Name: formulating and characterizing an exosome-based dopamine carrier system
Uploaded: 2022-04-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System at JoVE.com

העבודה נתמכה בעיקר על ידי מימון מחקר שסופק על ידי Yıldız Technical University Scientific Research Projects (TSA-2021-4713).

הערה: עיין בטבלת החומרים לקבלת פרטים הקשורים לכל החומרים והציוד המשמשים בפרוטוקול זה.
1. טיפוח ושימור בהקפאה של תאי גזע מזנכימליים ג'לי של וורטון
<ol><li>הוציאו את WJ-MSCs (מ-ATCC) מהמקפיא בטמפרטורה של -80°C. זרעו את התאים לתוך בקבוק המכיל DMEM-F12 בינוני בתוספת 10% סרום בק...

אקסוזומים הם בועיות קרום קטנות עם ממדים של 40-200 ננומטר המופרשים על ידי רוב סוגי התאים, למשל, MSCs1. אקסוזומים מסוגלים לאפשר תקשורת בין תאים, ויכולים להיכנס לתאים בדרכים שונות כגון אנדוציטוזה, פאגוציטוזה, מיקרופינוציטוזה, הפנמה בתיווך שומנים ואיחוי33,44...

אקסוזומים, בועיות ביו-אקטיביות בעלות תכונות משמעותיות, נעים בין 40 ננומטר ל-200 ננומטר. אקסוזומים מקורם בקרום התא והם נוצרים בגלל שחרור האנדוזומים1. מבנים אלה משמשים כמתקשרים בין תאים ומתקשרים עם תאים שכנים כדי להקל על העברת מולקולות פעילות. אקסוזומים יכולים להיות מבודדים ממקורות רבים ושונים. אלה כוללים נוזלי גוף כגון פלזמה, שתן, נוזל מוחי שדרתי, רוק, כמו גם קווי תאים בתרבית בתנאי מבחנה . לאקסוזומים יש תפקיד חשוב בסילוק נזק עצבי, הודות לביו-מקרומולקולות שהם מכילים, כגון שומנים, חלבונים וחומצות גרעין2. גליה, שהם התאים התומכים של מערכת העצבים3, מעבירים חלבונים ומיקרו-רנ"א לאקסונים של נוירונים באמצעות אקסוזומים4.
שומנים המרכיבים את מעטפת המיאלין, שהם תכונה אופיינית בהולכה עצבית, משתחררים גם מאוליגודנדרוציטים באמצעות אקסוזומים 4,5. אקסוזומים מעורבים גם בתהליכים כגון פלסטיות סינפטית, תגובת לחץ עצבי, תקשורת תא-תא ויצירת תאי עצב במוח 6,7. העובדה שלאקסוזומים יש ננו-ממד מאפשרת להם לעבור דרך ה-BBB. יש מסלול מעבר מיוחד מהנוזל הבין-תאי לנוזל השדרה לאחר חדירה לקרום זה8. הודות לתכונות פני השטח שלהם, אקסוזומים יכולים לתקשר ביעילות עם תאי המטרה כמערכת אספקת תרופות ולהעביר באופן פעיל את התרופות הטעונות.
בשל הביטוי של חלבוני דבק שונים (טטרספנינים ואינטגרינים) על פני השטח של אקסוזומים, שלפוחיות חוץ-תאיות אלה יכולות בקלות לתקשר ולהתמזג עם קרום התא המארח9. הוא חשב כי אקסוזומים יכולים לשמש כמערכת העברת תרופות, במיוחד בטיפול במחלות מערכת העצבים המרכזית בשל יכולתם לחדור BBB ואת תכונות פני השטח שלהם. אקסוזומים שמקורם בתאי גזע מזנכימליים (MSC) הם בעלי סיכון נמוך יותר לדחייה חיסונית בהשוואה לטיפולים תאיים אלוגניים, ומבחינה זו, הם יכולים להיות מרכיב חשוב ביישומי טיפול ללא תאים10.
דופמין הוא מולקולה שמחסור במוח הוא המאפיין האופייני של מחלת פרקינסון (PD), המחמיר מיום ליום11,12,13. ידוע כי מחלת פרקינסון קשורה לניוון של נוירונים דופמינרגיים בחומר השחור של המזנצפלון ולאובדן תפקודי נוירונים מוטוריים14,15. המוות של נוירונים דופמינרגיים מונע את אספקת המוליך העצבי דופמין לסטריאטום המוח. זה, בתורו, מביא את הופעתם של סימפטומים ספציפיים PD16. תסמינים אלה של פרקינסון הם ברדיקינזיה, חוסר יציבות יציבה, נוקשות, ובמיוחד רעד במנוחה12,13. למרות שמחלת פרקינסון תוארה לראשונה לפני יותר ממאתיים שנה, מחקרים להבנת הפתולוגיה והאטיולוגיה של המחלה עדיין נמשכים וכיום מקובל כי פרקינסון היא מחלה מערכתית מורכבת17. זה צפוי כי מחסור בדופמין מתרחש, ותסמינים קליניים PD נצפים כאשר יותר מ 80% של נוירונים מתנוונים18. בטיפול במחלה, תוספת דופמין חלקית עדיפה כדי להפחית את הסימפטומים המוטוריים. מחקרי In vivo הראו כי עירוי ישיר של דופמין למוח מפחית באופן משמעותי את הסימפטומים אצל בעלי חיים19. מבשרי דופמין כגון L-DOPA (L-3,4-dihydroxyphenylalanine) ותרופות קולטן דופמין משמשים במרפאה מכיוון שעירוי ישיר של דופמין למוח אינו אפשרי בבני אדם ודופמין הנכנס למערכת אינו יכול לחצות את BBB20. תרופות מסוג זה מאבדות את יעילותן עם הזמן. עם זאת, עדיין אין גישה טיפולית מרפאת לפרקינסון. לפיכך, יש צורך עצום לפתח אסטרטגיות טיפוליות ושיטות טיפול חדשות כדי לחשוף את הפתופיזיולוגיה של המחלה ולהפחית את ההשפעה של פרקינסון על החולים.
