Name: probing myosin ensemble mechanics in actin filament bundles using optical tweezers
Uploaded: 2022-05-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers at JoVE.com

يتم دعم هذا العمل جزئيا من قبل زمالة أبحاث مجلس طلاب الدراسات العليا بجامعة ميسيسيبي (OA) ، وجامعة ميسيسيبي سالي ماكدونيل باركسديل مع مرتبة الشرف (JCW ، JER) ، واتحاد منح الفضاء في ميسيسيبي تحت رقم المنحة NNX15AH78H (JCW ، DNR) ، وجمعية القلب الأمريكية تحت رقم المنحة 848586 (DNR).

1. نقش أغطية
<ol><li>قم بإذابة 100 غرام من KOH في 300 مل من الإيثانول بنسبة 100٪ في كوب 1000 مل. يحرك المزيج بقضيب التحريك حتى تذوب غالبية KOH. تنبيه: يمكن أن يسبب محلول KOH المركز حروقا وأضرارا للملابس. ارتداء القفازات وحماية العين ومعطف المختبر.</li>
	<li>ضع الأغطية بشكل فردي في رفوف تنظيف الغطاء.<br...

تم إجراء دراسة في المختبر باستخدام ملاقط بصرية جنبا إلى جنب مع التصوير الفلوري للتحقيق في ديناميكيات مجموعات الميوسين التي تتفاعل مع خيوط الأكتين. تم تجميع حزم الأكتين-الميوسين-الأكتين باستخدام الميوسين العضلي الثاني، والأكتين الرودامين في الجزء السفلي من الحزمة وعلى سطح الغطاء، و...

