Name: nitroreductase/metronidazole-mediated ablation and a matlab platform (rpegen) for studying regeneration of the zebrafish retinal pigment epithelium
Uploaded: 2022-03-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nitroreductase/Metronidazole-Mediated Ablation and a MATLAB Platform RpEGEN for Studying Regeneration of the Zebrafish Retinal Pigment Epithelium at JoVE.com

此处描述的工作得到了美国国立卫生研究院的支持（RO1-EY29410至J.M.G，NIH CORE Grant P30-EY08098至眼科）;UPMC 免疫移植和治疗中心（L.L.L. 和 J.M.G.）;和E. Ronald Salvitti眼科研究主席（致J.M.G.）。此外，还获得了韦根眼科奖学金（L.L.L）、匹兹堡眼耳基金会（Eye & Ear Foundation of Pittsburgh）的额外支持，以及纽约州纽约预防失明研究的无限制资助。作者还要感谢Amanda Platt的技术援助，以及Hugh Hammer博士和水上运动人员提供的出色动物护理支持。

此处概述的所有方法均符合匹兹堡大学机构动物护理和使用委员会（IACUC）的要求。
1.斑马鱼胚胎收集前的准备
<ol><li>将胚胎培养箱设置为28.5°C。</li>
	<li>制备黑色素生成抑制剂N-苯基硫脲（PTU）21，22的25x储备溶液。该储备溶液根据常用配方22进行缩放，1x等于每体积0.003%重量（%w / v）（例如，...

该协议描述了对RPE进行遗传消融的方法，并研究了幼体年龄斑马鱼的变性和再生机制。该方案也已在成年斑马鱼3 中成功实施，但表征范围较小，这就是为什么幼虫是这里的重点。方案这一部分的关键方面（步骤1-4）包括：1）在黑色素发生开始之前向胚胎添加1.5倍PTU，2）以2-3 dpf对PTU处理的胚胎进行去壳化，3）仔细筛查eGFP，以及4）MTZ基因消融期间水的变化时间。PTU抑制黑色素?...

