Name: a procedure to study stress-induced relapse of heroin seeking after punishment-imposed abstinence
Uploaded: 2022-03-23T14:00:00
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Este trabalho foi apoiado pelo Natural Sciences & Engineering Council Discovery Program (EUA: RGPIN-2016-06694).

Todos os ratos são tratados de acordo com as diretrizes do Conselho Canadense de Cuidados com Animais. A aprovação de todos os procedimentos experimentais foi concedida pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Universidade de Concórdia.
1. Animais
<ol><li>Adquira ratos Long Evans pesando 275-300 g (machos) ou 225-250 g (fêmeas). Ratos de casa dupla em gaiolas plásticas padrão com roupa de cama corncob e papel picado até a cirurgia.</li>
	<li>Mantenha os ratos em ...

<ol>
	<li>Jaffe, J. H., Gilman, A. G., Rall, T. W., Nies, A. S., Taylor, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+addiction+and+drug+abuse.">Drug addiction and drug abuse.</a> Goodman &amp; Gilman's the Pharmacological Basis of Therapeutics. , 522-573 (1990).</li><li>O'Brien, C. P., McLellan, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myths+about+the+treatment+of+addiction.">Myths about the treatment of addiction.</a> Lancet. 347, 237-240 (1996).</li><li>Miczek, K. A., de Wit, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Challenges+for+translational+psychopharmacology+research--some+basic+principles.">Challenges for translational psychopharmacology research--some basic principles.</a> Psychopharmacology (Berl). 199 (3), 291-301 (2008).</li><li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+does+stress+increase+risk+of+drug+abuse+and+relapse.">How does stress increase risk of drug abuse and relapse.</a> Psychopharmacology. 158, 343-359 (2001).</li><li>Cheskin, L. J., Hess, J. M., Henningfield, J., Gorelick, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calorie+restriction+increases+cigarette+use+in+adult+smokers.">Calorie restriction increases cigarette use in adult smokers.</a> Psychopharmacology. 179, 430-436 (2005).</li><li>Krahn, D., Kurth, C., Demitrack, M., Drewnowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+relationship+of+dieting+severity+and+bulimic+behaviors+to+alcohol+and+other+drug+use+in+young+women.">The relationship of dieting severity and bulimic behaviors to alcohol and other drug use in young women.</a> Journal of Substance Abuse. 4, 341-353 (1992).</li><li>Shalev, U., Highfield, D., Yap, J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stress+and+relapse+to+drug+seeking+in+rats:+studies+on+the+generality+of+the+effect.">Stress and relapse to drug seeking in rats: studies on the generality of the effect.</a> Psychopharmacology. 150, 337-346 (2000).</li><li>Peck, J. A., Ranaldi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+abstinence:+exploring+animal+models+and+behavioral+treatment+strategies.">Drug abstinence: exploring animal models and behavioral treatment strategies.</a> Psychopharmacology (Berl). 231 (10), 2045-2058 (2014).</li><li>Cooper, A., Barnea-Ygael, N., Levy, D., Shaham, Y., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conflict+rat+model+of+cue-induced+relapse+to+cocaine+seeking).">A conflict rat model of cue-induced relapse to cocaine seeking).</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 117-125 (2007).</li><li>Barnea-Ygael, N., Yadid, G., Yaka, R., Ben-Shahar, O., Zangen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cue-induced+reinstatement+of+cocaine+seeking+in+the+rat+&amp;#34;conflict+model&amp;#34;:+effect+of+prolonged+home-cage+confinement.">Cue-induced reinstatement of cocaine seeking in the rat &amp;#34;conflict model&amp;#34;: effect of prolonged home-cage confinement.</a> Psychopharmacology (Berl). 219 (3), 875-883 (2012).</li><li>Fredriksson, I., Applebey, S. V., Minier-Toribio, A., Shekara, A., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+the+dopamine+stabilizer+(-)-OSU6162+on+potentiated+incubation+of+opioid+craving+after+electric+barrier-induced+voluntary+abstinence.">Effect of the dopamine stabilizer (-)-OSU6162 on potentiated incubation of opioid craving after electric barrier-induced voluntary abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 45 (5), 770-779 (2020).