Name: laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome
Uploaded: 2022-05-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome at JoVE.com

Ingen särskild finansiering erhölls för detta arbete.

Den lokala etiska kommittén vid det tertiära remisscentret för MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Milano, Italien) underrättades och godkände protokollet innan det implementerades i juli 2017. Alla patienter eller vårdnadshavare gav undertecknat informerat samtycke för laparoskopisk oocythämtning och kryokonservering under vaginoplastik och för användning av anonymiserade kliniska / laboratoriedata för vetenskapliga ändamål.
1. Lagets sammansättning...

<ol>
	<li>Committee on Adolescent Health Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ACOG+Committee+Opinion+No.+728:+M&#252;llerian+Agenesis:+Diagnosis,+Management,+And+Treatment.">ACOG Committee Opinion No. 728: M&#252;llerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment.</a> Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).</li><li>Reichman, D. E., Laufer, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+Fertility+counseling+and+treatment.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: Fertility counseling and treatment.</a> Fertility and Sterility. 94 (5), 1941-1943 (2010).</li><li>Ben-Rafael, Z., Bar-Hava, I., Levy, T., Orvieto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplifying+ovulation+induction+for+surrogacy+in+women+with+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Simplifying ovulation induction for surrogacy in women with Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 13 (6), 1470-1471 (1998).</li><li>Beski, S., Gorgy, A., Venkat, G., Craft, I. L., Edmonds, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gestational+surrogacy:+a+feasible+option+for+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Gestational surrogacy: a feasible option for patients with Rokitansky syndrome.</a> Human Reproduction. 15 (11), 2326-2328 (2000).</li><li>Br&#228;nnstr&#246;m, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Livebirth+after+uterus+transplantation.">Livebirth after uterus transplantation.</a> Lancet. 385 (9968), 607-616 (2015).</li><li>Sreenivas, K., Campo-Engelstein, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Domestic+and+international+surrogacy+laws:+implications+for+cancer+survivors.">Domestic and international surrogacy laws: implications for cancer survivors.</a> Cancer Treatment and Research. 156, 135-152 (2010).</li><li>Soderstrom-Anttila, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogacy:+outcomes+for+surrogate+mothers,+children+and+the+resulting+families-a+systematic+review.">Surrogacy: outcomes for surrogate mothers, children and the resulting families-a systematic review.</a> Human Reproductive Update. 22 (2), 260-276 (2016).</li><li>Wood, E. G., Batzer, F. R., Corson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+response+to+gonadotrophins,+optimal+method+for+oocyte+retrieval+and+pregnancy+outcome+in+patients+with+vaginal+agenesis.">Ovarian response to gonadotrophins, optimal method for oocyte retrieval and pregnancy outcome in patients with vaginal agenesis.</a> Human Reproduction. 14 (5), 1178-1181 (1999).</li><li>Raziel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surrogate+in+vitro+fertilization+outcome+in+typical+and+atypical+forms+of+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome.">Surrogate in vitro fertilization outcome in typical and atypical forms of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 27 (1), 126-130 (2012).</li><li>Egarter, C., Huber, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+stimulation+and+retrieval+of+oocytes+in+patient+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster+syndrome.">Successful stimulation and retrieval of oocytes in patient with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster syndrome.</a> Lancet. 1 (8597), 1283 (1988).</li><li>Candiani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oocyte+retrieval+during+laparoscopic+vaginoplasty+to+reduce+invasiveness+in+the+treatment+of+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome.">Oocyte retrieval during laparoscopic vaginoplasty to reduce invasiveness in the treatment of Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome.</a> Journal of Minimally Invasive Gynecology. 27 (1), 74-79 (2020).</li><li>Fedele, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+a+neovagina+by+Davydov's+laparoscopic+modified+technique+in+patients+with+Rokitansky+syndrome.">Creation of a neovagina by Davydov's laparoscopic modified technique in patients with Rokitansky syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (1), 1-6 (2010).</li><li>ESHRE Working Group on Ultrasound in ART et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+good+practice+in+ultrasound:+oocyte+pick+up.">Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up.</a> Human Reproduction Open. 2019 (4), (2019).</li><li>Callens, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+update+on+surgical+and+non-surgical+treatments+for+vaginal+hypoplasia.">An update on surgical and non-surgical treatments for vaginal hypoplasia.</a> Human Reproductive Update. 20 (5), 775-801 (2014).</li><li>S&#246;nmezer, M., G&#252;l&#252;mser, &. #. 1. 9. 9. ;., S&#246;nmezer, M., S&#252;k&#252;r, Y. E., Atabeko&#287;lu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transabdominal+ultrasound+guided+oocyte+retrieval+using+vaginal+ultrasound+probe:+Definition+of+the+technique.">Transabdominal ultrasound guided oocyte retrieval using vaginal ultrasound probe: Definition of the technique.</a> The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 47 (2), 800-806 (2021).</li><li>Raju, G. A., Haranath, G. B., Krishna, K. M., Prakash, G. J., Madan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+pregnancy+with+laparoscopic+oocyte+retrieval+and+in+vitro+fertilization+in+Mullerian+agenesis.">Successful pregnancy with laparoscopic oocyte retrieval and in vitro fertilization in Mullerian agenesis.</a> Singapore Medicine Journal. 47 (4), 329-331 (2006).</li><li>Liszewska-Kap&#322;on, M., Str&#243;zik, M., Kotarski, &. #. 3. 2. 1. ;., Bag&#322;aj, M., Hirnle, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+as+an+interdisciplinary+problem.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome as an interdisciplinary problem.</a> Advances in Clinical and Experimental Medicine. 29 (4), 505-511 (2020).</li><li>Wagner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+management+during+the+adolescent+transition+period+of+girls+and+young+women+with+Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome+(MRKHS):+A+systematic+literature+review.">Treatment management during the adolescent transition period of girls and young women with Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome (MRKHS): A systematic literature review.</a> Orphanet Journal of Rare Diseases. 11 (1), 152 (2016).</li><li>Bean, E. J., Mazur, T., Robinson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser+syndrome:+sexuality,+psychological+effects,+and+quality+of+life.">Mayer-Rokitansky-K&#252;ster-Hauser syndrome: sexuality, psychological effects, and quality of life.</a> Journal of Pediatric and Adolescent Gynecology. 22 (6), 339-346 (2009).</li></ol>

