समिति के दायरे से बाहर हैं, इसलिए न...

वर्तमान प्रोटोकॉल में, बकरी आईएफपी से एमएससी के अलगाव के लिए एक सरल, विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य विधि प्रदान की गई है। इस विधि का उपयोग करके पृथक कोशिकाओं का उपयोग इन विट्रो ऊतक पुनर्जन?...

मेसेनकाइमल स्टेम सेल (एमएससी) पुनर्योजी चिकित्सा 1,2 में सेल-आधारितउपचारों के लिए एक आकर्षक उम्मीदवार हैं। उन्हें अस्थि मज्जा, गर्भनाल, प्लेसेंटा, दंत लुगदी और चमड़े के नीचे वसा ऊतक जैसे विभिन्न ऊतक स्रोतों से काटा जा सकताहै। हालांकि, चूंकि वयस्कों में स्टेम कोशिकाओं की उपलब्धता सीमित है और उनकी अलगाव प्रक्रिया अक्सर आक्रामक होती है (जिसके परिणामस्वरूप दाता साइट रुग्णता होती है), एक वैकल्पिक स्टेम सेल स्रोत होना वांछनीय है जो इन चुनौतियों को दरकिनार कर सकता है।
घुटने का जोड़ विभिन्न सेल प्रकारों का एक डिपो है, जैसे कि इन्फ्रापेटलर वसा पैड-व्युत्पन्न एमएससी, श्लेष झिल्ली-व्युत्पन्न एमएससी, श्लेष द्रव-व्युत्पन्न एमएससी, लिगामेंट फाइब्रोब्लास्ट, आर्टिकुलर चोंड्रोसाइट्स, आदि 4,5,6। इन कोशिकाओं में मस्कुलोस्केलेटल ऊतक इंजीनियरिंग-आधारित अनुसंधान में व्यापक रूप से पता लगाने की क्षमता है। घुटने के जोड़ में स्थित एडीपोज डिपो, जिसे इन्फ्रापेटलर फैट पैड (आईएफपी) या होफा के वसा पैड के रूप में जाना जाता है, एमएससी डिपो का एक आशाजनक और वैकल्पिक विकल्प है। आईएफपी एमएससी का अपेक्षाकृत आसानी से सुलभ और चिकित्सकीय रूप से उपलब्ध स्रोत है, क्योंकि इसे नियमित रूप से घुटने की आर्थ्रोस्कोपी या ओपन नी सर्जरी के दौरान सर्जिकल कचरे के रूप में निकाला और फेंक दिया जाता है। आईएफपी को हटाना न्यूनतम दाता-साइट रुग्णता से जुड़ा हुआ है, जो इसे एक आकर्षक ऊतक स्रोत भी बनाता है। एक समान फेनोटाइपिक प्रोफाइल होने के बावजूद, आईएफपी (आईएफपी-एमएससी) के एमएससी ने अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न मेसेनकाइमल स्टेम सेल (बीएम-एमएससी) 6 की तुलना में क्लोनोजेनिक क्षमता को बढ़ाया है और चमड़े के नीचे वसा-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (एडीएससी) 7 की तुलना में बेहतर प्रोलिफेरेटिव क्षमता है। दिलचस्प बात यह है कि श्लेष द्रव-व्युत्पन्न एमएससी (एसएफ-एमएससी) की तुलना में, आईएफपी-एमएससी देर से मार्ग पर अपनी प्रोलिफेरेटिव क्षमता नहीं खोते हैं, न ही देर से मार्ग पर दोगुना समय बढ़ता है। इससे पता चलता है कि, सेल विस्तार के दौरान, आईएफपी-एमएससी अपने प्रसार दर8 से समझौता किए बिना इन विट्रो ऊतक इंजीनियरिंग अनुप्रयोगों के लिए पर्याप्त संख्या में कोशिकाओं को प्राप्त कर सकते हैं। हाल के अध्ययनों ने यह भी सुझाव दिया है कि आईएफपी-एमएससी में अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न एमएससी (बीएमएससी) और वसा-व्युत्पन्न एमएससी (एडीएससी) की तुलना में बेहतर चोंड्रोजेनिक भेदभाव क्षमता होती है, संभवतः आर्टिकुलर कार्टिलेज के लिए उनकी शारीरिक निकटता के कारण, उपास्थि ऊतक इंजीनियरिंग 6,7,9,10 के लिए उनकी उपयुक्तता का संकेत देती है। इसके अलावा, उनके पास आयु-स्वतंत्र ओस्टोजेनिक भेदभाव क्षमताभी है। आईएफपी-एमएससी के इंट्रा-आर्टिकुलर इंजेक्शन को पुराने ऑस्टियोआर्थराइटिस (ओए) 12,13 के रोगियों में दर्द को कम करने और घुटने के जोड़ों के कार्यों में सुधार करने के लिए दिखाया गया है। इसके अलावा, रोग संबंधी स्थितियों के दौरान भड़काऊ साइटोकिन्स की उपस्थिति में आईएफपी-एमएससी के मजबूत इम्यूनोसप्रेसिव प्रतिक्रियाओं और बेहतर इम्यूनोमॉड्यूलेटरी गुणों कीभी सूचना दी गई है।
