Name: laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome
Uploaded: 2022-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome at JoVE.com

Der blev ikke modtaget nogen specifik finansiering til dette arbejde.

Den lokale etiske komité ved det tertiære henvisningscenter for MRKHS (IRCCS San Raffaele Universitetshospital, Milano, Italien) blev underrettet og godkendte protokollen inden dens gennemførelse i juli 2017. Alle patienter eller værger gav underskrevet informeret samtykke til laparoskopisk oocythentning og kryopræservering under vaginoplastik og til brug af anonymiserede kliniske / laboratoriedata til videnskabelige formål.
1. Holdets sammensætning
<ol><li>Udpeg et d...

<ol>
	<li>Committee on Adolescent Health Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACOG+Committee+Opinion+No.+728:+M&#252;llerian+Agenesis:+Diagnosis,+Management,+And+Treatment.">ACOG Committee Opinion No. 728: M&#252;llerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment.</a> Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).</li><li>Reichman, D. E., Laufer, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+Fertility+counseling+and+treatment.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: Fertility counseling and treatment.</a> Fertility and Sterility. 94 (5), 1941-1943 (2010).</li><li>Ben-Rafael, Z., Bar-Hava, I., Levy, T., Orvieto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplifying+ovulation+induction+for+surrogacy+in+women+with+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Simplifying ovulation induction for surrogacy in women with Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 13 (6), 1470-1471 (1998).</li><li>Beski, S., Gorgy, A., Venkat, G., Craft, I. L., Edmonds, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+surrogacy:+a+feasible+option+for+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Gestational surrogacy: a feasible option for patients with Rokitansky syndrome.</a> Human Reproduction. 15 (11), 2326-2328 (2000).</li><li>Br&#228;nnstr&#246;m, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+uterus+transplantation.">Livebirth after uterus transplantation.</a> Lancet. 385 (9968), 607-616 (2015).</li><li>Sreenivas, K., Campo-Engelstein, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Domestic+and+international+surrogacy+laws:+implications+for+cancer+survivors.">Domestic and international surrogacy laws: implications for cancer survivors.</a> Cancer Treatment and Research. 156, 135-152 (2010).</li><li>Soderstrom-Anttila, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogacy:+outcomes+for+surrogate+mothers,+children+and+the+resulting+families-a+systematic+review.">Surrogacy: outcomes for surrogate mothers, children and the resulting families-a systematic review.</a> Human Reproductive Update. 22 (2), 260-276 (2016).</li><li>Wood, E. G., Batzer, F. R., Corson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+response+to+gonadotrophins,+optimal+method+for+oocyte+retrieval+and+pregnancy+outcome+in+patients+with+vaginal+agenesis.">Ovarian response to gonadotrophins, optimal method for oocyte retrieval and pregnancy outcome in patients with vaginal agenesis.</a> Human Reproduction. 14 (5), 1178-1181 (1999).</li><li>Raziel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogate+in+vitro+fertilization+outcome+in+typical+and+atypical+forms+of+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Surrogate in vitro fertilization outcome in typical and atypical forms of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 27 (1), 126-130 (2012).