Name: a procedure to study stress-induced relapse of heroin seeking after punishment-imposed abstinence
Uploaded: 2022-03-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af Natural Sciences &Engineering Council Discovery Program (USA: RGPIN-2016-06694).

Alle rotter behandles i henhold til retningslinjerne fra det canadiske råd for dyrepleje. Godkendelse af alle forsøgsprocedurer blev givet af Concordia University Animal Research Ethics Committee.
1. Dyr
<ol><li>Erhverv Long Evans rotter, der vejer 275-300 g (mænd) eller 225-250 g (kvinder). Dobbelt husrotter i standard plastbure med corncob sengetøj og strimlet papir indtil operation.</li>
	<li>Hold rotterne på en omvendt lys-mørk cyklus (lys slukket kl. 9:30, lys tæ...

<ol>
	<li>Jaffe, J. H., Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+addiction+and+drug+abuse.">Drug addiction and drug abuse.</a> Goodman &amp; Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics. , 522-573 (1990).</li><li>O'Brien, C. P., McLellan, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myths+about+the+treatment+of+addiction.">Myths about the treatment of addiction.</a> Lancet. 347, 237-240 (1996).</li><li>Miczek, K. A., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+for+translational+psychopharmacology+research--some+basic+principles.">Challenges for translational psychopharmacology research--some basic principles.</a> Psychopharmacology (Berl). 199 (3), 291-301 (2008).</li><li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+does+stress+increase+risk+of+drug+abuse+and+relapse.">How does stress increase risk of drug abuse and relapse.</a> Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).</li><li>Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+increases+cigarette+use+in+adult+smokers.">Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers.</a> Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).</li><li>Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+of+dieting+severity+and+bulimic+behaviors+to+alcohol+and+other+drug+use+in+young+women.">The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women.</a> Journal of Substance Abuse. 4, 341-353 (1992).</li><li>Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats:+studies+on+the+generality+of+the+effect.">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).</li><li>Peck, J. A., Ranaldi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+abstinence:+exploring+animal+models+and+behavioral+treatment+strategies.">Drug abstinence: exploring animal models and behavioral treatment strategies.</a> Psychopharmacology (Berl). 231 (10), 2045-2058 (2014).</li><li>Cooper, A., Barnea-Ygael, N., Levy, D., Shaham, Y., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conflict+rat+model+of+cue-induced+relapse+to+cocaine+seeking).">A conflict rat model of cue-induced relapse to cocaine seeking).</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 117-125 (2007).</li><li>Barnea-Ygael, N., Yadid, G., Yaka, R., Ben-Shahar, O., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cue-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking+in+the+rat+&amp;#34;conflict+model&amp;#34;:+effect+of+prolonged+home-cage+confinement.">Cue-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat &amp;#34;conflict model&amp;#34;: effect of prolonged home-cage confinement.</a> Psychopharmacology (Berl). 219 (3), 875-883 (2012).</li><li>Fredriksson, I., Applebey, S. V., Minier-Toribio, A., Shekara, A., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+the+dopamine+stabilizer+(-)-OSU6162+on+potentiated+incubation+of+opioid+craving+after+electric+barrier-induced+voluntary+abstinence.">Effect of the dopamine stabilizer (-)-OSU6162 on potentiated incubation of opioid craving after electric barrier-induced voluntary abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 45 (5), 770-779 (2020).</li><li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment:+effects+of+drug+taking+history.">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li><li>Marchant, N. J., Campbell, E. J., Kaganovsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Punishment+of+alcohol-reinforced+responding+in+alcohol+preferring+P+rats+reveals+a+bimodal+population:+Implications+for+models+of+compulsive+drug+seeking.">Punishment of alcohol-reinforced responding in alcohol preferring P rats reveals a bimodal population: Implications for models of compulsive drug seeking.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology &amp; Biological Psychiatry. 87, 68-77 (2018).</li><li>Krasnova, I. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incubation+of+methamphetamine+and+palatable+food+craving+after+punishment-induced+abstinence.">Incubation of methamphetamine and palatable food craving after punishment-induced abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 39 (8), 2008-2016 (2014).</li><li>Panlilio, L. V., Thorndike, E. B., Schindler, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstatement+of+punishment-suppressed+opioid+self-administration+in+rats:+an+alternative+model+of+relapse+to+drug+abuse.">Reinstatement of punishment-suppressed opioid self-administration in rats: an alternative model of relapse to drug abuse.</a> Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 229-235 (2003).</li><li>Economidou, D., Pelloux, Y., Robbins, T. W., Dalley, J. W., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+impulsivity+predicts+relapse+to+cocaine-seeking+after+punishment-induced+abstinence.">High impulsivity predicts relapse to cocaine-seeking after punishment-induced abstinence.</a> Biological Psychiatry. 65 (10), 851-856 (2009).</li><li>Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+procedure+to+study+the+effect+of+prolonged+food+restriction+on+heroin+seeking+in+abstinent+rats.">A procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50751 (2013).</li><li>Venniro, M., Caprioli, D., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+drug+relapse+and+craving:+From+drug+priming-induced+reinstatement+to+incubation+of+craving+after+voluntary+abstinence.">Animal models of drug relapse and craving: From drug priming-induced reinstatement to incubation of craving after voluntary abstinence.</a> Progress in Brain Research. 224, 25-52 (2016).</li><li>Deroche-Gamonet, V., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychobiology+of+cocaine+addiction:+Contribution+of+a+multi-symptomatic+animal+model+of+loss+of+control.">Psychobiology of cocaine addiction: Contribution of a multi-symptomatic animal model of loss of control.</a> Neuropharmacology. 76, 437-449 (2014).</li><li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment:+effects+of+drug+taking+history.">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li><li>Epstein, D. H., Kowalczyk, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+seekers:+Our+take.+Two+clinicians'+perspective+on+a+new+animal+model+of+addiction.">Compulsive seekers: Our take. Two clinicians' perspective on a new animal model of addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 43 (4), 677-679 (2018).</li><li>Hser, Y. I., Hoffman, V., Grella, C. E., Anglin, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+33-year+follow-up+of+narcotics+addicts.">A 33-year follow-up of narcotics addicts.</a> Archives of General Psychiatry. 58 (5), 503-508 (2001).</li><li>Chen, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescuing+cocaine-induced+prefrontal+cortex+hypoactivity+prevents+compulsive+cocaine+seeking.">Rescuing cocaine-induced prefrontal cortex hypoactivity prevents compulsive cocaine seeking.</a> Nature. 496 (7445), 359-362 (2013).</li></ol>