מחקרים מבוססי אקסוזום משכו לאחרונה תשומת לב לאיסוף מידע הן על גישות טיפוליות והן על פתולוגיות של מחלות מערכת העצבים. אקסוזומים שמקורם ב-MSC הוכחו כמפחיתים דלקת בנזק עצבי ותורמים להתחדשות עצבית21,22,23. בנוסף, דווח כי הפרשות אקסוזום שמקורן ב- MSC מפחיתות אפופטוזיס על ידי הצגת השפעות נוירוטרופיות ונוירופרוטקטיביות, במיוחד על נוירונים דופמינרגיים24,25. המחקר על פלטפורמות שבהן אקסוזומים משמשים כמערכות מתן תרופות טיפוליות הואץ באופן אינטנסיבי בשנים האחרונות. במחקרים רבים, נצפה כי תרופות רלוונטיות יכולות להיעטף בקלות לאקסוזומים ולהעביר בבטחה לתאי מטרה, רקמות ואיברים26,27. שיטות שונות כגון דגירה, מחזורי הקפאה/הפשרה, סוניקציה ושחול יכולות לשמש להעמסת תרופות לתוך אקסוזומים28.
דגירה עם אקסוזומים או שלפוחיות דמויות אקסוזום מאפשרת למולקולות קטנות ליפופיליות להיות עטופות באופן פסיבי במערכות העברה אלה28,29,30. בפרט, מולקולות שונות כגון כורכומין 31, קטלאז 30, דוקסורוביצין32 ופקליטקסל33 הועמסו ביעילות לתוך אקסוזומים. נצפה כי אקסוזומים המכילים קטלאז, בעלי פעילות נוגדת חמצון, צברו ביעילות בנוירונים ובתאי מיקרוגליאה במוח והפגינו פעילות נוירופרוטקטורית חזקה30. באותו מחקר, סאפונין, שנוסף למתחם כדי להגביר את יעילות ההעמסה, נמצא כמגדיל את אחוז העמסת התרופה במהלך הדגירה30,34. עם זאת, נדרשים מחקרים נוספים כדי לקבוע את הסטנדרטים להעמסת תרופות לתוך אקסוזומים.
מאמר זה מתאר את התפתחותה של מערכת ננו-נשאית על ידי אנקפסולציה של דופמין לתוך אקסוזומים שבודדו מ-WJ-MSCs. כל השלבים, כולל טיפוח WJ-MSCs, בידוד ואפיון אקסוזומים, ניסויי העמסת תרופות, אפיון אקסוזומים טעוני דופמין בטכניקות שונות, וניתוח ציטוטוקסיות חוץ גופית מוסברים בפירוט.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m membrane filter</td>
			<td>Aisimo</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#181;m syringe filter</td>
			<td>Aisimo</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL Falcon tube</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25 cm2 cell culture flasks (Falcon, TPP tissue culture flasks</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL Falcon tube</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 cell culture flasks (Falcon, TPP tissue culture flasks</td>
			<td>Nest</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well plates (Falcon, TPP microplates)</td>
			<td>Merck Millipore</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>271004-1L</td>
			<td>Used for HPLC analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave</td>
			<td>NUVE-OT 90L</td>
			<td></td>
			<td>Used for the sterilization process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Cabin</td>
			<td>Hera Safe KS</td>
			<td></td>
			<td>Used for the cell culture process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifugal</td>
			<td>Hitachi</td>
			<td>CF16RN</td>
			<td>Used in the exosome isolation step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 incubator with Safe Cell UV</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td></td>
			<td>Used for the cell culture process</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dopamine hydrochloride H8502-10G</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H8502-10G</td>
