Name: formulating and characterizing an exosome-based dopamine carrier system
Uploaded: 2022-04-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System at JoVE.com

تم دعم العمل بشكل أساسي من خلال تمويل البحث المقدم من مشاريع البحث العلمي بجامعة يلدز التقنية (TSA-2021-4713).

ملاحظة: انظر جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بجميع المواد والمعدات المستخدمة في هذا البروتوكول.
1. زراعة الخلايا الجذعية الوسيطة الهلامية في وارتون وحفظها بالتبريد
<ol><li>قم بإزالة WJ-MSCs (من ATCC) من الفريزر -80 درجة مئوية. بذر الخلايا في دورق يحتوي على ...

Exosomes عبارة عن حويصلات غشائية صغيرة بأبعاد 40-200 نانومتر تفرزها معظم أنواع الخلايا ، على سبيل المثال ، MSCs1. قادرة على تمكين التواصل بين الخلايا ، يمكن أن تدخل exosomes الخلايا بطرق مختلفة مثل التداخل الخلوي ، البلعمة ، كثرة الكريات الدقيقة ، الاستيعاب بوساطة الدهون ، والاندماج<sup class=...

Exosomes ، الحويصلات النشطة بيولوجيا مع ميزات كبيرة ، تتراوح في الحجم من 40 نانومتر إلى 200 نانومتر. تنشأ الإكسوسومات من غشاء الخلية وتتشكل بسبب إطلاق الإندوسومات1. تعمل هذه الهياكل كمحاورات من خلية إلى خلية وتتفاعل مع الخلايا المجاورة لتسهيل نقل الجزيئات النشطة. يمكن عزل الإكسوسومات من العديد من المصادر المختلفة. وتشمل هذه سوائل الجسم مثل البلازما والبول والسائل النخاعي واللعاب ، وكذلك خطوط الخلايا المزروعة في ظل ظروف المختبر . تلعب الإكسوسومات دورا مهما في القضاء على تلف الأعصاب ، وذلك بفضل الجزيئات الحيوية التي تحتوي عليها ، مثل الدهون والبروتينات والأحماض النووية2. تقوم Glia ، وهي الخلايا الداعمة للجهاز العصبي3 ، بنقل البروتينات والحمض النووي الريبي الصغير إلى محاور الخلايا العصبية عبر exosomes4.
يتم أيضا إطلاق الدهون التي تشكل غمد المايلين ، والتي تعد سمة مميزة في التوصيل العصبي ، من الخلايا قليلة التغصن عبر exosomes 4,5. تشارك الإكسوسومات أيضا في عمليات مثل اللدونة المشبكية ، واستجابة الإجهاد العصبي ، والتواصل بين الخلايا الخلوية ، وتكوين الخلايا العصبية في الدماغ 6,7. حقيقة أن الإكسوسومات تمتلك أبعادا نانوية تمكنها من المرور عبر BBB. هناك طريق انتقال خاص من السائل الخلالي إلى السائل النخاعي بعد اختراق هذا الغشاء8. بفضل خواص سطحها ، يمكن أن تتفاعل الإكسوسومات بكفاءة مع الخلايا المستهدفة كنظام لتوصيل الدواء وتوصيل الأدوية المحملة بنشاط.
بسبب التعبير عن البروتينات اللاصقة المختلفة (tetraspanins و integrins) على سطح exosomes ، يمكن لهذه الحويصلات خارج الخلية أن تتفاعل بسهولة وتندمج مع أغشية الخلايا المضيفة9. يعتقد أنه يمكن استخدام exosomes كنظام لتوصيل الأدوية ، خاصة في علاج أمراض الجهاز العصبي المركزي بسبب قدرتها على اختراق BBB وخصائصها السطحية. الإكسوسومات المشتقة من الخلايا الجذعية الوسيطة (MSC) لديها خطر أقل للرفض المناعي مقارنة بالعلاجات الخلوية الخيفية ، وفي هذا الصدد ، يمكن أن تكون مكونا مهما في تطبيقات العلاج الخالية من الخلايا10.
الدوبامين هو جزيء نقصه في الدماغ هو السمة المميزة لمرض باركنسون (PD) ، ويزداد سوءا يوما بعد يوم11،12،13. من المعروف أن PD يرتبط بانحطاط الخلايا العصبية الدوبامينية في المادة السوداء للدماغ المتوسط وفقدان وظائف الخلايا العصبية الحركية14,15. موت الخلايا العصبية الدوبامين يمنع توريد الدوبامين الناقل العصبي إلى مخطط الدماغ. وهذا بدوره يؤدي إلى ظهور أعراض خاصة بمرض باركنسون16. هذه الأعراض من PD هي بطء الحركة ، وعدم الاستقرار الوضعي ، والصلابة ، وخاصة الهزة يستريح12،13. على الرغم من أن مرض باركنسون قد تم وصفه لأول مرة منذ أكثر من قرنين من الزمان ، إلا أن الدراسات لفهم أمراض المرض ومسبباته لا تزال جارية ومن المقبول حاليا أن مرض باركنسون مرض جهازي معقد17. من المتوقع أن يحدث نقص الدوبامين ، وتلاحظ أعراض PD السريرية عندما تتدهور أكثر من 80 ٪ من الخلايا العصبية18. في علاج المرض ، يفضل مكملات الدوبامين غير المكتملة لتقليل الأعراض الحركية. أظهرت الدراسات في الجسم الحي أن التسريب المباشر للدوبامين في الدماغ يقلل بشكل كبير من الأعراض في الحيوانات19. تستخدم سلائف الدوبامين مثل L-DOPA (L-3،4-dihydroxyphenylalanine) وأدوية مستقبلات الدوبامين في العيادة لأن التسريب المباشر للدوبامين في الدماغ غير ممكن في البشر ولا يمكن للدوبامين الذي يدخل النظام عبور BBB20. هذه الأنواع من الأدوية تفقد فعاليتها بمرور الوقت. ومع ذلك ، لا يوجد حتى الآن نهج علاجي علاجي لمرض باركنسون. وبالتالي ، هناك ضرورة كبيرة لتطوير استراتيجيات علاجية وطرق علاج جديدة للكشف عن الفيزيولوجيا المرضية للمرض وتقليل تأثير مرض باركنسون على المرضى.
