Name: laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome
Uploaded: 2022-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome at JoVE.com

No se recibió financiación específica para este trabajo.

El comité ético local en el centro de referencia terciaria para MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Milán, Italia) fue notificado y aprobó el protocolo antes de su implementación en julio de 2017. Todos los pacientes o tutores dieron su consentimiento informado firmado para la recuperación laparoscópica de ovocitos y la criopreservación durante la vaginoplastia y para el uso de datos clínicos/de laboratorio anónimos con fines científicos.
1. Composición del equipo<...

<ol>
	<li>Committee on Adolescent Health Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACOG+Committee+Opinion+No.+728:+M&#252;llerian+Agenesis:+Diagnosis,+Management,+And+Treatment.">ACOG Committee Opinion No. 728: M&#252;llerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment.</a> Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).</li><li>Reichman, D. E., Laufer, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+Fertility+counseling+and+treatment.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: Fertility counseling and treatment.</a> Fertility and Sterility. 94 (5), 1941-1943 (2010).</li><li>Ben-Rafael, Z., Bar-Hava, I., Levy, T., Orvieto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplifying+ovulation+induction+for+surrogacy+in+women+with+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Simplifying ovulation induction for surrogacy in women with Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 13 (6), 1470-1471 (1998).</li><li>Beski, S., Gorgy, A., Venkat, G., Craft, I. L., Edmonds, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+surrogacy:+a+feasible+option+for+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Gestational surrogacy: a feasible option for patients with Rokitansky syndrome.</a> Human Reproduction. 15 (11), 2326-2328 (2000).</li><li>Br&#228;nnstr&#246;m, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+uterus+transplantation.">Livebirth after uterus transplantation.</a> Lancet. 385 (9968), 607-616 (2015).</li><li>Sreenivas, K., Campo-Engelstein, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Domestic+and+international+surrogacy+laws:+implications+for+cancer+survivors.">Domestic and international surrogacy laws: implications for cancer survivors.</a> Cancer Treatment and Research. 156, 135-152 (2010).</li><li>Soderstrom-Anttila, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogacy:+outcomes+for+surrogate+mothers,+children+and+the+resulting+families-a+systematic+review.">Surrogacy: outcomes for surrogate mothers, children and the resulting families-a systematic review.</a> Human Reproductive Update. 22 (2), 260-276 (2016).</li><li>Wood, E. G., Batzer, F. R., Corson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+response+to+gonadotrophins,+optimal+method+for+oocyte+retrieval+and+pregnancy+outcome+in+patients+with+vaginal+agenesis.">Ovarian response to gonadotrophins, optimal method for oocyte retrieval and pregnancy outcome in patients with vaginal agenesis.</a> Human Reproduction. 14 (5), 1178-1181 (1999).</li><li>Raziel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogate+in+vitro+fertilization+outcome+in+typical+and+atypical+forms+of+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Surrogate in vitro fertilization outcome in typical and atypical forms of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 27 (1), 126-130 (2012).