Name: probing myosin ensemble mechanics in actin filament bundles using optical tweezers
Uploaded: 2022-05-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers at JoVE.com

עבודה זו נתמכת בחלקה על ידי מלגת המחקר של מועצת הסטודנטים לתארים מתקדמים של אוניברסיטת מיסיסיפי (OA), מכללת המצטיינים של אוניברסיטת מיסיסיפי סאלי מקדונל-בארקסדייל (JCW, JER), קונסורציום מענקי החלל של מיסיסיפי תחת מענק מספר NNX15AH78H (JCW, DNR), ואיגוד הלב האמריקאי תחת מענק מספר 848586 (DNR).

1. כיסויי תחריט
<ol><li>יש להמיס 100 גרם של KOH ב-300 מ"ל של 100% אתנול בכוס של 1,000 מ"ל. מערבבים עם מוט ערבוב עד שרוב ה-KOH מתמוסס. אזהרה: תמיסת KOH מרוכזת עלולה לגרום לכוויות ולנזק לבגדים. יש ללבוש כפפות, להגן על העיניים ומעיל מעבדה.</li>
	<li>הניחו את הכיסויים בנפרד במדפים לניקוי כיסויים. הערה: המדפ...

מחקר במבחנה באמצעות פינצטה אופטית בשילוב עם הדמיה פלואורסצנטית בוצע כדי לחקור את הדינמיקה של הרכבי מיוזין המקיימים אינטראקציה עם חוטי אקטין. צרורות אקטין-מיוזין-אקטין הורכבו באמצעות מיוזין שריר II, רודמין אקטין בתחתית הצרור ועל משטח הכיסוי, וסיבי אקטין בעלי תווית של 488 ביוטינילים בחל...