Detta protokoll minskar invasiviteten vid behandling av MRKHS genom att kombinera förfarandena för vaginoplastik och äggcellshämtning. För detta ändamål är det avgörande att ett dedikerat team utses för att säkerställa att tidpunkten för COS, det kirurgiska ingreppet och oocytförglasningen planeras effektivt.
MRKHS-patienter för vilka denna kombinerade laparoskopiska metod förväntas vara mest fördelaktig är de där en transvaginal hämtning skulle anses vara tekniskt utmanan...

Med en förekomst av cirka 1 av 4-10 000 kvinnor är MRKHS orsaken till 15% av de primära amenorréfallen. MRKHS kännetecknas av den medfödda frånvaron av det övre segmentet av slidan och livmodern, medan urinvägarna och skelettavvikelserna är associerade varierande. Mer specifikt är ett vaginalt valv med ett djup av 1-2 cm vanligtvis närvarande, och två rudimentala livmoderhorn kan hittas1.
Tidigare var det primära medicinska intresset för MRKHS att möjliggöra normalt samlag, vilket i allmänhet kräver konstruktion av en neovagina genom antingen icke-kirurgiska eller kirurgiska tillvägagångssätt2. Framsteg inom reproduktionsmedicin tillåter dock för närvarande genetiskt moderskap hos MRKHS-patienter, antingen genom surrogatmödraskap 3,4 eller-mer nyligen-livmodertransplantation5. Medan livmodertransplantation fortfarande är ett experimentellt förfarande, är surrogatmödraskap tillgängligt i många länder över hela världen6, och rapporterade obstetriska och psykosociala resultat är jämförbara med de för standard in vitro-befruktning och oocytdonation7.
Både surrogatmödraskap och livmodertransplantation kräver äggcellshämtning och provrörsbefruktning, men det finns ingen konsensus om hur man utför ägginsamling hos patienter med MRKHS. Ett transvaginalt tillvägagångssätt kan vara omöjligt på grund av otillräcklig vaginal elasticitet8 även efter vaginoplastik, atypisk placering av äggstockarna9 eller överdrivet avstånd mellan äggstockarna och vaginalmanschetten 4,10. I dessa fall representerar laparoskopisk oocythämtning det optimala tillvägagångssättet när det gäller kirurgisk åtkomst. Men eftersom de flesta MRKHS-patienter för närvarande genomgår laparoskopisk neovaginoplastik, föreslår vi att man utför en laparoskopisk oocythämtning vid operationen för vaginoplastik11, följt av oocytkryokonservering för framtida användning, vilket minimerar invasivitet samtidigt som behandlingen av den sexuella och reproduktiva funktionen hos MRKHS-patienter kombineras.
Demografiska data för patienter Tjugotre MRKH-patienter genomgick behandling med detta protokoll hittills. Anamnestiska, instrumentella och laboratoriefynd av patienter sammanfattas i tabell 1. Om inte annat anges i tabell 1 hittades inga associerade medfödda anomalier.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Oocyte retrieval procedure</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Portable incubator</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>352057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage Fertilization medium SAGE</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte denudation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 O2 Incubator</td>
			<td>Sanyo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet adjustable handle set</td>
			<td>Cook</td>
			<td>G18674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Hood</td>
			<td>Cooper Surgical</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Consumables</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-well dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>144444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CSCM (Continuos single culture) medium</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>90165</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)</td>
			<td>Origio</td>
			<td>3001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronidase</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVF culture 60 mm petri dish</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>FA9150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mineral oil for embryo culture</td>
			<td>Origio</td>
			<td>4008</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>One Well Dish</td>
			<td>Oosafe</td>
			<td>OOPW-CW05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quinn&#8217;s Advantage medium with HEPES</td>
