Name: probing myosin ensemble mechanics in actin filament bundles using optical tweezers
Uploaded: 2022-05-04T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers at JoVE.com

Bu çalışma kısmen Mississippi Üniversitesi Lisansüstü Öğrenci Konseyi Araştırma Bursu (OA), Mississippi Üniversitesi Sally McDonnell-Barksdale Honors College (JCW, JER), NNX15AH78H (JCW, DNR) hibe numarası altında Mississippi Uzay Hibe Konsorsiyumu ve 848586 hibe numarası (DNR) altında Amerikan Kalp Derneği tarafından desteklenmektedir.

1. Gravür kapakları
<ol><li>100 g KOH'u 300 mL'lik %100 etanol içinde 1.000 mL'lik bir beherde eritin. KOH'un çoğunluğu çözülene kadar bir karıştırma çubuğuyla karıştırın. DİKKAT: Konsantre KOH çözeltisi yanıklara ve giysilerde hasara neden olabilir. Eldiven, göz koruması ve laboratuvar önlüğü giyin.</li>
	<li>Kapak fişlerini tek tek coverslip temizleme raflarına yerleştirin. NOT: Raflar, kapak kaymasının her bir yüzünde aşındırma ve durulamaya, alttaki delik...

Aktin filamentlerle etkileşime giren miyozin topluluklarının dinamiklerini araştırmak için floresan görüntüleme ile birlikte optik cımbız kullanan in vitro bir çalışma yapıldı. Aktin-miyosin-aktin demetleri, kas miyozin II, demetin dibinde ve kapak kayma yüzeyinde rodamin aktin ve demetin üstünde 488 etiketli, biyotinile aktin filamentleri kullanılarak birleştirildi. Tavşan kasından elde edilen aktin proteini, genel aktin tamponları (GAB) ve aktin polimerize edici tamponlar (APB) kullanı...