</li><li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment:+effects+of+drug+taking+history.">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li><li>Marchant, N. J., Campbell, E. J., Kaganovsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Punishment+of+alcohol-reinforced+responding+in+alcohol+preferring+P+rats+reveals+a+bimodal+population:+Implications+for+models+of+compulsive+drug+seeking.">Punishment of alcohol-reinforced responding in alcohol preferring P rats reveals a bimodal population: Implications for models of compulsive drug seeking.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology &amp; Biological Psychiatry. 87, 68-77 (2018).</li><li>Krasnova, I. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incubation+of+methamphetamine+and+palatable+food+craving+after+punishment-induced+abstinence.">Incubation of methamphetamine and palatable food craving after punishment-induced abstinence.</a> Neuropsychopharmacology. 39 (8), 2008-2016 (2014).</li><li>Panlilio, L. V., Thorndike, E. B., Schindler, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinstatement+of+punishment-suppressed+opioid+self-administration+in+rats:+an+alternative+model+of+relapse+to+drug+abuse.">Reinstatement of punishment-suppressed opioid self-administration in rats: an alternative model of relapse to drug abuse.</a> Psychopharmacology (Berl). 168 (1-2), 229-235 (2003).</li><li>Economidou, D., Pelloux, Y., Robbins, T. W., Dalley, J. W., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+impulsivity+predicts+relapse+to+cocaine-seeking+after+punishment-induced+abstinence.">High impulsivity predicts relapse to cocaine-seeking after punishment-induced abstinence.</a> Biological Psychiatry. 65 (10), 851-856 (2009).</li><li>Sedki, F., D'Cunha, T., Shalev, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+procedure+to+study+the+effect+of+prolonged+food+restriction+on+heroin+seeking+in+abstinent+rats.">A procedure to study the effect of prolonged food restriction on heroin seeking in abstinent rats.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50751 (2013).</li><li>Venniro, M., Caprioli, D., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+drug+relapse+and+craving:+From+drug+priming-induced+reinstatement+to+incubation+of+craving+after+voluntary+abstinence.">Animal models of drug relapse and craving: From drug priming-induced reinstatement to incubation of craving after voluntary abstinence.</a> Progress in Brain Research. 224, 25-52 (2016).</li><li>Deroche-Gamonet, V., Piazza, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychobiology+of+cocaine+addiction:+Contribution+of+a+multi-symptomatic+animal+model+of+loss+of+control.">Psychobiology of cocaine addiction: Contribution of a multi-symptomatic animal model of loss of control.</a> Neuropharmacology. 76, 437-449 (2014).</li><li>Pelloux, Y., Everitt, B. J., Dickinson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+drug+seeking+by+rats+under+punishment:+effects+of+drug+taking+history.">Compulsive drug seeking by rats under punishment: effects of drug taking history.</a> Psychopharmacology (Berl). 194 (1), 127-137 (2007).</li><li>Epstein, D. H., Kowalczyk, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compulsive+seekers:+Our+take.+Two+clinicians'+perspective+on+a+new+animal+model+of+addiction.">Compulsive seekers: Our take. Two clinicians' perspective on a new animal model of addiction.</a> Neuropsychopharmacology. 43 (4), 677-679 (2018).</li><li>Hser, Y. I., Hoffman, V., Grella, C. E., Anglin, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+33-year+follow-up+of+narcotics+addicts.">A 33-year follow-up of narcotics addicts.</a> Archives of General Psychiatry. 58 (5), 503-508 (2001).</li><li>Chen, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescuing+cocaine-induced+prefrontal+cortex+hypoactivity+prevents+compulsive+cocaine+seeking.">Rescuing cocaine-induced prefrontal cortex hypoactivity prevents compulsive cocaine seeking.</a> Nature. 496 (7445), 359-362 (2013).</li></ol>

Há duas demonstrações importantes neste jornal. Primeiro, a validação da abstinência imposta pela punição usando a busca e a cadeia com heroína. Em segundo lugar, foi demonstrado que a recaída induzida pelo estresse poderia ser observada em um procedimento de abstinência imposta por punição. Estas são demonstrações importantes porque (i) O procedimento de abstinência induzido pela punição imita mais de perto a condição humana, pois resulta em abstinência voluntária, ou seja, não devido à extinç?...