البروتينات الحركية ضرورية للحياة ، وتحويل الطاقة الكيميائية إلى عمل ميكانيكي1،2،3. تتفاعل محركات الميوسين مع خيوط الأكتين عن طريق اتخاذ خطوات على طول الخيوط المشابهة للمسار ، وتقوم ديناميكيات شبكات الأكتين الميوسين بتنفيذ تقلص العضلات ، وحركية الخلية ، وحلقة الانقباض أثناء الحركية الخلوية ، وحركة البضائع داخل الخلية ، من بين المهام الأساسية الأخرى3،4،5،6،7،8 . نظرا لأن الميوسين له العديد من الأدوار الأساسية ، فإن الفشل في وظائف شبكة الميوسين أكتين يمكن أن يؤدي إلى تطور المرض ، مثل الطفرات في سلسلة الميوسين الثقيلة التي تسبب فرط انقباض القلب في اعتلال عضلة القلب الضخامي (HCM) 9,10,11,12,13,14 . في تقلص العضلات ، تتعاون محركات الميوسين الفردية مع بعضها البعض من خلال العمل كمجموعة لتوفير الطاقة الميكانيكية المطلوبة التي تنفذ الانزلاق النسبي للتركيز البؤري التلقائي4،15،16،17،18. تشكل محركات الميوسين جسورا متقاطعة بين الرجفان الأذيني وتستخدم تغيرات متطابقة بسبب دورتها الميكانيكية الكيميائية للتحرك بشكل جماعي نحو الطرف الشائك للخيوط المحاذاة17،18،19،20،21.
وقد سهل تطوير مقايسات الحركة الكمية في المختبر على مستوى SM باستخدام تقنيات مثل الاصطياد البصري جمع تفاصيل غير مسبوقة عن كيفية عمل محركات الميوسين الفردية ، بما في ذلك قياس توليد قوة SM وأحجام الخطوات 22،23،24،25،26،27،28،29،30 . طور Finer et al. اختبار الاصطياد البصري "ثلاثي الخرز" أو "الدمبل" للتحقيق في ميكانيكا توليد القوة لمحركات myosin II المفردة23,31. نظرا لأن myosin II العضلي يعمل في فرق للتعاقد مع AFs ولكنه غير عملي على مستوى SM ، كان لا بد من إعادة ترتيب اتجاه فحص الاصطياد البصري من نهج الخرزة الكلاسيكية المرتبطة بالمحرك32. لتشكيل فحص الدمبل ، تم استخدام فخاخين بصريتين لتثبيت التركيز البؤري التلقائي فوق محرك الميوسين المرتبط بحبة متصلة بغطاء ، وتم قياس خرج القوة بواسطة المحرك الفردي من خلال حركات التركيز البؤري التلقائي داخل المصيدة23.
ومع ذلك ، فإن قوى SM واستخدام اتجاه فحص محرك واحد / خيط واحد لا يعطي صورة كاملة عن توليد القوة على مستوى النظام لأن العديد من البروتينات الحركية ، بما في ذلك الميوسين الثاني ، لا تعمل بمعزل عن بعضها البعض وغالبا ما لا تعمل كمجموع لأجزائها 15,16,17,32,33,34,35,36 . الهياكل الأكثر تعقيدا التي تشمل أكثر من محرك واحد يتفاعل مع أكثر من خيوط واحدة ضرورية لفهم أفضل للتآزر بين شبكات خيوط الميوسين والأكتين15,32. تم استغلال اتجاه فحص الدمبل للتحقيق في توليد قوة المجموعة الصغيرة من خلال وجود ميوسينات متعددة متصلة بحرزة أو باستخدام خيوط سميكة من الميوسين متصلة بسطح والسماح للمحركات بالتفاعل مع التركيز البؤري التلقائي المعلق 4,23,34,37,38,39,40.
تشمل اختبارات المجموعة الصغيرة الأخرى مقايسة انزلاقية في المختبر حيث يتم طلاء محركات الميوسين على سطح الغطاء ، ويتم استخدام حبة مرتبطة بالتركيز البؤري التلقائي للتحقيق في القوة الناتجة عن فريق المحركات 4,35,36,38,39,40,41,42,43 . في كلتا الحالتين ، ترتبط الميوسينات بسطح صلب - حبة أو غطاء - وتستخدم AF واحدا. في هذه الحالات ، لا تكون المحركات قادرة على التحرك بحرية أو التواصل مع بعضها البعض ، ولا يعكس وجود myosins مقيد بشكل صارم البيئة الهرمية المتوافقة التي ستعمل فيها المحركات معا في ساركومير32. وقد اقترحت دراسات سابقة أن الميوسين II يمكن أن يستشعر بيئته ويتكيف وفقا لذلك مع تغير ظروف التركيز اللزج المرن أو الحركي عن طريق تغيير الخصائص مثل توليد القوة ونسبة الواجب41،44،45. وبالتالي ، هناك حاجة إلى تطوير اختبار الاصطياد البصري الذي يعزز ويلتقط اتصالات المحرك وتوافق النظام لرسم صورة أكثر واقعية للأسس الميكانيكية لتوليد قوة مجموعة الميوسين II.
هنا ، طورنا طريقة لإقران الهيكل الهرمي في المختبر مع الاصطياد البصري عن طريق تشكيل حزم أو سندويشات أكتوميوزين تتكون من محركات ميوسين متعددة تتفاعل بين اثنين من خيوط الأكتين. تتمتع هندسة المقايسة المعيارية هذه بالقدرة على التحقيق المباشر في كيفية تأثير العوامل الجزيئية والبيئية على توليد قوة الميوسين الجماعية. علاوة على ذلك ، فإن التحقيق في آليات توليد القوة من خلال مجموعات الأكتين الميوسين هذه لديه القدرة على المساعدة في نمذجة وفهم كيفية انتشار المهام الخلوية واسعة النطاق ، مثل تقلص العضلات ، من المستوى الجزيئي9،10،13.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Actin protein (biotin): skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>AB07-A</td>
			<td>Biotinylated actin protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein, rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>AKL99-A</td>
			<td>Actin protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Actin stabilizer and Alexa Fluor 488 stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP413-25</td>
			<td>Required for actin assembly and myosin motility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-D-glucose</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>MP218069110</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blotting Grade Blocker (casein)</td>
			<td>Biorad</td>
			<td>1706404</td>
			<td>Used to block surface from non-specific binding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>C79500</td>
			<td>Calcium chloride, provides the necessary control over the dynamics of actin myosin network</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalase</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>ICN10040280</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12544C</td>
			<td>Used to make flow cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DTT</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>AC327190010</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>A4094</td>
			<td>Regent used for cleaning coverslips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose oxidase</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>34-538-610KU</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOH</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>P250-1</td>
			<td>Used to etch coverslips and adjust buffer pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>M33-500</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-544-2</td>
			<td>Used to make flow cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Myosin II protein: rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>MY02</td>
			<td>Full length myosin motor protein isolated from rabbit skeletal muscle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanotracker2</td>
			<td>Bruker/JPK</td>
			<td>NT2</td>
			<td>Optical trapping instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-l-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8920</td>
			<td>Facilities adhesion of actin filaments onto glass surface of the coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodamine Phalloidin</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>PHDR1</td>
			<td>Actin stabilizer and rhodamine fluorescent stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptavidin beads, 1 &#956;m</td>
			<td>Spherotech</td>
			<td>SVP-10-5</td>
			<td>Optical trapping handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>PR H5121</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

probing myosin ensemble mechanics in actin filament bundles using optical tweezers