</li><li>Egarter, C., Huber, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+stimulation+and+retrieval+of+oocytes+in+patient+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster+syndrome.">Successful stimulation and retrieval of oocytes in patient with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster syndrome.</a> Lancet. 1 (8597), 1283 (1988).</li><li>Candiani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+retrieval+during+laparoscopic+vaginoplasty+to+reduce+invasiveness+in+the+treatment+of+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome.">Oocyte retrieval during laparoscopic vaginoplasty to reduce invasiveness in the treatment of Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome.</a> Journal of Minimally Invasive Gynecology. 27 (1), 74-79 (2020).</li><li>Fedele, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+neovagina+by+Davydov's+laparoscopic+modified+technique+in+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Creation of a neovagina by Davydov's laparoscopic modified technique in patients with Rokitansky syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (1), 1-6 (2010).</li><li>ESHRE Working Group on Ultrasound in ART et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+good+practice+in+ultrasound:+oocyte+pick+up.">Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up.</a> Human Reproduction Open. 2019 (4), (2019).</li><li>Callens, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+on+surgical+and+non-surgical+treatments+for+vaginal+hypoplasia.">An update on surgical and non-surgical treatments for vaginal hypoplasia.</a> Human Reproductive Update. 20 (5), 775-801 (2014).</li><li>S&#246;nmezer, M., G&#252;l&#252;mser, &. #. 1. 9. 9. ;., S&#246;nmezer, M., S&#252;k&#252;r, Y. E., Atabeko&#287;lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transabdominal+ultrasound+guided+oocyte+retrieval+using+vaginal+ultrasound+probe:+Definition+of+the+technique.">Transabdominal ultrasound guided oocyte retrieval using vaginal ultrasound probe: Definition of the technique.</a> The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 47 (2), 800-806 (2021).</li><li>Raju, G. A., Haranath, G. B., Krishna, K. M., Prakash, G. J., Madan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+pregnancy+with+laparoscopic+oocyte+retrieval+and+in+vitro+fertilization+in+Mullerian+agenesis.">Successful pregnancy with laparoscopic oocyte retrieval and in vitro fertilization in Mullerian agenesis.</a> Singapore Medicine Journal. 47 (4), 329-331 (2006).</li><li>Liszewska-Kap&#322;on, M., Str&#243;zik, M., Kotarski, &. #. 3. 2. 1. ;., Bag&#322;aj, M., Hirnle, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+as+an+interdisciplinary+problem.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome as an interdisciplinary problem.</a> Advances in Clinical and Experimental Medicine. 29 (4), 505-511 (2020).</li><li>Wagner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+management+during+the+adolescent+transition+period+of+girls+and+young+women+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+(MRKHS):+A+systematic+literature+review.">Treatment management during the adolescent transition period of girls and young women with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome (MRKHS): A systematic literature review.</a> Orphanet Journal of Rare Diseases. 11 (1), 152 (2016).</li><li>Bean, E. J., Mazur, T., Robinson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+sexuality,+psychological+effects,+and+quality+of+life.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: sexuality, psychological effects, and quality of life.</a> Journal of Pediatric and Adolescent Gynecology. 22 (6), 339-346 (2009).</li></ol>