本文描述的方法详细说明了利用斑马鱼幼虫遗传消融视网膜色素上皮（RPE）的方案。RPE延伸到眼睛的后部，位于神经视网膜的分层层和构成脉络膜的脉管系统层之间。营养支持，光毒性光的吸收和视觉周期蛋白的维持只是RPE执行的一些关键功能，这些功能对于维持这些相邻组织的健康和完整性至关重要1。当病变较小时，对哺乳动物RPE的损害是可以修复的2;然而，较大的损伤或进行性退行性疾病所遭受的损害是不可逆的。在人类中，RPE 退行性疾病（例如，年龄相关性黄斑变性 （AMD） 和 Stargardt 病）导致永久性视力丧失，并且由于可用的治疗选择很少，患者生活质量下降。哺乳动物RPE自我修复能力有限，这在RPE再生过程领域造成了知识空白。鉴于斑马鱼在许多不同组织类型中具有强大的再生能力，该方案旨在建立 体内 脊椎动物系统，以促进对内在再生RPE的研究，并揭示驱动该反应的机制。使用此处概述的消融范式，规范的Wnt信号通路3，mTOR通路4和免疫相关反应5 已被确定为RPE再生的关键介质，可能具有重叠的功能。
在这种遗传消融范式中，斑马鱼（rpe65a：nfsB-eGFP）3表达细菌来源的硝基还原酶（NTR / nfsB）基因6在RPE增强子元件rpe65a7的控制下融合到eGFP。消融是通过在斑马鱼系统水中加入前体药物甲硝唑（MTZ）来实现的。硝基还原酶对MTZ的细胞内活化导致NTR / nfsB表达细胞8，9中的DNA交联和凋亡。该技术已广泛应用于斑马鱼中，以消融视网膜10，11，12，13和其他组织的细胞8。这些元素共同实现了诱导细胞消融方法（NTR / MTZ）8，9和荧光标记物（eGFP）的靶向表达（rpe65a）以进行可视化。
还存在其他有趣的 体内 模型，可用于研究RPE14的再生潜力。这些是广泛的，包括两栖动物视网膜切除术后的RPE到视网膜转分化，其中因视网膜再生而失去的RPE细胞被替换15，16;RPE修复损伤后“超强愈合”MRL/MpJ小鼠17;和自发性RPE和视网膜变性18的大鼠模型中RPE增殖的外源性刺激等。体 外 模型，如成人人RPE干细胞（RPESCs）19 也被开发出来。这些模型都是有价值的工具，用于揭示与RPE再生相关的细胞过程（例如，增殖，分化等）;然而，斑马鱼在消融后具有固有的RPE修复能力方面是独一无二的。
虽然这里的方法是为了专注于理解驱动RPE再生的机制， 但Tg（rpe65a：nfsB-eGFP） 系和这种遗传消融方案可用于研究其他细胞过程，如RPE凋亡，RPE变性以及RPE损伤对邻近视网膜和血管组织的影响。消融方案也可以修改以包括药物操作，这是筛选目标信号通路的便捷初步策略。例如，使用 Wnt 反应抑制剂 -1 （IWR-1）20 阻断规范的 Wnt 途径已被证明会损害 RPE 再生3。这里重复了这一点，以指导用户完成药理学操作实验，并作为概念验证，以验证为根据色素沉着的恢复来量化RPE再生而创建的MATLAB脚本（RpEGEN）。与转基因系和消融方案一样，RpEGEN脚本具有适应性，可用于量化RPE中的其他标记物/细胞过程。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Lab Material/Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride (DAPI)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>D9542</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well plates</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>07-200-83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Polypropylene Centrifuge Tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>05-539-13</td>
			<td>Catalog number is for 50 mL tubes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond tip scribing pen</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>50-254-51</td>
			<td>Manufactured by Electron Microscopy Sciences, items similar to this part number are adequate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO) &#8805;99.7 %</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP231</td>
			<td>Check instiutional chemical waste disposal requirements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embryo incubator (large)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>3720A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embryo incubator (mini/tabletop)</td>
			<td>Labnet</td>
			<td>I5110A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence stereo microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Axio Zoom.V16</td>
			<td>Or similar, with 488 nm excitation laser/filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass Pasteur pipette</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>13-678-4</td>
			<td>Manufactured by Corning, non-sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>InSolution Wnt Antagonist I, IWR-1-endo</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>5.04462</td>
			<td>Manufactured by Calbiochem; 25 mM in DMSO; check instiutional chemical waste disposal requirements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methylene blue (powder)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP117-100</td>
			<td>Also available as a premade aqeuous solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metronidazole (MTZ)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>M3761</td>
			<td>Check instiutional chemical waste disposal requirements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-phenylthiourea (PTU)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P7629</td>
			<td>Check instiutional chemical waste disposal requirements</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde (16 % w/v) methanol free</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AA433689M</td>
			<td>Chemical waste, proper disposal required</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB0875712</td>
			<td>10 cm diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (powder packets)</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Used to make 10 X PBS stock</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pronase</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>PRON-RO</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shaking incubator</td>
			<td>Benchmark</td>
			<td>H2010</td>
			<td>Used for incubating MTZ for 1 hour at 37 degrees Celcius</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>S9i</td>
			<td>Or similar, with transmitted light illumination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Dumont #5 forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91150-20</td>
			<td>Fine-tipped forceps for manual dechorionation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tabletop rotator/shaker</td>
			<td>Scilogex</td>
			<td>SK-D1807-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>Z135003</td>
			<td>3.2 mL bulb draw, non-sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine methanesulfonate (MS-222)</td>
			<td>Pentair</td>
			<td>TRS1, TRS2, TRS5</td>
			<td>Also available from Fisher Scientific (NC0342409)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium with DAPI</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software Material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FIJI (Fiji is Just ImageJ)</td>
			<td>FIJI (Fiji is Just ImageJ)</td>
			<td>https://imagej.net/software/fiji/</td>
			<td>Version: 2.0.0-rc-69/1.52p; Build: 269a0ad53f; Plugin needed: Bio-Formats</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GRAMM examples and how-tos</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td>https://www.mathworks.com/matlabcentral/fileexchange/54465-gramm-complete-data-visualization-toolbox-ggplot2-r-like.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td>https://www.mathworks.com/products/get-matlab.html</td>
			<td>Toolboxes needed to run RpEGEN: Image Processing Toolbox, Curve Fitting Toolbox, Statistics and Machine Learning Toolbox</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MATLAB support</td>
			<td>MathWorks</td>
			<td>https://www.mathworks.com/support.html</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

nitroreductase/metronidazole-mediated ablation and a matlab platform (rpegen) for studying regeneration of the zebrafish retinal pigment epithelium