A recaída é o problema mais desafiador no tratamento do uso de drogas 1,2. No entanto, apenas um punhado de tratamentos farmacológicos são aprovados para ajudar a evitar a recaída em humanos3. A epidemia de opioides que a América do Norte enfrenta atualmente é um exemplo marcante disso, e exige considerar diferentes abordagens sobre modelos animais de recaída aos opioides.
O estresse agudo tem se mostrado um gatilho chave para a recaída em humanos4. Um estressor ambiental que muitas vezes está associado ao vício em drogas é a privação de alimentos. Os usuários de drogas muitas vezes optam por alocar recursos para a obtenção de drogas em vez de alimentos. O déficit calórico mostrou-se correlacionado com maior recaída ao usode cigarros 5 e álcool6. Devido a questões éticas e práticas, modelos animais foram desenvolvidos ao longo das últimas décadas para facilitar a pesquisa no campo. Em modelos animais, a privação aguda de alimentos tem sido demonstrada para restabelecer robustamente a heroína extinta em buscade 7. Atualmente, a maioria dos modelos animais de recaída baseia-se em procedimentos de abstinência que não são representativos da abstinência humana (por exemplo, modelos baseados em extinção) ou abrangem apenas a pequena porcentagem de usuários de drogas que são forçados a se abster devido ao encarceramento ou tratamento de internação (por exemplo, modelos de abstinência forçada). A principal razão pela qual os usuários de drogas optam por abster-se são as consequências negativas associadas à busca e tomada dedrogas 8. A abstinência imposta pela punição é um modelo animal que imita as consequências negativas associadas à busca de drogas na abstinência auto-imposta em humanos. Este modelo introduz um estímulo aversivo, por exemplo, um leve choque de pés, com busca ou tomada de drogas, o que leva o animal a parar de tomar a droga voluntariamente. Outro procedimento que incorpora consequências negativas para a busca de drogas é o modelo de conflito de barreiras elétricas para abstinência de drogas e recaída9. O rato deve atravessar uma barreira elétrica para executar o comportamento operante ligado à autoadministração de drogas. O modelo foi utilizado com sucesso para demonstrar abstinência voluntária e recaída para psicostimulantes e drogas opioides10,11. No entanto, sob o procedimento de barreira elétrica, os esforços de busca de drogas estão sempre associados a um evento aversivo, ao contrário da condição humana. Além disso, o consumo de drogas em si pode se sobrepor com o choque elétrico do pé à medida que o animal retorna à área segura após a infusão cruzando a barreira novamente.
A abstinência imposta pela punição tem sido usada com outras drogas de abuso, como cocaína12, álcool13, metanfetamina14, remifentanil15, mas nunca foi aplicada a animais treinados com heroína. O modelo tem sido usado para estudar a recaída induzida pela escoração14 e pistas associadas a drogas16, mas não foi integrado a um procedimento de recaída induzido pelo estresse. O procedimento descrito aqui é usado para demonstrar recaída aguda induzida por privação alimentar à heroína em busca de abstinência imposta por punição em ratos machos.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anafen Injection 100 mg/mL Vial/50 mL</td>
			<td>MERIAL Canada, Inc.</td>
			<td>1938126</td>
			<td>anti-inflammatory drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balance arm</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H29-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cannulae (22 G, 5-up)</td>
			<td>Plastics One</td>
			<td>C313G-5up</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Environment connection board &#38; Linc cable</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H03-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed speed infusion pump (3.3 RPM)</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>A73-01-3.3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GE Marine Silicon</td>
			<td>GE</td>
			<td>SE-1134</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphic State Notation 3</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>GS3</td>
			<td>Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Habitest universal Linc</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H02-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heroin HCl</td>
			<td>National Institute for Drug Abuse, Research Triangle Park, NC, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>House light-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H11-01R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isofluorane USP 99.9% Vial/250 mL</td>
			<td>Fresenius Kabi Canada Ltd</td>
			<td>2237518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid Swivels, Plastic, 22 G</td>
			<td>Lomir Biomedical, Inc.</td>
			<td>RSP1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat test cage</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H10-11R-TC</td>
			<td>Operant conditioning chambers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractable lever-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H23-17RA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silastic tubing (ID 0.02, OD 0.037)</td>
			<td>Fisher Scientific (Canada)</td>
			<td>1118915A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Single high-bright cue-Rat</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H11-03R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sound attenuation boxes</td>
			<td>Concordia University</td>
			<td>Home made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steal grid floor</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H10-11R-TC-SF</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>System controller 2</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>SYS CTRL 2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>System power base</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H01-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tone module 2.9 KHz</td>
			<td>Coulbourn Instruments</td>
			<td>H12-02R-2.9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon tubing (ID 0.02, OD 0.060)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>63018-044</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a procedure to study stress-induced relapse of heroin seeking after punishment-imposed abstinence