Der er to vigtige demonstrationer i dette papir. For det første valideringen af den strafpålagte afholdenhed ved hjælp af søge- og tage-kæden med heroin. For det andet blev det påvist, at stressfremkaldt tilbagefald kunne observeres i en strafpålagt afholdenhedsprocedure. Dette er vigtige demonstrationer, fordi (i) Den strafinducerede afholdenhedsprocedure i højere grad efterligner den menneskelige tilstand, da den resulterer i frivillig afholdenhed, dvs. ikke på grund af udryddelse af stofsøgning eller tvungen...

Tilbagefald er det mest udfordrende problem i behandlingen af stofbrug 1,2. Imidlertid er kun en håndfuld farmakologiske behandlinger godkendt til at hjælpe med at undgå tilbagefald hos mennesker3. Opioidepidemien, som Nordamerika i øjeblikket står over for, er et slående eksempel på det, og det kræver overvejelse af forskellige tilgange til dyremodeller for tilbagefald til opioider.
Akut stress har vist sig at være en vigtig udløser for tilbagefald hos mennesker4. En miljømæssig stressfaktor, der ofte er forbundet med narkotikamisbrug, er fødevaremangel. Stofbrugere vælger ofte at afsætte ressourcer til at skaffe stoffer i stedet for mad. Kalorieunderskud har vist sig at være korreleret med højere tilbagefald til cigaretter5 og alkohol6 brug. På grund af etiske og praktiske spørgsmål er dyremodeller blevet udviklet i løbet af de sidste årtier for at lette forskningen på området. I dyremodeller har akut fødevaremangel vist sig at være robust at genindføre slukket heroin, der søger7. I øjeblikket er de fleste dyremodeller for tilbagefald baseret på afholdenhedsprocedurer, der enten ikke er repræsentative for menneskelig afholdenhed (f.eks. udryddelsesbaserede modeller) eller kun omfatter den lille procentdel af stofbrugere, der er tvunget til at afholde sig på grund af fængsling eller indlæggelsesbehandling (f.eks. modeller for tvungen afholdenhed). Hovedårsagen til, at stofbrugere vælger at afholde sig fra at stemme, er de negative konsekvenser, der er forbundet med at søge og tagestoffer 8. Strafpålagt afholdenhed er en dyremodel, der efterligner de negative konsekvenser forbundet med stofsøgning på selvpålagt afholdenhed hos mennesker. Denne model introducerer en aversiv stimulus, fx en mild fodchok, med lægemiddelsøgning eller indtagelse, som får dyret til at stoppe med at tage stoffet frivilligt. En anden procedure, der inkorporerer negative konsekvenser for lægemiddelsøgning, er den elektriske barrierekonfliktmodel for lægemiddelafholdenhed og tilbagefald9. Rotten skal krydse en elektrisk barriere for at udføre den operant adfærd, der er forbundet med selvadministration af stoffer. Modellen blev med succes brugt til at demonstrere frivillig afholdenhed og tilbagefald til psykostimulerende og opioide lægemidler 10,11. Under den elektriske barriereprocedure er lægemiddelsøgningsindsats imidlertid altid forbundet med en aversiv begivenhed, i modsætning til den menneskelige tilstand. Desuden kan selve indtagelsen overlappe med det elektriske fodchok, når dyret vender tilbage til det sikre område efter infusionen ved at krydse barrieren igen.
Strafpålagt afholdenhed er blevet brugt sammen med andre misbrugsstoffer som kokain12, alkohol13, metamfetamin14, remifentanil15, men det blev aldrig anvendt på herointrænede dyr. Modellen er blevet brugt til at studere tilbagefald induceret af priming14 og lægemiddelassocierede signaler16, men den blev ikke integreret i en stressinduceret tilbagefaldsprocedure. Den procedure, der er beskrevet her, bruges til at demonstrere akut fødevaremangel-induceret tilbagefald til heroinsøgning efter strafpålagt afholdenhed hos hanrotter.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anafen Injection 100 mg/mL Vial/50 mL</td>
			<td>MERIAL Canada, Inc.</td>
			<td>1938126</td>
			<td>anti-inflammatory drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance arm</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H29-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannulae (22 G, 5-up)</td>
			<td>Plastics One</td>
			<td>C313G-5up</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Environment connection board &#38; Linc cable</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H03-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed speed infusion pump (3.3 RPM)</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>A73-01-3.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GE Marine Silicon</td>
			<td>GE</td>
			<td>SE-1134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphic State Notation 3</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>GS3</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Habitest universal Linc</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H02-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heroin HCl</td>
			<td>National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>House light-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H11-01R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane USP 99.9% Vial/250 mL</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd</td>
			<td>2237518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Swivels, Plastic, 22 G</td>
			<td>Lomir Biomedical, Inc.</td>
			<td>RSP1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat test cage</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H10-11R-TC</td>
			<td>Operant conditioning chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractable lever-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H23-17RA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037)</td>
			<td>Fisher Scientific (Canada)</td>
			<td>1118915A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single high-bright cue-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H11-03R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound attenuation boxes</td>
			<td>Concordia University</td>
			<td>Home made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steal grid floor</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H10-11R-TC-SF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>System controller 2</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>SYS CTRL 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>System power base</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H01-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tone module 2.9 KHz</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H12-02R-2.9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>63018-044</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a procedure to study stress-induced relapse of heroin seeking after punishment-imposed abstinence

