Name: formulating and characterizing an exosome-based dopamine carrier system
Uploaded: 2022-04-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System at JoVE.com

Die Arbeit wurde in erster Linie durch Forschungsgelder unterstützt, die von den wissenschaftlichen Forschungsprojekten der Technischen Universität Yıldız (TSA-2021-4713) bereitgestellt wurden.

HINWEIS: In der Materialtabelle finden Sie Einzelheiten zu allen Materialien und Geräten, die in diesem Protokoll verwendet werden.
1. Kultivierung und Kryokonservierung von mesenchymalen Wharton-Jelly-Stammzellen
<ol><li>Nehmen Sie die WJ-MSCs (von ATCC) aus dem Gefrierschrank bei -80 °C. Die Zellen werden in einen Kolben mit DMEM-F12-Medium gesät, der mit 10 % fötalem Kälberserum (FBS) angereichert ist. Sie werden bei 37 °C in einem Inkubator mit 5 %...

Exosomen sind kleine Membranvesikel mit Abmessungen von 40-200 nm, die von den meisten Zelltypen, z.B.MSCs 1, sezerniert werden. Exosomen sind in der Lage, die Kommunikation zwischen Zellen zu ermöglichen, und können auf unterschiedliche Weise in Zellen eindringen, z. B. durch Endozytose, Phagozytose, Mikropinozytose, lipidvermittelte Internalisierung und Fusion33,44. Im Vergleich zu anderen Nanocarrier-Systemen verleihen die Lipide und ...