आईएफपी-एमएससी एमएससी का एक आशाजनक और वैकल्पिक स्रोत हैं; हालांकि, ऊतक इंजीनियरिंग और पुनर्योजी चिकित्सा में उनके चिकित्सीय लाभ अपेक्षाकृत कम खोजे गए हैं। आईएफपी-एमएससी पर मौजूदा अध्ययनों ने मानव दाताओं से कोशिकाओं का प्रमुख रूप से उपयोग किया है। इनमें से, कुछ हालिया अध्ययनों ने स्वस्थ मानव दाताओं (गैर-गठिया रोगियों, 17-60 वर्ष की आयु) 6,14 से आईएफपी-एमएससी की जांच की है, जबकि अधिकांश अध्ययनों ने कुल घुटने की प्रतिस्थापन सर्जरी (रोगग्रस्त रोगी, 70-80 वर्ष की आयु) से गुजरने वाले वृद्ध रोगियों से आईएफपी-एमएससी का उपयोग किया है। चूंकि उम्र और बीमारी दोनों को स्टेम कोशिकाओं के सामान्य कामकाज (कार्यात्मक क्षमता की कम संख्या और हानि) को बदलने के लिए जाना जाता है, इससे संभावित रूप से एमएससी-आधारित अध्ययन 7,15,16,17 के परिणाम में विसंगतियां हो सकती हैं। इसके अलावा, पैथोफिजियोलॉजिकल स्थितियों (जैसे, गठिया और मोटापा) वाले रोगियों से आईएफपी-एमएससी का उपयोग भी विट्रो में स्वस्थ कोशिकाओं की बुनियादी विशेषताओं को समझने में कठिनाई पैदा करता है, जिससे एमएससी-आधारित उपचारों के विकास में एक सीमित कारक के रूप में कार्य किया जाता है। इन मुद्दों को दूर करने के लिए, स्वस्थ दाताओं से आईएफपी-एमएससी का उपयोग महत्वपूर्ण है। जैसा कि एक स्वस्थ मानव दाता तक पहुंच चुनौतीपूर्ण है, पशु मॉडल एक बेहतर विकल्प हो सकता है। इस संबंध में, कुछ अध्ययन हैं जहां आईएफपी को चूहों से अलग किया गया है। हालांकि, सामान्य चूहों में वसा पैड के छोटे आकार के कारण, कई जानवरों के वसा ऊतकों को विस्तृत प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं को निष्पादित करने के लिए पर्याप्त ऊतक प्राप्त करने के लिए जोड़ा गयाहै। इसलिए, एक बड़े पशु मॉडल की आवश्यकता है, जो कोशिकाओं की अधिक संख्या की आवश्यकता को पूरा कर सकता है और साथ ही पशु अनुसंधान में 3 आर सिद्धांतों (परिष्कृत, प्रतिस्थापित और कम) का अनुपालन करसकता है। बड़े जानवरों के उपयोग का ट्रांसलेशनल अनुसंधान में महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। विशेष रूप से, मस्कुलोस्केलेटल ऊतक इंजीनियरिंग में, कुत्तों, सूअरों, भेड़, बकरियों और घोड़ों जैसे बड़े जानवरोंकी एक श्रृंखला की जांच की गई है। बकरी (कैपरा एगग्रस हिर्कस) बड़े जानवर का एक उत्कृष्ट विकल्प है क्योंकि इसके दमघोंटू जोड़ में मानव घुटने के जोड़ के सबसे करीब शरीर रचना22,23,24 है। बकरियों की सबकॉन्ड्रल हड्डी ट्रेब्युलर संरचना और सबकॉन्ड्रल हड्डी की मोटाई मनुष्यों के समान होती है, और हड्डी के उपास्थि का अनुपात भी मनुष्यों के करीब बतायाजाता है। इसके अलावा, बकरियों को दुनिया भर में व्यापक रूप से पालतू बनाया गया है, जिससे वे कंकाल रूप से परिपक्व होने पर आसानी से उपलब्ध हो जाते हैं। इसके अलावा, कम रखरखाव लागत और आसान हैंडलिंग ने उन्हें अनुसंधान के लिए एक आकर्षक पशु मॉडल बना दियाहै।
वर्तमान अध्ययन में, आईएफपी-एमएससी को कैप्रा एगाग्रस हिर्कस (बकरी) के घुटन वाले जोड़ से अलग करने के लिए एक सरल प्रोटोकॉल और उनके विस्तार और भेदभाव के लिए इन विट्रो कल्चर स्थितियों का प्रदर्शन किया गया है। पृथक कोशिकाएं अनुयायी हैं, एमएससी जैसी आकृति विज्ञान है, सीएफयू-एफ (कॉलोनी बनाने वाली इकाई-फाइब्रोब्लास्ट) कॉलोनियां बनाती हैं, और एडिपोजेनिक, चोंड्रोजेनिक और ओस्टोजेनिक भेदभाव क्षमता रखती हैं। इसलिए, आईएफपी-एमएससी बायोमेडिकल अनुप्रयोगों के लिए एमएससी के वैकल्पिक स्रोत के रूप में क्षमता दिखाते हैं।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#946;-glycerophosphate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>G9422-10G</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.25% Trypsin- 0.02% EDTA</td>