Den strafpålagte afholdenhedsprocedure modellerer den selvpålagte afholdenhed, som mennesker indleder på grund af de negative konsekvenser forbundet med stofindtagelse. Denne model er blevet implementeret i eksperimenter med forskellige typer misbrugsstoffer såsom metamfetamin, kokain og alkohol. Der er imidlertid ikke påvist strafbetinget afholdenhed hos herointrænede dyr. Desuden er akut stress en vigtig udløser for tilbagefald hos mennesker og dyremodeller. Det har tidligere vist sig, at akut fødevaremangel kraftigt medførte genindførelse af slukket kokain- og heroinsøgning. Den procedure, der er beskrevet her, kan bruges til at vurdere virkningerne af akut stresseksponering på heroinsøgning efter strafpålagt afholdenhed. I alt 8 rotter blev implanteret med kroniske intravenøse (i.v.) katetre og trænet til selvadministration af heroin (0,1 mg/kg/infusion) i 18 dage under en søgekædet tidsplan. Afslutning af søgelinket gav adgang til tagehåndtaget, som blev parret med en heroininfusion. Søgehåndtaget var programmeret med en variabel interval 60 forstærkningsplan (VI60), og gribehåndtaget blev programmeret med en fast forhold 1 forstærkningsplan (FR1). Efter selvadministrationstræning blev der leveret et mildt fodchok på 30% af de gennemførte søgeforbindelser i stedet for forlængelse af håndtaget. Fodchokintensiteten blev øget med 0,1 mA pr. daglig session fra 0,2 mA til 1,0 mA. Heroinsøgende tests blev udført efter 24 timers fødevaremangel (FD) eller mætte forhold. Rotter under akut fødevaremangel øgede kraftigt heroinsøgningen efter strafpålagt afholdenhed.

Hanrotter viste en stigning i søgehåndtagspresser, da tidsplanen for forstærkning steg i løbet af træningsdagene, og et pålideligt, konsekvent antal heroininfusioner i løbet af træningsdage (figur 1). Under straf reducerede rotter antallet af søgehåndtagspresser og infusioner med stigningen i fodchokintensitet over 8 strafdage (figur 2). Fødevaremangeltilstanden øgede heroinsøgningen betydeligt efter strafpålagt afholdenhed (Fodringstilstand: F<sub...

Watch this Scientific Journal Video about A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence at JoVE.com

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

En procedure, der viser et robust akut fødevaremangel-induceret tilbagefald til heroinsøgning efter strafpålagt afholdenhed, beskrives. En strafpålagt afholdenhedsmodel blev med succes implementeret ved hjælp af søge- og tagekædeplanen for heroinselvadministration. Heroinsøgende tests udføres derefter efter 24 timers stress i fødevaremangel.

En procedure til undersøgelse af stressinduceret tilbagefald af heroinsøgning efter strafpålagt afholdenhed