Exosomen, bioaktive Vesikel mit signifikanten Merkmalen, haben eine Größe von 40 nm bis 200 nm. Exosomen entstehen aus der Zellmembran und entstehen durch die Freisetzung der Endosomen1. Diese Strukturen dienen als Zell-zu-Zell-Kommunikatoren und interagieren mit benachbarten Zellen, um den Transfer aktiver Moleküle zu erleichtern. Exosomen können aus vielen verschiedenen Quellen isoliert werden. Dazu gehören Körperflüssigkeiten wie Plasma, Urin, Liquor, Speichel sowie Zelllinien, die unter In-vitro-Bedingungen kultiviert werden. Exosomen spielen dank der enthaltenen Biomakromoleküle wie Lipide, Proteine und Nukleinsäuren eine wichtige Rolle bei der Beseitigung von Nervenschäden2. Gliazellen, die Stützzellen des Nervensystems3, übertragen Proteine und Mikro-RNAs über Exosomen4 auf die Axone von Neuronen.
Lipide, die die Myelinscheide bilden, die ein charakteristisches Merkmal der Nervenleitung sind, werden ebenfalls über Exosomen 4,5 von Oligodendrozyten freigesetzt. Exosomen sind auch an Prozessen wie synaptischer Plastizität, neuronaler Stressantwort, Zell-Zell-Kommunikation und Neurogenese im Gehirn beteiligt 6,7. Die Tatsache, dass Exosomen Nanodimensionen besitzen, ermöglicht es ihnen, die BHS zu passieren. Es besteht ein spezieller Übergangsweg von der interstitiellen Flüssigkeit zum Liquor cerebrospinalis nach Durchdringung dieser Membran8. Dank ihrer Oberflächeneigenschaften können Exosomen als Wirkstoffverabreichungssystem effizient mit Zielzellen interagieren und die beladenen Medikamente aktiv abgeben.
Aufgrund der Expression verschiedener adhäsiver Proteine (Tetraspanine und Integrine) auf der Oberfläche von Exosomen können diese extrazellulären Vesikel leicht mit Wirtszellmembranen interagieren und fusionieren9. Es wird angenommen, dass Exosomen aufgrund ihrer Fähigkeit, die BHS zu durchdringen, und ihrer Oberflächeneigenschaften als Arzneimittelverabreichungssystem verwendet werden können, insbesondere bei der Behandlung von Erkrankungen des zentralen Nervensystems. Aus mesenchymalen Stammzellen (MSC) gewonnene Exosomen haben im Vergleich zu allogenen Zelltherapien ein geringeres Risiko für eine Immunabstoßung und können in dieser Hinsicht ein wichtiger Bestandteil zellfreier Behandlungsanwendungen sein10.
Dopamin ist ein Molekül, dessen Mangel im Gehirn das charakteristische Merkmal der Parkinson-Krankheit (PD) ist und sich von Tag zu Tag verschlimmert11,12,13. Es ist bekannt, dass Parkinson mit einer Degeneration von dopaminergen Neuronen in der Substantia nigra des Mesencephalons und einem Verlust von Motoneuronenfunktionen verbunden ist14,15. Das Absterben von dopaminergen Neuronen verhindert die Versorgung des Gehirnstriatums mit dem Neurotransmitter Dopamin. Dies wiederum führt zur Entstehung von Parkinson-spezifischen Symptomen16. Diese Symptome der Parkinson-Krankheit sind Bradykinesie, posturale Instabilität, Rigidität und insbesondere Ruhetremor12,13. Obwohl Parkinson erstmals vor mehr als zwei Jahrhunderten beschrieben wurde, sind Studien zum Verständnis der Pathologie und Ätiologie der Krankheit noch im Gange, und es wird derzeit akzeptiert, dass Parkinson eine komplexe systemische Erkrankung ist17. Es wird prognostiziert, dass ein Dopaminmangel auftritt, und klinische Parkinson-Symptome werden beobachtet, wenn mehr als 80 % der Neuronen degenerieren18. Bei der Behandlung der Krankheit wird eine unvollständige Dopamin-Supplementierung bevorzugt, um motorische Symptome zu reduzieren. In-vivo-Studien haben gezeigt, dass die direkte Infusion von Dopamin in das Gehirn die Symptome bei Tieren signifikant reduziert19. Dopaminvorstufen wie L-DOPA (L-3,4-Dihydroxyphenylalanin) und Dopaminrezeptor-Medikamente werden in der Klinik eingesetzt, da die direkte Infusion von Dopamin in das Gehirn beim Menschen nicht möglich ist und Dopamin, das in das System gelangt, die BHS20 nicht überwinden kann. Diese Art von Medikamenten verliert mit der Zeit ihre Wirksamkeit. Es gibt jedoch immer noch keinen kurativen Behandlungsansatz für Parkinson. Daher besteht ein großer Bedarf, neue therapeutische Strategien und Behandlungsmodalitäten zu entwickeln, um die Pathophysiologie der Krankheit aufzudecken und die Auswirkungen von Parkinson auf die Patienten zu reduzieren.
Exosomen-basierte Studien haben in jüngster Zeit Aufmerksamkeit erregt, weil sie Informationen sowohl über Therapieansätze als auch über Pathologien von Erkrankungen des Nervensystems sammeln. Es wurde gezeigt, dass MSC-abgeleitete Exosomen Entzündungen bei Nervenschäden reduzieren und zur neuronalen Regeneration beitragen21,22,23. Darüber hinaus wurde berichtet, dass MSC-abgeleitete Exosomensekretome die Apoptose reduzieren, indem sie neurotrophe und neuroprotektive Wirkungen zeigen, insbesondere auf dopaminerge Neuronen24,25. Die Forschung an Plattformen, in denen Exosomen als therapeutische Drug-Delivery-Systeme eingesetzt werden, hat sich in den letzten Jahren intensiv beschleunigt. In zahlreichen Studien wurde beobachtet, dass relevante Medikamente leicht in Exosomen eingekapselt und sicher in Zielzellen, Gewebe und Organe eingebracht werden können26,27. Verschiedene Methoden wie Inkubation, Gefrier-/Auftauzyklen, Beschallung und Extrusion könnten für die Wirkstoffbeladung in Exosomen verwendet werden28.
Die Koinkubation mit Exosomen oder Exosomen-ähnlichen Vesikeln ermöglicht es, lipophile kleine Moleküle passiv in diese Verabreichungssysteme einzukapseln28,29,30. Insbesondere wurden verschiedene Moleküle wie Curcumin 31, Katalase 30, Doxorubicin32 und Paclitaxel33 effektiv in Exosomen geladen. Es wurde beobachtet, dass Katalase-haltige Exosomen, die eine antioxidative Aktivität haben, sich effizient in den Neuronen und Mikrogliazellen im Gehirn ansammelten und starke neuroprotektive Aktivitäten zeigten30. In derselben Studie wurde festgestellt, dass Saponin, das dem Komplex zugesetzt wird, um die Beladungseffizienz zu erhöhen, den Prozentsatz der Wirkstoffbeladung während der Inkubation erhöht30,34. Es sind jedoch weitere Studien erforderlich, um die Standards für die Beladung von Exosomen mit Medikamenten festzulegen.
Diese Arbeit beschreibt die Entwicklung eines Nanocarrier-Systems durch Einkapselung von Dopamin in Exosomen, die aus WJ-MSCs isoliert wurden. Alle Schritte, einschließlich der Kultivierung von WJ-MSCs, der Isolierung und Charakterisierung von Exosomen, der Wirkstoffbeladungsexperimente, der Charakterisierung von Dopamin-beladenen Exosomen mit verschiedenen Techniken und der In-vitro-Zytotoxizitätsanalyse werden ausführlich erläutert.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m membrane filter</td>
			<td>Aisimo</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m syringe filter</td>
			<td>Aisimo</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon tube</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 cm2 cell culture flasks (Falcon, TPP tissue culture flasks</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Falcon tube</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 cell culture flasks (Falcon, TPP tissue culture flasks</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well plates (Falcon, TPP microplates)</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>271004-1L</td>
			<td>Used for HPLC analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave</td>
			<td>NUVE-OT 90L</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Cabin</td>
			<td>Hera Safe KS</td>
			<td></td>
			<td>Used for the cell culture process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugal</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>CF16RN</td>
			<td>Used in the exosome isolation step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator with Safe Cell UV</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td></td>
			<td>Used for the cell culture process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dopamine hydrochloride H8502-10G</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8502-10G</td>
			<td>Used in exosome dopamine loading</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium/Nutrient Mixture-F12</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>RNBJ7249</td>
			<td>Used as cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum-FBS</td>
			<td>Capricorn</td>
			<td>FBS-16A</td>
			<td>It was used by adding to the cell culture medium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer -80 &#176;C</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MDF-U5386S-PE</td>
			<td>To store cells and the resulting exosomes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fridge</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MPR-215-PE</td>
			<td>Used to store cell culture and other materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography-HPLC</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td></td>
			<td>The presence of dopamine from the content of the obtained formulation was investigated.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope- Primovert</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Used to observe cells in cell culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT Assay</td>
			<td>Biomatik</td>
			<td></td>
			<td>Used to measure cell viability</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoSight NS300</td>
			<td>Malvern panalytical</td>
			<td>Malvern panalytical</td>
			<td>Used for exosome characterization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optima XPN-100 Ultracentrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>Used in the exosome isolation step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS tablet</td>
			<td>Biomatik</td>
			<td>43602</td>
			<td>In the preparation of the PBS solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicilin/Streptomycin Solution</td>
			<td>Capricorn</td>
			<td>PB-S</td>
			<td>It was added to the medium to prevent contamination in cell culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Aid</td>
			<td>Isolab</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision balance-Kern</td>
			<td>Kern-ABJ220-4NM</td>
			<td></td>
			<td>Used in the preparation of solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q500 Sonicator</td>
			<td>Qsonica, LLC</td>
			<td></td>
			<td>Used to digest exosomes in HPLC analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>47036-50G-F</td>
			<td>It was used by adding it to the total solution in the exosome dopamine loading process.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrostar-Nano-Spectrophotometry</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td></td>
			<td>Used for MTT and drug release analyzes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 22</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>statistical package program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorteks-FinePCR</td>
			<td>FinePCR-FineVortex</td>
			<td></td>
			<td>Used to mix solutions homogeneously</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Bath 37 &#176;C-Senova</td>
			<td>Senova</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wharton&#8217;s jelly mesenchymal stem cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer</td>
			<td>Malvern Nano ZS</td>
			<td>Malvern Nano ZS</td>
			<td>Used for exosome characterization</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