			<td>Used in exosome dopamine loading</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Modified Eagle&#39;s Medium/Nutrient Mixture-F12</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>RNBJ7249</td>
			<td>Used as cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum-FBS</td>
			<td>Capricorn</td>
			<td>FBS-16A</td>
			<td>It was used by adding to the cell culture medium.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer -80 &#176;C</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MDF-U5386S-PE</td>
			<td>To store cells and the resulting exosomes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fridge</td>
			<td>Panasonic</td>
			<td>MPR-215-PE</td>
			<td>Used to store cell culture and other materials</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High performance liquid chromatography-HPLC</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td></td>
			<td>The presence of dopamine from the content of the obtained formulation was investigated.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope- Primovert</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>Used to observe cells in cell culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MTT Assay</td>
			<td>Biomatik</td>
			<td></td>
			<td>Used to measure cell viability</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NanoSight NS300</td>
			<td>Malvern panalytical</td>
			<td>Malvern panalytical</td>
			<td>Used for exosome characterization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optima XPN-100 Ultracentrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td></td>
			<td>Used in the exosome isolation step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS tablet</td>
			<td>Biomatik</td>
			<td>43602</td>
			<td>In the preparation of the PBS solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicilin/Streptomycin Solution</td>
			<td>Capricorn</td>
			<td>PB-S</td>
			<td>It was added to the medium to prevent contamination in cell culture.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette Aid</td>
			<td>Isolab</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision balance-Kern</td>
			<td>Kern-ABJ220-4NM</td>
			<td></td>
			<td>Used in the preparation of solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Q500 Sonicator</td>
			<td>Qsonica, LLC</td>
			<td></td>
			<td>Used to digest exosomes in HPLC analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>47036-50G-F</td>
			<td>It was used by adding it to the total solution in the exosome dopamine loading process.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spectrostar-Nano-Spectrophotometry</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td></td>
			<td>Used for MTT and drug release analyzes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPSS 22</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>statistical package program</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vorteks-FinePCR</td>
			<td>FinePCR-FineVortex</td>
			<td></td>
			<td>Used to mix solutions homogeneously</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water Bath 37 &#176;C-Senova</td>
			<td>Senova</td>
			<td></td>
			<td>Used in cell culture step</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wharton&#8217;s jelly mesenchymal stem cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZetaSizer</td>
			<td>Malvern Nano ZS</td>
			<td>Malvern Nano ZS</td>
			<td>Used for exosome characterization</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