			<td>Origio</td>
			<td>1024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Serum Substitute Supplement</td>
			<td>Fujifilm irvine Scientific</td>
			<td>99193</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile glass pasteur pipettes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (140 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1140-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stripping pipette tips (170 &#956;m)</td>
			<td>Cook</td>
			<td>K-FPIP-1170-10BS-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oocyte vitrification</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>35 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>90 mm Petri dish</td>
			<td>NUNC</td>
			<td>150360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Container for Cooling rack</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryodevice/cryotop</td>
			<td>Kitazato</td>
			<td>81111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic timer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Flexipet</td>
			<td>COOK</td>
			<td>K- 1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gilson Pipetman</td>
			<td>Gilson</td>
			<td>F123601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab Printer LabXpert</td>
			<td>Brady</td>
			<td>XSL-86-461</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 20-200 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2160G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tips 2-20 &#181;L</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>2139-HR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Visotubes</td>
			<td>Cryo Bio System</td>
			<td>20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Freeze Kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90133-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vitrification Thaw kit</td>
			<td>Fujifilm Irvine Scientific</td>
			<td>90137-SO</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

laparoscopic oocyte retrieval and cryopreservation during vaginoplasty for treatment of mayer-rokitansky-kuster-hauser syndrome

I Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrom (MRKHS) patienter som är planerade för laparoskopisk vaginoplastik och har en önskan om biologiskt moderskap, föreslår vi att en samtidig laparoskopisk oocythämtning för kryokonservering utförs. Oocythämtning eftersträvas i början av laparoskopin. Höger och vänster 5 mm trokar är placerade, genom vilka en 17 G äggstocksaspirationsnål används för punktering av höger respektive vänster äggstockar. För att underlätta exponeringen av folliklarna mobiliseras äggstockarna och hålls med laparoskopiska pincett.
Vid aspirering av flera folliklar nära varandra behålls nålspetsen i äggstocken för att minska antalet gånger som äggstocksbarken transfixeras och på grund av den inneboende risken för blödning. Efterföljande steg är oförändrade jämfört med Davydov laparoskopisk modifierad teknik för vaginoplastik. Före operationen utförs kontrollerad äggstocksstimulering med ett gonadotropinhormonfrisättande hormon (Gn-RH) antagonistprotokoll, och det samtidiga förfarandet för äggcellshämtning och vaginoplastik planeras 36 timmar efter den slutliga follikulära mognadsutlösaren. Follikulär vätska samlas upp i samma 10 ml sterila rör som används vid transvaginal oocythämtning och överförs i ett uppvärmningsblock (37 ° C) till laboratoriet för assisterad befruktning, där mogna (metafas II) oocyter förglasas.
I detta fall hämtades en serie av 23 kvinnor med MRKH, oocyter framgångsrikt och kryokonserverades hos alla patienter; vaginoplastik utfördes därefter utan modifieringar, och slutenvården och poliklinisk postoperativ vård (dag för borttagning av urinkateter, dag för sjukhusutskrivning, användning av dilator och komfort vid uppföljning) förblev opåverkad. En postoperativ komplikation inträffade hos en patient (feber som utvecklades på dag 5 efter operationen och intraperitoneal vätskedetektering vid transabdominal ultraljud) och försvann efter konservativ behandling. I stället för att utföra kirurgisk vaginoplastik och fördröja äggcellshämtning hos MRKH-patienter, kombinerar detta tillvägagångssätt båda procedurerna i en enda laparoskopi, vilket minimerar kirurgisk invasivitet och anestesiologiska risker.

