Name: assessing mitochondrial function in sciatic nerve by high-resolution respirometry
Uploaded: 2022-05-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry at JoVE.com

Denne studien ble finansiert av Instituto Serrapilheira, Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) og Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior-Brasil (CAPES). Vi er takknemlige til Dr. Antonio Galina Filho, Dr. Monica Montero Lomeli og Dr. Claudio Masuda for støtten med laboratoriefasiliteter, og Dr. Martha Sorenson for snille og verdifulle kommentarer for å forbedre artikkelen.

Den nåværende protokollen er godkjent av Etikkutvalget for bruk av dyr i forskning, CCS/UFRJ (CEUA-101/19) og Nasjonale helseinstitutter retningslinjer for pleie og bruk av eksperimentelle dyr. Isjiasnerven er isolert fra fire måneder gamle mannlige C57BL/6 mus, euthanized av cervical dislocation i henhold til institusjonelle retningslinjer. Protokolltrinnene er optimalisert for å unngå mitokondrieforringelse. Derfor, i denne protokollen, ble kalibrering av polarografiske oksygensensorer utført før musisjias nerve...

Flere sykdommer eller tilstander som følger med nevropatier har mitokondrie dysfunksjon som en risikofaktor. Evalueringen av mitokondriefunksjon i perifere nerver er avgjørende for å belyse hvordan mitokondriene virker under disse nevrodegenerative forholdene. Vurderingen av mitokondriefunksjon er arbeidskrevende på grunn av vanskeligheten med isolasjonsmetoden og knappheten på materialet. Dermed er utviklingen av vevspermeabiliseringsteknikker som ikke krever isolering av mitokondrier viktig.
<p class="jove_con...