</li><li>Egarter, C., Huber, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+stimulation+and+retrieval+of+oocytes+in+patient+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster+syndrome.">Successful stimulation and retrieval of oocytes in patient with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster syndrome.</a> Lancet. 1 (8597), 1283 (1988).</li><li>Candiani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+retrieval+during+laparoscopic+vaginoplasty+to+reduce+invasiveness+in+the+treatment+of+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome.">Oocyte retrieval during laparoscopic vaginoplasty to reduce invasiveness in the treatment of Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome.</a> Journal of Minimally Invasive Gynecology. 27 (1), 74-79 (2020).</li><li>Fedele, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+neovagina+by+Davydov's+laparoscopic+modified+technique+in+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Creation of a neovagina by Davydov's laparoscopic modified technique in patients with Rokitansky syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (1), 1-6 (2010).</li><li>ESHRE Working Group on Ultrasound in ART et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+good+practice+in+ultrasound:+oocyte+pick+up.">Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up.</a> Human Reproduction Open. 2019 (4), (2019).</li><li>Callens, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+on+surgical+and+non-surgical+treatments+for+vaginal+hypoplasia.">An update on surgical and non-surgical treatments for vaginal hypoplasia.</a> Human Reproductive Update. 20 (5), 775-801 (2014).</li><li>S&#246;nmezer, M., G&#252;l&#252;mser, &. #. 1. 9. 9. ;., S&#246;nmezer, M., S&#252;k&#252;r, Y. E., Atabeko&#287;lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transabdominal+ultrasound+guided+oocyte+retrieval+using+vaginal+ultrasound+probe:+Definition+of+the+technique.">Transabdominal ultrasound guided oocyte retrieval using vaginal ultrasound probe: Definition of the technique.</a> The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 47 (2), 800-806 (2021).</li><li>Raju, G. A., Haranath, G. B., Krishna, K. M., Prakash, G. J., Madan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+pregnancy+with+laparoscopic+oocyte+retrieval+and+in+vitro+fertilization+in+Mullerian+agenesis.">Successful pregnancy with laparoscopic oocyte retrieval and in vitro fertilization in Mullerian agenesis.</a> Singapore Medicine Journal. 47 (4), 329-331 (2006).</li><li>Liszewska-Kap&#322;on, M., Str&#243;zik, M., Kotarski, &. #. 3. 2. 1. ;., Bag&#322;aj, M., Hirnle, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+as+an+interdisciplinary+problem.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome as an interdisciplinary problem.</a> Advances in Clinical and Experimental Medicine. 29 (4), 505-511 (2020).</li><li>Wagner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+management+during+the+adolescent+transition+period+of+girls+and+young+women+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+(MRKHS):+A+systematic+literature+review.">Treatment management during the adolescent transition period of girls and young women with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome (MRKHS): A systematic literature review.</a> Orphanet Journal of Rare Diseases. 11 (1), 152 (2016).</li><li>Bean, E. J., Mazur, T., Robinson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+sexuality,+psychological+effects,+and+quality+of+life.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: sexuality, psychological effects, and quality of life.</a> Journal of Pediatric and Adolescent Gynecology. 22 (6), 339-346 (2009).</li></ol>