formulating and characterizing an exosome-based dopamine carrier system

אקסוזומים בגודל של 40 עד 200 ננומטר מהווים את תת-הקבוצה הקטנה ביותר של שלפוחיות חוץ-תאיות. שלפוחיות ביו-אקטיביות אלה המופרשות על ידי תאים ממלאות תפקיד פעיל במטען ובתקשורת בין-תאיים. אקסוזומים נמצאים בעיקר בנוזלי גוף כגון פלזמה, נוזל מוחי שדרתי, שתן, רוק, מי שפיר, קולוסטרום, חלב אם, נוזל מפרקים, זרע וחומצה פלאורלית. בהתחשב בגודל של אקסוזומים, הוא חשב כי הם עשויים לשחק תפקיד חשוב במחלות מערכת העצבים המרכזית כי הם יכולים לעבור דרך מחסום הדם-מוח (BBB). לפיכך, מחקר זה נועד לפתח מערכת ננו-נשאית מבוססת אקסוזום על ידי עטיפת דופמין לתוך אקסוזומים שבודדו מתאי גזע מזנכימליים ג'לי של וורטון (WJ-MSCs). אקסוזומים שעברו את תהליך האפיון הודגרו עם דופמין. האקסוזומים טעוני הדופמין אופיינו מחדש בסוף הדגירה. אקסוזומים עמוסי דופמין נחקרו במבחני שחרור תרופות וציטוטוקסיות. התוצאות הראו כי ניתן לעטוף בהצלחה דופמין בתוך האקסוזומים וכי האקסוזומים העמוסים בדופמין לא השפיעו על יכולת הקיום של פיברובלסטים.

בידוד ואפיון אקסוזום תאי גזע של ג'לי וורטון מתורבתים ומודגרים בתווך ללא סרום במשך 48 שעות כאשר התרבית מגיעה לצפיפות מספקת. לאחר סיום הדגירה, supernatant מאוחסן ב -20 מעלות צלזיוס. הסופרנאטנטים שנאספו מדוללים באמצעות PBS ונתונים לאולטרה-צנטריפוגה (איור 1). הפתרון המתקבל מנ...

Watch this Scientific Journal Video about Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System at JoVE.com

Formulating and Characterizing an Exosome-based Dopamine Carrier System

כאן, שאפנו להשיג ניסוח על ידי העמסת דופמין של האקסוזומים המבודדים של תאי גזע מתאי גזע מזנכימליים ג'לי של וורטון. בידוד ואפיון אקסוזום, העמסת תרופות לתוך האקסוזומים המתקבלים, והפעילות ציטוטוקסית של הפורמולציה המפותחת מתוארים בפרוטוקול זה.

גיבוש ואפיון מערכת נשאי דופמין מבוססת אקסוזום

Exosomes between 40 and 200 nm in size constitute the smallest subgroup of extracellular vesicles. These bioactive vesicles secreted by cells play an ...

