Name: a procedure to study stress-induced relapse of heroin seeking after punishment-imposed abstinence
Uploaded: 2022-03-23T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av Natural Sciences & Engineering Council Discovery Program (USA: RGPIN-2016-06694).

Alle rotter behandles i henhold til retningslinjene fra Canadian Council on Animal Care. Godkjenning for alle eksperimentelle prosedyrer ble gitt av Concordia University Animal Research Ethics Committee.
1. Dyr
<ol><li>Oppnå Long Evans rotter som veier 275-300 g (menn) eller 225-250 g (kvinner). Doble husrotter i standard plastbur med corncob sengetøy og strimlet papir til kirurgi.</li>
	<li>Hold rottene på en omvendt lys-mørk syklus (lyser av kl. 09:30, lys på kl. 21:3...

<ol>
	<li>Jaffe, J. H., Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+addiction+and+drug+abuse.">Drug addiction and drug abuse.</a> Goodman &amp; Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics. , 522-573 (1990).</li><li>O'Brien, C. P., McLellan, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myths+about+the+treatment+of+addiction.">Myths about the treatment of addiction.</a> Lancet. 347, 237-240 (1996).</li><li>Miczek, K. A., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+for+translational+psychopharmacology+research--some+basic+principles.">Challenges for translational psychopharmacology research--some basic principles.</a> Psychopharmacology (Berl). 199 (3), 291-301 (2008).</li><li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+does+stress+increase+risk+of+drug+abuse+and+relapse.">How does stress increase risk of drug abuse and relapse.</a> Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).</li><li>Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+increases+cigarette+use+in+adult+smokers.">Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers.</a> Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).</li><li>Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+of+dieting+severity+and+bulimic+behaviors+to+alcohol+and+other+drug+use+in+young+women.">The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women.</a> Journal of Substance Abuse. 4, 341-353 (1992).</li><li>Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats:+studies+on+the+generality+of+the+effect.">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).</li><li>Peck, J. A., Ranaldi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+abstinence:+exploring+animal+models+and+behavioral+treatment+strategies.">Drug abstinence: exploring animal models and behavioral treatment strategies.</a> Psychopharmacology (Berl). 231 (10), 2045-2058 (2014).</li><li>Cooper, A., Barnea-Ygael, N., Levy, D., Shaham, Y., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conflict+rat+model+of+cue-induced+relapse+to+cocaine+seeking).">A conflict rat model of cue-induced relapse to cocaine seeking).</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 117-125 (2007).</li><li>Barnea-Ygael, N., Yadid, G., Yaka, R., Ben-Shahar, O., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cue-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking+in+the+rat+&amp;#34;conflict+model&amp;#34;:+effect+of+prolonged+home-cage+confinement.">Cue-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat &amp;#34;conflict model&amp;#34;: effect of prolonged home-cage confinement.</a> Psychopharmacology (Berl). 219 (3), 875-883 (2012).</li><li>Fredriksson, I., Applebey, S. V., Minier-Toribio, A., Shekara, A., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+the+dopamine+stabilizer+(-)-OSU6162+on+potentiated+incubation+of+opioid+craving+after+electric+barrier-induced+voluntary+abstinence.">Effect of the dopamine stabilizer (-)-OSU6162 on potentiated incubation of opioid craving after electric barrier-induced voluntary abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 45 (5), 770-779 (2020).</li><li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment:+effects+of+drug+taking+history.">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li><li>Marchant, N. J., Campbell, E. J., Kaganovsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Punishment+of+alcohol-reinforced+responding+in+alcohol+preferring+P+rats+reveals+a+bimodal+population:+Implications+for+models+of+compulsive+drug+seeking.">Punishment of alcohol-reinforced responding in alcohol preferring P rats reveals a bimodal population: Implications for models of compulsive drug seeking.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology &amp; Biological Psychiatry. 87, 68-77 (2018).</li><li>Krasnova, I. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incubation+of+methamphetamine+and+palatable+food+craving+after+punishment-induced+abstinence.">Incubation of methamphetamine and palatable food craving after punishment-induced abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 39 (8), 2008-2016 (2014).</li><li>Panlilio, L. V., Thorndike, E. B., Schindler, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstatement+of+punishment-suppressed+opioid+self-administration+in+rats:+an+alternative+model+of+relapse+to+drug+abuse.">Reinstatement of punishment-suppressed opioid self-administration in rats: an alternative model of relapse to drug abuse.</a> Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 229-235 (2003).</li><li>Economidou, D., Pelloux, Y., Robbins, T. W., Dalley, J. W., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+impulsivity+predicts+relapse+to+cocaine-seeking+after+punishment-induced+abstinence.">High impulsivity predicts relapse to cocaine-seeking after punishment-induced abstinence.</a> Biological Psychiatry. 65 (10), 851-856 (2009).</li><li>Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+procedure+to+study+the+effect+of+prolonged+food+restriction+on+heroin+seeking+in+abstinent+rats.">A procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50751 (2013).</li><li>Venniro, M., Caprioli, D., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+drug+relapse+and+craving:+From+drug+priming-induced+reinstatement+to+incubation+of+craving+after+voluntary+abstinence.">Animal models of drug relapse and craving: From drug priming-induced reinstatement to incubation of craving after voluntary abstinence.</a> Progress in Brain Research. 224, 25-52 (2016).</li><li>Deroche-Gamonet, V., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychobiology+of+cocaine+addiction:+Contribution+of+a+multi-symptomatic+animal+model+of+loss+of+control.">Psychobiology of cocaine addiction: Contribution of a multi-symptomatic animal model of loss of control.</a> Neuropharmacology. 76, 437-449 (2014).</li><li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment:+effects+of+drug+taking+history.">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li><li>Epstein, D. H., Kowalczyk, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+seekers:+Our+take.+Two+clinicians'+perspective+on+a+new+animal+model+of+addiction.">Compulsive seekers: Our take. Two clinicians' perspective on a new animal model of addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 43 (4), 677-679 (2018).</li><li>Hser, Y. I., Hoffman, V., Grella, C. E., Anglin, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+33-year+follow-up+of+narcotics+addicts.">A 33-year follow-up of narcotics addicts.</a> Archives of General Psychiatry. 58 (5), 503-508 (2001).</li><li>Chen, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescuing+cocaine-induced+prefrontal+cortex+hypoactivity+prevents+compulsive+cocaine+seeking.">Rescuing cocaine-induced prefrontal cortex hypoactivity prevents compulsive cocaine seeking.</a> Nature. 496 (7445), 359-362 (2013).</li></ol>