Denne protokol reducerer invasiviteten i behandlingen af MRKHS ved at kombinere procedurerne for vaginoplastik og oocythentning. Til dette formål er det afgørende, at der udpeges et dedikeret team for at sikre, at timingen af COS, den kirurgiske procedure og oocytforglasning planlægges effektivt.
MRKHS-patienter, for hvem denne kombinerede laparoskopiske metode forventes at være mest gavnlig, er dem, hvor en transvaginal hentning ville blive betragtet som teknisk udfordrende eller umulig p...

Med en forekomst på ca. 1 ud af 4-10.000 kvinder er MRKHS årsag til 15% af de primære amenoré tilfælde. MRKHS er karakteriseret ved det medfødte fravær af det øvre segment af vagina og livmoderen, mens urinveje og skeletanomalier er forbundet variabelt. Mere specifikt er en vaginal hvælving med en dybde på 1-2 cm normalt til stede, og to rudimentale livmoderhorn kan findes1.
Tidligere var den primære medicinske interesse i MRKHS at muliggøre normalt samleje, hvilket generelt kræver konstruktion af en neovagina ved enten ikke-kirurgiske eller kirurgiske tilgange2. Imidlertid tillader fremskridt inden for reproduktiv medicin i øjeblikket genetisk moderskab hos MRKHS-patienter ved enten surrogatmoderskab 3,4 eller for nylig livmodertransplantation5. Mens livmodertransplantation stadig er en eksperimentel procedure, er surrogatmoderskab tilgængelig i mange lande verden over6, og rapporterede obstetriske og psykosociale resultater kan sammenlignes med standardbefrugtning in vitro-befrugtning og oocytdonation7.
Både surrogatmoderskab og livmodertransplantation kræver oocytudtagning og in vitro-befrugtning, men der er ingen konsensus om, hvordan man udfører ægopsamling hos patienter med MRKHS. En transvaginal tilgang kan være umulig på grund af utilstrækkelig vaginal elasticitet8 selv efter vaginoplastik, atypisk placering af æggestokkene9 eller overdreven afstand mellem æggestokkene og vaginalmanchetten 4,10. I disse tilfælde repræsenterer laparoskopisk oocythentning den optimale tilgang med hensyn til kirurgisk adgang. Men da de fleste MRKHS-patienter i øjeblikket gennemgår laparoskopisk neovaginoplastik, foreslår vi at udføre en laparoskopisk oocythentning på tidspunktet for operationen for vaginoplastik11 efterfulgt af oocytkryopræservering til fremtidig brug, hvilket minimerer invasivitet, samtidig med at behandlingen af MRKHS-patienters seksuelle og reproduktive funktion kombineres.
Demografiske data for patienter Treogtyve MRKH-patienter gennemgik behandling med denne protokol indtil videre. Anamnestiske, instrumentelle og laboratoriefund af patienter er opsummeret i tabel 1. Medmindre andet er angivet i tabel 1, blev der ikke fundet tilknyttede medfødte anomalier.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Oocyte retrieval procedure</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable incubator</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage Fertilization medium SAGE</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte denudation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet adjustable handle set</td>
			<td>Cook</td>
			<td>G18674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CSCM (Continuos single culture) medium</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>90165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVF culture 60 mm petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serum Substitute Supplement</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>99193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (140 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1140-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (170 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1170-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte vitrification</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Container for Cooling rack</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryodevice/cryotop</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td>81111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic timer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet</td>
			<td>COOK</td>
			<td>K- 1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gilson Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Printer LabXpert</td>
			<td>Brady</td>
			<td>XSL-86-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 20-200 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2160G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 2-20 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2139-HR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visotubes</td>
			<td>Cryo Bio System</td>
			<td>20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Freeze Kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90133-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Thaw kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90137-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome

I Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrom (MRKHS) patienter, der er planlagt til laparoskopisk vaginoplastik og har et ønske om biologisk moderskab, foreslår vi, at der udføres en samtidig laparoskopisk oocythentning til kryopræservering. Oocythentning forfølges i begyndelsen af laparoskopien. Højre og venstre 5 mm trocars er placeret, hvorigennem en 17 G ægge aspirationsnål bruges til punktering af henholdsvis højre og venstre æggestokke. For at lette eksponeringen af folliklerne mobiliseres æggestokkene og holdes med laparoskopiske tang.
Ved aspiring af flere follikler nær hinanden bevares nålespidsen i æggestokken for at reducere antallet af gange, som æggestokkene er fastgjort og på grund af den iboende risiko for blødning. Efterfølgende trin er uændrede sammenlignet med Davydov laparoskopisk modificeret teknik til vaginoplastik. Før operationen udføres kontrolleret ovariestimulering med en gonadotropinhormonfrigivende hormon (Gn-RH) antagonistprotokol, og den samtidige procedure for oocythentning og vaginoplastik er planlagt 36 timer efter den endelige follikulære modningsudløser. Follikulær væske opsamles i de samme 10 ml sterile rør, der anvendes under transvaginal oocythentning og overføres i en opvarmningsblok (37 ° C) til det assisterede reproduktionslaboratorium, hvor modne (metafase II) oocytter er forglasset.
I dette tilfælde blev en serie på 23 kvinder med MRKH, oocytter med succes udtaget og kryopræserveret hos alle patienter; vaginoplastik blev efterfølgende udført uden ændringer, og den indlagte og ambulante postoperative pleje (dag for fjernelse af urinkateter, udskrivningsdag, brug af dilatator og komfort ved opfølgning) forblev upåvirket. En postoperativ komplikation forekom hos en patient (feber udviklede sig på dag 5 efter operationen og påvisning af intraperitoneal væske på transabdominal ultralyd) og forsvandt efter konservativ behandling. I stedet for at udføre kirurgisk vaginoplastik og forsinke oocythentning hos MRKH-patienter, kombinerer denne tilgang begge procedurer i en enkelt laparoskopi og derved minimerer kirurgisk invasivitet og anæstesiologiske risici.