Este protocolo reduce la invasividad en el tratamiento de MRKHS al combinar los procedimientos de vaginoplastia y recuperación de ovocitos. Para este propósito, es crucial que se designe un equipo dedicado para garantizar que el momento del COS, el procedimiento quirúrgico y la vitrificación de ovocitos se programen de manera eficiente.
Los pacientes con MRKHS para quienes se espera que este método laparoscópico combinado sea más beneficioso son aquellos en quienes una recuperación tra...

Con una incidencia de aproximadamente 1 de cada 4-10.000 mujeres, MRKHS es la causa del 15% de los casos de amenorrea primaria. MRKHS se caracteriza por la ausencia congénita del segmento superior de la vagina y el útero, mientras que las anomalías del tracto urinario y esquelético se asocian de manera variable. Más específicamente, una bóveda vaginal con una profundidad de 1-2 cm suele estar presente, y se pueden encontrar dos cuernos uterinos rudimentarios1.
En el pasado, el interés médico primario en MRKHS era permitir las relaciones sexuales normales, que generalmente requieren la construcción de una neovagina por abordajes no quirúrgicos o quirúrgicos2. Sin embargo, los avances en medicina reproductiva actualmente permiten la maternidad genética en pacientes con MRKHS, ya sea por subrogación3,4 o, más recientemente, por trasplante de útero5. Si bien el trasplante de útero es todavía un procedimiento experimental, la subrogación está disponible en muchos países del mundo6, y los resultados obstétricos y psicosociales informados son comparables a los de la fertilización in vitro estándar y la donación de ovocitos7.
Tanto la gestación subrogada como el trasplante de útero requieren la recuperación de ovocitos y la fertilización in vitro, pero no existe consenso sobre cómo realizar la recolección de óvulos en pacientes con MRKHS. El abordaje transvaginal puede ser inviable debido a la elasticidad vaginal insuficiente8 incluso después de la vaginoplastia, la localización atípica de los ovarios9 o la distancia excesiva entre los ovarios y el manguito vaginal 4,10. En estos casos, la recuperación laparoscópica de ovocitos representa el enfoque óptimo en términos de acceso quirúrgico. Sin embargo, como la mayoría de las pacientes con MRKHS actualmente se someten a neovaginoplastia laparoscópica, sugerimos realizar una recuperación laparoscópica de ovocitos en el momento de la cirugía para la vaginoplastia11, seguida de la criopreservación de ovocitos para uso futuro, minimizando así la invasividad y combinando el tratamiento de la función sexual y reproductiva de las pacientes con MRKHS.
Datos demográficos de los pacientes Veintitrés pacientes con MRKH se sometieron a tratamiento con este protocolo hasta el momento. Los hallazgos anamnésicos, instrumentales y de laboratorio de los pacientes se resumen en la Tabla 1. A menos que se especifique en la Tabla 1, no se encontraron anomalías congénitas asociadas.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Oocyte retrieval procedure</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable incubator</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage Fertilization medium SAGE</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte denudation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet adjustable handle set</td>
			<td>Cook</td>
			<td>G18674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CSCM (Continuos single culture) medium</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>90165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVF culture 60 mm petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serum Substitute Supplement</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>99193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (140 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1140-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (170 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1170-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte vitrification</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Container for Cooling rack</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryodevice/cryotop</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td>81111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic timer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet</td>
			<td>COOK</td>
			<td>K- 1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gilson Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Printer LabXpert</td>
			<td>Brady</td>
			<td>XSL-86-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 20-200 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2160G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 2-20 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2139-HR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visotubes</td>
			<td>Cryo Bio System</td>
			<td>20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Freeze Kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90133-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Thaw kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90137-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome

En pacientes con síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser (MRKHS) que están programadas para vaginoplastia laparoscópica y tienen un deseo de maternidad biológica, proponemos que se realice una recuperación laparoscópica concomitante de ovocitos para criopreservación. La recuperación de ovocitos se persigue al comienzo de la laparoscopia. Se colocan trócares de 5 mm derecho e izquierdo, a través del cual se utiliza una aguja de aspiración de óvulo de 17 G para la punción de los ovarios derecho e izquierdo, respectivamente. Para facilitar la exposición de los folículos, los ovarios se movilizan y se sostienen con fórceps laparoscópicos.
Al aspirar múltiples folículos cerca uno del otro, la punta de la aguja se retiene en el ovario para reducir el número de veces que la corteza ovárica está paralizada y debido al riesgo inherente de sangrado. Los pasos posteriores no cambian en comparación con la técnica modificada laparoscópica de Davydov para la vaginoplastia. Antes de la cirugía, la estimulación ovárica controlada se realiza con un protocolo antagonista de la hormona liberadora de hormona gonadotropina (Gn-RH), y el procedimiento concomitante de recuperación de ovocitos y vaginoplastia se programa 36 h después del desencadenante final de la maduración folicular. El líquido folicular se recoge en los mismos tubos estériles de 10 ml utilizados durante la recuperación transvaginal de ovocitos y se transfiere en un bloque de calentamiento (37 °C) al laboratorio de reproducción asistida, donde se vitrifican ovocitos maduros (metafase II).
En este caso, una serie de 23 mujeres con MRKH, ovocitos fueron recuperados con éxito y criopreservados en todas las pacientes; La vaginoplastia se realizó posteriormente sin modificaciones, y la atención postoperatoria para pacientes hospitalizados y ambulatorios (día de la retirada del catéter urinario, día del alta hospitalaria, uso del dilatador y comodidad en el seguimiento) no se vio afectada. Una complicación postoperatoria ocurrió en un paciente (fiebre que se desarrolló el día 5 después de la cirugía y detección de líquido intraperitoneal en la ecografía transabdominal) y se resolvió después del tratamiento conservador. En lugar de realizar vaginoplastia quirúrgica y retrasar la recuperación de ovocitos en pacientes con MRKH, este enfoque combina ambos procedimientos en una sola laparoscopia, minimizando así la invasividad quirúrgica y los riesgos anestésicosicos.