视网膜色素上皮（RPE）位于眼睛的后部，执行维持邻近视网膜和血管组织的健康和完整性所必需的功能。目前，哺乳动物RPE的修复能力有限，仅限于小损伤，阻碍了理解 体内 RPE再生过程的进展。在这里，提供了一个详细的方法，以促进利用斑马鱼的 体内 RPE修复的研究，斑马鱼是一种能够进行强大组织再生的脊椎动物模型。该方案描述了转基因硝基还原酶/甲硝唑 （NTR/MTZ） 介导的损伤范式 （rpe65a：nfsB-eGFP），其在 MTZ 治疗 24 小时后可消融 24 小时后消融 RPE 的中央三分之二，随后组织恢复。重点放在斑马鱼幼虫的RPE消融上，并概述了测试药理学化合物对RPE再生的影响的方法。还讨论了RpEGEN的生成和验证，RpEGEN是一种MATLAB脚本，用于基于色素沉着自动量化RPE再生。除了活性RPE修复机制外，该方案还可以扩展到RPE变性和损伤反应的研究，以及RPE损伤对邻近视网膜和血管组织以及其他细胞和分子过程的影响。这种斑马鱼系统在识别驱动RPE再生和RPE疾病相关机制的基因，网络和过程方面具有重大前景，其长期目标是将这些知识应用于哺乳动物系统，并最终实现治疗发展。

已知抑制规范的Wnt信号通路会显着损害斑马鱼RPE再生使用方案3中描述的遗传消融范式（rpe65a：nfsB-eGFP）和药理学操作方法（IWR-1）。本文重复该实验，验证了一种基于色素沉着的斑马鱼RPE再生量化自动化方法。下面总结的结果涵盖了方案的所有步骤，从受精当天（0 dpf）到使用RpEGEN量化RPE再生。
在斑马鱼幼体中实施RPE消融方案（通过药物操作）<...

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Nitroreductase/Metronidazole-Mediated Ablation and a MATLAB Platform RpEGEN for Studying Regeneration of the Zebrafish Retinal Pigment Epithelium

该协议描述了使用转基因斑马鱼模型对视网膜色素上皮（RPE）进行遗传消融的方法。使用药理学化合物调整方案以纳入信号通路调节被广泛详细。开发了一种基于色素沉着的量化RPE再生的MATLAB平台，并进行了介绍和讨论。

硝基还原酶/甲硝唑介导的消融和MATLAB平台（RpEGEN）研究斑马鱼视网膜色素上皮的再生

The retinal pigment epithelium (RPE) resides at the back of the eye and performs functions essential for maintaining the health and integrity of adjacent ...

