Pozitif Anlamlı RNA Virüsü Varyantlarını Tasarlamak için Tersine Genetik

1.1K Views

•

15:49 min

•

June 9th, 2022

DOI :

10.3791/63685-v

June 9th, 2022

•

1,072 Views

Shalini Soni¹, Shubhra Agarwal¹, Rakesh Aggarwal², Naga Suresh Veerapu¹

¹Virology Section, Department of Life Sciences, Shiv Nadar University, ²Gastroenterology, Sanjay Gandhi Postgraduate Institute of Medical Sciences

Chapters

0:04

Introduction

1:01

Genome‐Wide Substitution Mutagenesis of JFH1 Using Error‐Prone PCR

2:46

Estimation of the Proportion of Mutations in ep‐PCR Products (Mutant Libraries)

6:08

Viral RNA Transfection of the Huh7.5 Cell Line

7:57

Quantification of Virus Titers

11:59

Drug‐Resistant Viral Variant Selection

13:33

Results: Integration of ep‐PCR and Virus Reverse Genetics to Generate HCV Mutants

15:17

Conclusion

Transcript

Burada açıklanan protokol, 10 kilobayt uzunluğa kadar tek iplikli pozitif RNA viral genomlarının rastgele mutajenize edilmiş tam uzunlukta RNA kütüphanelerinin oluşturulmasına ve istenen deneysel koşullar altında ilgilenilen fenotiplerin seçilmesi

Summary

Protokol, hataya açık PCR ve ters genetik kullanarak tam uzunlukta mutant RNA sentezini birleştirerek hepatit C virüsü genomunda kontrol edilebilir genetik çeşitliliği tanıtmak için bir yöntemi açıklar. Yöntem, fenotip seçimi için bir model sağlar ve 10 kb uzunluğunda pozitif anlamlı RNA virüs genomları için kullanılabilir.

Explore More Videos

Ters Genetik

Pozitif Anlaml RNA Vir s

lgilenilen Fenotipler

Tam Uzunlukta Mutant RNA Sentezi FL MRS

K t phane

Genetik e itlilik