Name: laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome
Uploaded: 2022-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome at JoVE.com

Nenhum financiamento específico foi recebido para este trabalho.

O comitê de ética local do centro terciário de referência para MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Milão, Itália) foi notificado e aprovou o protocolo antes de sua implementação em julho de 2017. Todos os pacientes ou responsáveis assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido para recuperação e criopreservação de ovócitos laparoscópicos durante a vaginoplastia e para o uso de dados clínicos/laboratoriais anônimos para fins científicos.
1. Composiçã...

<ol>
	<li>Committee on Adolescent Health Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACOG+Committee+Opinion+No.+728:+M&#252;llerian+Agenesis:+Diagnosis,+Management,+And+Treatment.">ACOG Committee Opinion No. 728: M&#252;llerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment.</a> Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).</li><li>Reichman, D. E., Laufer, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+Fertility+counseling+and+treatment.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: Fertility counseling and treatment.</a> Fertility and Sterility. 94 (5), 1941-1943 (2010).</li><li>Ben-Rafael, Z., Bar-Hava, I., Levy, T., Orvieto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplifying+ovulation+induction+for+surrogacy+in+women+with+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Simplifying ovulation induction for surrogacy in women with Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 13 (6), 1470-1471 (1998).</li><li>Beski, S., Gorgy, A., Venkat, G., Craft, I. L., Edmonds, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+surrogacy:+a+feasible+option+for+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Gestational surrogacy: a feasible option for patients with Rokitansky syndrome.</a> Human Reproduction. 15 (11), 2326-2328 (2000).</li><li>Br&#228;nnstr&#246;m, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+uterus+transplantation.">Livebirth after uterus transplantation.</a> Lancet. 385 (9968), 607-616 (2015).</li><li>Sreenivas, K., Campo-Engelstein, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Domestic+and+international+surrogacy+laws:+implications+for+cancer+survivors.">Domestic and international surrogacy laws: implications for cancer survivors.</a> Cancer Treatment and Research. 156, 135-152 (2010).</li><li>Soderstrom-Anttila, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogacy:+outcomes+for+surrogate+mothers,+children+and+the+resulting+families-a+systematic+review.">Surrogacy: outcomes for surrogate mothers, children and the resulting families-a systematic review.</a> Human Reproductive Update. 22 (2), 260-276 (2016).</li><li>Wood, E. G., Batzer, F. R., Corson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+response+to+gonadotrophins,+optimal+method+for+oocyte+retrieval+and+pregnancy+outcome+in+patients+with+vaginal+agenesis.">Ovarian response to gonadotrophins, optimal method for oocyte retrieval and pregnancy outcome in patients with vaginal agenesis.</a> Human Reproduction. 14 (5), 1178-1181 (1999).</li><li>Raziel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogate+in+vitro+fertilization+outcome+in+typical+and+atypical+forms+of+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Surrogate in vitro fertilization outcome in typical and atypical forms of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 27 (1), 126-130 (2012).