La Tabla 2 incluye los datos de estimulación ovárica de las pacientes, mientras que los principales resultados quirúrgicos y funcionales se describen en la Tabla 3. Los procedimientos laparoscópicos concomitantes de recuperación de ovocitos y vaginoplastia se combinaron con éxito en todas las pacientes. Se recuperaron un promedio de 11,4 ± 5,4 ovocitos (media ± DE) y 9,6 ± 4,3 ovocitos MII fueron criopreservados (Tabla 3). En nuestra experiencia con la crioprese...

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Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome

Un equipo dedicado puede ofrecer a las pacientes de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser la opción de realizar estimulación ovárica controlada y criopreservación de ovocitos en el momento de la vaginoplastia laparoscópica.

Recuperación laparoscópica de ovocitos y criopreservación durante la vaginoplastia para el tratamiento del síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser

In Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome (MRKHS) patients who are scheduled for laparoscopic vaginoplasty and have a desire for biological motherhood, ...

Nuestro enfoque permite minimizar la enfermedad invasiva en el tratamiento del síndrome de Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser combinando la vaginoplastia laparoscópica y la recuperación de ovocitos para futuros tratamientos de fertilidad. Las principales ventajas de nuestro enfoque son la necesidad de una sola anestesia y la superación de la inviabilidad de una recuperación transvaginal de ovocitos en pacientes más jóvenes de Rokitansky. El procedimiento será demostrado por Diana Delprato, ginecóloga senior de nuestra unidad de infertilidad y por Alessandra Alteri y Greta Cermisoni, dos embriólogas clínicas senior de nuestro laboratorio de reproducción asistida.Iniciar la estimulación ovárica controlada el día 14 a partir del día de la cirugía. Monitorizar la respuesta ovárica mediante ecografía transabdominal seriada y mediciones concomitantes de estradiol y progesterona. Establecer neumoperitoneo con una técnica abierta.Coloque un trocar umbilical de 10 milímetros para la inserción del laparoscopio y tres trócares de cinco milímetros en los cuadrantes inferior central, derecho e izquierdo. Bajo visión laparoscópica, use una aguja de un solo lumen de calibre 17 conectada a una bomba de aspiración, como se emplea comúnmente para la recuperación transvaginal a través de los trócares central e izquierdo para la punción del ovario derecho e izquierdo, respectivamente. Levante y sostenga los ovarios con fórceps laparoscópicos para facilitar la exposición de los folículos.Al aspirar múltiples folículos que están uno cerca del otro, retenga la punta de la aguja en el ovario para reducir el número de veces que la corteza ovárica está paralizada y el riesgo inherente de sangrado. Diseccionar el peritoneo levantando e incisando la hebra peritoneal transversalmente entre los dos cuernos uterinos rudimentarios, y luego, extendiendo la incisión lateral, anterior y posteriormente. Exponga el hoyuelo vaginal en el enfoque perineal y realice una incisión en forma de H y cree un espacio neovaginal mediante la disección aguda y contundente del espacio vesicorectal.Luego, tire hacia abajo de los márgenes peritoneales disecados hasta el borde del vestíbulo vaginal. Posición interrumpida de suturas en polidioxanona sintética absorbible 3-0 para la anastomosis vestibular peritoneal. Comience una sutura de cuerda de bolso en monofilamento 2-0 absorbible sintético de polidioxanona en cada hemipelvis desde el peritoneo movilizado por encima de la vejiga con transfixión conectivo del ligamento redondo, el istmo tubárico, el ligamento utero-ovárico y la hoja peritoneal lateral.Luego, incluya en las dos suturas la cara lateral del mesorrecto y la cara anterior de la serosa rectal inmediatamente debajo de la unión rectosigmoidea. Por último, coloque una gasa recubierta de parafina en la neovagina recubierta de peritoneo. Recoja los aspirados foliculares en tubos de fondo redondo de 10 milímetros mantenidos calientes en una incubadora portátil y transpótelos inmediatamente al laboratorio de embriología con un tiempo de transporte de aproximadamente 10 minutos.A medida que se recolectan todos los complejos de ovocitos cúmulos, colóquelos en el plato de cuatro pocillos que contiene el medio de fertilización y etiquete la tapa y el fondo con datos relacionados con la identidad del paciente. Incubarlos a 37 grados centígrados en una atmósfera controlada que contiene 