Name: assessing mitochondrial function in sciatic nerve by high-resolution respirometry
Uploaded: 2022-05-05T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry at JoVE.com

Denna studie finansierades av Instituto Serrapilheira, Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) och Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior-Brasil (CAPES). Vi är tacksamma mot Dr Antonio Galina Filho, Dr Monica Montero Lomeli och Dr. Claudio Masuda för stödet med laboratoriefaciliteter och Dr. Martha Sorenson för vänliga och värdefulla kommentarer för att förbättra artikeln.

Detta protokoll är godkänt av etikkommittén för användning av djur i forskning, CCS/UFRJ (CEUA-101/19) och National Institutes of Health riktlinjer för vård och användning av försöksdjur. Ischiasnerven är isolerad från fyra månader gamla manliga C57BL/6-möss, avlivad genom cervikal dislokation enligt de institutionella riktlinjerna. Protokollstegen är optimerade för att undvika mitokondriell försämring. Därför utfördes i detta protokoll kalibrering av polarografiska syresensorer före mussciatisk ner...

Flera sjukdomar eller tillstånd som åtföljer neuropatier har mitokondriell dysfunktion som en riskfaktor. Utvärderingen av mitokondriell funktion i perifera nerver är avgörande för att belysa hur mitokondrierna verkar vid dessa neurodegenerativa tillstånd. Bedömningen av mitokondriell funktion är mödosam på grund av svårigheten med isoleringsmetoden och bristen på material. Således är utvecklingen av vävnadspermeabiliseringstekniker som inte kräver isolering av mitokondrier väsentlig.
<p class="jov...