Tabell 2 innehåller äggstocksstimuleringsdata för patienterna, medan huvudsakliga kirurgiska och funktionella resultat beskrivs i tabell 3. De samtidiga laparoskopiska procedurerna för äggcellshämtning och vaginoplastik kombinerades framgångsrikt hos alla patienter. I genomsnitt hämtades 11,4 ± 5,4 (medelvärde ± SD) oocyter och 9,6 ± 4,3 MII-oocyter kryokonserverades (tabell 3). Enligt vår erfarenhet av oocytkryokonservering hos patienter som genomgår ART v...

Watch this Scientific Journal Video about Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome at JoVE.com

Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome

Ett dedikerat team kan erbjuda Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-patienter möjlighet att utföra kontrollerad äggstocksstimulering och oocytkryokonservering vid tidpunkten för laparoskopisk vaginoplastik.

Laparoskopisk äggcellshämtning och kryokonservering under vaginoplastik för behandling av Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrom

In Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome (MRKHS) patients who are scheduled for laparoscopic vaginoplasty and have a desire for biological motherhood, ...

Vårt tillvägagångssätt gör det möjligt att minimera invasiv sjukdom vid behandling av Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrom genom att kombinera laparoskopisk vaginoplastik och äggcellshämtning för framtida fertilitetsbehandlingar. De främsta fördelarna med vårt tillvägagångssätt är kravet på en enda anestesi och övervinnandet av omöjligheten av en transvaginal oocythämtning hos yngre Rokitansky-patienter. Proceduren kommer att demonstreras av Diana Delprato, en senior gynekolog vid vår infertilitetsenhet och av Alessandra Alteri och Greta Cermisoni, två seniora kliniska embryologer från vårt assisterade reproduktionslaboratorium.Börja kontrollerad äggstocksstimulering på dag 14 från operationsdagen. Övervaka äggstockssvaret genom seriell transabdominal ultraljud och samtidiga mätningar av östradiol och progesteron. Upprätta pneumoperitoneum med en öppen teknik.Placera en 10-millimeters naveltrokar för införande av laparoskopet och tre fem millimeter trokar i de centrala, högra och vänstra nedre kvadranterna. Under laparoskopisk syn, använd en 17-gauge enda lumennål ansluten till en aspirationspump, som vanligtvis används för transvaginal hämtning genom de centrala och vänstra trokarna för punktering av höger respektive vänster äggstock. Lyft och håll äggstockarna med laparoskopiska pincett för att underlätta exponeringen av folliklarna.När du aspirerar flera folliklar som ligger nära varandra, behåll nålspetsen i äggstocken för att minska antalet gånger som äggstocksbarken transfixeras och den inneboende risken för blödning. Dissekera bukhinnan genom att lyfta och skära bukhinnans sträng tvärs mellan de två rudimentala livmoderhornen och sedan förlänga snittet i sidled, främre och bakre. Exponera vaginal dimple på perinealmetoden och utför ett H-format snitt och skapa ett neo-vaginalt utrymme genom skarp och trubbig dissektion av det vesikorektala utrymmet.Dra sedan ner de dissekerade peritoneala marginalerna till kanten av vaginal vestibulum. Position avbrutna suturer i polydioxanon syntetiskt absorberbart 3-0 för peritoneal vestibulär anastomos. Börja en handväska sträng sutur i polydioxanon syntetisk absorberbar 2-0 monofilament i varje hemipelvis från det mobiliserade bukhinnan ovanför blåsan med bindande transfixering av det runda ligamentet, tubal isthmus, utero-äggstocksbandet och det laterala peritoneala bladet.Inkludera sedan i de två suturerna den laterala aspekten av mesorektum och den främre aspekten av rektal serosa omedelbart under rektosigmoidkorsningen. Slutligen placera en paraffinbelagd gasväv i bukhinnan belagd neovagina. Samla follikulära aspirater i 10 millimeter rundbottnade rör som hålls varma i en bärbar inkubator och transportera dem omedelbart till embryologilaboratoriet med en transporttid på cirka 10 