Mitokondrier er avgjørende for å opprettholde celle levedyktighet og utføre mange cellefunksjoner som energimetabolisme (glukose, aminosyre, lipid og nukleotid metabolisme veier). Som det primære stedet for reaktiv oksygenarter (ROS) produksjon, er mitokondrier sentrale i flere cellesignaleringsprosesser som apoptose og deltar i syntesen av jern-svovel (Fe-S) klynger, mitokondrieprotein import og modning, og vedlikehold av deres genom og ribosomer 1,2,3. Det mitokondriemembrandynamikknettverket styres av fusjons- og fisjonsprosesser, og de har også maskiner for kvalitetskontroll og mitophagy 4,5,6.
Mitokondrie dysfunksjon er forbundet med utseendet av flere patologiske tilstander som kreft, diabetes og fedme7. Forstyrrelser i mitokondriefunksjonen oppdages i nevrodegenerative lidelser som påvirker sentralnervesystemet, som ved Alzheimers sykdom 8,9, Parkinsons sykdom 10,11, amyotrofisk lateral sklerose12,13 og Huntington sykdom14,15 . I det perifere nervesystemet observeres tap av mitokondriefunksjon i axoner i immun nevropatier, som Guillain-Barré syndrom16,17, og i forbindelse med høy mitokondrie ROS-produksjon i axoner, fører disse hendelsene til MAP Kinase-aktivering i Schwann-cellene18. Dette viser at mitokondriefysiologi kan være viktig, ikke bare for en stedsspesifikk celle, men for et helt vev. I HIV-assosiert distal sensorisk polyneuropati (HIV-DSP) har mitokondrier en rolle i mekanismen der transaktivatoren for transkripsjon (HIV-TAT) protein gjør det mulig for HIV å replikere effektivt, samt flere andre roller i HIV-infeksjonspatogenese19,20.
Evaluering av isjias nerve mitokondrie fysiologi har dukket opp som et viktig mål for å undersøke nevropati 7,21,22. I diabetisk nevropati tyder proteomiske og metabolomiske analyser på at de fleste molekylære endringer i diabetes påvirker isjiasnerven mitokondrie oksidativ fosforylering og lipidmetabolisme7. Disse endringene synes også å være tidlige tegn på fedme-indusert diabetes21. I en musemodell av kjemoterapiindusert smertefull nevropati oppdages mitokondriehemming i isjiasnerven som en reduksjon i oksidativ fosforylering22, og en reduksjon av mitokondriekomplekser aktiviteter, membranpotensial og ATP-innhold23. Men selv om flere grupper har sitert mitokondriedysfunksjon i nevropatier, er disse studiene begrenset til målinger av aktivitet i mitokondriekomplekser uten bevaring av mitokondriemembranene, uten evaluering av mitokondrieintegritet eller målinger av ATP-innhold som en parameter for mitokondrie-ATP-produksjon. Generelt krever en riktig vurdering av mitokondrie oksygenforbruk og ROS-produksjon isolering av mitokondrier ved differensial sentrifugering i en percoll / sukrose gradient. Isolering av mitokondrier kan også være en begrensende faktor for isjiasnervevev på grunn av den store mengden vev som trengs og mitokondrier tap og forstyrrelser.
Den nåværende studien tar sikte på å gi en protokoll for å måle mitokondriefysiologi som mitokondrie oksygenforbruk og ROS-produksjon i isjiasnerven, bevare mitokondriemembraner og uten behov for å isolere mitokondrier. Denne protokollen er tilpasset fra oksygenforbruksmålinger i permeabiliserte muskelfibre24 ved høyoppløselig respirometri (HRR). Fordelene ved denne prosedyren er muligheten for å evaluere mitokondrier i små mengder vev som isjiasnerven og evaluere mitokondrieparametere in situ, og dermed bevare mitokondriemiljøet, strukturen og bioenergetisk profil, for å oppnå et fysiologisk pålitelig resultat. Mitokondrie-luftveiene ble bestemt med substrater og hemmere etter isjiasnervens permeabilisering for å vurdere mitokondriebioenergetikk og cytokrom c koeffisient for mitokondriemembranintegritet på riktig måte, og gir en guide for trinn i mitokondrie-elektrontransportsystemet (ETS) evaluering og beregning av essensielle parametere. Denne studien kan gi verktøy for å svare på spørsmål i patofysiologiske mekanismer der isjias nervemetabolisme er implisert, for eksempel perifere nevropatier.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#39; triphosphate dissodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A26209</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#8242;-diphosphate sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A2754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amplex Red Reagent</td>
			<td>Thermo Fisher scientific</td>
			<td>A12222</td>
			<td>Amplex Red is prepared in DMSO accordindly with product datasheet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antimycin A (from Streptomyces sp.)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7030</td>
			<td>heat shock fraction, protease free, fatty acid free, essentially globulin free, pH 7, &#8805;98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C6763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone (FCCP)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C2920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytochrome c</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C7752</td>
			<td>(from equine heart; small hemeprotein)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DataLab version 5.1.1.91</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td></td>
			<td>Copyright (c) 2002 - 13 by Dr. Erich Gnaiger</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital orbital microplate shaker 120V</td>
			<td>Thermo Fisher scientific</td>
			<td>88882005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DL-Dithiothreitol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>43819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HAM80075</td>
			<td>10 uL, 25 uL and 50 uL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution 30% W/W</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H1009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imidazole</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I2399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-(&#8722;)-Malic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MES sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M3885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting forceps, curved</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F4142</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting forceps, straight</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F4017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O2K - Filter set Amplex Red</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td>44321-01</td>
			<td>Fasching M, Sumbalova Z, Gnaiger E (2013) O2k-Fluorometry: HRR and H2O2 production in mouse brain mitochondria. Mitochondr Physiol Network 17.17.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O2K - Fluorescence LED2 - module component Fluorscence-Sensor Green</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td>44210-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>O4876</td>
			<td>(from Streptomyces diastatochromogenes; mixture of oligomycins A, B, and C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OROBOROS Oxygraph-2k</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td>http://www.oroboros.at</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Palmitoylcarnitine (Palmitoyl-DL-carnitine-HCl)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase from horseradish</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene</td>
			<td>MERCK</td>
			<td>P5606</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphocreatine disodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium dihydrogen phosphate monobasic</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hydroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>221473</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotenone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SAE0073</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium succinate dibasic hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S9378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T0625</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing mitochondrial function in sciatic nerve by high-resolution respirometry