斑马鱼的独特之处在于其再生许多不同组织类型（包括RPE）的内在能力。该协议可用于鉴定驱动RPE再生和RPE疾病相关机制的分子途径。多功能性是这种方法的主要优势。除了研究RPE再生外，该方案还可用于检查RPE退行性过程以及RPE损伤对眼睛邻近组织的影响。哺乳动物，包括人类，无法修复由创伤或退行性疾病引起的大型RPE损伤。使用斑马鱼作为发现RPE促再生因子的工具是促进哺乳动物RPE再生的重要一步。为了制备新鲜的10毫摩尔MTZ溶液，在受精后五天，将MTZ粉末加入到没有PTU的系统水中，并通过在37摄氏度下剧烈摇动一小时彻底混合。在室温下在台式旋转器或摇床上冷却10毫摩尔MTZ溶液一小时。为了从rpe65a：nsfB-eGFP转基因中筛选斑马鱼幼虫，使用具有488纳米激发激光的荧光立体显微镜将转基因eGFP阳性幼虫与非转基因eGFP阴性幼虫分开。通过将直接移液到培养皿中，将筛选的幼虫立即唤醒，其中含有新鲜的1.5倍PTU，不含三卡因。在完成筛选后，将eGFP阳性幼虫进一步分离成两组培养皿，一组接受MTZ处理，一组作为未减压对照组。然后通过从消融处理皿中除去1.5X PTU并加入新鲜制作的10毫摩尔MTZ溶液来消融视网膜色素上皮。同时从未升压的控制培养皿中取出1.5倍PTU，并在没有PTU的情况下加入新鲜系统水。在正好24小时后取出10毫摩尔MTZ溶液，并在没有PTU的情况下加入新鲜的系统水。更换MTZ负极盘上没有PTU的新鲜系统水。在受精后四天筛查eGFP阳性幼虫。eGFP在受精后四天可见，但在第五天看起来比信号强度更暗。将eGFP阳性幼虫放入六孔平板而不是培养皿中，密度不超过每孔10只幼虫进行药物治疗。为消融和未消融的幼虫指定单独的六孔板。确定所需的 15 微摩尔 IWR-1 或体积匹配的 DMSO 车辆控制预处理的体积，并相应地将 1.5 倍 PTU 等分到锥形管中。将 IWR-1 原液加入 1.5 倍 PTU，最终浓度为 15 微摩尔 IWR-1。将匹配体积的 DMSO 库存添加到 1.5 倍 PTU。通过涡旋充分混合，并直观地确认化合物的溶解。从六孔板中的eGFP阳性幼虫中除去1.5倍PTU，每孔加入5毫升新鲜制作的0.06%DMSO或15微摩尔IWR-1处理。第二天消融RPE。在受精后五天，确定未升压和烧蚀六孔板所需的药理学和载体对照处理的体积，并将适当体积的没有PTU的淡水系统水或10毫摩尔MTZ溶液等分试样到锥形管中。如前所述，将 IWR-1 和 DMSO 储备溶液添加到相应的锥形管中。通过涡旋充分混合，并直观地确认化合物的溶解。从指定的未升压和烧蚀的六孔板中去除1.5X PTU中的0.06%DMSO和15微摩尔IWR-1预处理。补充适当的新鲜系统水，无需 PTU 和 MTZ 溶液处理。在 10 毫摩尔 MTZ 溶液中，精确 24 小时后，在 0.06% DMSO 和 15 微摩尔 IWR-1 处理液中去除，并在没有 PTU 的新鲜系统水中补充处理。在未升压的六孔板上补充0.06%DMSO和15微摩尔IWR-1处理，无需PTU的新鲜系统水。使用体视显微镜上的透射光照明监测体内消融的成功和程度，以进行遗传消融后的幼虫维持。要使用斐济生成感兴趣的RPE区域或ROI，请打开一个八位TIFF图像，通过选择图像，变换和水平翻转来重新定向图像，使背侧向上，远端左侧。对于最后一个命令，请选择最适合该图像所需的方向性的选项。通过选择分析，工具，ROI管理器来启动ROI管理器。使用图像、缩放并在 DAPI 和明场通道之间切换。使用键盘快捷键提高效率。确定RPE的顶端侧与外限制膜尖端相邻的点，并将此解剖标志作为ROI起点。使用斐济工具栏中的多边形选择工具创建 RPE ROI，同时使用 DAPI 和明场图像通道以及图像缩放功能来识别顶端和基础 RPE 边界。将ROI的背端和腹端带到一个尖锐的点，而不是钝化或圆润。通过在 ROI 管理器中单击添加来添加 ROI。通过选择更多来保存 ROI 文件，然后在 ROI 管理器中保存。双击 rpegen。m 文件，以便在编辑器窗格中打开。在用户定义的变量部分下，rpegen。m 文件中，输入包含 roi 文件的文件夹的目录位置、tiff 图像文件以及应保存输出文件的位置。输入要导出的 mat 文件的组名以及 Brightfield 通道在 TIFF 图像堆栈中的位置。通过单击 MATLAB 顶部编辑器菜单中的“运行”按钮来运行脚本。保存MAT文件后，将出现一个三面板图，并且还将作为PDF保存到每次图像运行的输出目录中。等到这些质量控制PDF保存到输出文件夹，最后一个数字消失了。打开各个 PDF 并验证所有 ROI 是否与明场图像匹配。双击rpegen_permplot。m 文件，以便在新的编辑器选项卡中打开。在“单用户定义变量”部分下，输入包含运行 rpegen 的 MAT 文件的输出文件夹的目录位置。m 脚本。输入要加载的每个 MAT 文件名。通过单击编辑器菜单中的“运行部分”按钮来运行脚本的此部分。在第二部分中，输入两组的名称，以便在数据 A 和数据 B 变量中进行统计比较，并在 reps 变量中指定排列模拟重复次数。此演示仅使用了 2，000 次重复，以缩短处理时间。通过单击编辑器菜单中的“运行部分”按钮来运行脚本的此部分。运行热点图，并使用运行部分按钮对结果和 P 值部分进行独立分组。受精后5天幼虫的整个坐位损伤在筛选遗传消融时在RPE中显示出明亮的转基因表达。未凋息的受精后6天幼虫的横向冷冻切片显示转基因表达仅限于成熟的RPE细胞，其最亮的表达仅限于RPE的中央2/3。箭头表示顶端微绒毛。对损伤后一天的消融幼虫进行横切冷冻，显示eGFP阳性细胞形态紊乱。箭头表示皮指核。未凋息的受精后7 d幼虫的整个坐位损伤在整个眼睛中显示RPE色素沉着，并且在损伤后两天消融的幼虫在中央RPE中显示消融区没有色素。使用RpEGEN生成的图显示，在整个RPE长度上，未实施的受精后9天DMSO和IWR-1组之间存在相似性。该图显示，在损伤后消融四天的DMSO和IWR-1组中，与任何其他治疗组相比，消融IWR-1组的总体像素强度最轻。在比较消融的IWR-1处理的幼虫和消融的DMSO处理的对照组时，中枢RPE色素沉着的差异是显着的。使用这种斑马鱼消融范式，我们已经能够识别出几种分子信号通路，例如我们在这里展示的风信号通路，它们是RPE再生的关键调节因子。