الميوسينات هي بروتينات حركية تحلل ATP لتخطو على طول مسارات خيوط الأكتين (AF) وهي ضرورية في العمليات الخلوية مثل الحركة وتقلص العضلات. لفهم آليات توليد القوة الخاصة بهم ، تم التحقيق في الميوسين II على مستوى الجزيء الواحد (SM) وكفرق من المحركات في المختبر باستخدام الطرق الفيزيائية الحيوية مثل الاصطياد البصري.
أظهرت هذه الدراسات أن سلوك توليد قوة الميوسين يمكن أن يختلف اختلافا كبيرا عند الانتقال من مستوى الجزيء الواحد في ترتيب ثلاثي الخرز إلى مجموعات من المحركات التي تعمل معا على خرزة صلبة أو سطح غطاء في ترتيب انزلاقي. ومع ذلك ، فإن إنشاءات الفحص هذه لا تسمح بتقييم ديناميكيات مجموعة الميوسين داخل التسلسل الهرمي الهيكلي اللزج المرن كما تفعل داخل الخلية. لقد طورنا طريقة باستخدام ملاقط بصرية للتحقيق في ميكانيكا توليد القوة بواسطة مجموعات الميوسين التي تتفاعل مع خيوط الأكتين المتعددة.
تسهل حزم الأكتوميوس هذه التحقيق في بيئة هرمية ومتوافقة تلتقط الاتصالات الحركية وإخراج قوة المجموعة. تسمح الطبيعة القابلة للتخصيص للفحص بتغيير الظروف التجريبية لفهم كيف تؤدي التعديلات على مجموعة الميوسين أو حزمة خيوط الأكتين أو البيئة المحيطة إلى مخرجات قوة مختلفة.

تتميز خلايا التدفق التي تحتوي على أنظمة حزم الأكتوميوزين بتصميم قياسي ، وتتكون من شريحة مجهرية وغطاء محفور مفصول بقناة مصنوعة من شريط لاصق على الوجهين (الشكل 1). ثم يتم بناء الفحص من الغطاء إلى الأعلى باستخدام مقدمات مرحلية كما هو موضح في البروتوكول. يتكون الفحص النهائي من ?...

Watch this Scientific Journal Video about Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers at JoVE.com

Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers

يتم عرض ومناقشة تشكيل حزم أكتوميوزين في المختبر وقياس توليد قوة مجموعة الميوسين باستخدام ملاقط بصرية.

فحص ميكانيكا فرقة الميوسين في حزم خيوط الأكتين باستخدام ملاقط بصرية

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle ...