جذبت الدراسات القائمة على الإكسوسوم الانتباه مؤخرا لجمع المعلومات حول كل من الأساليب العلاجية وأمراض أمراض الجهاز العصبي. لقد ثبت أن الإكسوسومات المشتقة من MSC تقلل الالتهاب في تلف الأعصاب وتساهم في تجديد الخلايا العصبية21،22،23. بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن أن إفرازات exosome المشتقة من MSC تقلل من موت الخلايا المبرمج من خلال إظهار تأثيرات التغذية العصبية والوقائية العصبية ، خاصة على الخلايا العصبية الدوبامينية24,25. تسارعت الأبحاث على المنصات التي تستخدم فيها الإكسوسومات كأنظمة لتوصيل الأدوية العلاجية بشكل مكثف في السنوات الأخيرة. في العديد من الدراسات ، لوحظ أنه يمكن تغليف الأدوية ذات الصلة بسهولة في exosomes وتسليمها بأمان إلى الخلايا والأنسجة والأعضاء المستهدفة26,27. يمكن استخدام طرق مختلفة مثل الحضانة ، ودورات التجميد / الذوبان ، والصوتنة ، والبثق لتحميل الدواء في exosomes28.
يسمح Coincubation مع exosomes أو الحويصلات الشبيهة بالإكسوسوم بتغليف الجزيئات الصغيرة المحبة للدهون بشكل سلبي في أنظمة التوصيل هذه28،29،30. على وجه الخصوص ، تم تحميل جزيئات مختلفة مثل الكركمين 31 ، الكاتلاز 30 ، دوكسوروبيسين32 ، وباكليتاكسيل33 بشكل فعال في exosomes. وقد لوحظ أن exosomes المحتوية على الكاتلاز ، والتي لها نشاط مضاد للأكسدة ، تراكمت بكفاءة في الخلايا العصبية والخلايا الدبقية الصغيرة في الدماغ وأظهرت أنشطة عصبية قوية30. في نفس الدراسة ، وجد أن الصابونين ، المضاف إلى المجمع لزيادة كفاءة التحميل ، يزيد من نسبة تحميل الدواء أثناء الحضانة30,34. ومع ذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لوضع معايير لتحميل الدواء في exosomes.
تصف هذه الورقة تطوير نظام ناقل نانوي عن طريق تغليف الدوبامين في الإكسوسومات التي تم عزلها من WJ-MSCs. يتم شرح جميع الخطوات ، بما في ذلك زراعة WJ-MSCs ، وعزل وتوصيف الإكسوسومات ، وتجارب تحميل الأدوية ، وتوصيف الإكسوسومات المحملة بالدوبامين بتقنيات مختلفة ، وتحليل السمية الخلوية في المختبر بالتفصيل.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m membrane filter</td>
			<td>Aisimo</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m syringe filter</td>
			<td>Aisimo</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon tube</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 cm2 cell culture flasks (Falcon, TPP tissue culture flasks</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Falcon tube</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 cell culture flasks (Falcon, TPP tissue culture flasks</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well plates (Falcon, TPP microplates)</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>271004-1L</td>
			<td>Used for HPLC analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave</td>
			<td>NUVE-OT 90L</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Cabin</td>
			<td>Hera Safe KS</td>
			<td></td>
			<td>Used for the cell culture process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugal</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>CF16RN</td>
			<td>Used in the exosome isolation step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator with Safe Cell UV</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td></td>