Research

JoVE Journal

Biology

Nitroreductase/Metronidazole-Mediated Ablation and a MATLAB Platform (RpEGEN) for Studying Regeneration of the Zebrafish Retinal Pigment Epithelium

A System for Culturing Iris Pigment Epithelial Cells to Study Lens Regeneration in Newt

一个系统为培养虹膜色素上皮细胞，研究蝾螈镜头再生

Salamanders like newt and axolotl possess the ability to regenerate many of its lost body parts such as limbs, the tail with spinal cord, eye, brain, ...

科研

生物学

Laser Ablation of the Zebrafish Pronephros to Study Renal Epithelial Regeneration

激光烧蚀斑马鱼Pronephros研究肾小管上皮再生

Acute kidney injury (AKI) is characterized by high mortality rates from deterioration of renal function over a period of hours or days that culminates in ...

MicroRNA Expression Profiles of Human iPS Cells, Retinal Pigment Epithelium Derived From iPS, and Fetal Retinal Pigment Epithelium

人类iPS细胞的微小RNA表达谱，视网膜色素上皮衍生自IPS和胎儿视网膜色素上皮

The objective of this report is to describe the protocols for comparing the microRNA (miRNA) profiles of human induced-pluripotent stem (iPS) cells, ...

Methylnitrosourea (MNU)-induced Retinal Degeneration and Regeneration in the Zebrafish: Histological and Functional Characteristics

Methylnitrosourea MNU-induced Retinal Degeneration and Regeneration in the Zebrafish: Histological and Functional Characteristics

Methylnitrosourea（MNU）诱导的视网膜变性和再生的斑马鱼：组织学和功能特征

Retinal degenerative diseases, e.g. retinitis pigmentosa, with resulting photoreceptor damage account for the majority of vision loss in the industrial ...

Primary Cell Cultures from the Mouse Retinal Pigment Epithelium

小鼠视网膜色素上皮细胞的原代培养

The retinal pigment epithelium (RPE) is a highly polarized multi-functional epithelium that is located between the neural retina and the choroid of the ...

Isolation of Primary Mouse Retinal Pigmented Epithelium Cells

小鼠原代视网膜色素上皮细胞的分离

The retinal pigmented epithelium (RPE) layer lies immediately behind the photoreceptors and harbors a complex metabolic system that plays several critical ...

Efficient and Consistent Generation of Retinal Pigment Epithelium/Choroid Flatmounts from Human Eyes for Histological Analysis

从人眼高效、一致地生成视网膜色素上皮/脉络膜平面安装，用于组织学分析

The retinal pigment epithelium (RPE) and retina are functionally and structurally connected tissues that work together to regulate light perception and ...

Caudal Peduncle Cryoinjury in Adult Zebrafish

A Cryoinjury Model for Studying Skeletal Muscle Regeneration of the Caudal Peduncle in Adult Zebrafish

A Cryoinjury Model for Studying Skeletal Muscle Regeneration of the Caudal Peduncle in Adult Zebrafish (Video) | JoVE 

研究成年斑马鱼尾柄骨骼肌再生的冷冻损伤模型

Skeletal muscle undergoes renewal and restoration after minor injury through the activation of satellite-like stem cells. Severe injuries of the ...

Modeling and Analyzing Retinal Degeneration

LipidUNet-Machine Learning-Based Method of Characterization and Quantification of Lipid Deposits Using iPSC-Derived Retinal Pigment Epithelium

Unraveling the Pathogenesis of Age-Related Macular Degeneration and Discovering Potential Therapies (Video) | JoVE

基于脂质UNet-机器学习的脂质沉积物使用iPSC衍生的视网膜色素上皮表征和定量脂质沉积物的方法

The retinal pigment epithelium (RPE) is a monolayer of hexagonal cells located at the back of the eye. It provides nourishment and support to ...

Staining of Sub-Retinal Pigment Epithelium (RPE) Deposits

Staining of Sub-Retinal Pigment Epithelium (RPE) Deposits (Video) | JoVE 

视网膜下色素上皮 （RPE） 沉积物的染色