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

Det er første gang, at stressfremkaldt tilbagefald til heroin vises efter strafpålagt afholdenhed. Disse metoder kan hjælpe os med at forstå den neuronale mekanisme, der ligger til grund for stressinduceret tilbagefald hos mennesker efter frivillig afholdenhed. Ved at bruge fødevaremangel og strafpålagt afholdenhed efterligner vi i højere grad den menneskelige tilstand og bringer økologisk gyldighed til dyremodeller for tilbagefald.Begynd med at indstille de operante konditionskamre som beskrevet i manuskriptet. Efter genopretning fra operationen skal du vænne rotten i det operante træningskammer i 24 timer, før protokollen påbegyndes uden at fastgøre rotten til metalfjederen. Placer rotten anbragt i de operanankamre under hele eksperimentet.Fastgør derefter 5up-stikket til Tygon-røret og metalfjederen. Start træningspasset ved begyndelsen af den mørke fase af den omvendte lyscyklus. Ved selvadministration af heroin bør tagehåndtaget være tilgængeligt under fast forhold et eller FR.Program hvert forsøg til at begynde med indsættelsen af taghåndtaget og tænd lyset i huset. Når rotten trykker på tagehåndtaget en gang, skal du trække taghåndtaget tilbage, tænde signallyset over håndtaget og tone i en 20-sekunders timeoutperiode. Sluk for husets lys, og lad levering af 0,13 ml heroininfusion i en dosis på 0,1 milligram pr. Kg.Derefter programmeres et 30-sekunders intertrialinterval, hvor der ikke præsenteres signaler, husets lys slukkes, og håndtaget trækkes tilbage. Til den næste prøveperiode skal du indsætte taghåndtaget og tænde husets lys. For selvadministrationen med søgetagkæden under FR en, skal du programmere det operante træningssystem til kun at indsætte søgehåndtaget og tænde huslyset for at signalere begyndelsen af sessionen med tagehåndtaget i en tilbagetrukket tilstand.Når rotten trykker en gang på søgehåndtaget, trækker programmet søgehåndtaget tilbage og indsætter tagehåndtaget. Et tryk på taghåndtaget trækker tagehåndtaget tilbage og starter proceduren med at tænde cue-lyset og et 30-sekunders intertrialinterval, som vist tidligere. Efter intertrialintervallet skal du programmere det operante træningssystem til at indsætte søgehåndtaget og tænde husets lys for at signalere begyndelsen af det næste forsøg.Dernæst skal du programmere alle trin til selvadministration med en søgetagkæde under fast forhold et, som demonstreret tidligere med at indføre et variabelt interval på fem i tre dage som den nye tidsplan for forstærkning på søgehåndtaget. Indstil softwaren til at tillade det første tryk på søgehåndtaget for at aktivere variabelt interval fem tidsplaner. Tillad softwaren tilfældigt at vælge en intervaltid fra en liste på 0,1, fem og 10 sekunder, hvilket resulterer i et gennemsnit på fem sekunders interval.Når det valgte interval er gået, trækker det første søgehåndtagstryk søgehåndtaget tilbage og forlænger tagehåndtaget. Efter at have fulgt trinene for tagehåndtaget, og når forsøget slutter, skal du træne rotten i fem dage under variabelt interval 30-skema for søgelinket. For at gøre det skal du tillade