			<td>Hi-Media</td>
			<td>TCL049</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15-mL centrifuge tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Phospho-L-ascorbic acid trisodium salt</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>49752-10G</td>
			<td>50 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Propanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I9516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES)</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>TCL021-50ml</td>
			<td>10 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50-mL centrifuge tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcian Blue</td>
			<td>Hi-Media</td>
			<td>RM471</td>
			<td>For sufated gycosaminoglycans staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alizarin Red S</td>
			<td>S D Fine-Chem Limited</td>
			<td>26048-25G</td>
			<td>For calcium deposition</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>A011</td>
			<td>2.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basic fibroblast growth factor (bFGF)</td>
			<td>Sino Biologicals</td>
			<td>10014-HNAE</td>
			<td>5 ng/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BCIP/NBT ALP Substrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>B5655-5TAB</td>
			<td>For ALP staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biological safety cabinet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>MB-083</td>
			<td>Long name: Bovine Serum Albumin (1.25 mg/mL )</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>TCP-182</td>
			<td>70 &#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>REMI</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ciprofloxacin</td>
			<td>RANBAXY LAB. Limited</td>
			<td>B17407T1</td>
			<td>2.5 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Crystal Violet</td>
			<td>S D Fine-Chem Limited</td>
			<td>42555</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+)-glucose</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.94925.0521</td>
			<td>25 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethasone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D2915</td>
			<td>1 &#181;M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM LG</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>D5523</td>
			<td>Long name: Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Media Low Glucose</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Merck</td>
			<td>100983</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270</td>
			<td>Long name: Fetal Bovine Serum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde solution 37%-41%</td>
			<td>Merck</td>
			<td>61780805001730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Indomethacin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I7378</td>
			<td>100 &#181;M</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I9278</td>
			<td>10 &#181;g/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted microscope</td>