אקסוזומים עשויים להגיב לבועיות המופרשות על ידי תא בגודל של בין 14 ל -200 ננומטר, ומתפצלות מהמטען והתקשורת התוך-תאיים, המגיעים לתת-הקבוצה הקטנה ביותר של שלפוחיות חוץ-תאיות. אקסוזומים הנוצרים כתוצאה מהתמיינות האנדוזום, מקורם בקרום התא. ניתן לבודד את תאי הגזע ממקורות שונים כגון מח עצם או רקמות שומן.אבל לתאי גזע מיובשים ברקמה בוגרת יש פוטנציאל אימונוגני גבוה יותר חסרונות בקפיצת גודל של אקסוזומים, נאמר כי זה עשה תפקיד חשוב במחלת מערכת העצבים המרכזית כי זה יכול לעבור דרך מחסום הדם במוח. כדי להתחיל, לשטוף את זרעי תאי גזע mesenchymal ג'לי של וורטון עם חמישה מיליליטר של PBS. לאחר מכן להוסיף חמישה מיליליטר של תמיסת טריפסין EDTA לפני הצבת הבקבוק באינקובטור.לאחר הדגירה, לאסוף את התאים ואת הצנטריפוגה ב 1, 500 גרם במשך חמש דקות. לאחר מכן הסר את supernatant ולהוסיף מיליליטר אחד של DMEM-F12 המכיל 10% FBS לצינור. לשטוף תאים בתרבית עם PBS.לאחר השטיפה, להוסיף מדיום DMEM-F12 ללא סרום לתאים ולמקם אותו באינקובטור. כדי לבודד את האקסוזומים, אספו את המדיה והצנטריפוגה ללא סרום ב-300 גרם בארבע מעלות צלזיוס למשך 10 דקות. מעבירים את הסופרנאטנט לצינור אחר ומעבדים אותו באמצעות צנטריפוגה טורית במהירויות גבוהות יותר.לאחר הצנטריפוגה הסופית, מוציאים לאט את הסופרנאטנט וממיסים את הגלולה במיליליטר PBS. מערבבים על ידי מערבולת ולהמשיך עם ultracentrifugation ב 110, 000 גרם במשך 70 דקות בארבע מעלות צלזיוס. הוסף שלושה מיליליטר PBS לתרחיף האקזוזום שנאסף קודם לכן על ידי אולטרה-צנטריפוגה ועיקור את המתלה המדולל על ידי סינון באמצעות מסנן 0.22 מיקרון.לאחר מכן להעביר 500 מיקרוליטר של ההשעיה exosome מעוקר צינור אחר. לאחר מכן, ברצף, להוסיף 500 מיקרוליטר של 0.5 מיליגרם לכל מיליליטר תמיסת דופמין ו saponin לתוך ההשעיה מעוקר. לאחר הדגירה אולטרה צנטריפוגה את המתלים.הדגימה יכולה לשמש לניתוח NTA ו-DLS כדי לאפיין אקסוזומים טעוני דופמין או לאחסן בטמפרטורה של מינוס 20 מעלות צלזיוס עד לשימוש נוסף. בניתוח של נת"ע, נקבע כי הגודל הממוצע של אקסוזומים שמקורם בג'לי וורטון הוא 98 ננומטר ואקסוזומים טעוני דופמין להיות 110 ננומטר. מספרי הננו-חלקיקים שנחשפו בניתוחי נת"ע ו-DLS תאמו זה את זה.פוטנציאל הזטה של אקסוזומים שמקורם בג'לי וורטון נמדד כמינוס 15.7 ואקסוזומים טעוני דופמין כמינוס 17.6 מיליוולט. ניתוח HPLC של האקסוזומים טעוני הדופמין זיהה את שיא הדופמין לאחר 6.45 דקות. פרופיל שחרור התרופה המצטבר גילה כי 74.8% מהדופמין העטוף שוחרר מהאקסוזומים בשמונה השעות הראשונות.נחקרה הציטוטוקסיות של האקסוזומים הטעונים בדופמין והחופשיים על פיברובלסטים. למרות שהאקסוזומים העמוסים בדופמין לא הדגימו השפעות ציטוטוקסיות, ספונין הפחית את יכולת הקיום של הפיברובלסט. בדיקת MTT הראתה יכולת קיום מוגברת של תאים כאשר הפיברובלסטים טופלו באקסוזומים טעוני דופמין.המובהקות הסטטיסטית של התוצאות הוערכה על ידי ביצוע אנובה חד-כיוונית. בנוסף, ההשפעות ציטוטוקסיות של ריכוזים שונים של אקסוזומים חופשיים נחקרו על הפיברובלסטים. הכדאיות של הפיברובלסטים הייתה גבוהה יותר עם אקסוזומים חופשיים בריכוז של 25 מיקרוליטר למיליליטר.חשוב מאוד שמערכת העצבים המרכזית תהיה גודל המטופל, תפקיד המשחק בתהליכים כמו פלסטיות, תגובה עצבית, תקשורת מצד לצד ויצירת תאי עצב במוח. בנוסף, הודות לפני השטח של אקסוזומים, הוא אומר, נצפה כי הם יכולים באינטראקציה עם התרופה תא המטרה ופעילות המועברת במהלך התרופה היא השלמה. בפעם הראשונה במחקר, פיתחנו נוסחה חדשה של תרופה על ידי עטיפת דופמין לתוך אקסוזומים שמקורם בתאי גזע.הוא הציע כי ניסוח זה יהיה כל כך מבטיח לטיפול במחלת פרקינסון.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