Tabel 2 indeholder data om ovarieretimulering af patienterne, mens de vigtigste kirurgiske og funktionelle resultater er beskrevet i tabel 3. De samtidige laparoskopiske procedurer for oocythentning og vaginoplastik blev kombineret med succes hos alle patienter. Et gennemsnit på 11,4 ± 5,4 (gennemsnit ± SD) oocytter blev hentet, og 9,6 ± 4,3 MII oocytter var kryopræserverede (tabel 3). I vores erfaring med oocytkryopræservering hos patienter, der gennemgår ART, va...

Watch this Scientific Journal Video about Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome at JoVE.com

Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome

Et dedikeret team kan tilbyde Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-patienter mulighed for at udføre kontrolleret ovariestimulering og oocytkryopræservering på tidspunktet for laparoskopisk vaginoplastik.

Laparoskopisk oocythentning og kryopræservering under vaginoplastik til behandling af Mayer-Rokitansky-Kuster-Hausers syndrom

In Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome (MRKHS) patients who are scheduled for laparoscopic vaginoplasty and have a desire for biological motherhood, ...

Vores tilgang gør det muligt at minimere invasiv sygdom i behandlingen af Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrom ved at kombinere laparoskopisk vaginoplastik og oocythentning til fremtidige fertilitetsbehandlinger. De vigtigste fordele ved vores tilgang er kravet om en enkelt anæstesi og overvindelsen af umuligheden af en transvaginal oocythentning hos yngre Rokitansky-patienter. Proceduren vil blive demonstreret af Diana Delprato, en senior gynækolog i vores infertilitetsenhed og af Alessandra Alteri og Greta Cermisoni, to senior kliniske embryologer fra vores assisterede reproduktionslaboratorium.Start kontrolleret ovariestimulering på dag 14 fra operationsdagen. Overvåg ovarierespons ved seriel transabdominal ultralyd og samtidige målinger af østradiol og progesteron. Etabler pneumoperitoneum med en åben teknik.Placer en 10 millimeter navlestrengstrocar til indsættelse af laparoskopet og tre fem millimeter trocars i de centrale, højre og venstre nedre kvadranter. Under laparoskopisk syn skal du bruge en 17-gauge enkelt lumennål forbundet til en aspirationspumpe, som almindeligt anvendt til transvaginal hentning gennem de centrale og venstre trocars til punktering af henholdsvis højre og venstre æggestok. Løft og hold æggestokkene med laparoskopiske tang for at lette eksponeringen af folliklerne.Når du aspirerer flere follikler, der er tæt på hinanden, skal du beholde nålespidsen i æggestokken for at reducere antallet af gange, som æggestokkene er fikseret og den iboende risiko for blødning. Dissekere peritoneum ved at løfte og skære peritonealstrengen på tværs mellem de to rudimentale livmoderhorn og derefter udvide snittet sideværts, anteriort og bagud. Udsæt den vaginale fordybning på perineal tilgang og udfør et H-formet snit og skab et neo-vaginalt rum ved skarp og stump dissektion af det vesicorektale rum.Træk derefter de dissekerede peritoneale margener ned til kanten af vaginal vestibulum. Position afbrudte suturer i polydioxanon syntetisk absorberbar 3-0 for peritoneal vestibulær anastomose. Begynd en pungstrengsutur i polydioxanon syntetisk absorberbar 2-0 monofilament i hvert hemipelvis fra det mobiliserede peritoneum over blæren med bindevævstransfiksering af det runde ledbånd, tubal isthmus, utero-ovariebåndet og det laterale peritoneale blad.Inkluder derefter i de to suturer det laterale aspekt af mesorektum og det forreste aspekt af den rektale serosa umiddelbart under rectosigmoid-krydset. Til sidst skal du placere en paraffinbelagt gasbind i den peritoneum-belagte neovagina. Saml follikulære aspirater i 10 millimeter rundbundede rør, der holdes varme i en bærbar inkubator, og transporter dem straks til embryologilaboratoriet med en transporttid på ca. 10 minutter.Når alle cumulus oocytkomplekser indsamles, placeres de i skålen med fire brønde, der indeholder befrugtningsmediet, og