			<td>Nikon Eclipse TS 100</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ITS + 1</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I2521-5mL</td>
			<td>Long name: insulin, transferrin, sodium selenite + linoleic-BSA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Proline</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>TO-109-25G</td>
			<td>1 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride</td>
			<td>Merck</td>
			<td>61751605001730</td>
			<td>For lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Meck</td>
			<td>1.07018.2521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micropipettes and sterile tips (20 &#181;L, 200 &#181;L, 1000 &#181;L)</td>
			<td>Thermoscientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MUSE Cell analyser</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td></td>
			<td>For cell counting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCT compound</td>
			<td>Tissue-Tek</td>
			<td>4583</td>
			<td>Long name: Optimal Cutting Temperature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oil Red O dye</td>
			<td>S D Fine-Chem Limited</td>
			<td>54304</td>
			<td>For lipid vacuole staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>HiMedia</td>
			<td>A007</td>
			<td>100 U/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes (150 mm and 90 mm)</td>
			<td>NEST</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranin O</td>
			<td>S D Fine-Chem Limited</td>
			<td>50240</td>
			<td>For sufated gycosaminoglycans staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium citrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C3434</td>
			<td>3.4 % (w/v)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile scissors, forceps and scalpels</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For isolation of IFP-MSC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1.94953.0521</td>
			<td>35 % (w/v)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TGF-&#946;1</td>
			<td>Sino Biologicals</td>
			<td></td>
			<td>Long name: Transforming growth factor- &#946;1 (10 ng/mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture incubator 37 &#176;C, 5% CO2</td>
			<td>Thermoscientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris buffer</td>
			<td>Merck</td>
			<td>61771405001730</td>
			<td>For lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X100</td>
			<td>S D Fine-Chem Limited</td>
			<td>40632</td>
			<td>For lysis buffer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Type II collagenase</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17101015</td>
			<td>1.5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitamin D3</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C9756-1G</td>
			<td>10 nM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Well plates (6 -WP and 24-WP)</td>
			<td>NEST</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation, expansion, and differentiation of mesenchymal stem cells from the infrapatellar fat pad of the goat stifle joint