Mitokondrier är viktiga för att upprätthålla cellviabilitet och utföra många cellfunktioner såsom energimetabolism (glukos, aminosyra, lipid och nukleotidmetabolismvägar). Som den primära platsen för produktion av reaktiva syrearter (ROS) är mitokondrier centrala i flera cellsignaleringsprocesser såsom apoptos och deltar i syntesen av järn-svavel (Fe-S) kluster, mitokondriell proteinimport och mognad och underhåll av deras genom och ribosomer 1,2,3. Mitokondriella membrandynamiknätverket styrs av fusions- och fissionsprocesser, och de har också maskiner för kvalitetskontroll och mitophagy 4,5,6.
Mitokondriell dysfunktion är förknippad med uppkomsten av flera patologiska tillstånd som cancer, diabetes och fetma7. Störningar i mitokondriell funktion detekteras vid neurodegenerativa störningar som påverkar centrala nervsystemet, som vid Alzheimers sjukdom 8,9, Parkinsons sjukdom10,11, amyotrofisk lateralskleros12,13 och Huntingtons sjukdom14,15 . I det perifera nervsystemet observeras förlust av mitokondriell funktion i axoner i immunneuropati, såsom Guillain-Barré syndrom16,17, och i samband med hög mitokondriell ROS-produktion i axoner leder dessa händelser till MAP Kinase-aktivering i Schwann-celler18. Detta visar att mitokondriell fysiologi kan vara avgörande inte bara för en platsspecifik cell utan för en hel vävnad. I HIV-associerad distal sensorisk polyneuropati (HIV-DSP) har mitokondrier en roll i mekanismen genom vilken transaktivatorn för transkriptionsprotein (HIV-TAT) tillåter HIV att replikera effektivt, liksom flera andra roller i HIV-infektionspatogenes19,20.
Utvärdering av mitokondriell fysiologi i ischiasnerven har framstått som ett viktigt mål för att undersöka neuropati 7,21,22. Vid diabetisk neuropati tyder proteomiska och metabolomiska analyser på att de flesta molekylära förändringar vid diabetes påverkar mitokondriell oxidativ fosforylering och lipidmetabolism7. Dessa förändringar verkar också vara tidiga tecken på fetma-inducerad diabetes21. I en musmodell av kemoterapiinducerad smärtsam neuropati detekteras mitokondriell försämring i ischiasnerven som en minskning av oxidativ fosforylering22 och en minskning av mitokondriella komplexaktiviteter, membranpotential och ATP-innehåll23. Men även om flera grupper har citerat mitokondriell dysfunktion i neuropatier, är dessa studier begränsade till mätningar av aktivitet i mitokondriella komplex utan bevarande av mitokondriella membran, utan utvärdering av mitokondriell integritet eller mätningar av ATP-innehåll som en parameter för mitokondriell ATP-produktion. I allmänhet kräver en korrekt bedömning av mitokondriell syreförbrukning och ROS-produktion isolering av mitokondrier genom differentiell centrifugering i en percoll / sackarosgradient. Isolering av mitokondrier kan också vara en begränsande faktor för ischiasnervvävnad på grund av den stora mängd vävnad som behövs och mitokondriförlust och störningar.
Den aktuella studien syftar till att tillhandahålla ett protokoll för att mäta mitokondriell fysiologi som mitokondriell syreförbrukning och ROS-produktion i ischiasnerven, bevara mitokondriella membran och utan behov av isolerande mitokondrier. Detta protokoll är anpassat från syreförbrukningsmätningar i permeabiliserade muskelfibrer24 med högupplöst respirometri (HRR). Fördelarna med denna procedur är möjligheten att utvärdera mitokondrier i små mängder vävnad såsom ischiasnerven och utvärdera mitokondriella parametrar in situ och därigenom bevara mitokondriell miljö, struktur och bioenergetisk profil för att erhålla ett fysiologiskt tillförlitligt resultat. De mitokondriella andningstillstånden bestämdes med substrat och hämmare efter ischiasnervpermeabilisering för att korrekt bedöma mitokondriell bioenergetik och cytokrom c-koefficient för mitokondriell membranintegritet, vilket ger en guide för steg i mitokondriell elektrontransportsystem (ETS) utvärdering och beräkning av väsentliga parametrar. Denna studie kan ge verktyg för att svara på frågor i patofysiologiska mekanismer där ischiasnervmetabolism är inblandad, såsom perifera neuropatier.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#39; triphosphate dissodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A26209</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenosine 5&#8242;-diphosphate sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A2754</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amplex Red Reagent</td>
			<td>Thermo Fisher scientific</td>
			<td>A12222</td>
			<td>Amplex Red is prepared in DMSO accordindly with product datasheet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antimycin A (from Streptomyces sp.)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A8674</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A7030</td>
			<td>heat shock fraction, protease free, fatty acid free, essentially globulin free, pH 7, &#8805;98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C6763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone (FCCP)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C2920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytochrome c</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>C7752</td>
			<td>(from equine heart; small hemeprotein)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DataLab version 5.1.1.91</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td></td>
			<td>Copyright (c) 2002 - 13 by Dr. Erich Gnaiger</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital orbital microplate shaker 120V</td>
			<td>Thermo Fisher scientific</td>
			<td>88882005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DL-Dithiothreitol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>43819</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGTA sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8145</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HAM80075</td>
			<td>10 uL, 25 uL and 50 uL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrogen peroxide solution 30% W/W</td>
			<td>Merck</td>
			<td>H1009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imidazole</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I2399</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-(&#8722;)-Malic acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M7397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium chloride hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M2393</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MES sodium salt</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>M3885</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting forceps, curved</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F4142</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting forceps, straight</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F4017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O2K - Filter set Amplex Red</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td>44321-01</td>
			<td>Fasching M, Sumbalova Z, Gnaiger E (2013) O2k-Fluorometry: HRR and H2O2 production in mouse brain mitochondria. Mitochondr Physiol Network 17.17.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>O2K - Fluorescence LED2 - module component Fluorscence-Sensor Green</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td>44210-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oligomycin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>O4876</td>
			<td>(from Streptomyces diastatochromogenes; mixture of oligomycins A, B, and C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OROBOROS Oxygraph-2k</td>
			<td>OROBOROS INSTRUMENTS, Austria</td>
			<td>http://www.oroboros.at</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Palmitoylcarnitine (Palmitoyl-DL-carnitine-HCl)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Peroxidase from horseradish</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P8375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dishes, polystyrene</td>
			<td>MERCK</td>
			<td>P5606</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphocreatine disodium salt hydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P7936</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium dihydrogen phosphate monobasic</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>PHR1330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium hydroxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>221473</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rotenone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8875</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saponin</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>SAE0073</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium pyruvate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P5280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium succinate dibasic hexahydrate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sucrose</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S9378</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taurine</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T0625</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing mitochondrial function in sciatic nerve by high-resolution respirometry