חלבונים מוטוריים חיוניים לחיים, וממירים אנרגיה כימית לעבודה מכנית 1,2,3. מנועי מיוזין מתקשרים עם חוטי אקטין על ידי נקיטת צעדים לאורך החוטים הדומים למסלול, והדינמיקה של רשתות אקטין-מיוזין מבצעת התכווצות שרירים, תנועתיות תאים, טבעת התכווצות במהלך ציטוקינזיס ותנועת מטען בתוך התא, בין שאר המשימות החיוניות 3,4,5,6,7,8 . מאחר שלמיוסינים יש כל כך הרבה תפקידים חיוניים, כשל בתפקוד של רשת המיוזין-אקטין יכול להוביל להתפתחות מחלות, כגון מוטציות בשרשרת הכבדה של המיוזין הגורמות להיפר-התכווצויות יתר של הלב בקרדיומיופתיה היפרטרופית (HCM)9,10,11,12,13,14 . בהתכווצות שרירים, מנועי מיוזין בודדים משתפים פעולה זה עם זה על ידי עבודה כאנסמבל כדי לספק את האנרגיה המכנית הנדרשת המבצעת את ההחלקה היחסית של AFs 4,15,16,17,18. מנועי מיוזין יוצרים גשרים צולבים בין AFs ומשתמשים בשינויים קונפורמיים עקב המחזור המכנוכימי שלהם כדי לנוע באופן קולקטיבי לעבר הקצה התיל של החוטים המיושרים 17,18,19,20,21.
פיתוח מבחני תנועתיות כמותיים במבחנה ברמת ה-SM תוך שימוש בטכניקות כגון השמנה אופטית הקל על איסוף פרטים חסרי תקדים על האופן שבו מנועי מיוזין בודדים מתפקדים, כולל מדידת ייצור כוח SM וגדלי צעדים 22,23,24,25,26,27,28,29,30 . Finer et al. פיתחו את בדיקת הלכידה האופטית "שלושה חרוזים" או "משקולת" כדי לחקור את מכניקת ייצור הכוח של מנועי מיוזין II בודדים23,31. מכיוון שמיוזין שריר II עובד בצוותים כדי לכווץ AFs אך אינו מעובד ברמת SM, היה צורך לארגן מחדש את כיוון בדיקת הלכידה האופטית מהגישה הקלאסית של חרוזים הקשורים למנוע32. כדי ליצור את בדיקת המשקולת, שתי מלכודות אופטיות שימשו להחזקת AF מעל מנוע מיוזין הקשור לחרוז המחובר לכיסוי, ותפוקת הכוח על ידי המנוע היחיד נמדדה באמצעות תנועות של המיקוד האוטומטי בתוך מלכודת23.
עם זאת, כוחות SM ושימוש בכיוון בדיקה של מנוע יחיד/נימה בודדת אינם נותנים תמונה מלאה על יצירת כוח ברמת המערכת מכיוון שחלבונים מוטוריים רבים, כולל מיוזין II, אינם פועלים בבידוד ולעתים קרובות אינם מתפקדים כסכום חלקיהם 15,16,17,32,33,34,35,36 . מבנים מורכבים יותר הכוללים יותר ממנוע אחד המקיים אינטראקציה עם יותר מחוט אחד נחוצים כדי להבין טוב יותר את הסינרגיה של רשתות המיוזין וחוטי האקטין15,32. כיוון בדיקת המשקולת נוצל כדי לחקור יצירת כוח אנסמבל קטן על ידי חיבור מיוזינים מרובים לחרוז או שימוש בחוט עבה מיוזין המחובר למשטח ומאפשר למנועים לקיים אינטראקציה עם המיקוד האוטומטיהתלוי 4,23,34,37,38,39,40.
מבחני אנסמבל קטנים אחרים כוללים בדיקת גלישה של נימה במבחנה שבה מנועי מיוזין מצופים על משטח כיסוי, וחרוז הקשור ל- AF משמש כדי לחקור את הכוח שנוצר על ידי צוות המנועים 4,35,36,38,39,40,41,42,43 . בשני המקרים הללו, המיוזינים קשורים למשטח קשיח - חרוז או כיסוי - ומשתמשים במיקוד אוטומטי אחד. במקרים אלה, המנועים אינם מסוגלים לנוע בחופשיות או לתקשר זה עם זה, וגם קיום מיוסינים הקשורים באופן נוקשה אינו משקף את הסביבה התואמת, ההיררכית, שבה המנועים יעבדו יחד בסרקומר32. מחקרים קודמים הציעו כי מיוזין II יכול לחוש את סביבתו ולהסתגל בהתאם לשינויים בתנאי ריכוז ויסקואלסטיים או מוטוריים על ידי שינוי מאפיינים כגון ייצור כוח ויחס חובה41,44,45. לפיכך, יש צורך לפתח מבחן לכידה אופטי המטפח ולוכד תקשורת מוטורית ותאימות מערכת כדי לצייר תמונה מציאותית יותר של היסודות המכניסטיים של יצירת כוח הרכב מיוזין II.
כאן, פיתחנו שיטה לשילוב מבנה היררכי במבחנה עם לכידה אופטית על ידי יצירת צרורות אקטומיוזין או סנדוויצ'ים המורכבים ממנועי מיוזין מרובים המקיימים אינטראקציה בין שני חוטי אקטין. לגיאומטריה מודולרית זו יש את היכולת לחקור ישירות כיצד גורמים מולקולריים וסביבתיים משפיעים על יצירת כוח מיוזין בהרכב. יתר על כן, לחקר מנגנוני יצירת הכוח באמצעות הרכבי אקטין-מיוזין אלה יש פוטנציאל לסייע במידול ובהבנת האופן שבו משימות תאיות בקנה מידה גדול, כגון התכווצות שרירים, מתפשטות מהרמה המולקולרית 9,10,13.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Actin protein (biotin): skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>AB07-A</td>
			<td>Biotinylated actin protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein, rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>AKL99-A</td>
			<td>Actin protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Actin stabilizer and Alexa Fluor 488 stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP413-25</td>
			<td>Required for actin assembly and myosin motility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-D-glucose</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>MP218069110</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blotting Grade Blocker (casein)</td>
			<td>Biorad</td>
			<td>1706404</td>
			<td>Used to block surface from non-specific binding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>C79500</td>
			<td>Calcium chloride, provides the necessary control over the dynamics of actin myosin network</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalase</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>ICN10040280</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12544C</td>
			<td>Used to make flow cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DTT</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>AC327190010</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>A4094</td>
			<td>Regent used for cleaning coverslips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose oxidase</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>34-538-610KU</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOH</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>P250-1</td>
			<td>Used to etch coverslips and adjust buffer pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>M33-500</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-544-2</td>
			<td>Used to make flow cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Myosin II protein: rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>MY02</td>
			<td>Full length myosin motor protein isolated from rabbit skeletal muscle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanotracker2</td>
			<td>Bruker/JPK</td>
			<td>NT2</td>
			<td>Optical trapping instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-l-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8920</td>
			<td>Facilities adhesion of actin filaments onto glass surface of the coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodamine Phalloidin</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>PHDR1</td>
			<td>Actin stabilizer and rhodamine fluorescent stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptavidin beads, 1 &#956;m</td>
			<td>Spherotech</td>
			<td>SVP-10-5</td>
			<td>Optical trapping handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>PR H5121</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

probing myosin ensemble mechanics in actin filament bundles using optical tweezers