mærker låget og bunden med data vedrørende patientens identitet. Inkubere dem ved 37 grader Celsius i en kontrolleret atmosfære indeholdende 6% kuldioxid og 5% ilt. Sørg for, at en dobbeltkontrol af proceduren udføres af et andet medlem af laboratoriepersonalet.Udfør fjernelse af cumulus koronaceller inden for 38 timer efter ægløsningsudløser. Anbring cumulus oocytkomplekser i den centrale brønd, der indeholder enzymet, for at sprede cumuluscellerne med en glas Pasteur-pipette, og pipetter forsigtigt opløsningen indeholdende cumulus oocytkomplekser op og ned i op til 30 sekunder. Flyt oocytterne til den anden centrale brøndskål, der kun indeholder HEPES-buffermedium, og sørg for at fortrænge en minimal mængde af enzymet.Fjern de resterende koronaceller ved hjælp af denudingpipetter med faldende indre diametre. Vurder stadiet af oocytmodning, adskillelse af metafase II oocytter. Overfør metafase II-oocytterne i en IVF-kultur 60 millimeter petriskål indeholdende ni dråber kontinuerligt enkeltkulturmedium dækket med seks millimeter mineralolie.Inkubere dem ved 37 grader Celsius i en kontrolleret atmosfære indeholdende 6% kuldioxid og 5% ilt. Fyld en køleboks op til toppen med frisk flydende nitrogen og dæk, indtil den bruges til at minimere dispersion og fordampning. Brug en stripperpipette med en indvendig diameter på 170 mikrometer for at undgå at beskadige oocytter under manipulation.Ryst forsigtigt hvert hætteglas med ækvilibreringsopløsning, forglasningsopløsning og vaskeopløsning for at blande indholdet før brug. Forbered låget på en 60 ml petriskål med en dråbe 50 mikroliter vaskeopløsning en. Placer dråber lige før brug for at begrænse medium fordampning.Tag oocytskålen fra inkubatoren og overfør metafase II-oocytterne med et minimalt volumen medium fra kulturskålen til 50 mikroliter vaskeopløsning. Undlad 50 mikroliter dråber vaskeopløsning to, ligevægtsopløsning en og ligevægtsopløsning to i umiddelbar nærhed og overfør oocytter fra dråbevaskopløsning en til dråbevaskeopløsning to. Flet dråben af ligevægtsopløsning en til vaskeopløsning to og vent i to minutter på spontan blanding af begge opløsninger.Flet derefter dråben af ligevægtsopløsning to til de tidligere fusionerede dråber og lad det stå i yderligere to minutter. Til sidst flettes en ny 100 mikroliter dråbe ligevægtsopløsning tre til de tidligere fusionerede dråber og efterlades i et ekstra minut. Anbring oocytterne i 100 mikroliter dråbe ligevægtsopløsning fire i 10 minutter.Dispenser to 50 mikroliter dråber vitrifikationsopløsning og en 100 mikroliter vitrifikationsopløsning. Flyt oocytterne sekventielt ind i de tre dråber vitrifikationsopløsning i 60 sekunder, så oocytterne forbliver i hver dråbe i ca. 20 sekunder. Når der er ca. 10 sekunder tilbage inden udgangen af de 60 sekunders inkubation, placeres kryoapparatet under mikroskopet.Bær oocytterne ved spidsen af pipetten, og læg dem på kryoapparatet med den mindste mængde forglasningsopløsning. Aspirer den overskydende forglasningsopløsning, og lad oocytterne være dækket af et tyndt lag forglasningsopløsning. Dyk cryoenheden direkte i flydende nitrogen og flyt den hurtigt.Opbevar enheden i flydende nitrogen og dæk den med et beskyttende låg. De samtidige laparoskopiske procedurer for oocythentning og vaginoplastik blev kombineret med succes hos alle patienter. Et gennemsnit på 11,4 5,4 oocytter blev hentet og 9,6 4,3 M2 oocytter blev kryobevaret.Den samlede gennemsnitlige driftstid var 114 17 minutter. Intraoperativt blodtab var ubetydeligt hos alle patienter, og der blev ikke observeret intraoperative bivirkninger. På dag tre efter operationen begyndte patienterne daglig brug af dilatator og blev udskrevet på dag 6.0 1.0.En forsigtig aspiration af follikler i æggestokken anbefales, med behørig opmærksomhed på den automatiske mobilisering af æggestokkene for at sikre optimal adgang og hentning.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation, Cryopreservation and Culture of Human Amnion Epithelial Cells for Clinical Applications