Det er to viktige demonstrasjoner i denne artikkelen. For det første valideringen av den straffpålagte avholdenheten ved å søke og ta kjede med heroin. For det andre ble det vist at stressindusert tilbakefall kunne observeres i en straffepålagt avholdenhetsprosedyre. Dette er viktige demonstrasjoner fordi (i) Den straff-induserte avholdenhetsprosedyren etterligner den menneskelige tilstanden nærmere, da den resulterer i frivillig avholdenhet, dvs. ikke på grunn av utryddelse av narkotikasøkende eller tvungen fjer...

Tilbakefall er det mest utfordrende problemet i behandlingen av narkotikabruk 1,2. Imidlertid er bare en håndfull farmakologiske behandlinger godkjent for å unngå tilbakefall hos mennesker3. Opioidepidemien som Nord-Amerika for tiden står overfor, er et slående eksempel på det, og det krever å vurdere ulike tilnærminger på dyremodeller for tilbakefall til opioider.
Akutt stress har vist seg å være en viktig utløser for tilbakefall hos mennesker4. En miljøstressor som ofte er forbundet med narkotikamisbruk er matmangel. Narkotikabrukere velger ofte å bruke ressurser på å skaffe narkotika i stedet for mat. Kaloriunderskudd har vist seg å være korrelert med høyere tilbakefall til sigaretter5 og alkohol6 bruk. På grunn av etiske og praktiske problemstillinger har dyremodeller blitt utviklet de siste tiårene for å lette forskningen på feltet. I dyremodeller har akutt matmangel vist seg å gjenopprette slukket heroinsøking7. For tiden er de fleste dyremodeller for tilbakefall basert på avholdenhetsprosedyrer som enten ikke er representative for menneskelig avholdenhet (f.eks. utryddelsesbaserte modeller) eller bare omfatter den lille prosentandelen av narkotikabrukere som er tvunget til å avstå på grunn av fengsling eller døgnbehandling (f.eks. modeller for tvungen avholdenhet). Hovedårsaken til at narkotikabrukere velger å avstå er de negative konsekvensene forbundet med narkotikasøking og bruk8. Straffpålagt avholdenhet er en dyremodell som etterligner de negative konsekvensene forbundet med narkotikasøking på selvpålagt avholdenhet hos mennesker. Denne modellen introduserer en aversiv stimulans, for eksempel en mild fotshock, med narkotikasøking eller inntak, noe som fører til at dyret slutter å ta stoffet frivillig. En annen prosedyre som inkorporerer negative konsekvenser for narkotikasøking er den elektriske barrierekonfliktmodellen for narkotikaavholdenhet og tilbakefall9. Rotta må krysse en elektrisk barriere for å utføre operant oppførsel knyttet til narkotika selvadministrasjon. Modellen ble brukt med hell for å demonstrere frivillig avholdenhet og tilbakefall til psykostimulerende og opioide stoffer10,11. Men under den elektriske barriereprosedyren er narkotikasøkende innsats alltid forbundet med en aversiv hendelse, i motsetning til den menneskelige tilstanden. Videre kan legemiddelbruk i seg selv overlappe med det elektriske fotskjelvet når dyret vender tilbake til det sikre området etter infusjonen ved å krysse barrieren igjen.
Avstraffet avholdenhet har blitt brukt med andre rusmidler som kokain 12, alkohol 13, metamfetamin14, remifentanil15, men det ble aldri brukt på herointrente dyr. Modellen har blitt brukt til å studere tilbakefall indusert av priming14 og medikamentassosierte signaler16, men den ble ikke integrert i en stressindusert tilbakefallsprosedyre. Prosedyren beskrevet her brukes til å demonstrere akutt matmangel-indusert tilbakefall til heroin som søker etter straffpålagt avholdenhet hos hannrotter.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anafen Injection 100 mg/mL Vial/50 mL</td>
			<td>MERIAL Canada, Inc.</td>
			<td>1938126</td>
			<td>anti-inflammatory drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance arm</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H29-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannulae (22 G, 5-up)</td>
			<td>Plastics One</td>
			<td>C313G-5up</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Environment connection board &#38; Linc cable</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H03-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed speed infusion pump (3.3 RPM)</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>A73-01-3.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GE Marine Silicon</td>
			<td>GE</td>
			<td>SE-1134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphic State Notation 3</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>GS3</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Habitest universal Linc</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H02-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heroin HCl</td>
			<td>National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>House light-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H11-01R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane USP 99.9% Vial/250 mL</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd</td>
			<td>2237518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Swivels, Plastic, 22 G</td>
			<td>Lomir Biomedical, Inc.</td>
			<td>RSP1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat test cage</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H10-11R-TC</td>
			<td>Operant conditioning chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractable lever-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H23-17RA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037)</td>
			<td>Fisher Scientific (Canada)</td>
			<td>1118915A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single high-bright cue-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H11-03R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound attenuation boxes</td>
			<td>Concordia University</td>
			<td>Home made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steal grid floor</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H10-11R-TC-SF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>System controller 2</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>SYS CTRL 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>System power base</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H01-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tone module 2.9 KHz</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H12-02R-2.9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>63018-044</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a procedure to study stress-induced relapse of heroin seeking after punishment-imposed abstinence

Den straffpålagte avholdenhetsprosedyren modellerer den selvpålagte avholdenheten som mennesker initierer på grunn av de negative konsekvensene forbundet med narkotikabruk. Denne modellen er implementert i eksperimenter med ulike typer rusmidler som metamfetamin, kokain og alkohol. Det er imidlertid ikke påvist straffutløst avholdenhet hos herointrente dyr. Videre er akutt stress en viktig utløser for tilbakefall hos mennesker og dyremodeller. Det er tidligere vist at akutt matmangel førte til gjeninnføring av slukket kokain og heroinsøking. Prosedyren beskrevet her kan brukes til å vurdere effekten av akutt stresseksponering på heroin som søker etter straffpålagt avholdenhet. Totalt 8 rotter ble implantert med kroniske intravenøse (i.v.) katetre og trent til selvadministrering av heroin (0,1 mg/kg/infusjon) i 18 dager i henhold til en søk-ta-kjedet tidsplan. Fullføring av søkelenken ga tilgang til takspaken, som ble parret med en heroininfusjon. Søkespaken ble programmert med et variabelt intervall 60 forsterkningsplan (VI60), og spaken ble programmert med et fast forhold 1 forsterkningsplan (FR1). Etter opplæring i selvadministrasjon ble det levert et mildt fotsjokk på 30% av de fullførte søkelenkene i stedet for forlengelsen av takspaken. Fotsjokkintensiteten ble økt med 0,1 mA per døgnøkt fra 0,2 mA til 1,0 mA. Heroinsøkende tester ble utført etter 24 timer med matmangel (FD) eller mettede forhold. Rotter under akutt matmangel tilstand økte heroin som søker etter straffpålagt avholdenhet.