מיוסינים הם חלבונים מוטוריים המבצעים הידרוליזה של ATP כדי לצעוד לאורך מסלולי נימה אקטין (AF) והם חיוניים בתהליכים תאיים כגון תנועתיות והתכווצות שרירים. כדי להבין את מנגנוני ייצור הכוח שלהם, מיוזין II נחקר הן ברמת המולקולה הבודדת (SM) והן כצוותים של מנועים במבחנה באמצעות שיטות ביופיזיות כגון לכידה אופטית.
מחקרים אלה הראו שהתנהגות של יצירת כוח מיוזין יכולה להיות שונה מאוד כאשר עוברים מרמת המולקולה הבודדת בסידור של שלושה חרוזים לקבוצות של מנועים העובדים יחד על משטח חרוז קשיח או כיסוי בסידור גלישה. עם זאת, מבני בדיקה אלה אינם מאפשרים להעריך את הדינמיקה הקבוצתית של מיוזין בתוך היררכיה מבנית ויסקו-אלסטית כפי שהיו עושים בתוך תא. פיתחנו שיטה המשתמשת בפינצטה אופטית כדי לחקור את המכניקה של יצירת כוח על ידי הרכבי מיוזין המקיימים אינטראקציה עם חוטי אקטין מרובים.
צרורות אקטומיוזין אלה מאפשרים חקירה בסביבה היררכית ותואמת, הלוכדת תקשורת מוטורית ותפוקת כוח אנסמבל. האופי הניתן להתאמה אישית של הבדיקה מאפשר לשנות את תנאי הניסוי כדי להבין כיצד שינויים בהרכב המיוזין, בצרור חוטי האקטין או בסביבה הסובבת גורמים לתפוקות כוח שונות.

תאי זרימה המכילים את מערכות צרור האקטומיוזין הם בעלי עיצוב סטנדרטי, המורכב משקופית מיקרוסקופ וכיסוי חרוט המופרדים על ידי תעלה העשויה מסרט דביק דו-צדדי (איור 1). לאחר מכן, הבדיקה נבנית מהכיסוי באמצעות מבואות מבוימים כמתואר בפרוטוקול. הבדיקה הסופית מורכבת מחוטים של אקטין המס...

Watch this Scientific Journal Video about Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers at JoVE.com

Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers

היווצרות של צרורות actomyosin במבחנה ומדידת ייצור כוח אנסמבל מיוזין באמצעות פינצטה אופטית מוצג ונדון.

חקר מכניקת אנסמבל מיוזין בצרורות נימה של אקטין באמצעות פינצטה אופטית

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle ...