formulating and characterizing an exosome-based dopamine carrier system

Exosomen zwischen 40 und 200 nm Größe bilden die kleinste Untergruppe der extrazellulären Vesikel. Diese bioaktiven Vesikel, die von Zellen abgesondert werden, spielen eine aktive Rolle bei der interzellulären Fracht und Kommunikation. Exosomen kommen meist in Körperflüssigkeiten wie Plasma, Liquor, Urin, Speichel, Fruchtwasser, Kolostrum, Muttermilch, Gelenkflüssigkeit, Sperma und Pleurasäure vor. In Anbetracht der Größe der Exosomen wird angenommen, dass sie eine wichtige Rolle bei Erkrankungen des zentralen Nervensystems spielen könnten, da sie die Blut-Hirn-Schranke (BHS) passieren können. Daher zielte diese Studie darauf ab, ein auf Exosomen basierendes Nanocarrier-System zu entwickeln, indem Dopamin in Exosomen eingekapselt wird, die aus Whartons mesenchymalen Jelly-Stammzellen (WJ-MSCs) isoliert wurden. Exosomen, die den Charakterisierungsprozess bestanden hatten, wurden mit Dopamin inkubiert. Die Dopamin-beladenen Exosomen wurden am Ende der Inkubation neu charakterisiert. Dopamin-beladene Exosomen wurden in Wirkstofffreisetzungs- und Zytotoxizitätsassays untersucht. Die Ergebnisse zeigten, dass Dopamin erfolgreich in die Exosomen eingekapselt werden konnte und dass die Dopamin-beladenen Exosomen die Lebensfähigkeit der Fibroblasten nicht beeinflussten.