Hannrotter viste en økning i søkespakpresser etter hvert som forsterkningsplanen økte i løpet av treningsdagene, og et pålitelig, konsistent antall heroininfusjoner over treningsdager (figur 1). Under straffen reduserte rottene antall spakpresser og infusjoner med økning av fotsjokkintensitet over 8 straffedager (figur 2). Matmangeltilstanden økte heroinsøkingen etter straffpålagt avholdenhet betydelig (Fôringsbetingelse: F(1, 7) = 7,12, p = .0,03, <em...

Watch this Scientific Journal Video about A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence at JoVE.com

A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

En prosedyre som viser et robust akutt matmangel-indusert tilbakefall til heroin som søker etter straffpålagt avholdenhet, er beskrevet. En straffpålagt avholdenhetsmodell ble vellykket implementert ved hjelp av søke- og takjedeplanen for heroin-selvadministrasjon. Heroinsøkende tester utføres deretter etter 24 timer med matmangelstress.

En prosedyre for å studere stress-indusert tilbakefall av heroin søker etter straff-pålagt avholdenhet

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

Det er første gang at stress-indusert tilbakefall til heroin er vist etter straff-pålagt avholdenhet. Disse metodene kan hjelpe oss å forstå den nevrale mekanismen som ligger til grunn for stressindusert tilbakefall hos mennesker etter frivillig avholdenhet. Ved å bruke matmangel og straff pålagt avholdenhet, etterligner vi nærmere den menneskelige tilstanden og bringer økologisk gyldighet til dyremodeller for tilbakefall.Begynn med å sette operant condition kamre som beskrevet i manuskriptet. Etter å ha blitt frisk fra operasjonen, tilpass rotten i operant treningskammer i 24 timer før protokollen startes uten å feste rotta til metallfjæren. Plasser rotta plassert i operant kamre gjennom hele eksperimentet.Deretter fester du 5up-kontakten til Tygon-røret og metallfjæren. Start treningsøkten ved starten av den mørke fasen av den omvendte lyssyklusen. For selvadministrasjon av heroin, bør ta spaken være tilgjengelig under fast forhold en, eller FR en.Programmer hver prøve til å begynne med innsetting av ta spaken og slå på husets lys. Når rotta trykker på take-spaken en gang, trekker du tilbake takespaken, slår på kølyset over spaken og toner i en 20-sekunders timeout-periode. Slå av huslyset, og tillat levering av 0, 13 ml heroininfusjon i en dose på 0, 1 milligram per kilo.Programmer deretter et 30-sekunders intervall der ingen signaler presenteres, huslyset slås av og spaken trekkes tilbake. For neste forsøk, sett inn ta spaken, og slå på huset lys. For selvadministrasjon med søker ta kjeden under FR en, programmere operant treningssystem for å sette inn bare søke spaken og slå på huset lys for å signalisere begynnelsen av økten med ta spaken i en tilbaketrukket tilstand.Når rotta trykker en gang på søkespaken, trekker programmet søkespaken inn og setter inn takspaken. Ett trykk på take-spaken trekker inn takspaken og starter prosedyren for å slå på kølyset, og et intervall på 30 sekunder, som vist tidligere. Etter intertrialintervallet, programmer operant treningssystem for å sette inn søkespaken og slå på huslyset for å signalisere begynnelsen på neste prøve.Deretter programmerer du alle trinn for selvadministrasjon med en søkekjede under fast forhold en, som vist tidligere med å innføre et variabelt intervall på fem i tre dager som den nye forsterkningsplanen på søkespaken. Sett opp programvaren