आईएफपी, घुटने के जोड़ में मौजूद है, एमएससी के एक आशाजनक स्रोत के रूप में कार्य करता है। आईएफपी एक आसानी से सुलभ ऊतक है क्योंकि इसे आर्थोस्कोपिक प्रक्रियाओं और घुटने के प्रतिस्थापन सर्जरी के दौरान नियमित रूप से बचाया और त्याग दिया जाता है। इसके अतिरिक्त, इसका निष्कासन न्यूनतम दाता साइट रुग्णता से जुड़ा हुआ है। हाल के अध्ययनों से पता चला है कि आईएफपी-एमएससी इन विट्रो विस्तार के दौरान अपनी प्रसार क्षमता नहीं खोते हैं और आयु-स्वतंत्र ओस्टोजेनिक भेदभाव क्षमता रखते हैं। आईएफपी-एमएससी में अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न एमएससी (बीएमएससी) और वसा-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं (एडीएससी) की तुलना में बेहतर चोंड्रोजेनिक भेदभाव क्षमता होती है। यद्यपि ये कोशिकाएं वृद्ध और रोगग्रस्त रोगियों से आसानी से उपलब्ध हैं, लेकिन उनकी प्रभावशीलता सीमित है। इसलिए, बायोमेडिकल अनुप्रयोगों में उनकी प्रभावकारिता निर्धारित करने के लिए स्वस्थ दाताओं से आईएफपी-एमएससी का उपयोग करना महत्वपूर्ण है। जैसा कि एक स्वस्थ मानव दाता तक पहुंच चुनौतीपूर्ण है, पशु मॉडल मौलिक समझ को सक्षम करने के लिए एक बेहतर विकल्प हो सकता है। कुत्ते, घोड़े, भेड़ और बकरी जैसे बड़े जानवर ट्रांसलेशनल अनुसंधान में महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। इनमें से, बकरी एक पसंदीदा मॉडल हो सकती है क्योंकि बकरी के दमघोंटू जोड़ में मानव घुटने के जोड़ के सबसे करीब शरीर रचना होती है। इसके अलावा, बकरी-आईएफपी ऊतक पुनर्जनन अनुप्रयोगों के लिए आवश्यक उच्च एमएससी संख्याओं को पूरा कर सकता है। इसके अलावा, पशु अनुसंधान के लिए कम लागत, उपलब्धता और 3 आर सिद्धांतों के अनुपालन ने उन्हें एक आकर्षक मॉडल बना दिया है। यह अध्ययन आईएफपी-एमएससी को बकरियों के घुटन वाले जोड़ से अलग करने और उनके विस्तार और भेदभाव के लिए इन विट्रो कल्चर स्थितियों को अलग करने के लिए एक सरल प्रोटोकॉल प्रदर्शित करता है। बकरी से सड़न रोकने योग्य रूप से पृथक आईएफपी को धोया गया, कीमा मारा गया, और एंजाइमेटिक रूप से पचाया गया। निस्पंदन और सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, एकत्रित कोशिकाओं को सुसंस्कृत किया गया था। ये कोशिकाएं अनुयायी थीं, एमएससी जैसी आकृति विज्ञान थीं, और उल्लेखनीय क्लोनोजेनिक क्षमता का प्रदर्शन किया। इसके अलावा, उन्होंने एडिपोजेनिक, चोंड्रोजेनिक और ओस्टोजेनिक वंशों में विभेदित किया, जो उनकी बहुशक्ति का प्रदर्शन करते हैं। निष्कर्ष में, अध्ययन एमएससी के अलगाव और विस्तार को दर्शाता है, जो ऊतक इंजीनियरिंग और पुनर्योजी चिकित्सा अनुप्रयोगों में क्षमता दिखाता है।

बकरी के ऊरु जोड़ से आईएफपी-एमएससी का अलगाव एक बकरी के दमघोंटू जोड़ से आईएफपी-एमएससी के अलगाव में शामिल कदमों को चित्र 1 में दर्शाया गया है। पेटेला की आंतरिक गैर-अभिव्यक्ति सतह में मौज?...

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Isolation, Expansion, and Differentiation of Mesenchymal Stem Cells from the Infrapatellar Fat Pad of the Goat Stifle Joint

इन्फ्रापेटलर वसा पैड मेसेनकाइमल स्टेम सेल (आईएफपी-एमएससी) को घुटने के जोड़ के इन्फ्रापेटलर वसा पैड से आसानी से अलग किया जा सकता है। वे विट्रो में अच्छी तरह से प्रसार करते हैं, सीएफयू-एफ कॉलोनियों का निर्माण करते हैं, और एडिपोजेनिक, चोंड्रोजेनिक और ओस्टोजेनिक वंशों में अंतर करते हैं। इसमें, बकरी के जोड़ से आईएफपी-एमएससी के अलगाव, विस्तार और विभेदन के लिए पद्धति प्रदान की गई है।

बकरी के इन्फ्रापेटेलर फैट पैड से मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं का अलगाव, विस्तार और भेदभाव

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