			<td>Used for the cell culture process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dopamine hydrochloride H8502-10G</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8502-10G</td>
			<td>Used in exosome dopamine loading</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium/Nutrient Mixture-F12</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>RNBJ7249</td>
			<td>Used as cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum-FBS</td>
			<td>Capricorn</td>
			<td>FBS-16A</td>
			<td>It was used by adding to the cell culture medium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer -80 &#176;C</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MDF-U5386S-PE</td>
			<td>To store cells and the resulting exosomes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fridge</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MPR-215-PE</td>
			<td>Used to store cell culture and other materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography-HPLC</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td></td>
			<td>The presence of dopamine from the content of the obtained formulation was investigated.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope- Primovert</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Used to observe cells in cell culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT Assay</td>
			<td>Biomatik</td>
			<td></td>
			<td>Used to measure cell viability</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoSight NS300</td>
			<td>Malvern panalytical</td>
			<td>Malvern panalytical</td>
			<td>Used for exosome characterization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optima XPN-100 Ultracentrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>Used in the exosome isolation step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS tablet</td>
			<td>Biomatik</td>
			<td>43602</td>
			<td>In the preparation of the PBS solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicilin/Streptomycin Solution</td>
			<td>Capricorn</td>
			<td>PB-S</td>
			<td>It was added to the medium to prevent contamination in cell culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Aid</td>
			<td>Isolab</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision balance-Kern</td>
			<td>Kern-ABJ220-4NM</td>
			<td></td>
			<td>Used in the preparation of solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q500 Sonicator</td>
			<td>Qsonica, LLC</td>
			<td></td>
			<td>Used to digest exosomes in HPLC analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>47036-50G-F</td>
			<td>It was used by adding it to the total solution in the exosome dopamine loading process.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrostar-Nano-Spectrophotometry</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td></td>
			<td>Used for MTT and drug release analyzes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 22</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>statistical package program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorteks-FinePCR</td>
			<td>FinePCR-FineVortex</td>
			<td></td>
			<td>Used to mix solutions homogeneously</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Bath 37 &#176;C-Senova</td>
			<td>Senova</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wharton&#8217;s jelly mesenchymal stem cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer</td>
			<td>Malvern Nano ZS</td>
			<td>Malvern Nano ZS</td>
			<td>Used for exosome characterization</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