يعد التحقيق في سلوك الأكتين باستخدام هذا البروتوكول أمرا مهما لأنه يسمح للمستخدم بفحص ديناميكيات مجموعة البروتين الحركي باستخدام دقة الاصطياد البصري. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي القدرة على قياس ميكانيكا الميوسين داخل التسلسل الهرمي لبنية الأكتين ، على عكس الاتجاه التقليدي أحادي الخيط أحادي المحرك المستخدم في العديد من تجارب الاصطياد البصري. ميزة أخرى لهذا البروتوكول هي طبيعته المعيارية ، والتي تسمح للمستخدم بتخصيص الفحص لنظام الهيكل الخلوي الهرمي الذي يختاره.للبدء ، ضع قطعتين من الشريط اللاصق على الوجهين في منتصف شريحة المجهر على بعد ثلاثة إلى أربعة ملليمترات من بعضها البعض. ثم قم بتمزيق أو قطع الشريط الزائد المعلق على حافة الشريحة. بعد ذلك ، أضف زلة الغطاء المطلية ب PLL أعلى الشريط بشكل عمودي على المحور الطويل لشريحة المجهر لتشكيل قناة.باستخدام أنبوب صغير لضغط الغطاء ، انزلق على الشريط والمجهر ، حرك جيدا حتى يصبح الشريط شفافا ، مع التأكد من عدم وجود فقاعات في الشريط لأن ذلك قد يتسبب في تسرب من قناة التدفق. أضف 15 ميكرولترا من أكتين الرودامين المخفف إلى خلية تدفق PLL وفتيل المحلول الزائد من خلال خلية التدفق ، لكن لا تسمح لقناة التدفق أن تجف. ثم احتضان لمدة 10 دقائق في غرفة الرطوبة.بعد ذلك ، قم بإعداد ملليغرام واحد لكل ملليلتر من محلول الكازين في مخزن بلمرة الأكتين وأضف 15 ميكرولتر من المحلول لمنع الارتباط غير المحدد للمكونات اللاحقة. ثم احتضان لمدة خمس دقائق في غرفة الرطوبة. بعد ذلك ، أضف التركيز المطلوب من الميوسين إلى الأكتين المحضر بيوتينيل وتعليق الخرز وحركه برفق بطرف ماصة.ثم ، أضف على الفور 15 ميكرولتر من التعليق مع تركيز الميوسين المطلوب إلى خلية التدفق واحتضانه لمدة 20 دقيقة. بعد ذلك ، أغلق الأطراف المفتوحة لخلية التدفق بطلاء الأظافر لمنع التبخر أثناء التصوير وتجارب الاصطياد البصري. بمجرد أن يصبح النظام جاهزا ، قم بتشغيل الليزر باستخدام زر طاقة الليزر في الزاوية السفلية اليسرى من الشاشة إلى 50 ملي واط واتركه يستقر لمدة 30 دقيقة.انقر بالتتابع على أزرار الإضاءة والكاميرا والهدف وحركة المسرح داخل البرنامج لإظهار تلك النوافذ للعرض والتلاعب أثناء التجربة. قم بتشغيل إضاءة المجهر بالنقر فوق الزر تشغيل / إيقاف وضبطه على أقصى طاقة عن طريق النقر فوق الشريط وسحبه إلى اليمين. افتح منطقة العينة وأزل حامل العينة من مرحلة المجهر.ثم أضف خلية التدفق وقم بتثبيتها بحاملات العينات المعدنية ، مما يضمن أن زلة الغطاء في الأسفل. بعد ذلك ، أضف 30 ميكرولترا من ماء التناضح العكسي إلى مركز الهدف السفلي وأعد إدخال مرحلة العينة. ثم ارفع الهدف السفلي باستخدام L2 على جهاز التحكم عن بعد حتى تلامس حبة الماء انزلاق الغطاء.بعد ذلك ، قم بخفض الهدف العلوي حتى يتم الوصول إلى حوالي نصف المسافة إلى خلية التدفق باستخدام R2 على وحدة التحكم عن بعد. بعد ذلك ، أضف 170 ميكرولترا من ماء RO إلى الجزء العلوي من خلية التدفق مباشرة أسفل الهدف العلوي وقم بخفض الهدف العلوي حتى يكسر التوتر السطحي للماء ويشكل هلالة. بعد ذلك ، حرك مرحلة المجهر باستخدام لوحة الأسهم الموجودة على وحدة التحكم عن بعد حتى يتم الوصول إلى حافة الشريط المجاور لقناة التدفق ثم أغلق باب العينة.باستخدام نافذة الهدف في الشاشة ، قم بإحضار حافة الشريط والتركيز عن طريق إحضار الهدف السفلي المسمى Laser Objective لأعلى بالنقر فوق السهم العلوي والهدف العلوي بالنقر فوق السهم السفلي باستخدام عناصر التحكم التي تظهر على الشاشة. ابحث عن حبة عائمة وحبسها بالنقر فوق زر غالق المصيدة ، والذي سيفتح الغالق ويسمح لليزر الملائمة بضرب العينة. ثم انقر فوق مؤشر الملائمة على الشاشة واسحبه لتحريك موقع ليزر الملائمة.بمجرد محاصرتها ، قم بمعايرة الخرزة بالنقر فوق زر المعايرة. ثم ، انقر فوق الإعدادات واكتب قطر الخرزة ودرجة حرارة المرحلة الموجودة في الجزء السفلي الأيسر من نافذة البرنامج. بعد ذلك ، انقر فوق Trap 1 ، ثم على X Signal وقم بإجراء ملاءمة تردد الزاوية بالنقر فوق تشغيل.ثم انقر واسحب داخل النافذة لتحسين ملاءمة الوظيفة. بعد ذلك ، انقر فوق استخدامه لقيم الحساسية والصلابة ثم اقبل القيم. بعد ذلك ، أغلق النافذة.ابحث عن حزمة أكتوميوسين من خلال البحث عن الخرز المرتبط ب AFs على سطح زلة الغطاء ومن خلال البحث عن كل من AFs الفلورية المترجمة بشكل مشترك. قم بتشغيل مصدر الضوء الأبيض واستخدم مكعب المرشح المناسب لتصوير كل خيوط أكتين عن طريق تدوير البرج. بمجرد التحقق ، قم بحبس الخرزة المرفقة بالخيوط العلوية للحزمة بالنقر فوق زر مصراع المصيدة.بعد ذلك ، قم بتسجيل البيانات بالنقر فوق زر راسم الذبذبات باستخدام عناصر التحكم التي تظهر على الشاشة. لتصور القياسات دون تسجيل البيانات ، انقر فوق ابدأ ثم انقر فوق الحفظ التلقائي لحفظ جميع البيانات. لتسجيل القياسات ، انقر فوق بدء التسجيل واختر البيانات التي سيتم تصورها في الوقت الفعلي عن طريق الاختيار من القائمة المنسدلة X Signal أو Y Signal.يظهر تتبع القوة لمحركات الميوسين الهيكلية التي تولد القوة داخل التسلسل الهرمي الهيكلي للأكتين في المختبر منحدرا ثابتا في القوة حتى يتم الوصول إلى الهضبة خلال دقيقتين إلى خمس دقائق. ومع ذلك ، لوحظ أيضا أن بعض حزم الأكتوميوسين التي لا تولد أي قوة محصلة وتظهر آثار القوة كضوضاء أساسية أو لا تظهر أي زيادة صافية كبيرة في القوة خلال 90 ثانية بسبب انخفاض تركيز المحرك أو الاتجاه الموازي غير المواتي للخيوط. سيمهد تطوير البروتوكول هذا الطريق نحو بناء فحوصات هيكلية خلوية أكثر تعقيدا في المختبر ستساعد بشكل أكبر في نمذجة المهام الخلوية واسعة النطاق ، مثل انقسام الخلايا وتقلص العضلات من الأسفل إلى الأعلى.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