minuter.När alla cumulus oocytkomplex samlas in, placera dem i fyrbrunnsskålen som innehåller befruktningsmediet och märk locket och botten med data om patientens identitet. Inkubera dem vid 37 grader Celsius i en kontrollerad atmosfär som innehåller 6% koldioxid och 5% syre. Se till att en dubbelkontroll av proceduren utförs av en andra medlem av laboratoriepersonalen.Utför avlägsnande av cumulus koronaceller inom 38 timmar efter ägglossningen. Placera cumulus oocytkomplex i den centrala brunnen som innehåller enzymet för att sprida cumuluscellerna med en pasteurpipett av glas, försiktigt pipettera lösningen innehållande cumulus oocytkomplex upp och ner i upp till 30 sekunder. Flytta oocyterna till den andra centrala brunnsskålen som endast innehåller HEPES-buffrat medium, se till att förskjuta en minsta mängd enzym.Ta bort de återstående koronacellerna med hjälp av denudingpipetter med minskande inre diametrar. Bedöm scenen av oocytmognad, separera metafas II-oocyter. Överför metafas II-oocyterna i en IVF-kultur 60-millimeter petriskål innehållande nio droppar kontinuerligt enkelodlingsmedium täckt med sex millimeter mineralolja.Inkubera dem vid 37 grader Celsius i en kontrollerad atmosfär som innehåller 6% koldioxid och 5% syre. Fyll en kylbox upp till toppen med färskt flytande kväve och täck tills det används för att minimera dispersion och avdunstning. Använd en stripppipett med en innerdiameter på 170 mikrometer för att undvika att skada oocyter under manipulation.Skaka försiktigt varje injektionsflaska med jämviktslösning, förglasningslösning och tvättlösning för att blanda innehållet före användning. Förbered locket på en 60-ml petriskål med en droppe 50 mikroliter tvättlösning en. Placera droppar strax före användning för att begränsa medelavdunstning.Ta oocytskålen från inkubatorn och överför metafas II-oocyterna med en minimal volym medium från odlingsskålen till 50 mikroliter tvättlösning. Dispensera 50 mikroliter droppar tvättlösning två, jämviktslösning ett och jämviktslösning två i närheten och överför oocyter från dropptvättlösning en till dropptvättlösning två. Slå samman droppen av jämviktslösning en till tvättlösning två och vänta i två minuter för spontan blandning av båda lösningarna.Slå sedan samman droppen av jämviktslösning två till de tidigare sammanslagna dropparna och låt stå i ytterligare två minuter. Slutligen slå samman en ny 100-mikroliter droppe jämviktslösning tre till de tidigare sammanslagna dropparna och lämna i ytterligare en minut. Placera oocyterna i 100 mikroliter droppe jämviktslösning fyra i 10 minuter.Dispensera två 50-mikroliter droppar förglasningslösning och en 100-mikroliter förglasningslösning. Flytta oocyterna sekventiellt i de tre dropparna förglasningslösning i 60 sekunder så att oocyterna förblir i varje droppe i cirka 20 sekunder. När cirka 10 sekunder är kvar före slutet av de 60 sekunderna av inkubationen, placera kryoenheten under mikroskopet.Bär oocyterna vid pipettens spets och placera dem på kryoenheten med minsta mängd förglasningslösning. Aspirera överskottsförglasningslösningen och lämna oocyterna täckta av ett tunt lager av förglasningslösning. Kasta kryoenheten direkt i flytande kväve och flytta den snabbt.Förvara enheten i flytande kväve och täck den med ett skyddande lock. De samtidiga laparoskopiska procedurerna för äggcellshämtning och vaginoplastik kombinerades framgångsrikt hos alla patienter. I genomsnitt 11,4 5,4 oocyter hämtades och 9,6 4,3 M2 oocyter kryokonserverades.Den totala genomsnittliga operativa tiden var 114 17 minuter. Intraoperativ blodförlust var obetydlig hos alla patienter och inga intraoperativa biverkningar observerades. På dag tre efter operationen började patienterna daglig användning av dilatatorer och skrevs ut på dag 6.0 1.0.En försiktig aspiration av folliklar inom äggstocken rekommenderas, med vederbörlig uppmärksamhet åt automatisk mobilisering av äggstockarna för att säkerställa optimal åtkomst och hämtning.