Isolation, Kryopræservering og dyrkning af humane amnion epitelceller ved kliniske anvendelser

Human amnion epithelial cells (hAECs) derived from term or pre-term amnion membranes have attracted attention from researchers and clinicians as a ...

Intraoperative Gastroscopy for Tumor Localization in Laparoscopic Surgery for Gastric Adenocarcinoma

Intraoperativ Gastroskopi for Tumor Lokalisering i laparoskopisk kirurgi for gastrisk adenocarcinom

Determining resection margins for gastric cancer, which are not exposed to the serosal surface of the stomach, is the most important procedure during ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Netværk Analyse af foramen ovale elektrode Optagelser i Drug-resistent TLE Patienter

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Laparoscopic Technique for Serial Collection of Liver and Mesenteric Lymph Nodes in Macaques

Laparoskopisk Teknik for Serial Indsamling af Lever og mesenteriallymfeknuder i makakaber

The mesenteric lymph nodes (MLN) and the liver are exposed to microbes and microbial products from the gastrointestinal (GI) tract, making them ...

Transaxillary First Rib Resection for Treatment of the Thoracic Outlet Syndrome

Transaxillær første ribbenresektion til behandling af thoraxudløbssyndromet

Thoracic outlet syndrome (TOS) is a common disorder that causes a significant loss of productivity. The transaxillary first rib resection (TFRR) protocol ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

Laparoskopisk radikale venstre skryktomi for kræft i bugspytkirtlen: Kirurgisk strategi og teknik Video

Radical resection margins, resection of Gerota&#8217;s (perirenal) fascia, and adequate lymph node dissection are crucial for an adequate oncological ...

Technical Modification of the Terminal Ureter During Total Transperitoneal Laparoscopic Nephroureterectomy for Upper Urinary Tract Urothelial Carcinoma

Teknisk modifikation af Terminal ureter under Total Transperitoneal laparoskopisk Nephroureterectomy for øvre urinvejs Urothelial karcinom

Upper tract urothelial carcinoma (UTUC) accounts for 5%&ndash;10% of all urothelial tumors. Radical nephroureterectomy is the standard treatment ...

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

OP-IVM: Kombination af in vitromodning efter oocyt-hentning med gynækologisk kirurgi

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

Surgical Techniques to Optimize Ovarian Reserve during Laparoscopic Cystectomy for Ovarian Endometrioma

Kirurgiske teknikker til at optimere æggestokkene Reserve under Laparoskopisk cystektomi for ovarie endometriose

Surgical management of ovarian endometrioma in patients desiring fertility is complicated by the need to balance maximal resection of disease with efforts ...

Comparing Objective Conjunctival Hyperemia Grading and the Ocular Surface Disease Index Score in Dry Eye Syndrome During COVID-19

Sammenligning af objektiv konjunktival hyperæmi-klassificering og ocular surface disease index score i tør øjensyndrom under COVID-19

The incidence of dry eye syndrome (DES) has increased due to wearing masks, utilizing digital devices, and working remotely during the pandemic. A survey ...