6% de dióxido de carbono y 5% de oxígeno. Asegúrese de que un segundo miembro del personal del laboratorio realice una doble verificación del procedimiento.Realice la eliminación de las células de la corona del cúmulo dentro de las 38 horas posteriores al desencadenante de la ovulación. Coloque los complejos de ovocitos cúmulos en el pocillo central que contiene la enzima para dispersar las células del cúmulo con una pipeta de vidrio Pasteur, pipeteando suavemente la solución que contiene complejos de ovocitos cúmulos hacia arriba y hacia abajo durante un máximo de 30 segundos. Mover los ovocitos al segundo plato central de pocillos que contenga solo medio tamponado HEPES, asegurándose de desplazar una cantidad mínima de la enzima.Retire las células corona restantes utilizando pipetas desnudas con diámetros internos decrecientes. Evaluar el estadio de maduración de los ovocitos, separando los ovocitos metafase II. Transfiera los ovocitos de metafase II en una placa de Petri de 60 milímetros de cultivo de FIV que contiene nueve gotas de medio de cultivo único continuo cubierto con seis milímetros de aceite mineral.Incubarlos a 37 grados centígrados en una atmósfera controlada que contiene 6% de dióxido de carbono y 5% de oxígeno. Llene una caja de enfriamiento hasta la parte superior con nitrógeno líquido fresco y cubra hasta que se use para minimizar la dispersión y la evaporación. Utilice una pipeta pelante con un diámetro interior de 170 micrómetros para evitar dañar los ovocitos durante la manipulación.Agite suavemente cada vial de solución de equilibrio, solución de vitrificación y solución de lavado para mezclar el contenido antes de usarlo. Prepare la tapa de una placa de Petri de 60 mililitros con una gota de 50 microlitros de solución de lavado uno. Coloque las gotas justo antes de usarlas para limitar la evaporación media.Tome la placa de ovocitos de la incubadora y transfiera los ovocitos de metafase II con un volumen mínimo de medio de la placa de cultivo a los 50 microlitros de solución de lavado. Dispense gotas de 50 microlitros de solución de lavado dos, solución de equilibrio uno y solución de equilibrio dos en estrecha proximidad y transfiera los ovocitos de la solución de lavado de gotas uno a la solución de lavado de gotas dos. Combine la gota de la solución de equilibrio uno con la solución de lavado dos y espere dos minutos para la mezcla espontánea de ambas soluciones.Luego, combine la gota de solución de equilibrio dos con las gotas previamente fusionadas y déjela durante otros dos minutos. Finalmente, combine una nueva gota de 100 microlitros de solución de equilibrio tres con las gotas previamente fusionadas y déjela por un minuto adicional. Coloque los ovocitos en una gota de 100 microlitros de solución de equilibrio cuatro durante 10 minutos.Dispense dos gotas de 50 microlitros de solución de vitrificación y una solución de vitrificación de 100 microlitros. Mover los ovocitos secuencialmente en las tres gotas de solución de vitrificación durante 60 segundos para que los ovocitos permanezcan en cada gota durante aproximadamente 20 segundos. Cuando queden aproximadamente 10 segundos antes del final de los 60 segundos de incubación, coloque el criodispositivo bajo el microscopio.Llevar los ovocitos en la punta de la pipeta y colocarlos en el criodispositivo con la cantidad mínima de solución de vitrificación. Aspirar el exceso de solución de vitrificación, dejando los ovocitos cubiertos por una fina capa de solución de vitrificación. Sumerja el criodispositivo directamente en nitrógeno líquido y muévalo rápidamente.Mantenga el dispositivo en nitrógeno líquido y cúbralo con una tapa protectora. Los procedimientos laparoscópicos concomitantes de recuperación de ovocitos y vaginoplastia se combinaron con éxito en todas las pacientes. Se recuperaron una media de 11,4 5,4 ovocitos y 9,6 4,3 M2 ovocitos criopreservados.El tiempo operatorio promedio total fue de 114 a 17 minutos. La pérdida de sangre intraoperatoria fue insignificante en todos los pacientes y no se observaron eventos adversos intraoperatorios. En el tercer día después de la cirugía, los pacientes comenzaron el uso diario de dilatadores y fueron dados de alta en el día 6.0 1.0.Se recomienda una aspiración cautelosa de los folículos dentro del ovario, prestando la debida atención a la movilización automática de los ovarios para garantizar un acceso y recuperación óptimos.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation, Cryopreservation and Culture of Human Amnion Epithelial Cells for Clinical Applications