O procedimento de abstinência imposta pela punição modela a abstinência auto-imposta que os humanos iniciam devido às consequências adversas associadas ao consumo de drogas. Este modelo tem sido implementado em experimentos usando diferentes tipos de substâncias de abuso, como metanfetamina, cocaína e álcool. No entanto, a abstinência induzida por punição em animais treinados com heroína não foi demonstrada. Além disso, o estresse agudo é um gatilho chave para a recaída em humanos e modelos animais. Foi demonstrado anteriormente que a privação aguda de alimentos induziu robustamente a reintegração de cocaína e heroína extintas. O procedimento descrito aqui pode ser usado para avaliar os efeitos da exposição aguda ao estresse na heroína em busca de abstinência após a abstinência imposta pela punição. Um total de 8 ratos foram implantados com cateteres intravenosos crônicos (i.v.) e treinados para auto-administrar heroína (0,1 mg/kg/infusão) por 18 dias sob um cronograma acorrentado. Completar o link de busca deu acesso à alavanca de tomada, que foi emparelhada com uma infusão de heroína. A alavanca de busca foi programada com um intervalo variável de 60 de reforço (VI60), e a alavanca de tomada foi programada com um cronograma de reforço de relação 1 fixa (FR1). Após o treinamento de autoadministração, um leve choque no pé foi entregue em 30% dos links de busca completas em vez da extensão da alavanca de tomada. A intensidade do footshock aumentou 0,1 mA por sessão diária de 0,2 mA para 1,0 mA. Os testes de busca de heroína foram realizados após 24h de privação alimentar (DF) ou condições saciadas. Ratos sob condição aguda de privação alimentar aumentaram robustamente a busca de heroína após a abstinência imposta pela punição.

Ratos machos demonstraram um aumento nas prensas de alavanca de busca à medida que o cronograma de reforço aumentava ao longo dos dias de treinamento, e um número confiável e consistente de infusões de heroína durante os dias de treinamento (Figura 1). Durante a punição, os ratos diminuíram o número de pressões e infusões de alavanca de busca com o aumento da intensidade do choque dos pés ao longo de 8 dias de punição (Figura 2). A condição de p...

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A Procedure to Study Stress-Induced Relapse of Heroin Seeking after Punishment-Imposed Abstinence

Um procedimento que demonstra uma robusta recaída induzida por privação alimentar aguda à heroína em busca de abstinência após a abstinência imposta pela punição é descrita. Um modelo de abstinência imposta pela punição foi implementado com sucesso usando o cronograma de busca e ação para a autoadministração da heroína. Os testes de busca de heroína são realizados após 24 horas de estresse de privação alimentar.

Um procedimento para estudar a recaída induzida pelo estresse da busca de heroína após a abstinência imposta pela punição

The punishment-imposed abstinence procedure models the self-imposed abstinence that humans initiate due to the adverse consequences associated with ...