ثلاثي الأبعاد البصرية الميكروسكوب الضوئي الاستبانة

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Multiparametric Optical Mapping of the Langendorff-perfused Rabbit Heart

Multiparametric رسم الخرائط البصرية للقلب الأرنب Langendorff - perfused

Optical imaging and fluorescent probes have significantly advanced research methodology in the field of cardiac electrophysiology in ways that could not ...

Optical Mapping of Action Potentials and Calcium Transients in the Mouse Heart

رسم الخرائط البصرية إمكانيات العمل والعابرون الكالسيوم في القلب ماوس

The mouse heart is a popular model for cardiovascular studies due to the existence of low cost technology for genetic engineering in this species. ...

Stretching Short Sequences of DNA with Constant Force Axial Optical Tweezers

تمتد سلاسل قصيرة من الحمض النووي مع ثابت القوة المحورية الملقط البصري

Single-molecule techniques for stretching DNA of contour lengths  less than a kilobase are fraught with experimental difficulties. However, many ...

Multiplexed Single-molecule Force Proteolysis Measurements Using Magnetic Tweezers

المضاعفة واحدة جزيء القياسات التحلل البروتيني باستخدام الملقط قوة مغناطيسية

The  generation and detection of mechanical forces is a ubiquitous aspect of cell physiology,  with direct relevance to cancer metastasis1, atherogenesis2 ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

رصد ميكانيكا الحائط أثناء النشر ستينت في وعاء

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

In vitro Synthesis of Native, Fibrous Long Spacing and Segmental Long Spacing Collagen

In vitro Synthesis of Native, Fibrous Long Spacing and Segmental Long Spacing Collagen

في تركيب المختبر من تباعد الليفية الأصلية، طويل والقطاعي الكولاجين تباعد طويل

Collagen fibrils are present in the  extracellular matrix of animal tissue to provide structural scaffolding and  mechanical strength. These native ...

Magnetic Tweezers for the Measurement of Twist and Torque

الملقط المغناطيسي لقياس تطور وعزم الدوران

Single-molecule techniques make it possible to investigate the behavior of individual biological molecules in solution in real time. These techniques ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation من واحدة RNA الجزيئات بواسطة الملقط البصرية

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Label-free Single Molecule Detection Using Microtoroid Optical Resonators

تسمية خالية واحدة كشف الجزيئة عن طريق Microtoroid البصرية الرنين

Detecting small concentrations of molecules down to the single molecule limit has impact on areas such as early detection of disease, and fundamental ...