</li><li>Egarter, C., Huber, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+stimulation+and+retrieval+of+oocytes+in+patient+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster+syndrome.">Successful stimulation and retrieval of oocytes in patient with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster syndrome.</a> Lancet. 1 (8597), 1283 (1988).</li><li>Candiani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+retrieval+during+laparoscopic+vaginoplasty+to+reduce+invasiveness+in+the+treatment+of+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome.">Oocyte retrieval during laparoscopic vaginoplasty to reduce invasiveness in the treatment of Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome.</a> Journal of Minimally Invasive Gynecology. 27 (1), 74-79 (2020).</li><li>Fedele, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+neovagina+by+Davydov's+laparoscopic+modified+technique+in+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Creation of a neovagina by Davydov's laparoscopic modified technique in patients with Rokitansky syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (1), 1-6 (2010).</li><li>ESHRE Working Group on Ultrasound in ART et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+good+practice+in+ultrasound:+oocyte+pick+up.">Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up.</a> Human Reproduction Open. 2019 (4), (2019).</li><li>Callens, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+on+surgical+and+non-surgical+treatments+for+vaginal+hypoplasia.">An update on surgical and non-surgical treatments for vaginal hypoplasia.</a> Human Reproductive Update. 20 (5), 775-801 (2014).</li><li>S&#246;nmezer, M., G&#252;l&#252;mser, &. #. 1. 9. 9. ;., S&#246;nmezer, M., S&#252;k&#252;r, Y. E., Atabeko&#287;lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transabdominal+ultrasound+guided+oocyte+retrieval+using+vaginal+ultrasound+probe:+Definition+of+the+technique.">Transabdominal ultrasound guided oocyte retrieval using vaginal ultrasound probe: Definition of the technique.</a> The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 47 (2), 800-806 (2021).</li><li>Raju, G. A., Haranath, G. B., Krishna, K. M., Prakash, G. J., Madan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+pregnancy+with+laparoscopic+oocyte+retrieval+and+in+vitro+fertilization+in+Mullerian+agenesis.">Successful pregnancy with laparoscopic oocyte retrieval and in vitro fertilization in Mullerian agenesis.</a> Singapore Medicine Journal. 47 (4), 329-331 (2006).</li><li>Liszewska-Kap&#322;on, M., Str&#243;zik, M., Kotarski, &. #. 3. 2. 1. ;., Bag&#322;aj, M., Hirnle, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+as+an+interdisciplinary+problem.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome as an interdisciplinary problem.</a> Advances in Clinical and Experimental Medicine. 29 (4), 505-511 (2020).</li><li>Wagner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+management+during+the+adolescent+transition+period+of+girls+and+young+women+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+(MRKHS):+A+systematic+literature+review.">Treatment management during the adolescent transition period of girls and young women with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome (MRKHS): A systematic literature review.</a> Orphanet Journal of Rare Diseases. 11 (1), 152 (2016).</li><li>Bean, E. J., Mazur, T., Robinson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+sexuality,+psychological+effects,+and+quality+of+life.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: sexuality, psychological effects, and quality of life.</a> Journal of Pediatric and Adolescent Gynecology. 22 (6), 339-346 (2009).</li></ol>