É a primeira vez que a recaída induzida pelo estresse à heroína é mostrada após a abstinência imposta pela punição. Esses métodos poderiam nos ajudar a entender o mecanismo neuronal subjacente à recaída induzida pelo estresse em humanos após a abstinência voluntária. Usando a privação alimentar e punição imposta abstinência, estamos imitando mais de perto a condição humana e trazendo validade ecológica para modelos animais de recaída.Comece definindo as câmaras de condicionamento operantes como descrito no manuscrito. Após a recuperação da cirurgia, habite o rato na câmara de treinamento operante por 24 horas antes de iniciar o protocolo sem anexar o rato à mola metálica. Coloque o rato alojado nas câmaras operísticas durante todo o experimento.Em seguida, conecte o conector de 5up ao tubo Tygon e à mola metálica. Inicie a sessão de treinamento no início da fase escura do ciclo de luz invertido. Para a autoadministração da heroína, a alavanca de tomada deve estar disponível sob a razão fixa um, ou FR um.Programe cada ensaio para começar com a inserção da alavanca de tomada e acendendo a luz da casa. Uma vez que o rato pressione a alavanca de tomada uma vez, retraia a alavanca de tomada, liga a luz da deixa acima da alavanca e tonifica para um período de intervalo de 20 segundos. Desligue a luz da casa e permita a entrega de 0,13 mililitros de infusão de heroína a uma dose de 0,1 miligrama por quilograma.Em seguida, programe um intervalo de intertridação de 30 segundos no qual não são apresentadas pistas, a luz da casa é desligada e a alavanca é retraída. Para o próximo teste, insira a alavanca de tomada e ligue a luz da casa. Para a autoadministração com a cadeia de busca em fr um, programe o sistema de treinamento operante para inserir apenas a alavanca de busca e acender a luz da casa para sinalizar o início da sessão com a alavanca de tomada em um estado retraído.Uma vez que o rato pressiona uma vez na alavanca de busca, o programa retrai a alavanca de busca e insere a alavanca de tomada. Uma prensa na alavanca de tomada retrai a alavanca de tomada e inicia o procedimento de ligar a luz do sinalização, e um intervalo de 30 segundos de intertrial, como demonstrado anteriormente. Após o intervalo intertrial, programe o sistema de treinamento operante para inserir a alavanca de busca e acender a luz da casa para sinalizar o início do próximo ensaio.Em seguida, programe todas as etapas para a autoadministração com uma cadeia de busca sob a proporção fixa um, como demonstrado anteriormente com a introdução de um intervalo variável de cinco por três dias como o novo cronograma de reforço na alavanca de busca. Configure o software para permitir que a primeira prensa na alavanca de busca ative o intervalo variável de cinco horários. Permita que o software selecione aleatoriamente um intervalo de uma lista de 0,1, 5 e 10 segundos, resultando em um intervalo médio de cinco segundos.Após o intervalo selecionado ter transcorrido, a primeira prensa de alavanca de busca retrai a alavanca de busca e estende a alavanca de tomada. Depois de seguir as etapas para a alavanca de tomada, e como o ensaio termina, treine o rato por cinco dias sob o intervalo variável 30 horário para o link de busca. Para isso, permita que o software selecione aleatoriamente um tempo de uma lista de 15, 30 e 45 segundos por uma média de 30 segundos.Em seguida, treine ratos por três dias sob intervalo variável 60 horários, permitindo que o software selecione aleatoriamente um tempo de uma lista de 45, 60 e 75 segundos. Para abstinência imposta pela punição, realize sessões de punição por oito dias com supervisão regular para garantir que os ratos não apresentem sinais de dor anormal ou quaisquer problemas de saúde. Inicie as sessões de punição com a inserção da alavanca de busca e acendendo a luz da casa.Programe o sistema de treinamento operante para que após completar o link de busca no intervalo variável 60, a alavanca de busca se retrai, a luz da casa é desligada, e um leve choque no pé é administrado ao rato em 30% dos links de busca completas em vez de inserção da alavanca de tomada. A alavanca de tomada se estende sobre os outros 70% dos links de busca concluídos como no julgamento regular de autoadministração. Depois de programar um intervalo intertrial de sete minutos, coloque a intensidade de choque do pé em 0,2 miliamperes, e aumente em 0,1 miliamperes por dia de punição até 1,0 miliamperes.Uma vez que o rato pressione a alavanca de tomada, repita a razão fixa um passo para retração da alavanca, entrega de infusão de heroína e apresentação das pistas seguidas de intervalo intertrial de sete minutos. Após o último dia da abstinência imposta pela punição, remova os funis alimentares das câmaras para ratos que passam por um teste de recaída induzido pela privação alimentar, e mantenha os funis de alimentos para o grupo saciado. Proporcionar acesso ilimitado à água em ambos os grupos e supervisionar a saúde dos animais.Após 24 horas de privação alimentar, prossiga para um teste de busca de heroína induzido por privação alimentar de três horas sob um intervalo variável de 60 horários com um intervalo intertrial de sete minutos sem choque ou infusões de heroína sendo entregues. Após a sessão, devolva os alimentos aos ratos privados de comida. No dia seguinte, remova os funis de comida das câmaras dos ratos que foram saciados no primeiro teste de recaída.Permita aos ratos anteriormente privados de alimentos acesso ilimitado aos alimentos antes e durante o teste. Após 24 horas de privação alimentar, realize três horas de teste de busca de heroína, como demonstrado anteriormente. No estudo, os ratos machos demonstraram um aumento nas prensas de alavanca de busca à medida que o cronograma de reforço aumentava.Um número confiável e consistente de infusões de heroína foi observado durante os dias de treinamento. Durante a punição, os ratos diminuíram o número de pressões e infusões de alavancas de busca com o aumento da intensidade de choque do pé ao longo de oito dias de punição. No teste de busca de heroína, a condição de privação de alimentos aumentou significativamente a busca de heroína após a abstinência imposta pela punição, e nenhum efeito estatisticamente significativo foi observado para o tempo nem para a busca de drogas ao longo do tempo em condições de alimentação É importante ter tempo para treinar os animais para aprender na busca básica e tomar cadeia sob a FR um.Sem esse passo, os animais não serão capazes de avançar nos experimentos. Depois de implementar o modelo, agora podemos projetar experimentos que analisam a neurobiologia da recaída induzida pelo estresse após abstinência voluntária.