Motor proteinleri, kimyasal enerjiyi mekanik çalışmaya dönüştürerek yaşam için gereklidir 1,2,3. Myosin motorları, bir ize benzer filamentler boyunca adımlar atarak aktin filamentleri ile etkileşime girer ve aktin-miyozin ağlarının dinamikleri, diğer temel görevlerin yanı sıra kas kasılması, hücre hareketliliği, sitokinezi sırasında kasılma halkası ve hücre içindeki yükün hareketini gerçekleştirir 3,4,5,6,7,8 . Miyosinlerin çok önemli rolleri olduğundan, miyozin-aktin ağının işlevselliğindeki başarısızlık, hipertrofik kardiyomiyopatide (HCM) kalp hiperkontraktilitesine neden olan miyozin ağır zincirindeki mutasyonlar gibi hastalık gelişimine yol açabilir 9,10,11,12,13,14 . Kas kasılmasında, bireysel miyozin motorları, AF'lerin 4,15,16,17,18'in göreceli kaymasını gerçekleştiren gerekli mekanik enerjiyi sağlamak için bir topluluk olarak çalışarak birbirleriyle işbirliği yapar. Myosin motorları, AF'ler arasında çapraz köprüler oluşturur ve hizalanmış filamentlerin17,18,19,20,21 dikenli ucuna doğru toplu olarak hareket etmek için mekanokimyasal döngüsü nedeniyle konformasyonel değişiklikler kullanır.
Optik yakalama gibi teknikler kullanılarak SM düzeyinde kantitatif in vitro motiliteli testlerin geliştirilmesi, SM kuvvet üretiminin ve adım boyutlarının ölçülmesi de dahil olmak üzere bireysel miyozin motorlarının nasıl çalıştığına dair benzeri görülmemiş ayrıntıların toplanmasını kolaylaştırmıştır 22,23,24,25,26,27,28,29,30 . Finer ve ark., tek miyozin II motorlarının kuvvet oluşturma mekaniğini araştırmak için "üç boncuk" veya "dambıl" optik yakalama testini geliştirdiler23,31. Kas miyozin II, AF'leri sözleşmek için ekipler halinde çalıştığından, ancak SM seviyesinde işlemsel olmadığından, optik yakalama testi oryantasyonunun klasik motora bağlı boncuk yaklaşımı32'den yeniden düzenlenmesi gerekiyordu. Dambıl tahlilini oluşturmak için, bir AF'yi bir kapaklı boncuğa bağlı bir miyozin motoru üzerinde tutmak için iki optik tuzak kullanıldı ve tek motor tarafından kuvvet çıkışı, AF'nin tuzak23 içindeki hareketleriyle ölçüldü.
Bununla birlikte, SM kuvvetleri ve tek bir motor / tek filament tahlili oryantasyonu kullanarak, sistem düzeyinde kuvvet üretimi hakkında tam bir görüntü vermez, çünkü miyozin II de dahil olmak üzere birçok motor proteini izolasyonda çalışmaz ve genellikle parçalarının toplamı olarak işlev görmez 15,16,17,32,33,34,35,36 . Birden fazla filament ile etkileşime giren birden fazla motor içeren daha karmaşık yapılar, miyozin ve aktin filamentlerinin ağlarının sinerjisini daha iyi anlamak için gereklidir15,32. Dambıl tahlili oryantasyonu, bir boncuğa bağlı birden fazla miyozin bulundurarak veya bir yüzeye bağlı miyozin kalınlığında bir filament kullanarak ve motorların asılı AF 4,23,34,37,38,39,40 ile etkileşime girmesine izin vererek küçük topluluk kuvveti oluşumunu araştırmak için kullanılmıştır.
Diğer küçük topluluk tahlilleri arasında, miyozin motorlarının bir kapak kayması yüzeyine kaplandığı ve 4,35,36,38,39,40,41,42,43 motor ekibi tarafından üretilen kuvveti araştırmak için bir AF'ye bağlı bir boncuk kullanıldığı bir in vitro filament kayma testi bulunmaktadır. . Her iki durumda da, miyosinler sert bir yüzeye bağlanır - boncuk veya örtü kayması - ve bir AF kullanır. Bu gibi durumlarda, motorlar serbestçe hareket edemez veya birbirleriyle iletişim kuramazlar ve miyozinlerin katı bir şekilde bağlanmış olması, motorların sarkomer32'de birlikte çalışacağı uyumlu, hiyerarşik ortamı yansıtmaz. Önceki çalışmalar, miyozin II'nin çevresini algılayabildiğini ve kuvvet üretimi ve görev oranı41,44,45 gibi özellikleri değiştirerek değişen viskoelastik veya motor konsantrasyon koşullarına göre uyum sağlayabileceğini öne sürmüştür. Bu nedenle, miyozin II topluluk kuvveti üretiminin mekanik temellerinin daha gerçekçi bir resmini çizmek için motor iletişimini ve sistem uyumluluğunu teşvik eden ve yakalayan bir optik yakalama testi geliştirmeye ihtiyaç vardır.
Burada, iki aktin filamenti arasında etkileşime giren çoklu miyozin motorlarından oluşan aktomiyozin demetleri veya sandviçler oluşturarak hiyerarşik yapıyı in vitro optik yakalama ile birleştirmek için bir yöntem geliştirdik. Bu modüler tahlil geometrisi, moleküler ve çevresel faktörlerin topluluk miyozin kuvveti üretimini nasıl etkilediğini doğrudan araştırma yeteneğine sahiptir. Ayrıca, bu aktin-miyozin toplulukları aracılığıyla kuvvet oluşturma mekanizmalarının araştırılması, kas kasılması gibi büyük ölçekli hücresel görevlerinmoleküler seviye 9,10,13'ten nasıl yayıldığını modellemeye ve anlamaya yardımcı olma potansiyeline sahiptir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Actin protein (biotin): skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>AB07-A</td>
			<td>Biotinylated actin protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Actin protein, rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>AKL99-A</td>
			<td>Actin protein</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor 488 Phalloidin</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A12379</td>
			<td>Actin stabilizer and Alexa Fluor 488 stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATP</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>BP413-25</td>
			<td>Required for actin assembly and myosin motility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beta-D-glucose</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>MP218069110</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blotting Grade Blocker (casein)</td>
			<td>Biorad</td>
			<td>1706404</td>
			<td>Used to block surface from non-specific binding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>C79500</td>
			<td>Calcium chloride, provides the necessary control over the dynamics of actin myosin network</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Catalase</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>ICN10040280</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12544C</td>
			<td>Used to make flow cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DTT</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>AC327190010</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>A4094</td>
			<td>Regent used for cleaning coverslips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose oxidase</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>34-538-610KU</td>
			<td>Part of oxygen scavenging system used to reduce photobleaching during fluorescence imaging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>P217-500</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KOH</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>P250-1</td>
			<td>Used to etch coverslips and adjust buffer pH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgCl2</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>M33-500</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>12-544-2</td>
			<td>Used to make flow cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Myosin II protein: rabbit skeletal muscle</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>MY02</td>
			<td>Full length myosin motor protein isolated from rabbit skeletal muscle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nanotracker2</td>
			<td>Bruker/JPK</td>
			<td>NT2</td>
			<td>Optical trapping instrument</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-l-lysine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8920</td>
			<td>Facilities adhesion of actin filaments onto glass surface of the coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhodamine Phalloidin</td>
			<td>Cytoskeleton</td>
			<td>PHDR1</td>
			<td>Actin stabilizer and rhodamine fluorescent stain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Streptavidin beads, 1 &#956;m</td>
			<td>Spherotech</td>
			<td>SVP-10-5</td>
			<td>Optical trapping handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tris-HCl</td>
			<td>Fisher scientific</td>
			<td>PR H5121</td>
			<td>Used for buffer preparation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

probing myosin ensemble mechanics in actin filament bundles using optical tweezers