Research

JoVE Journal

Medicine

Isolation, Cryopreservation and Culture of Human Amnion Epithelial Cells for Clinical Applications

Isolering, Frysförvaring och kultur för mänskliga amnion epitelceller för kliniska tillämpningar

Human amnion epithelial cells (hAECs) derived from term or pre-term amnion membranes have attracted attention from researchers and clinicians as a ...

Intraoperative Gastroscopy for Tumor Localization in Laparoscopic Surgery for Gastric Adenocarcinoma

Intraoperativ Gastroskopi för tumörlokalisering i laparoskopisk kirurgi för adenocarcinom

Determining resection margins for gastric cancer, which are not exposed to the serosal surface of the stomach, is the most important procedure during ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Network Analys av foramen ovale Elektrodrecordings i Läkemedelsresistenta Temporallobsepilepsi Patienter

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Laparoscopic Technique for Serial Collection of Liver and Mesenteric Lymph Nodes in Macaques

Laparoskopisk teknik för Serial Insamling av lever och kröslymfknutor i makaker

The mesenteric lymph nodes (MLN) and the liver are exposed to microbes and microbial products from the gastrointestinal (GI) tract, making them ...

Transaxillary First Rib Resection for Treatment of the Thoracic Outlet Syndrome

Transaxillär första revbensresektion för behandling av Thoracic Outlet Syndrome

Thoracic outlet syndrome (TOS) is a common disorder that causes a significant loss of productivity. The transaxillary first rib resection (TFRR) protocol ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

Laparoskopisk radikal vänster pankreatit för cancer i bukspottskörteln: Kirurgisk strategi och teknik Video

Radical resection margins, resection of Gerota&#8217;s (perirenal) fascia, and adequate lymph node dissection are crucial for an adequate oncological ...

Technical Modification of the Terminal Ureter During Total Transperitoneal Laparoscopic Nephroureterectomy for Upper Urinary Tract Urothelial Carcinoma

Teknisk modifiering av terminalen Ureter under total Transperitoneal laparoskopisk Nephroureterectomy för övre urinvägarna Urotelial cancer

Upper tract urothelial carcinoma (UTUC) accounts for 5%&ndash;10% of all urothelial tumors. Radical nephroureterectomy is the standard treatment ...

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

OP-IVM: Kombinera in vitro-mognad efter äggcellshämtning med gynekologisk kirurgi

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

Surgical Techniques to Optimize Ovarian Reserve during Laparoscopic Cystectomy for Ovarian Endometrioma

Kirurgiska tekniker för att optimera äggstocksreserven under laparoskopisk cystektomi för äggstockscancer

Surgical management of ovarian endometrioma in patients desiring fertility is complicated by the need to balance maximal resection of disease with efforts ...

Comparing Objective Conjunctival Hyperemia Grading and the Ocular Surface Disease Index Score in Dry Eye Syndrome During COVID-19

Jämförelse av objektiv konjunktivalhyperemigradering och okulär ytsjukdomsindexpoäng vid torra ögonsyndrom under COVID-19

The incidence of dry eye syndrome (DES) has increased due to wearing masks, utilizing digital devices, and working remotely during the pandemic. A survey ...