חקירת התנהגות אקטין באמצעות פרוטוקול זה היא משמעותית מכיוון שהיא מאפשרת למשתמש לחקור את הדינמיקה של אנסמבל החלבון המוטורי באמצעות הדיוק של השמנה אופטית. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא היכולת למדוד מכניקת מיוזין בתוך היררכיה מבנית של אקטין, בניגוד לכיוון החד-מנועי המסורתי של נימה בודדת המשמש בניסויי השמנה אופטיים רבים. יתרון נוסף של פרוטוקול זה הוא אופיו המודולרי, המאפשר למשתמש להתאים אישית את הבדיקה למערכת השלד ההיררכית לפי בחירתם.כדי להתחיל, להחיל שתי חתיכות של סרט דביק דו צדדי על אמצע מיקרוסקופ להחליק שלושה עד ארבעה מילימטרים זה מזה. לאחר מכן קרעו או חתכו את הסרט העודף שתלוי מקצה השקופית. לאחר מכן, הוסף את הכיסוי המצופה PLL על גבי הקלטת בניצב לציר הארוך של שקופית המיקרוסקופ כדי ליצור ערוץ.באמצעות צינור קטן כדי לדחוס את הכיסוי להחליק על הקלטת והמיקרוסקופ, להחליק ביסודיות עד שהקלטת היא שקופה, להבטיח כי אין בועות בסרט כמו זה יכול לגרום דליפה מערוץ הזרימה. הוסיפו 15 מיקרוליטרים של הרודמין אקטין המדולל לתא הזרימה PLL ותפתילו את התמיסה העודפת דרך תא הזרימה, אך אל תאפשרו לתעלת הזרימה להתייבש. לאחר מכן, לדגור במשך 10 דקות בתא לחות.לאחר מכן, הכינו תמיסת קזאין של מיליגרם אחד למיליליטר במאגר פילמור אקטין והוסיפו 15 מיקרוליטרים של התמיסה כדי למנוע קשירה לא ספציפית של הרכיבים הבאים. לאחר מכן, לדגור במשך חמש דקות בתא לחות. לאחר מכן, הוסיפו את הריכוז הרצוי של מיוזין לתרחיף האקטין והחרוזים המוכנים לשימוש ביוטינילי וערבבו בעדינות עם קצה פיפטה.לאחר מכן, מיד להוסיף 15 microliters של ההשעיה יחד עם ריכוז מיוזין הרצוי לתא הזרימה דגירה במשך 20 דקות. לאחר מכן, אטמו את הקצוות הפתוחים של תא הזרימה עם לק כדי למנוע אידוי במהלך ניסויי הדמיה ולכידה אופטית. לאחר שהמערכת מוכנה, הפעל את הלייזר באמצעות לחצן הפעלת הלייזר בפינה השמאלית התחתונה של המסך ל -50 מילי-וואט ותן לו להתייצב במשך 30 דקות.לחץ ברצף על כפתורי התאורה, המצלמה, המטרה והתנועה הבימתית בתוך התוכנה כדי להעלות חלונות אלה לצפייה ומניפולציה במהלך הניסוי. הפעל את תאורת המיקרוסקופ על-ידי לחיצה על לחצן הפעלה/כיבוי והגדרתו לעוצמה מרבית על-ידי לחיצה וגרירה של הסרגל כל הדרך ימינה. פתח את אזור הדגימה והסר את מחזיק הדגימה משלב המיקרוסקופ.לאחר מכן הוסף את תא הזרימה ואבטח אותו באמצעות מחזיקי דגימת המתכת, כדי להבטיח כי החלקת הכיסוי נמצאת בתחתית. לאחר מכן, הוסיפו 30 מיקרוליטרים של מי RO למרכז המטרה התחתונה והכניסו מחדש את שלב הדגימה. לאחר מכן הרם את המטרה התחתונה באמצעות L2 בשלט הרחוק עד שחרוז המים ייגע במחליק הכיסוי.לאחר מכן, הורד את המטרה העליונה עד שתגיע לכמחצית המרחק לתא הזרימה באמצעות R2 בשלט הרחוק. לאחר מכן, הוסיפו 170 מיקרוליטרים של מי RO לחלק העליון של תא הזרימה ישירות מתחת למטרה העליונה והורידו את המטרה העליונה עד שהיא שוברת את מתח הפנים של המים ויוצרת מניסקוס. לאחר מכן, הזז את שלב המיקרוסקופ באמצעות כרית החצים בשלט הרחוק עד להגעה לקצה הקלטת הסמוכה לערוץ הזרימה ולאחר מכן סגור את דלת הדגימה.באמצעות חלון המטרה במסך, הבא את קצה הקלטת ואת המיקוד על-ידי העלאת המטרה התחתונה בשם מטרת לייזר על-ידי לחיצה על החץ העליון והמטרה העליונה על-ידי לחיצה על חץ תחתון באמצעות הפקדים שעל המסך. מצא חרוז צף ולכוד אותו על ידי לחיצה על כפתור תריס המלכודת, אשר יפתח את התריס ויאפשר ללייזר ההשמנה לפגוע בדגימה. לאחר מכן, לחץ על סמן המלכודת על המסך וגרור אותו כדי להזיז את מיקום לייזר ההשמנה.לאחר ההשמנה, כייל את החרוז על ידי לחיצה על כפתור הכיול. לאחר מכן, לחץ על הגדרות והקלד את קוטר החרוז והטמפרטורה של השלב שנמצא בפינה השמאלית התחתונה של חלון התוכנה. לאחר מכן, לחץ על מלכודת 1, ולאחר מכן על אות X ובצע את התאמת תדר הפינה על ידי לחיצה על הפעלה.לאחר מכן לחץ וגרור בתוך החלון כדי לייעל את התאמת הפונקציה. לאחר מכן, לחץ על השתמש בו עבור ערכי רגישות ונוקשות ולאחר מכן קבל ערכים. לאחר מכן, סגור את החלון.מצא צרור אקטומיוזין על-ידי חיפוש חרוזים הקשורים ל-AFs על פני השטח של החלקת הכיסוי ועל-ידי חיפוש שני ה-AFs הפלואורסצנטיים המותאמים לשפות אחרות. הפעל את מקור האור הלבן והשתמש בקוביית הסינון המתאימה כדי לדמות כל נימה של אקטין על ידי סיבוב הצריח. לאחר האימות, לכוד את החרוז המחובר לחוט הלהט העליון של החבילה על ידי לחיצה על כפתור תריס המלכודת.לאחר מכן, הקלט את הנתונים על ידי לחיצה על כפתור אוסצילוסקופ באמצעות הפקדים שעל המסך. כדי להציג באופן חזותי מדידות מבלי להקליט את הנתונים, לחץ על התחל ולאחר מכן לחץ על שמירה אוטומטית כדי לשמור את כל הנתונים. כדי להקליט מדידות, לחץ על התחל להקליט ובחר אילו נתונים יוצגו באופן חזותי בזמן אמת על ידי בחירה מהתפריט הנפתח X Signal או Y Signal.עקבות הכוח של מנועי מיוזין שלדיים המייצרים כוח בתוך ההיררכיה המבנית של אקטין במבחנה הבנויה מפגינים רמפה יציבה בכוח עד שמגיעים לרמה של יותר משתיים עד חמש דקות. עם זאת, הוא ציין גם כי כמה צרורות actomyosin שאינם מייצרים כל כוח נטו עקבות הכוח מופיעים כרעש בסיסי או לא מציגים עלייה משמעותית נטו בכוח מעל 90 שניות עקב ריכוז נמוך של מנוע או כיוון מקביל שלילי של החוטים. פיתוח פרוטוקול זה יסלול את הדרך לבניית מבחנים ציטוסקטליים מורכבים יותר במבחנה, שיסייעו עוד יותר במודלים של משימות תאיות בקנה מידה גדול, כגון חלוקת תאים והתכווצות שרירים מלמטה למעלה.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