Miyosinler, ATP'yi aktin filament (AF) izleri boyunca adım atmak için hidrolize eden motor proteinlerdir ve motilitesi ve kas kasılması gibi hücresel süreçlerde gereklidir. Kuvvet üretme mekanizmalarını anlamak için, miyozin II hem tek moleküllü (SM) seviyede hem de optik yakalama gibi biyofiziksel yöntemler kullanılarak in vitro motor ekipleri olarak araştırılmıştır.
Bu çalışmalar, üç boncuklu bir düzenlemedeki tek moleküllü seviyeden, sert bir boncuk veya kayma düzeninde örtü kayması yüzeyinde birlikte çalışan motor gruplarına geçerken miyozin kuvvet üretme davranışının büyük ölçüde farklılık gösterebileceğini göstermiştir. Bununla birlikte, bu tahlil yapıları, miyozin grup dinamiklerinin viskoelastik yapısal hiyerarşi içinde bir hücre içinde olduğu gibi değerlendirilmesine izin vermez. Çoklu aktin filamentlerle etkileşime giren miyozin toplulukları tarafından kuvvet oluşturma mekaniğini araştırmak için optik cımbız kullanan bir yöntem geliştirdik.
Bu aktomiyozin demetleri, motor iletişimi ve topluluk kuvveti çıkışını yakalayan hiyerarşik ve uyumlu bir ortamda araştırmayı kolaylaştırır. Tahlilin özelleştirilebilir doğası, miyozin topluluğundaki, aktin filament demetindeki veya çevredeki ortamdaki değişikliklerin farklı kuvvet çıktılarına nasıl yol açtığını anlamak için deneysel koşulların değiştirilmesine izin verir.

Aktomiyozin demet sistemlerini içeren akış hücreleri, mikroskop sürgüsü ve çift taraflı yapışkan banttan yapılmış bir kanalla ayrılmış kazınmış bir kapak kaymasından oluşan standart bir tasarıma sahiptir (Şekil 1). Tahlil daha sonra protokolde açıklandığı gibi aşamalı tanıtımlar kullanılarak kapaktan yukarı doğru oluşturulur. Son tahlil, şablon rodamin etiketli aktin filamentlerinden oluşur; istenen miyozin konsantrasyonu ( Şekil 2...

Watch this Scientific Journal Video about Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers at JoVE.com

Probing Myosin Ensemble Mechanics in Actin Filament Bundles Using Optical Tweezers

Aktomiyozin demetlerinin in vitro oluşumu ve optik cımbız kullanılarak miyozin topluluk kuvveti oluşumunun ölçülmesi sunulmuş ve tartışılmıştır.

Optik Cımbız Kullanarak Aktin Filament Demetlerinde Myosin Topluluk Mekaniğinin İncelenmesi

Myosins are motor proteins that hydrolyze ATP to step along actin filament (AF) tracks and are essential in cellular processes such as motility and muscle ...