Mitokondrie dysfunksjon i perifere nerver følger med flere sykdommer forbundet med perifer nevropati, som kan utløses av flere årsaker, inkludert autoimmune sykdommer, diabetes, infeksjoner, arvelige lidelser og svulster. Vurdering av mitokondriefunksjon i mus perifere nerver kan være utfordrende på grunn av den lille prøvestørrelsen, et begrenset antall mitokondrier tilstede i vevet, og tilstedeværelsen av en myelinhylse. Teknikken beskrevet i dette arbeidet minimerer disse utfordringene ved å bruke en unik permeabiliseringsprotokoll tilpasset en som brukes til muskelfibre, for å vurdere isjiasnerve mitokondriefunksjon i stedet for å isolere mitokondriene fra vevet. Ved å måle fluorimetrisk reaktiv artsproduksjon med Amplex Red/Peroxidase og sammenligne forskjellige mitokondrie-substrater og hemmere i saponin-permeabiliserte nerver, var det mulig å oppdage mitokondrie-respiratoriske tilstander, reaktive oksygenarter (ROS) og aktiviteten til mitokondriekomplekser samtidig. Derfor gir metoden som presenteres her fordeler sammenlignet med vurderingen av mitokondriefunksjon ved andre teknikker.

Mitokondrie oksygenforbruket av permeabilisert isjiasnerv er representert i figur 2. Det røde sporet representerer O 2-fluksen per enhetsmasse i pmol/s.mg. Etter å ha registrert et basalt oksygenforbruk med endogene substrater (rutinemessig respirasjon), injiseres succinate (SUCC) for å registrere kompleks II (succinat dehydrogenase)-drevet åndedrett, noe som resulterer i en økning i oksygenforbruket. I rekkefølge tilsettes en mettende konsentrasjon av ADP, aktiverer ATP-syn...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry at JoVE.com

Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry

Høyoppløselig respirometri koblet til fluorescenssensorer bestemmer mitokondrie oksygenforbruk og reaktiv oksygenart (ROS) generasjon. Den nåværende protokollen beskriver en teknikk for å vurdere mitokondrie respiratoriske rater og ROS-produksjon i permeabilisert isjiasnerve.

Vurdering av mitokondriefunksjon i isjiasnerven ved høyoppløselig respirometri

Mitochondrial dysfunction in peripheral nerves accompanies several diseases associated with peripheral neuropathy, which can be triggered by multiple ...