Este protocolo reduz a invasividade no tratamento da MRKHS combinando os procedimentos de vaginoplastia e recuperação de ovócitos. Para este propósito, é crucial que uma equipe dedicada seja designada para garantir que o tempo de COS, o procedimento cirúrgico e a vitrificação de ovócitos sejam programados de forma eficiente.
As pacientes com MRKHS para as quais se espera que esse método laparoscópico combinado seja mais benéfico são aquelas nas quais uma recuperação transvaginal...

Com uma incidência de aproximadamente 1 em 4-10.000 mulheres, o MRKHS é a causa de 15% dos casos de amenorreia primária. A MRKHS é caracterizada pela ausência congênita do segmento superior da vagina e do útero, enquanto as anomalias do trato urinário e do esqueleto estão associadas variavelmente. Mais especificamente, uma abóbada vaginal com uma profundidade de 1-2 cm geralmente está presente, e dois chifres uterinos rudimentares podem ser encontrados1.
No passado, o principal interesse médico na MRKHS era permitir relações sexuais normais, o que geralmente requer a construção de uma neovagina por abordagens não cirúrgicas ou cirúrgicas2. No entanto, os avanços na medicina reprodutiva atualmente permitem a maternidade genética em pacientes com MRKHS, seja por meio de barriga de aluguel3,4 ou, mais recentemente, transplante de útero5. Embora o transplante de útero ainda seja um procedimento experimental, a gestação de substituição está disponível em muitos países do mundo6, e os resultados obstétricos e psicossociais relatados são comparáveis aos da fertilização in vitro padrão e da doação de ovócitos7.
Tanto a barriga de aluguel quanto o transplante de útero requerem recuperação de ovócitos e fertilização in vitro, mas não existe consenso sobre como realizar a coleta de óvulos em pacientes com MRKHS. A abordagem transvaginal pode ser inviável devido àelasticidade vaginal insuficiente8 mesmo após a vaginoplastia, localização atípica dos ovários9 ou distância excessiva entre os ovários e o manguito vaginal 4,10. Nesses casos, a recuperação laparoscópica de ovócitos representa a abordagem ideal em termos de acesso cirúrgico. No entanto, como a maioria dos pacientes com MRKHS atualmente é submetida à neovaginoplastia laparoscópica, sugerimos a realização de uma recuperação laparoscópica de ovócitos no momento da cirurgia para vaginoplastia11, seguida de criopreservação de ovócitos para uso futuro, minimizando assim a invasividade ao combinar o tratamento da função sexual e reprodutiva de pacientes com MRKHS.
Dados demográficos dos pacientes Vinte e três pacientes com MRKH foram submetidos a tratamento com este protocolo até o momento. Os achados anamnésticos, instrumentais e laboratoriais dos pacientes estão resumidos na Tabela 1. A menos que especificado na Tabela 1, não foram encontradas anomalias congênitas associadas.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Oocyte retrieval procedure</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable incubator</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage Fertilization medium SAGE</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte denudation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet adjustable handle set</td>
			<td>Cook</td>
			<td>G18674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CSCM (Continuos single culture) medium</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>90165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVF culture 60 mm petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serum Substitute Supplement</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>99193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (140 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1140-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (170 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1170-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte vitrification</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Container for Cooling rack</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryodevice/cryotop</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td>81111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic timer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet</td>
			<td>COOK</td>
			<td>K- 1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gilson Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Printer LabXpert</td>
			<td>Brady</td>
			<td>XSL-86-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 20-200 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2160G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 2-20 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2139-HR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visotubes</td>
			<td>Cryo Bio System</td>
			<td>20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Freeze Kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90133-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Thaw kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90137-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome

Em pacientes com Síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser (MRKHS) que estão programadas para vaginoplastia laparoscópica e têm desejo de maternidade biológica, propomos que seja realizada uma recuperação laparoscópica concomitante de ovócitos para criopreservação. A recuperação de ovócitos é realizada no início da laparoscopia. Posicionam-se os trocartes de 5 mm direito e esquerdo, através dos quais uma agulha de aspiração de óvulo 17 G é usada para punção dos ovários direito e esquerdo, respectivamente. Para facilitar a exposição dos folículos, os ovários são mobilizados e mantidos com pinça laparoscópica.
Ao aspirar múltiplos folículos próximos uns dos outros, a ponta da agulha é retida no ovário para reduzir o número de vezes que o córtex ovariano é transfixado e devido ao risco inerente de sangramento. As etapas subsequentes permanecem inalteradas em comparação com a técnica laparoscópica modificada de Davydov para vaginoplastia. Antes da cirurgia, a estimulação ovariana controlada é realizada com um protocolo antagonista do hormônio liberador de hormônio gonadotrofina (Gn-RH), e o procedimento concomitante de recuperação de ovócitos e vaginoplastia é agendado 36 h após o gatilho final da maturação folicular. O líquido folicular é coletado nos mesmos tubos estéreis de 10 mL usados durante a recuperação de ovócitos transvaginais e transferido em um bloco de aquecimento (37 °C) para o laboratório de reprodução assistida, onde os oócitos maduros (metáfase II) são vitrificados.
Neste caso, uma série de 23 mulheres com MRKH, oócitos foram recuperados com sucesso e criopreservados em todos os pacientes; a vaginoplastia foi realizada posteriormente, sem modificações, e os cuidados pós-operatórios hospitalares e ambulatoriais (dia da retirada do cateter urinário, dia da alta hospitalar, uso do dilatador e conforto no seguimento) permaneceram inalterados. Uma complicação pós-operatória ocorreu em um paciente (febre se desenvolvendo no 5º dia após a cirurgia e detecção de líquido intraperitoneal na ultrassonografia transabdominal) e resolvida após tratamento conservador. Em vez de realizar vaginoplastia cirúrgica e retardar a recuperação de ovócitos em pacientes com MRKH, essa abordagem combina ambos os procedimentos em uma única laparoscopia, minimizando assim a invasividade cirúrgica e os riscos anestesiológicos.