slik at det første trykket på søkespaken aktiverer variabelt intervall fem tidsplaner. La programvaren tilfeldig velge en intervalltid fra en liste på 0,1, fem og 10 sekunder, noe som resulterer i et gjennomsnitt på fem sekunders intervall.Etter at det valgte intervallet er gått, trekker den første søkespakpressen søkespaken tilbake og utvider takspaken. Etter å ha fulgt trinnene for ta spaken, og som rettssaken avsluttes, trene rotta i fem dager under variabelt intervall 30 tidsplan for søke linken. For å gjøre det, la programvaren tilfeldig velge en tid fra en liste på 15, 30 og 45 sekunder i gjennomsnitt 30 sekunder.Deretter trener rotter i tre dager under variabelt intervall 60 tidsplaner, slik at programvaren tilfeldig kan velge en tid fra en liste på 45, 60 og 75 sekunder. For straffpålagt avholdenhet, gjennomfør straffeøkter i åtte dager med regelmessig tilsyn for å garantere at rotter ikke viser tegn på unormal smerte eller helseproblemer. Start straffeøkter med innsetting av søkespak og slå på huslyset.Programmer operant treningssystem slik at etter å ha fullført søkekoblingen under variabelt intervall 60, trekker søkespaken seg tilbake, huslyset slås av, og et mildt fotstøt administreres til rotta på 30% av de fullførte søkekoblingene i stedet for innsetting av takspaken. Ta spaken strekker seg på de andre 70% av fullførte søke koblinger som i vanlig selvadministrasjon rettssaken. Etter å ha programmert et intertrialintervall på syv minutter, sett fotsjokkintensiteten til 0,2 milliampere, og øk med 0,1 milliampere per straffedag til 1,0 milliampere.Når rotta trykker på tasken, gjenta det faste forholdet ett trinn for tilbaketrekking av spaken, levering av heroininfusjon og presentasjon av signalene etterfulgt av syv minutters intertrialintervall. Etter den siste dagen av den straffpålagte avholdenheten, fjern matbeholdere fra kamrene for rotter som gjennomgår matmangel-indusert tilbakefallstest, og hold matbeholdere for den mette gruppen. Gi ubegrenset vanntilgang i begge gruppene og overvåke dyrenes helse.Etter 24 timer med matmangel, fortsett for en tre-timers matmangel-indusert heroinsøkende test under et variabelt intervall 60-tidsplan med et intertrialintervall på syv minutter uten sjokk- eller heroininfusjoner. Etter økten, returner matbeholdere til de matberøvede rottene. Neste dag, fjern matbeholdere fra kamrene til rottene som ble mettet på den første tilbakefallstesten.Gi de tidligere matberøvede rottene ubegrenset tilgang til mat før og under testen. Etter 24-timers matmangel, utfør tre timers heroinsøkende test, som demonstrert tidligere. I studien viste hannrotter en økning i søkespakpresser etter hvert som forsterkningsplanen økte.Et pålitelig, konsistent antall heroininfusjoner ble observert i løpet av treningsdagene. Under straffen reduserte rotter antall søkehåndtak og infusjoner med økningen av fotsjokkintensitet over åtte straffedager. I heroinsøkende test økte matmangeltilstanden signifikant heroinsøkende etter straffpålagt avholdenhet, og det ble ikke observert noen statistisk signifikant effekt for tid eller for narkotikasøking over tid på tvers av fôringsforhold Det er viktig å ta seg tid til å trene dyrene til å lære i grunnleggende søk og ta kjede under FR en.Uten dette trinnet vil dyrene ikke kunne gå videre i forsøkene. Etter å ha implementert modellen, kan vi nå designe eksperimenter som ser på nevrobiologien til stressindusert tilbakefall etter frivillig avholdenhet.