El aislamiento, la criopreservación y cultivo de células epiteliales Amnion Humanos para Aplicaciones clínicas

Human amnion epithelial cells (hAECs) derived from term or pre-term amnion membranes have attracted attention from researchers and clinicians as a ...

Investigación

Medicina

Intraoperative Gastroscopy for Tumor Localization in Laparoscopic Surgery for Gastric Adenocarcinoma

Gastroscopia intraoperatoria para la localización del tumor en la cirugía laparoscópica para el adenocarcinoma gástrico

Determining resection margins for gastric cancer, which are not exposed to the serosal surface of the stomach, is the most important procedure during ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Análisis de la red de foramen oval de electrodos Grabaciones en epilepsia del lóbulo temporal pacientes resistentes a los medicamentos

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Laparoscopic Technique for Serial Collection of Liver and Mesenteric Lymph Nodes in Macaques

Técnica laparoscópica para la Recolección de serie del hígado y los ganglios linfáticos mesentéricos en macacos

The mesenteric lymph nodes (MLN) and the liver are exposed to microbes and microbial products from the gastrointestinal (GI) tract, making them ...

Transaxillary First Rib Resection for Treatment of the Thoracic Outlet Syndrome

Resección transaxilar de la primera costilla para el tratamiento del síndrome de salida torácica

Thoracic outlet syndrome (TOS) is a common disorder that causes a significant loss of productivity. The transaxillary first rib resection (TFRR) protocol ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

Pancreatectomía Izquierda Radical Laparoscópica para Cáncer de Páncreas: Estrategia Quirúrgica y Video Técnica

Radical resection margins, resection of Gerota&#8217;s (perirenal) fascia, and adequate lymph node dissection are crucial for an adequate oncological ...

Technical Modification of the Terminal Ureter During Total Transperitoneal Laparoscopic Nephroureterectomy for Upper Urinary Tract Urothelial Carcinoma

Modificación técnica del ureter terminal durante la nefroterectomía laparoscópica transperitoneal total para el carcinoma urotélial del tracto urinario superior

Upper tract urothelial carcinoma (UTUC) accounts for 5%&ndash;10% of all urothelial tumors. Radical nephroureterectomy is the standard treatment ...

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

OP-IVM: Combinación de la maduración in vitro después de la recuperación de ovocitos con cirugía ginecológica

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

Surgical Techniques to Optimize Ovarian Reserve during Laparoscopic Cystectomy for Ovarian Endometrioma

Técnicas quirúrgicas para optimizar la reserva ovárica durante la cistectomía laparoscópica para el endometrioma ovárico

Surgical management of ovarian endometrioma in patients desiring fertility is complicated by the need to balance maximal resection of disease with efforts ...

Comparing Objective Conjunctival Hyperemia Grading and the Ocular Surface Disease Index Score in Dry Eye Syndrome During COVID-19

Comparación de la clasificación objetiva de la hiperemia conjuntival y la puntuación del índice de enfermedad de la superficie ocular en el síndrome del ojo seco durante COVID-19

The incidence of dry eye syndrome (DES) has increased due to wearing masks, utilizing digital devices, and working remotely during the pandemic. A survey ...