A Tabela 2 inclui os dados de estimulação ovariana das pacientes, enquanto os principais resultados cirúrgicos e funcionais estão descritos na Tabela 3. Os procedimentos laparoscópicos concomitantes de recuperação de ovócitos e vaginoplastia foram combinados com sucesso em todos os pacientes. Uma média de 11,4 ± 5,4 (média ± DP) foram recuperados, e 9,6 ± 4,3 oócitos MII foram criopreservados (Tabela 3). Em nossa experiência com a criopreservação de ovó...

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Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome

Uma equipe dedicada pode oferecer às pacientes de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser a opção de realizar estimulação ovariana controlada e criopreservação de ovócitos no momento da vaginoplastia laparoscópica.

Recuperação e Criopreservação de Ovócitos Laparoscópicos durante a Vaginoplastia para Tratamento da Síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser

In Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome (MRKHS) patients who are scheduled for laparoscopic vaginoplasty and have a desire for biological motherhood, ...

Nossa abordagem permite minimizar a doença invasiva no tratamento da síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser, combinando vaginoplastia laparoscópica e recuperação de ovócitos para futuros tratamentos de fertilidade. As principais vantagens de nossa abordagem são a necessidade de uma única anestesia e a superação da inviabilidade de uma recuperação de ovócitos transvaginais em pacientes mais jovens de Rokitansky. O procedimento será demonstrado por Diana Delprato, ginecologista sênior de nossa unidade de infertilidade e por Alessandra Alteri e Greta Cermisoni, duas embriologistas clínicas seniores de nosso laboratório de reprodução assistida.Inicie a estimulação ovariana controlada no dia 14 a partir do dia da cirurgia. Monitore a resposta ovariana por ultrassonografia transabdominal seriada e medições concomitantes de estradiol e progesterona. Estabeleça pneumoperitônio com uma técnica aberta.Posicione um trocarte umbilical de 10 milímetros para inserção do laparoscópio e três trocartes de cinco milímetros nos quadrantes inferior central, direito e esquerdo. Sob visão laparoscópica, use uma agulha de lúmen único de calibre 17 conectada a uma bomba de aspiração, como comumente empregado para recuperação transvaginal através dos trocartes central e esquerdo para punção do ovário direito e esquerdo, respectivamente. Levante e segure os ovários com pinça laparoscópica para facilitar a exposição dos folículos.Ao aspirar múltiplos folículos que estão próximos um do outro, retenha a ponta da agulha no ovário para reduzir o número de vezes que o córtex ovariano é transfixado e o risco inerente de sangramento. Dissecar o peritônio levantando e incidindo a fita peritoneal transversalmente entre os dois cornos uterinos rudimentares e, em seguida, estendendo a incisão lateralmente, anteriormente e posteriormente. Exponha a covinha vaginal na abordagem perineal e realize uma incisão em forma de H e crie um espaço neovaginal por dissecção afiada e contundente do espaço vesiorretal.Em seguida, puxe as margens peritoneais dissecadas até a borda do vestíbulo vaginal. Posição interrompeu suturas em polidioxanona sintética absorvível 3-0 para a anastomose vestibular peritoneal. Iniciar uma sutura em corda de bolsa em monofilamento sintético absorvível 2-0 de polidioxanona em cada hemipelve a partir do peritônio mobilizado acima da bexiga com transfixação conjuntiva do ligamento redondo, do istmo tubário, do ligamento utero-ovariano e da folha peritoneal lateral.Em seguida, inclua nas duas suturas a face lateral do mesoreto e a face anterior da serosa retal imediatamente abaixo da junção retossigmoide. Por fim, coloque uma gaze revestida de parafina na neovagina revestida de peritônio. Recolher os aspirados foliculares em tubos de fundo redondo de 10 milímetros mantidos aquecidos numa incubadora portátil e transportá-los imediatamente para o laboratório de embriologia com um tempo de transporte de aproximadamente 10 minutos.