Research

JoVE Journal

Behavior

Assessment and Evaluation of the High Risk Neonate: The NICU Network Neurobehavioral Scale

Análise e Avaliação do Risco Neonatal Alta: A Escala de UTIN Rede Neurobehavioral

There has been a long-standing interest in the assessment of the neurobehavioral integrity of the newborn infant.  The NICU Network Neurobehavioral Scale ...

Comportamento

A Procedure to Study the Effect of Prolonged Food Restriction on Heroin Seeking in Abstinent Rats

Um procedimento para estudar o efeito da restrição alimentar prolongada em heroína Buscando em ratos abstinentes

In human drug addicts, exposure to drug-associated cues or environments that were previously associated with drug taking can trigger relapse during ...

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

Um procedimento para Observar Renovação induzida por Contexto de pavloviano condicionado Comportamento Álcool-seeking em Ratos

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

A Dual Task Procedure Combined with Rapid Serial Visual Presentation to Test Attentional Blink for Nontargets

A Tarefa Procedimento dupla Combinado com apresentação visual Serial rápida para testar Attentional Blink para Nontargets

When viewers search for targets in a rapid serial visual presentation (RSVP) stream, if two targets are presented within about 500 msec of each other, the ...

A Mouse Model of Subchronic and Mild Social Defeat Stress for Understanding Stress-induced Behavioral and Physiological Deficits

Um modelo de mouse subcrónica e Mild Derrota social Estresse para Compreender déficits comportamentais e fisiológicas induzida por estresse

Stressful life events often increase the incidence of depression in humans. To study the mechanisms of depression, the development of animal models of ...

Rodent Brain Microinjection to Study Molecular Substrates of Motivated Behavior

Roedor Cérebro microinjeção para estudar substratos moleculares do comportamento motivado

Brain microinjection can aid elucidation of the molecular substrates of complex behaviors, such as motivation. For this purpose rodents can serve as ...

Detecting Behavioral Deficits in Rats After Traumatic Brain Injury

Detecção de défices comportamentais em ratos após lesão cerebral traumática

With the increasing incidence of traumatic brain injury (TBI) in both civilian and military populations, TBI is now considered a chronic disease; however, ...

Utilizing the Modified T-Maze to Assess Functional Memory Outcomes After Cardiac Arrest

Utilizando o ZIF modificados para avaliar resultados de memória funcional após parada cardíaca

Background: Evaluating mild to moderate cognitive impairment in a global cerebral ischemia (i.e. cardiac arrest) model can be difficult due to poor ...

A Method to Study Adaptation to Left-Right Reversed Audition

Um método para estudar a adaptação para a esquerda-direita invertida audição

An unusual sensory space is one of the effective tools to uncover the mechanism of adaptability of humans to a novel environment. Although most of the ...

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Reintegração de busca de drogas em ratos utilizando o paradigma de preferência lugar condicionado

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...