תלת ממדית ברזולוציה אופטית photoacoustic מיקרוסקופית

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Multiparametric Optical Mapping of the Langendorff-perfused Rabbit Heart

Multiparametric מיפוי אופטי של הלב Langendorff-perfused הארנב

Optical imaging and fluorescent probes have significantly advanced research methodology in the field of cardiac electrophysiology in ways that could not ...

Optical Mapping of Action Potentials and Calcium Transients in the Mouse Heart

מיפוי אופטי של פוטנציאלים פעולה ו הארעית סידן בלב מאוס

The mouse heart is a popular model for cardiovascular studies due to the existence of low cost technology for genetic engineering in this species. ...

Stretching Short Sequences of DNA with Constant Force Axial Optical Tweezers

מתיחת רצפים קצרים של DNA עם פינצטה חיל הצירי האופטית קבועה

Single-molecule techniques for stretching DNA of contour lengths  less than a kilobase are fraught with experimental difficulties. However, many ...

Multiplexed Single-molecule Force Proteolysis Measurements Using Magnetic Tweezers

מרובב יחיד מולקולה proteolysis חיל מדידות באמצעות מלקטת מגנטיים

The  generation and detection of mechanical forces is a ubiquitous aspect of cell physiology,  with direct relevance to cancer metastasis1, atherogenesis2 ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

מעקב אחר מכניקה קיר במהלך פריסה סטנט בכלי

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

In vitro Synthesis of Native, Fibrous Long Spacing and Segmental Long Spacing Collagen

In vitro Synthesis of Native, Fibrous Long Spacing and Segmental Long Spacing Collagen

בסינתזת מבחנה של ריווח ילידים, סיבי קולגן וארך ריווח המגזרי

Collagen fibrils are present in the  extracellular matrix of animal tissue to provide structural scaffolding and  mechanical strength. These native ...

Magnetic Tweezers for the Measurement of Twist and Torque

מלקחיים מגנטיים למדידה של טוויסט ומומנט

Single-molecule techniques make it possible to investigate the behavior of individual biological molecules in solution in real time. These techniques ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Nanomanipulation של יחיד RNA מולקולות על ידי מלקחיים אופטיים

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Label-free Single Molecule Detection Using Microtoroid Optical Resonators

ללא תווית מולקולה בודדת איתור באמצעות תהודה אופטית Microtoroid

Detecting small concentrations of molecules down to the single molecule limit has impact on areas such as early detection of disease, and fundamental ...