À medida que todos os complexos de ovócitos cumulus são coletados, coloque-os no prato de quatro poços contendo o meio de fertilização e rotule a tampa e o fundo com dados relacionados à identidade do paciente. Incubá-los a 37 graus Celsius em uma atmosfera controlada contendo 6% de dióxido de carbono e 5% de oxigênio. Certifique-se de que uma verificação dupla do procedimento seja realizada por um segundo membro da equipe do laboratório.Realizar a remoção das células cumulus corona dentro de 38 horas após o gatilho da ovulação. Coloque os complexos de ovócitos cumulus no poço central que contém a enzima para dispersar as células cumulus com uma pipeta Pasteur de vidro, pipetando suavemente a solução contendo complexos cumulus oocyte para cima e para baixo por até 30 segundos. Mova os ovócitos para o segundo prato do poço central contendo apenas o meio tamponada HEPES, certificando-se de deslocar uma quantidade mínima da enzima.Remova as células corona restantes usando pipetas de desnudamento com diâmetros internos decrescentes. Avaliar o estágio de maturação dos ovócitos, separando os ovócitos da metáfase II. Transferir os ovócitos da metáfase II em uma placa de Petri de 60 milímetros de cultura de FIV contendo nove gotas de meio de cultura único contínuo coberto com seis milímetros de óleo mineral.Incubá-los a 37 graus Celsius em uma atmosfera controlada contendo 6% de dióxido de carbono e 5% de oxigênio. Encha uma caixa de resfriamento até o topo com nitrogênio líquido fresco e cubra até que seja usada para minimizar a dispersão e a evaporação. Use uma pipeta decapante com um diâmetro interno de 170 micrômetros para evitar danificar os oócitos durante a manipulação.Agite suavemente cada frasco para injetáveis de solução de equilíbrio, solução de vitrificação e solução de lavagem para misturar o conteúdo antes de utilizar. Prepare a tampa de uma placa de Petri de 60 mililitros com uma gota de 50 microlitros de solução de lavagem um. Coloque gotas imediatamente antes do uso para limitar a evaporação do meio.Retirar a placa de ovócitos da incubadora e transferir os ovócitos da metáfase II com um volume mínimo de meio da placa de cultura para os 50 microlitros de solução de lavagem. Dispense gotas de 50 microlitros de solução de lavagem dois, solução de equilíbrio um e solução de equilíbrio dois em estreita proximidade e transfira oócitos da solução de lavagem por gota um para a solução de lavagem por gota dois. Mesclar a gota de solução de equilíbrio um com a solução de lavagem dois e aguardar dois minutos para a mistura espontânea de ambas as soluções.Em seguida, mescle a gota de solução de equilíbrio dois com as gotas mescladas anteriormente e deixe por mais dois minutos. Finalmente, mescle uma nova gota de 100 microlitros de solução de equilíbrio três com as gotas previamente mescladas e deixe por mais um minuto. Coloque os ovócitos em 100 microlitros de gota de solução de equilíbrio quatro por 10 minutos.Dispense duas gotas de 50 microlitros de solução de vitrificação e uma de 100 microlitros de solução de vitrificação. Mover os ovócitos sequencialmente para as três gotas de solução de vitrificação durante 60 segundos para que os ovócitos permaneçam em cada gota durante aproximadamente 20 segundos. Quando restarem aproximadamente 10 segundos antes do final dos 60 segundos de incubação, coloque o criodispositivo sob o microscópio.Transportar os ovócitos na ponta da pipeta e colocá-los no criodispositivo com a quantidade mínima de solução de vitrificação. Aspirar a solução de vitrificação em excesso, deixando os ovócitos cobertos por uma fina camada de solução de vitrificação. Mergulhe o criodispositivo diretamente no nitrogênio líquido e mova-o rapidamente.Mantenha o dispositivo em nitrogênio líquido e cubra-o com uma tampa protetora. Os procedimentos laparoscópicos concomitantes de recuperação de ovócitos e vaginoplastia foram combinados com sucesso em todos os pacientes. Uma média de 11,4 5,4 ovócitos foram recuperados e 9,6 4,3 oócitos M2 foram crio-preservados.O tempo operatório médio total foi de 114 a 17 minutos. A perda de sangue intraoperatória foi insignificante em todos os pacientes e nenhum evento adverso intraoperatório foi observado. No terceiro dia pós-operatório, os pacientes iniciaram o uso diário de dilatadores e receberam alta no dia 6,0 1,0.Recomenda-se uma aspiração cautelosa dos folículos dentro do ovário, com a devida atenção à mobilização automática dos ovários, a fim de garantir o acesso e a recuperação ideais.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation, Cryopreservation and Culture of Human Amnion Epithelial Cells for Clinical Applications