Denne protokollen tillater evaluering av mitokondriefunksjon inne i nerve ved parcellasjon av de isolerte mitokondriene, en utfordrende prosedyre i et lite vev som inneholder et begrenset antall mitokondrier. Teknikken gir en mulighet til å analysere mitokondrier funksjoner som oksygenforbruk og ROS produksjon samtidig i en bevart mitokondrier in situ. Med flere substrater, inhibitorer og uncoupler designprotokoller.Flere sykdommer deler mitokondriefunksjon, spesielt nevropatier indusert av type to diabetes eller kjemoterapi. I disse sykdommene er svekkelse av mitokondrie oksidativ fosforylering det eneste tegn som dikterer sykdomsutvikling. Denne metoden gir innsikt i nevrobiologi, biokjemi og farmakologi, med undersøkelse av mitokondriesykdomsmekanismer, søk etter terapier, for eksempel mitokondrieforsterkere eller ameliorated nevropatisk smerte.Til å begynne med kalibrer oksygensensorene ved å pipettere 2,1 milliliter MR-buffer inn i hvert kammer. Lukk den med stopperne og trekk luft inn i kammeret til en boble er dannet. Rør ved 37 grader Celsius i en time i kalibreringsmodus til oksygenstrømmen per masse stabiliserer seg.Bruke HRR-programvaren til å utføre en luftkalibrering av de polarografiske oksygensensorene i henhold til produsentens instruksjoner. For vevsforberedelse, plasser isjiasnerven i en Petri-tallerken med nok TP-buffer til å dekke den. Hold den ene enden av nerven med tang og med et annet par tang trekker ut nervebuntene horisontalt.Først overfører du det viste vevet til en liten tallerken som inneholder en milliliter TP-buffer for vevspermeabilisering. For å starte permeabilisering, overfør vevet med tang til en annen tallerken som inneholder en milliliter TP-buffer, som inneholder 50 mikrogram per milliliter saponin. Plasser platen i en mikroplate shaker og la den røre forsiktig i 30 minutter.Overfør deretter vevet med tang til en frisk tallerken som inneholder en milliliter MR-buffer, og la det røre forsiktig i 10 minutter. Overfør vevet med tang til et kalibrert HRR-kammer. Fyll HRR-kamrene med 2,1 milliliter MR-buffer.Tilsett Amplex Red og peroxidase i en endelig konsentrasjon på henholdsvis fem mikromolar og to enheter per milliliter. Legg deretter til den gjennomtrengelige isjiasnerven. Fest instrumentets fluorescerende sensorer.Slå deretter av lysene i kontrolldelen av programvaren og klikk på koble til oksygraf"Gå for å redigere protokoller"i programvaren og sett inn vevsvekten. Gå til layout og velg det spesifikke flux per enhetsprøve"alternativet. Velg deretter tomter for samtidig tilgang til oksygenforbrukets avlesning, og om nødvendig hydrogenperoksidproduksjonen.Vent i ca. 10 minutter. Injiser to pulser av hydrogenperoksid, hver til en endelig konsentrasjon på 260 mikromolar for kalibrering av kammeret. Injiser 20 mikroliter succinat, et mitokondriekompleks II-substrat, for å aktivere mitokondrie-elektrontransportsystemet.Tilsett 20 mikroliter ADP for å aktivere ATP-syntese. I rekkefølge legger du til fem mikroliter cytokrom c som en indikator på membranintegritet. Titrat med aliquots på 0,2 mikrogram per milliliter oligomycin til det ikke observeres ytterligere reduksjon i oksygenforbruket.Titrat med aliquots på 0,5 mikromol per liter FCCP, mitokondrie-uncoupler, til det ikke observeres ytterligere økning i oksygenforbruket. For å avslutte eksperimentet injisere to mikroliter antimycin A, gjør en endelig konsentrasjon på fem millimolar og vent på at strømmen skal stabilisere seg. Gå til kommandolinjen.Søk etter multisensorisk"i programvaren. Klikk på kontroll"trykk deretter lagre fil"og koble fra. Åpne den lagrede filen og velg oksygenfluks per massebrett for å oppnå de eksperimentelle oksygenforbruksresultatene.Velg vinduet manuelt mellom injeksjoner ved å trykke på skift pluss venstre museknapp. Gå til merker, og velg statistikk for å visualisere resultatene for hver injeksjon av substrater, inhibitorer og uncoupler-protokoll. For hydrogenperoksidproduksjon utfører samme prosedyre med forsterkerhellingssporet.Nedgangen i membranpotensialet fremmet av ATP-sytaseaktivitet akselererte oksygenforbruket. Tilsetningen av eksogen cytokrom C fremmet bare minimal stimulering av respirasjon, sertifiserende mitokondrie ytre membranintegritet for dette preparatet. Absolutt oksygenstrøm ble registrert og bare en 6,3% økning ble observert i åndedrett, noe som indikerer god kvalitet på vevspreparatet.Oksygenforbruket og ROS-produksjonen ble målt samtidig i nærvær av forskjellige substrater som gir drivstoff til elektrontransportsystemet. Tilsetningen av pyruvat og malate for mitokondriekompleks jeg økte åndedrett. Og videre tilsetning av succinate for komplekse II øker også oksygenforbruket.Derfor kan andre substrater testes. ROS-produksjonen økte også, noe som indikerer lekkasje av oksygen fra elektrontransportsystemet. Tilsetningen av adenosindifosfat i mettende konsentrasjon økte oksygenforbruket som drev ATP-dannelsen, og reduserte ROS-produksjonen.Derimot reduserte oligotitrering oksygenforbruket og økt ROS-produksjon. Dette antydet at permeablized isjiasnerven kunne gjenskape standardforholdet i mitokondriefysiologi. Tilsetningen av FCCP og retinone, på linje med de forventede oksygenfluksendringene, bekrefter at mitokondriefysiologi og bioenergetisk profil ble bevart i permeablized isjiasnerven.Det viktigste trinnet er å forsiktig forberede vevsdelen, sørg for at alle kammeråpninger er ordentlig rengjort. Endringer i mitokondrienes funksjon kan skyldes dysfunksjon eller et lavere mitokondrietall. derfor anbefales syntaseaktivitet og mitokondrielt DNA-innholdsbekreftelse av PCR.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Bruke Stillas liposomer for å rekonstituere Lipid-proksimale Protein-protein interaksjoner<em&gt; In Vitro</em