Bu protokolü kullanarak aktin davranışını araştırmak önemlidir, çünkü kullanıcının optik yakalama hassasiyetini kullanarak motor protein topluluk dinamiklerini araştırmasına izin verir. Bu tekniğin temel avantajı, birçok optik yakalama deneyinde kullanılan geleneksel tek motorlu tek filament oryantasyonunun aksine, aktin yapısal hiyerarşisi içindeki miyozin mekaniğini ölçme yeteneğidir. Bu protokolün bir diğer avantajı, kullanıcının tahlili seçtikleri hiyerarşik sitoiskelet sistemine göre özelleştirmesini sağlayan modüler doğasıdır.Başlamak için, mikroskop slaytının ortasına birbirinden üç ila dört milimetre uzakta iki parça çift taraflı yapışkan bant uygulayın. Ardından, slaytın kenarından sarkan fazla bandı yırtın veya kesin. Daha sonra, bir kanal oluşturmak için mikroskop slaytının uzun eksenine dik olarak bandın üstüne PLL kaplı kapak kaymasını ekleyin.Kapak kaymasını bant ve mikroskop üzerine sıkıştırmak için küçük bir tüp kullanarak, bant şeffaf olana kadar iyice kaydırın, böylece akış kanalından sızıntıya neden olabileceğinden bantta kabarcık olmadığından emin olun. PLL akış hücresine 15 mikrolitre seyreltilmiş rodamin aktinini ekleyin ve fazla çözeltiyi akış hücresinden geçirin, ancak akış kanalının kurumasına izin vermeyin. Ardından, bir nem odasında 10 dakika kuluçkaya yatırın.Daha sonra, aktin polimerizasyon tamponunda mililitre kazein çözeltisi başına bir miligram hazırlayın ve sonraki bileşenlerin spesifik olmayan bağlanmasını önlemek için çözeltinin 15 mikrolitresini ekleyin. Ardından, bir nem odasında beş dakika kuluçkaya yatırın. Daha sonra, hazırlanan biyotinile aktin ve boncuk süspansiyonuna istenen miyozin konsantrasyonunu ekleyin ve bir pipet ucu ile hafifçe karıştırın.Daha sonra, derhal akış hücresine istenen miyozin konsantrasyonu ile birlikte süspansiyonun 15 mikrolitresini ekleyin ve 20 dakika boyunca inkübe edin. Daha sonra, görüntüleme ve optik yakalama deneyleri sırasında buharlaşmayı önlemek için akış hücresinin açık uçlarını oje ile kapatın. Sistem hazır olduğunda, ekranın sol alt köşesindeki lazer güç düğmesini kullanarak lazeri 50 miliwatt'a kadar açın ve 30 dakika boyunca stabilize olmasına izin verin.Deney sırasında görüntüleme ve manipülasyon için bu pencereleri açmak için yazılımdaki aydınlatma, kamera, objektif ve sahne alanı hareket düğmelerine sırayla tıklayın. Açma/Kapama düğmesine tıklayarak mikroskop aydınlatmasını açın ve çubuğu tıklayıp sağa doğru sürükleyerek maksimum güce ayarlayın. Numune alanını açın ve numune tutucuyu mikroskop aşamasından çıkarın.Ardından akış hücresini ekleyin ve metal numune tutucularla sabitleyerek kapak kaymasının altta olduğundan emin olun. Daha sonra, alt hedefin ortasına 30 mikrolitre RO suyu ekleyin ve numune aşamasını yeniden yerleştirin. Ardından, su boncuğu kapak kaymasına dokunana kadar uzaktan kumandadaki L2'yi kullanarak alt hedefi yükseltin.Ardından, uzaktan kumandadaki R2 kullanılarak akış hücresine olan mesafenin yaklaşık yarısına ulaşılana kadar üst hedefi düşürün. Daha sonra, akış hücresinin tepesine doğrudan üst hedefin altına 170 mikrolitre RO suyu ekleyin ve suyun yüzey gerilimini kırana ve bir menisküs oluşturana kadar üst hedefi düşürün. Daha sonra, akış kanalına bitişik bandın kenarına ulaşılana kadar uzaktan kumanda üzerindeki ok tuş takımını kullanarak mikroskop aşamasını hareket ettirin ve ardından numune kapısını kapatın.Ekrandaki objektif penceresini kullanarak, bandın kenarını getirin ve ekrandaki kontrolleri kullanarak üst oka ve alt oka tıklayarak üst hedefe tıklayarak Lazer Hedefi adlı alt hedefi yukarı getirerek odaklanın. Yüzen bir boncuk bulun ve deklanşörü açacak ve yakalama lazerinin numuneye çarpmasına izin verecek olan tuzak deklanşör düğmesine tıklayarak yakalayın. Ardından, ekrandaki tuzak imlecine tıklayın ve yakalama lazerinin konumunu hareket ettirmek için sürükleyin.Sıkıştıktan sonra, kalibrasyon düğmesine tıklayarak boncuğu kalibre edin. Ardından, Ayarlar'a tıklayın ve yazılım penceresinin sol alt köşesinde bulunan boncuğun çapını ve sahne alanının sıcaklığını yazın. Ardından, Tuzak 1'e, ardından X Signal'e tıklayın ve Çalıştır'a tıklayarak köşe frekansı uyumunu gerçekleştirin.Ardından, işlev uyumunu optimize etmek için pencerenin içine tıklayıp sürükleyin. Daha sonra, Duyarlılık ve sertlik değerleri için kullan'a tıklayın ve ardından değerleri kabul edin. Ardından, pencereyi kapatın.Kapak kaymasının yüzeyindeki AF'lere bağlı boncukları arayarak ve birlikte lokalize edilmiş her iki floresan AF'yi arayarak bir aktomiyozin demeti bulun. Beyaz ışık kaynağını açın ve tareti çevirerek her aktin filamentini görüntülemek için uygun filtre küpünü kullanın. Doğrulandıktan sonra, tuzak deklanşör düğmesine tıklayarak paketin üst filamentine bağlı boncuğu yakalayın.Ardından, ekrandaki kontrolleri kullanarak osiloskop düğmesine tıklayarak verileri kaydedin. Verileri kaydetmeden ölçümleri görselleştirmek için, Başlat'a tıklayın ve ardından tüm verileri kaydetmek için Otomatik Kaydet'e tıklayın. Ölçümleri kaydetmek için, Kaydı başlat'a tıklayın ve X Sinyali veya Y Sinyali açılır menüsünden seçim yaparak hangi verilerin gerçek zamanlı olarak görselleştirileceğini seçin.İnşa edilmiş in vitro aktin yapısal hiyerarşisi içinde kuvvet üreten iskelet miyozin motorlarının kuvvet izi, iki ila beş dakika içinde bir platoya ulaşılana kadar kuvvette sabit bir rampa sergiler. Bununla birlikte, herhangi bir net kuvvet üretmeyen bazı aktomiyozin demetlerinin ve kuvvet izlerinin temel gürültü olarak göründüğü veya düşük motor konsantrasyonu veya filamentlerin elverişsiz paralel yönelimi nedeniyle 90 saniye boyunca kuvvette önemli bir net artış göstermediği de gözlenmiştir. Bu protokol gelişimi, hücre bölünmesi ve aşağıdan yukarıya doğru kas kasılması gibi büyük ölçekli hücresel görevlerin modellenmesine yardımcı olacak daha karmaşık in vitro sitoiskelet testleri oluşturmaya giden yolu açacaktır.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Üç boyutlu optik çözünürlük foto akustik Mikroskopi