Isolierung und Charakterisierung von Exosomen Wharton-Jelly-Stammzellen werden kultiviert und 48 Stunden lang in einem serumfreien Medium inkubiert, wenn die Kultur eine ausreichende Dichte erreicht hat. Nach Beendigung der Inkubation wird der Überstand bei -20 °C gelagert. Die gesammelten Überstände werden mit PBS verdünnt und einer Ultrazentrifugation unterzogen (Abbildung 1). Die erhaltene Lösung wird durch NTA- und DLS-Analysen analysiert. Die Exosomen werden s...

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Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System

Hier haben wir uns zum Ziel gesetzt, eine Formulierung durch Dopaminbeladung der isolierten Exosomen von Stammzellen aus Whartons mesenchymalen Jelly-Stammzellen zu erhalten. Die Isolierung und Charakterisierung von Exosomen, die Wirkstoffbeladung der resultierenden Exosomen und die zytotoxische Aktivität der entwickelten Formulierung werden in diesem Protokoll beschrieben.

Formulierung und Charakterisierung eines Exosom-basierten Dopaminträgersystems

Exosomes between 40 and 200 nm in size constitute the smallest subgroup of extracellular vesicles. These bioactive vesicles secreted by cells play an ...

Exosomen können auf Vesikel reagieren, die von einer Zelle zwischen 14 und 200 Nanometern Größe abgesondert werden und sich in der intrazellulären Fracht und Kommunikation abspalten, die zur kleinsten Untergruppe der extrazellulären Vesikel führt. Exosomen, die durch die Differenzierung des Endosoms entstehen, stammen von der Zellmembran. Die Stammzellen können aus verschiedenen Quellen wie Knochenmark oder Fettgewebe isoliert werden.Getrocknete Stammzellen aus adultem Gewebe haben jedoch ein höheres immunogenes Potenzial Durch die Größe von Exosomen wird gesagt, dass es eine wichtige Rolle bei Erkrankungen des Zentralnervensystems spielt, da es die Blut-Hirn-Schranke durchdringen kann. Waschen Sie zunächst die mesenchymalen Wharton-Jelly-Stammzellen mit fünf Millilitern PBS. Geben Sie dann fünf Milliliter Trypsin-EDTA-Lösung hinzu, bevor Sie den Kolben in einen Inkubator stellen.Nach der Inkubation werden die Zellen gesammelt und fünf Minuten lang bei 1,500 g zentrifugiert. Entfernen Sie dann den Überstand und geben Sie einen Milliliter DMEM-F12 mit 10 % FBS in das Röhrchen. Waschen Sie kultivierte Zellen mit PBS.Geben Sie nach dem Waschen serumfreies DMEM-F12-Medium zu den Zellen und legen Sie es in den Inkubator. Um die Exosomen zu isolieren, sammeln Sie das serumfreie Medium und zentrifugieren Sie es 10 Minuten lang bei 300 g bei vier Grad Celsius. Überführen Sie den Überstand in ein anderes Röhrchen und verarbeiten Sie ihn durch serielle Zentrifugation mit höheren Geschwindigkeiten.Nach der letzten Zentrifugation wird der Überstand langsam entfernt und das Pellet in einem Milliliter PBS aufgelöst. Durch Vortexen mischen und mit der Ultrazentrifugation bei 110.000 G für 70 Minuten bei vier Grad Celsius fortfahren. Fügen Sie drei Milliliter PBS zu der zuvor durch Ultrazentrifugation gesammelten Exosomensuspension hinzu und sterilisieren Sie die verdünnte Suspension durch Filtration mit einem 0,22-Mikron-Filter.Anschließend werden 500 Mikroliter der sterilisierten Exosomensuspension in ein anderes Röhrchen überführt. Als nächstes werden nacheinander 500 Mikroliter 0,5 Milligramm pro Milliliter Dopaminlösung und Saponin in die sterilisierte Suspension gegeben. Nach der Inkubation wird die Suspension ultrazentrifugiert.Die Probe kann entweder für die NTA- und DLS-Analyse zur Charakterisierung von Dopamin-beladenen Exosomen verwendet oder bis zur weiteren Verwendung bei minus 20 Grad Celsius gelagert werden. In der NTA-Analyse wurde die durchschnittliche Größe der aus Wharton-Gelee gewonnenen Exosomen auf 98 Nanometer und die von Dopamin beladenen Exosomen auf 110 Nanometer bestimmt. Die Anzahl der Nanopartikel, die durch NTA- und DLS-Analysen ermittelt wurden, stimmte überein.Das Zetapotential von Wharton-Jelly-abgeleiteten Exosomen wurde mit minus 15,7 und Dopamin-beladenen Exosomen mit minus 17,6 Millivolt gemessen. Die HPLC-Analyse der Dopamin-beladenen Exosomen detektierte den Peak für Dopamin nach 6,45 Minuten. Das kumulative Wirkstofffreisetzungsprofil zeigte, dass 74,8 % des eingekapselten Dopamins innerhalb der ersten acht Stunden aus den Exosomen freigesetzt wurden.Die Zytotoxizität der Dopamin-beladenen und freien Exosomen auf Fibroblasten wurde untersucht. Obwohl die Dopamin-beladenen Exosomen keine zytotoxischen Wirkungen zeigten, verringerte Saponin die Lebensfähigkeit der Fibroblasten. Der MTT-Assay zeigte eine erhöhte Zelllebensfähigkeit, wenn die Fibroblasten mit den Dopamin-beladenen Exosomen behandelt wurden.Die statistische Signifikanz der Ergebnisse wurde durch die Durchführung einer unidirektionalen Nanova evaluiert. Zusätzlich wurden die zytotoxischen Effekte verschiedener Konzentrationen freier Exosomen auf die Fibroblasten untersucht. Die Viabilität der Fibroblasten war mit freien Exosomen in einer Konzentration von 25 Mikrolitern pro Milliliter höher.Es ist wirklich wichtig für das zentrale Nervensystem, die Größe der Patienten, die Rolle bei den Prozessen wie Plastizität, Neuroreaktion, Kommunikation von Seite zu Seite und Neurogenese im Gehirn. Darüber hinaus wurde dank der Oberfläche der Exosomen beobachtet, dass sie mit dem Zielzellmedikament interagieren können, und die Aktivität, die während des Arzneimittels abgegeben wird. Zum ersten Mal in der Studie haben wir eine neue Wirkstoffformulierung entwickelt, indem wir Dopamin in aus Stammzellen gewonnene Exosomen eingekapselt haben.Er schlug vor, dass diese Formulierung für die Behandlung der Parkinson-Krankheit vielversprechend sein wird.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