softwaren tilfældigt at vælge et tidspunkt fra en liste på 15, 30 og 45 sekunder i gennemsnit 30 sekunder.Træn derefter rotter i tre dage under variable interval 60-tidsplaner, så softwaren tilfældigt kan vælge et tidspunkt fra en liste på 45, 60 og 75 sekunder. For strafpålagt afholdenhed skal du gennemføre strafsessioner i otte dage med regelmæssigt tilsyn for at garantere, at rotter ikke viser tegn på unormal smerte eller sundhedsmæssige problemer. Start strafsessioner med indsættelse af søgehåndtag og tænd husets lys.Programmer det operante træningssystem, så søgehåndtaget trækkes tilbage efter at have gennemført søgelinket under variabelt interval 60, huslyset slukkes, og et mildt fodstød administreres til rotten på 30% af de afsluttede søgelinks i stedet for indsættelse af taghåndtaget. Take-håndtaget strækker sig på de øvrige 70% af de afsluttede søgelinks som i almindeligt selvadministrationsforsøg. Efter programmering af et intertrialinterval på syv minutter indstilles fodchokintensiteten til 0,2 milliampere og øges med 0,1 milliampere pr. strafdag indtil 1,0 milliampere.Når rotten trykker på tagehåndtaget, skal du gentage det faste forhold et trin til tilbagetrækning af håndtaget, levering af heroininfusion og præsentation af signalerne efterfulgt af syv minutters intertrialinterval. Efter den sidste dag af den strafpålagte afholdenhed skal du fjerne madbeholdere fra kamrene til rotter, der gennemgår fødevaremangelinduceret tilbagefaldstest, og opbevare madbeholdere til den mætte gruppe. Giv ubegrænset adgang til vand i begge grupper og overvåg dyrenes sundhed.Efter 24 timers fødevaremangel skal du fortsætte med en tre-timers fødevaremangelinduceret heroinsøgningstest under en variabel interval 60-tidsplan med et intertrialinterval på syv minutter uden chok eller heroininfusioner. Efter sessionen returneres madbeholdere til de madberøvede rotter. Den næste dag skal du fjerne madbeholdere fra rotternes kamre, der blev mættet ved den første tilbagefaldstest.Giv de tidligere fødevarefattige rotter ubegrænset adgang til mad før og under testen. Efter 24-timers fødevaremangel skal du udføre tre timers heroinsøgningstest, som tidligere demonstreret. I undersøgelsen viste hanrotter en stigning i søgehåndtagspresser, da tidsplanen for forstærkning steg.Der blev observeret et pålideligt, konstant antal heroininfusioner i løbet af træningsdagene. Under afstraffelsen reducerede rotter antallet af søgehåndtagstryk og infusioner med stigningen i fodchokintensitet over otte strafdage. I den heroinsøgende test øgede fødevareafsavnsbetingelsen signifikant heroinsøgningen efter strafpålagt afholdenhed, og der blev ikke observeret nogen statistisk signifikant effekt for tid eller for stofsøgning over tid på tværs af fodringsbetingelser Det er vigtigt at tage sig tid til at træne dyrene til at lære i den grundlæggende søgning og tage kæde under FR en.Uden dette trin vil dyr ikke være i stand til at komme videre i forsøgene. Efter implementering af modellen kan vi nu designe eksperimenter, der ser på neurobiologien af stressinduceret tilbagefald efter frivillig afholdenhed.