Isolamento, criopreservação e cultivo de células epiteliais humanas Amnion para aplicações clínicas

Human amnion epithelial cells (hAECs) derived from term or pre-term amnion membranes have attracted attention from researchers and clinicians as a ...

Medicina

Intraoperative Gastroscopy for Tumor Localization in Laparoscopic Surgery for Gastric Adenocarcinoma

Gastroscopia intra-operatória para localização do tumor na cirurgia laparoscópica para gástrica Adenocarcinoma

Determining resection margins for gastric cancer, which are not exposed to the serosal surface of the stomach, is the most important procedure during ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Análise de Redes de forame oval Eletrodo Recordings na epilepsia do lobo temporal Os pacientes resistentes a drogas

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Laparoscopic Technique for Serial Collection of Liver and Mesenteric Lymph Nodes in Macaques

Técnica laparoscópica para a coleção de série do fígado e mesentérica linfonodos em macacos

The mesenteric lymph nodes (MLN) and the liver are exposed to microbes and microbial products from the gastrointestinal (GI) tract, making them ...

Transaxillary First Rib Resection for Treatment of the Thoracic Outlet Syndrome

Ressecção da Primeira Costela Transaxilar para Tratamento da Síndrome do Desfiladeiro Torácico

Thoracic outlet syndrome (TOS) is a common disorder that causes a significant loss of productivity. The transaxillary first rib resection (TFRR) protocol ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

Pancreatectomia esquerda radical laparoscópica para câncer pancreático: estratégia cirúrgica e vídeo técnico

Radical resection margins, resection of Gerota&#8217;s (perirenal) fascia, and adequate lymph node dissection are crucial for an adequate oncological ...

Technical Modification of the Terminal Ureter During Total Transperitoneal Laparoscopic Nephroureterectomy for Upper Urinary Tract Urothelial Carcinoma

Modificação técnica do Terminal Ureter durante a Nefrologia Laparoscópica Total Transperitoneal para o Carcinoma Urotelial do Trato Superior

Upper tract urothelial carcinoma (UTUC) accounts for 5%&ndash;10% of all urothelial tumors. Radical nephroureterectomy is the standard treatment ...

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

OP-IVM: Combinando Maturação In vitro após Recuperação de Oócito com Cirurgia Ginecológica

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

Surgical Techniques to Optimize Ovarian Reserve during Laparoscopic Cystectomy for Ovarian Endometrioma

Técnicas cirúrgicas para otimizar a reserva ovariana durante a Cistectomia Laparoscópica para Endometrioma Ovariano

Surgical management of ovarian endometrioma in patients desiring fertility is complicated by the need to balance maximal resection of disease with efforts ...

Comparing Objective Conjunctival Hyperemia Grading and the Ocular Surface Disease Index Score in Dry Eye Syndrome During COVID-19

Comparando a Classificação objetiva da Hiperemia Conjuntivival e o Índice de Índice de Doença da Superfície Ocular na Síndrome do Olho Seco durante o COVID-19

The incidence of dry eye syndrome (DES) has increased due to wearing masks, utilizing digital devices, and working remotely during the pandemic. A survey ...