Studies of integral membrane proteins in vitro are frequently complicated by the presence of a hydrophobic transmembrane domain. Further complicating ...

High-resolution Single Particle Analysis from Electron Cryo-microscopy Images Using SPHIRE

Høyoppløselig enkeltpartikkelanalyse fra elektronkryomikroskopi bilder ved hjelp av SPHIRE

SPHIRE (SPARX for High-Resolution Electron Microscopy) is a novel open-source, user-friendly software suite for the semi-automated processing of single ...

Measuring Liver Mitochondrial Oxygen Consumption and Proton Leak Kinetics to Estimate Mitochondrial Respiration in Holstein Dairy Cattle

Måle leveren mitokondrie oksygenforbruk og Proton lekkasje Kinetics å anslå mitokondrie åndedrett i Holstein melkeku

Oxygen consumption, proton motive force (PMF) and proton leak are measurements of mitochondrial respiration, or how well mitochondria are able to convert ...

Human Peripheral Blood Neutrophil Isolation for Interrogating the Parkinson's Associated LRRK2 Kinase Pathway by Assessing Rab10 Phosphorylation

Humanperifert blod nøytrofil isolasjon for å forhøre Parkinsons tilknyttede LRRK2 Kinase Pathway ved å vurdere Rab10 fosforylering

The leucine rich repeat kinase 2 (LRRK2) is the most frequently mutated gene in hereditary Parkinson&#8217; disease (PD) and all pathogenic LRRK2 ...

High-Resolution Complexome Profiling by Cryoslicing BN-MS Analysis

Høyoppløselig Complexome profilering av Cryoslicing BN-MS analyse

Proteins generally exert biological functions through interactions with other proteins, either in dynamic protein assemblies or as a part of stably formed ...

Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop

Cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been established as a routine method for protein structure determination during the past decade, taking an ...

High-Resolution Neutron Spectroscopy to Study Picosecond-Nanosecond Dynamics of Proteins and Hydration Water

Høyoppløselig nøytronspektroskopi for å studere picosekund-nanosekunddynamikk av proteiner og hydreringsvann

Neutron scattering offers the possibility to probe the dynamics within samples for a wide range of energies in a nondestructive manner and without ...

Advancing High-Resolution Imaging of Virus Assemblies in Liquid and Ice

Fremme høyoppløselig avbildning av virussamlinger i væske og is

Interest in liquid-electron microscopy (liquid-EM) has skyrocketed in recent years as scientists can now observe real-time processes at the nanoscale. It ...

High-Throughput Quantification of the Synthesis and Distribution of mtDNA

High-Throughput Image-Based Quantification of Mitochondrial DNA Synthesis and Distribution

High-Throughput Image-Based Quantification of Mitochondrial DNA Synthesis and Distribution (Video) | JoVE 

High-throughput bildebasert kvantifisering av mitokondriell DNA-syntese og distribusjon

The vast majority of cellular processes require a continuous supply of energy, the most common carrier of which is the ATP molecule. Eukaryotic cells ...

Stable Isotope Tracing & LC-MS Analysis to Measure DHODH and SDH Activities

Oxygen-Independent Assays to Measure Mitochondrial Function in Mammals

Oxygen-Independent Assays to Measure Mitochondrial Function in Mammals (Video) | JoVE 

Oksygenuavhengige analyser for å måle mitokondriefunksjon hos pattedyr

The flow of electrons in the mitochondrial electron transport chain (ETC) supports multifaceted biosynthetic, bioenergetic, and signaling functions in ...