Research

JoVE Journal

Behavior

Assessment and Evaluation of the High Risk Neonate: The NICU Network Neurobehavioral Scale

Vurdering og evaluering av den høye risikoen Neonatal: The NICU Network nevro Scale

There has been a long-standing interest in the assessment of the neurobehavioral integrity of the newborn infant.  The NICU Network Neurobehavioral Scale ...

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

En prosedyre for å studere effekten av Langvarig mat begrensning på Heroin Søker i rusfrie Rats

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

En prosedyre å observere Context-indusert Fornyelse av Pavlovian kondisjonerte Alkohol-søkende atferd i Rats

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

A Dual Task Procedure Combined with Rapid Serial Visual Presentation to Test Attentional Blink for Nontargets

En Dual Oppgave Slik Kombinert med Rapid Serial Visuell presentasjon til Test oppmerksomhets Blink for Nontargets

When viewers search for targets in a rapid serial visual presentation (RSVP) stream, if two targets are presented within about 500 msec of each other, the ...

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

En musemodell for Subkronisk og Mild Social Defeat Stress for Forstå Stress-indusert atferdsmessige og fysiologiske Underskudd

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Rodent Brain Microinjection to Study Molecular Substrates of Motivated Behavior

Gnager Brain Mikroinjeksjon å studere Molecular Underlag av motiverte Behavior

Brain microinjection can aid elucidation of the molecular substrates of complex behaviors, such as motivation. For this purpose rodents can serve as ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Oppdage atferdsmessige underskudd i rotter etter traumatisk hjerneskade

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Utilizing the Modified T-Maze to Assess Functional Memory Outcomes After Cardiac Arrest

Benytter modifisert T-Maze å vurdere funksjonelle minne resultater etter hjertestans

Background: Evaluating mild to moderate cognitive impairment in a global cerebral ischemia (i.e. cardiac arrest) model can be difficult due to poor ...

A Method to Study Adaptation to Left-Right Reversed Audition

En metode for å studere tilpasning til venstre høyre reversert Audition

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the ...

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Gjenoppretting av narkotika-søker i mus bruker betinget sted preferanse paradigmet

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...