An Experimental System to Study Mechanotransduction in Fetal Lung Cells

Ein experimentelles System, um Mechanotransduktion in fetalen Lunge Zellen zu untersuchen

Mechanical forces generated in utero by repetitive breathing-like movements and by fluid distension are critical for normal lung development. A key ...

Forschung

Biotechnik

Methods for Characterizing the Co-development of Biofilm and Habitat Heterogeneity

Methoden zur Charakterisierung des Co-Entwicklung von Biofilm und Habitat Heterogenität

Biofilms are surface-attached microbial communities that have complex structures and produce significant spatial heterogeneities. Biofilm development is ...

Design and Implementation of an Automated Illuminating, Culturing, and Sampling System for Microbial Optogenetic Applications

Design und Implementierung eines automatisierten Illuminating, Anzucht und Probenahmesystem für Mikrobielle optogenetische Anwendungen

Optogenetic systems utilize genetically-encoded proteins that change conformation in response to specific wavelengths of light to alter cellular ...

Targeted Plasma Membrane Delivery of a Hydrophobic Cargo Encapsulated in a Liquid Crystal Nanoparticle Carrier

Gezielte Plasma Membrane Lieferung eines Hydrophobic Transport Encapsulated in einem Liquid Crystal Nanoparticle Träger

The controlled delivery of drug/imaging agents to cells is critical for the development of therapeutics and for the study of cellular signaling processes. ...

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

Zellwanderung in dreidimensionales In Vitro Charakterisierung Wunde Umgebungen

Currently, most in vitro models of wound healing, such as well-established scratch assays, involve studying cell migration and wound closure on ...

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Synthese von infektiösen Bakteriophagen in einem E. Coli -basierte zellfreie Expressionssystems

A new generation of cell-free transcription-translation (TXTL) systems, engineered to have a greater versatility and modularity, provide novel ...

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Orbital schütteln Kultur von Säugerzellen in O-förmigen Schiffe, einheitliche Aggregate zu produzieren

Suspension cultures of mammalian cell aggregates are required for various applications in medical and biotechnological fields. The disposable bag-based ...

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Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...

Screening and Identification of Small Peptides Targeting Fibroblast Growth Factor Receptor2 using a Phage Display Peptide Library

Screening und Identifizierung von kleinen Peptiden Targeting Fibroblast Growth Factor Receptor2 mit einem Phage Display Peptid Bibliothek

The human Fibroblast Growth Factor Receptor (FGFR) family comprises four members, namely, FGFR1, FGFR2, FGFR3, and FGFR4, that are involved in various ...