formulating and characterizing an exosome-based dopamine carrier system

تشكل الإكسوسومات التي يتراوح حجمها بين 40 و 200 نانومتر أصغر مجموعة فرعية من الحويصلات خارج الخلية. تلعب هذه الحويصلات النشطة بيولوجيا التي تفرزها الخلايا دورا نشطا في الشحن والتواصل بين الخلايا. توجد الإكسوسومات في الغالب في سوائل الجسم مثل البلازما والسائل النخاعي والبول واللعاب والسائل الأمنيوسي واللبأ وحليب الثدي وسائل المفاصل والسائل المنوي وحمض الجنب. بالنظر إلى حجم الإكسوسومات ، يعتقد أنها قد تلعب دورا مهما في أمراض الجهاز العصبي المركزي لأنها يمكن أن تمر عبر الحاجز الدموي الدماغي (BBB). ومن ثم ، تهدف هذه الدراسة إلى تطوير نظام ناقل نانوي قائم على الإكسوسوم عن طريق تغليف الدوبامين في إكسوسومات معزولة من الخلايا الجذعية الوسيطة الهلامية في وارتون (WJ-MSCs). تم تحضين الإكسوسومات التي اجتازت عملية التوصيف بالدوبامين. تم إعادة توصيف الإكسوسومات المحملة بالدوبامين في نهاية الحضانة. تم التحقيق في الإكسوسومات المحملة بالدوبامين في إطلاق الدواء ومقايسات السمية الخلوية. أظهرت النتائج أنه يمكن تغليف الدوبامين بنجاح داخل الإكسوسومات وأن الإكسوسومات المحملة بالدوبامين لم تؤثر على صلاحية الخلايا الليفية.

عزل وتوصيف الإكسوسوم يتم استزراع الخلايا الجذعية لهلام وارتون وحضنها في وسط خال من المصل لمدة 48 ساعة عندما تصل الثقافة إلى كثافة كافية. بعد نهاية الحضانة ، يتم تخزين المادة الطافية عند -20 درجة مئوية. يتم تخفيف المواد الطافية المجمعة باستخدام PBS وتخضع للطرد المركزي الفائق (<strong cla...

Watch this Scientific Journal Video about Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System at JoVE.com

Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System

هنا ، كنا نهدف إلى الحصول على تركيبة عن طريق تحميل الدوبامين للإكسوسومات المعزولة للخلايا الجذعية من الخلايا الجذعية الوسيطة الهلامية في وارتون. يتم وصف عزل وتوصيف الإكسوسوم ، وتحميل الدواء في الإكسوسومات الناتجة ، والنشاط السام للخلايا للتركيبة المطورة في هذا البروتوكول.

صياغة وتوصيف نظام ناقل الدوبامين القائم على الإكسوسوم

Exosomes between 40 and 200 nm in size constitute the smallest subgroup of extracellular vesicles. These bioactive vesicles secreted by cells play an ...