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Biyomühendislik

Multiparametric Optical Mapping of the Langendorff-perfused Rabbit Heart

Çok parametreli Langendorff perfüze Tavşan Kalp Optik Haritalama

Optical imaging and fluorescent probes have significantly advanced research methodology in the field of cardiac electrophysiology in ways that could not ...

Optical Mapping of Action Potentials and Calcium Transients in the Mouse Heart

Fare Kalp Aksiyon Potansiyelleri ve Kalsiyum Geçici Optik Haritalama

The mouse heart is a popular model for cardiovascular studies due to the existence of low cost technology for genetic engineering in this species. ...

Stretching Short Sequences of DNA with Constant Force Axial Optical Tweezers

Sabit Kuvvet Eksenel Optik cımbız ile DNA Kısa Diziler Stretching

Single-molecule techniques for stretching DNA of contour lengths  less than a kilobase are fraught with experimental difficulties. However, many ...

Multiplexed Single-molecule Force Proteolysis Measurements Using Magnetic Tweezers

Manyetik cımbız kullanarak Multiplexed Tek molekül Kuvvetleri Proteoliz Ölçümleri

The  generation and detection of mechanical forces is a ubiquitous aspect of cell physiology,  with direct relevance to cancer metastasis1, atherogenesis2 ...

Monitoring the Wall Mechanics During Stent Deployment in a Vessel

Bir Gemi Stent Dağıtım sırasında Duvar Mekaniği izlenmesi

Clinical trials have reported different restenosis rates for various stent designs1. It is speculated that stent-induced strain concentrations on the ...

In vitro Synthesis of Native, Fibrous Long Spacing and Segmental Long Spacing Collagen

In vitro Synthesis of Native, Fibrous Long Spacing and Segmental Long Spacing Collagen

Yerli, Fibröz Uzun Aralığı ve Bölümlere Uzun Aralığı Kollajen in vitro sentezi olarak

Collagen fibrils are present in the  extracellular matrix of animal tissue to provide structural scaffolding and  mechanical strength. These native ...

Magnetic Tweezers for the Measurement of Twist and Torque

Büküm ve Moment Ölçümü için Manyetik Cımbız

Single-molecule techniques make it possible to investigate the behavior of individual biological molecules in solution in real time. These techniques ...

Nanomanipulation of Single RNA Molecules by Optical Tweezers

Optik cımbız ile Tek RNA Moleküllerin Nanomanipulation

A large portion of the human genome is transcribed but not translated. In this post genomic era, regulatory functions of RNA have been shown to be ...

Label-free Single Molecule Detection Using Microtoroid Optical Resonators

Microtoroid Optik Rezonatörler Kullanarak Etiket serbest Tek Molekül Algılama

Detecting small concentrations of molecules down to the single molecule limit has impact on areas such as early detection of disease, and fundamental ...