An Experimental System to Study Mechanotransduction in Fetal Lung Cells

מערכת ניסיונית ללמוד Mechanotransduction ב לתאי ריאה עוברית

Mechanical forces generated in utero by repetitive breathing-like movements and by fluid distension are critical for normal lung development. A key ...

Methods for Characterizing the Co-development of Biofilm and Habitat Heterogeneity

שיטות לאפיון Co-הפיתוח של Biofilm ובית גידול הטרוגניות

Biofilms are surface-attached microbial communities that have complex structures and produce significant spatial heterogeneities. Biofilm development is ...

Design and Implementation of an Automated Illuminating, Culturing, and Sampling System for Microbial Optogenetic Applications

השרשה של תאורה אוטומטית, Culturing, מערכת דגימה עבור יישומים מיקרוביאלית optogenetic

Optogenetic systems utilize genetically-encoded proteins that change conformation in response to specific wavelengths of light to alter cellular ...

Targeted Plasma Membrane Delivery of a Hydrophobic Cargo Encapsulated in a Liquid Crystal Nanoparticle Carrier

משלוח הממברנה ממוקד על Encapsulated מטענים הידרופובי בנושאת Nanoparticle קריסטל נוזלת

The controlled delivery of drug/imaging agents to cells is critical for the development of therapeutics and for the study of cellular signaling processes. ...

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

Characterizing Cell Migration Within Three-dimensional In Vitro Wound Environments

אפיון נדידת תאים בתוך תלת מימדי במבחנה פצע סביבות

Currently, most in vitro models of wound healing, such as well-established scratch assays, involve studying cell migration and wound closure on ...

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

Synthesis of Infectious Bacteriophages in an E. coli-based Cell-free Expression System

סינתזה של Bacteriophages זיהומיות e. coli -תא ללא ביטוי מערכת מבוססת

A new generation of cell-free transcription-translation (TXTL) systems, engineered to have a greater versatility and modularity, provide novel ...

An Orbital Shaking Culture of Mammalian Cells in O-shaped Vessels to Produce Uniform Aggregates

אורביטל טלטול התרבות של תאים בתרבית של צורת O כלי לייצר אגרגטים אחיד

Suspension cultures of mammalian cell aggregates are required for various applications in medical and biotechnological fields. The disposable bag-based ...

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

A Novel Surgical Technique As a Foundation for In Vivo Partial Liver Engineering in Rat

טכניקה כירורגית הרומן כבסיס In Vivo חלקי הכבד הנדסה בעכברוש

Organ engineering is a novel strategy to generate liver organ substitutes that can potentially be used in transplantation. Recently, in vivo liver ...

Real-time Visualization and Analysis of Chondrocyte Injury Due to Mechanical Loading in Fully Intact Murine Cartilage Explants

ויזואליזציה בזמן אמת וניתוח Chondrocyte לפציעה בגלל העמסה מכנית ב Explants הסחוס מאתר באופן מלא ללא פגע

Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...

Screening and Identification of Small Peptides Targeting Fibroblast Growth Factor Receptor2 using a Phage Display Peptide Library

הקרנה וזיהוי של פפטידים קטנים פילוח הצמיחה פיברוהפיצוץ מקדם Receptor2 באמצעות ספריית Phage התצוגה פפטיד

The human Fibroblast Growth Factor Receptor (FGFR) family comprises four members, namely, FGFR1, FGFR2, FGFR3, and FGFR4, that are involved in various ...