قد تتفاعل الإكسوسومات مع الحويصلات التي تفرزها خلية يتراوح حجمها بين 14 و 200 نانومتر ، وتنقسم من داخل الخلايا والاتصال ، والتي تأتي إلى أصغر مجموعة فرعية من الحويصلات خارج الخلية. Exosomes التي تتشكل نتيجة لتمايز endosome ، تنشأ من غشاء الخلية. يمكن عزل الخلايا الجذعية من مصادر مختلفة مثل نخاع العظم أو الأنسجة الدهنية.لكن الخلايا الجذعية المجففة في الأنسجة البالغة لديها إمكانات مناعية أعلى سلبيات ينبثق حجم الإكسوسومات ، يقال إنه لعب دورا مهما في أمراض الجهاز العصبي المركزي لأنه يمكن أن يمر عبر حاجز الدم في الدماغ. للبدء ، اغسل الخلايا الجذعية الوسيطة الهلامية في وارتون بخمسة ملليلتر من برنامج تلفزيوني. ثم أضف خمسة ملليلتر من محلول التربسين EDTA قبل وضع القارورة في حاضنة.بعد الحضانة ، اجمع الخلايا وأجهزة الطرد المركزي عند 1،500 غرام لمدة خمس دقائق. ثم قم بإزالة المادة الطافية وإضافة ملليلتر واحد من DMEM-F12 يحتوي على 10٪ FBS إلى الأنبوب. غسل الخلايا المستزرعة مع برنامج تلفزيوني.بعد الغسيل ، أضف وسط DMEM-F12 الخالي من المصل إلى الخلايا وضعه في الحاضنة. لعزل الإكسوسومات ، اجمع الوسائط الخالية من المصل وأجهزة الطرد المركزي عند 300 جرام عند أربع درجات مئوية لمدة 10 دقائق. نقل المادة الطافية إلى أنبوب آخر ومعالجتها عن طريق الطرد المركزي التسلسلي بسرعات أعلى.بعد الطرد المركزي النهائي ، قم بإزالة المادة الطافية ببطء وقم بإذابة الحبيبات في ملليلتر واحد PBS. تخلط عن طريق الدوامة والمضي قدما في الطرد المركزي الفائق في 110،000 غرام لمدة 70 دقيقة عند أربع درجات مئوية. أضف ثلاثة ملليلتر من PBS إلى التعليق الخارجي الذي تم جمعه مسبقا عن طريق الطرد المركزي الفائق وقم بتعقيم التعليق المخفف عن طريق الترشيح باستخدام مرشح 0.22 ميكرون.ثم انقل 500 ميكرولتر من تعليق exosome المعقم إلى أنبوب آخر. بعد ذلك بالتتابع ، أضف 500 ميكرولتر من 0.5 ملليغرام لكل ملليلتر من محلول الدوبامين والصابونين في التعليق المعقم. بعد الحضانة ultracentrifuge التعليق.يمكن استخدام العينة إما لتحليل NTA و DLS لتوصيف الإكسوسومات المحملة بالدوبامين أو تخزينها عند 20 درجة مئوية تحت الصفر حتى الاستخدام مرة أخرى. في تحليل NTA ، تم تحديد متوسط حجم الإكسوسومات المشتقة من هلام وارتون ليكون 98 نانومتر والإكسوسومات المحملة بالدوبامين ليكون 110 نانومتر. كانت أعداد الجسيمات النانوية التي كشفت عنها تحليلات NTA و DLS متسقة مع بعضها البعض.تم قياس إمكانات زيتا للإكسوسومات المشتقة من هلام وارتون على أنها ناقص 15.7 والإكسوسومات المحملة بالدوبامين على أنها ناقص 17.6 مللي فولت. كشف تحليل HPLC للإكسوسومات المحملة بالدوبامين عن ذروة الدوبامين في 6.45 دقيقة. كشف الملف التراكمي لإطلاق الدواء أن 74.8٪ من الدوبامين المغلف تم إطلاقه من الإكسوسومات خلال الساعات الثماني الأولى.تم التحقيق في السمية الخلوية للدونوبامين المحملة والإكسوسومات الحرة على الخلايا الليفية. على الرغم من أن الإكسوسومات المحملة بالدوبامين لم تظهر أي تأثيرات سامة للخلايا ، إلا أن الصابونين قلل من صلاحية الخلايا الليفية. أظهر اختبار MTT زيادة في صلاحية الخلية عندما عولجت الخلايا الليفية بالإكسوسومات المحملة بالدوبامين.تم تقييم الدلالة الإحصائية للنتائج من خلال إجراء anova أحادي الاتجاه. بالإضافة إلى ذلك ، تم التحقيق في التأثيرات السامة للخلايا لتركيزات مختلفة من الإكسوسومات الحرة على الخلايا الليفية. كانت صلاحية الخلايا الليفية أعلى مع الإكسوسومات الحرة بتركيز 25 ميكرولتر لكل ملليلتر.من المهم حقا بالنسبة للجهاز العصبي المركزي هو أحجام المرضى ، والدور الذي يلعب في عمليات مثل اللدونة ، والاستجابة العصبية ، والتواصل من جانب إلى جانب ، وتكوين الخلايا العصبية في الدماغ. بالإضافة إلى ذلك ، بفضل سطح exosomes ، كما تقول ، لوحظ أنها يمكن أن تتفاعل مع دواء الخلية المستهدفة والنشاط الذي يتم تسليمه أثناء الدواء هو الانتهاء. لأول مرة في الدراسة ، قمنا بتطوير تركيبة دوائية جديدة عن طريق تغليف الدوبامين في إكسوسومات مشتقة من الخلايا الجذعية.واقترح أن هذه الصيغة ستكون واعدة جدا لعلاج مرض باركنسون.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