Research

JoVE Journal

Behavior

Assessment and Evaluation of the High Risk Neonate: The NICU Network Neurobehavioral Scale

Vurderingen og evalueringen af ​​den store risiko for nyfødte: NICU Network neurobehavioral Scale

There has been a long-standing interest in the assessment of the neurobehavioral integrity of the newborn infant.  The NICU Network Neurobehavioral Scale ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

En procedure til at undersøge effekten af ​​langvarig mad begrænsning på Heroin Søger i afholdende Rats

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

En procedure til at Overhold Kontekst-induceret Fornyelse af Pavlov-condition Alkohol-søger adfærd i rotter

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

A Dual Task Procedure Combined with Rapid Serial Visual Presentation to Test Attentional Blink for Nontargets

En Dual Opgave Fremgangsmåde Kombineret med Rapid Serial Visual Presentation til Test opmærksomhedsgraden Blink for Nontargets

When viewers search for targets in a rapid serial visual presentation (RSVP) stream, if two targets are presented within about 500 msec of each other, the ...

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

En musemodel af Subkronisk og Mild Social nederlag stress for Understanding Stress-induceret adfærdsmæssige og fysiologiske Underskud

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Rodent Brain Microinjection to Study Molecular Substrates of Motivated Behavior

Gnaverhjerne Mikroinjektion at studere Molekylær Substrater af motiveret adfærd

Brain microinjection can aid elucidation of the molecular substrates of complex behaviors, such as motivation. For this purpose rodents can serve as ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Påvisning af adfærdsmæssige underskud i rotter efter traumatisk hjerneskade

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Utilizing the Modified T-Maze to Assess Functional Memory Outcomes After Cardiac Arrest

Udnytte den modificerede T-Maze for at vurdere funktionelle hukommelse resultater efter hjertestop

Background: Evaluating mild to moderate cognitive impairment in a global cerebral ischemia (i.e. cardiac arrest) model can be difficult due to poor ...

A Method to Study Adaptation to Left-Right Reversed Audition

En metode til at studere tilpasning til venstre-højre vendt Audition

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the ...

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Genindsættelse af stof-søgende i mus ved hjælp af konditioneret sted præference paradigme

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...