An Experimental System to Study Mechanotransduction in Fetal Lung Cells

والنظام التجريبي لدراسة Mechanotransduction في خلايا رئة الجنين

Mechanical forces generated in utero by repetitive breathing-like movements and by fluid distension are critical for normal lung development. A key ...

Methods for Characterizing the Co-development of Biofilm and Habitat Heterogeneity

طرق للتميز الرئيسين تطوير بيوفيلم والموئل التجانس

Biofilms are surface-attached microbial communities that have complex structures and produce significant spatial heterogeneities. Biofilm development is ...

Design and Implementation of an Automated Illuminating, Culturing, and Sampling System for Microbial Optogenetic Applications

تصميم وتنفيذ لإلقاء الضوء الآلي، التثقيف، ونظام أخذ العينات للتطبيقات الميكروبية علم البصريات الوراثي

Optogenetic systems utilize genetically-encoded proteins that change conformation in response to specific wavelengths of light to alter cellular ...

Targeted Plasma Membrane Delivery of a Hydrophobic Cargo Encapsulated in a Liquid Crystal Nanoparticle Carrier

استهدفت البلازما غشاء تسليم ومسعور الشحن مغلف في الكريستال السائل الجسيمات النانوية الناقل

The controlled delivery of drug/imaging agents to cells is critical for the development of therapeutics and for the study of cellular signaling processes. ...

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

وصف الهجرة الخلية في إطار ثلاثي الأبعاد في المختبر الجرح البيئات

Currently, most in vitro models of wound healing, such as well-established scratch assays, involve studying cell migration and wound closure on ...

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

توليف "باكتيريوفاجيس المعدية" في كولاي-استناداً إلى "نظام التعبير" الخلية الحرة

A new generation of cell-free transcription-translation (TXTL) systems, engineered to have a greater versatility and modularity, provide novel ...

An Orbital Shaking Culture of Mammalian Cells in O-shaped Vessels to Produce Uniform Aggregates

المداري تهز ثقافة خلايا الثدييات في السفن على شكل س لإنتاج المجاميع الموحدة

Suspension cultures of mammalian cell aggregates are required for various applications in medical and biotechnological fields. The disposable bag-based ...

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

رواية تقنية جراحية كأساس في فيفو جزئي الهندسة الكبد في الفئران

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

Real-time Visualization and Analysis of Chondrocyte Injury Due to Mechanical Loading in Fully Intact Murine Cartilage Explants

التصور في الوقت الحقيقي وتحليل للإصابة تشوندروسيتي بسبب تحميل الميكانيكية في Explants الغضاريف موريني سليمة تماما

Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...

Screening and Identification of Small Peptides Targeting Fibroblast Growth Factor Receptor2 using a Phage Display Peptide Library

فحص وتحديد الببتيدات الصغيرة التي تستهدف عامل نمو الخلايا الليفية Receptor2 باستخدام مكتبه الببتيد العرض Phage

The human Fibroblast Growth Factor Receptor (FGFR) family comprises four members, namely, FGFR1, FGFR2, FGFR3, and FGFR4, that are involved in various ...