Mitokondriell dysfunktion i perifera nerver åtföljer flera sjukdomar associerade med perifer neuropati, som kan utlösas av flera orsaker, inklusive autoimmuna sjukdomar, diabetes, infektioner, ärftliga störningar och tumörer. Att bedöma mitokondriell funktion i musperifera nerver kan vara utmanande på grund av den lilla provstorleken, ett begränsat antal mitokondrier som finns i vävnaden och närvaron av en myelinmantel. Tekniken som beskrivs i detta arbete minimerar dessa utmaningar genom att använda ett unikt permeabiliseringsprotokoll anpassat från ett som används för muskelfibrer, för att bedöma ischiasnervens mitokondriella funktion istället för att isolera mitokondrierna från vävnaden. Genom att mäta fluorimetrisk reaktiv artproduktion med Amplex Red/Peroxidas och jämföra olika mitokondriella substrat och hämmare i saponinpermeabiliserade nerver var det möjligt att detektera mitokondriella andningstillstånd, reaktiva syrearter (ROS) och aktiviteten hos mitokondriella komplex samtidigt. Därför erbjuder metoden som presenteras här fördelar jämfört med bedömningen av mitokondriell funktion med andra tekniker.

Den mitokondriella syreförbrukningen av den permeabiliserade ischiasnerven representeras i figur 2. Det röda spåret representerarO2-flödet per massenhet i pmol / s.mg. Efter registrering av en basal syreförbrukning med endogena substrat (rutinmässig andning) injiceras succinat (SUCC) för att registrera komplex II (succinatdehydrogenas) -driven andning, vilket resulterar i en ökning av syreförbrukningshastigheten. I följd tillsätts en mättande koncentration av ADP, vilk...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry at JoVE.com

Assessing Mitochondrial Function in Sciatic Nerve by High-Resolution Respirometry

Högupplöst respirometri kopplad till fluorescenssensorer bestämmer mitokondriell syreförbrukning och generering av reaktiva syrearter (ROS). Det nuvarande protokollet beskriver en teknik för att bedöma mitokondriella andningsfrekvenser och ROS-produktion i den permeabiliserade ischiasnerven.

Bedömning av mitokondriell funktion i ischiasnerven med högupplöst respirometri

Mitochondrial dysfunction in peripheral nerves accompanies several diseases associated with peripheral neuropathy, which can be triggered by multiple ...

Detta protokoll möjliggör utvärdering av mitokondriell funktion inuti nerven genom paketering av de isolerade mitokondrierna, ett utmanande förfarande i en liten vävnad som innehåller ett begränsat antal mitokondrier. Tekniken ger möjlighet att analysera mitokondrifunktioner såsom syreförbrukning och ROS-produktion samtidigt i en bevarad mitokondrier in situ. Med flera substrat, hämmare och ocoupler designprotokoll.Flera sjukdomar delar mitokondriell funktion, särskilt neuropatier inducerade av typ två diabetes eller kemoterapi. Vid dessa sjukdomar är försämringar av mitokondriell oxidativ fosforylering det enda tecknet som dikterar sjukdomsutveckling. Denna metod ger insikter i neurobiologi, biokemi och farmakologi, med undersökning av mitokondriella sjukdomsmekanismer, sökning efter terapier, såsom mitokondriella boosters eller förbättrad neuropatisk smärta.Börja med att kalibrera syresensorerna genom att pipettera 2,1 milliliter MR-buffert i varje kammare. Stäng den med propparna och dra luft in i kammaren tills en bubbla bildas. Rör om vid 37 grader Celsius i en timme i kalibreringsläge tills syreflödet per massa stabiliseras.Använd HRR-programvaran för att utföra en luftkalibrering av de polarografiska syresensorerna enligt tillverkarens instruktioner. För vävnadsberedning, placera ischiasnerven i en petriskål med tillräckligt med TP-buffert för att täcka den. Håll ena änden av nerven med pincett och med ett annat par pincett dra ut nervbuntarna horisontellt.Överför först den visade vävnaden till en liten skål som innehåller en milliliter TP-buffert för vävnadspermeabilisering. För att starta permeabilisering, överför vävnaden med pincett till en annan maträtt som innehåller en milliliter TP-buffert, innehållande 50 mikrogram per milliliter saponin. Placera plattan i en mikroplattskakare och låt den röra om försiktigt i 30 minuter.Överför sedan vävnaden med pincett till en ny skål som innehåller en milliliter MR-buffert och låt den röra försiktigt i 10 minuter. Överför vävnaden med pincett till en kalibrerad HRR-kammare. Fyll HRR-kamrarna med 2,1 ml MR-buffert.Tillsätt Amplex Red och peroxidas till en slutlig koncentration av fem mikromolar respektive två enheter per milliliter. Lägg sedan till den permeabla ischiasnerven. Fäst instrumentets fluorescerande sensorer.Stäng sedan av lamporna i kontrollavsnittet i programvaran och klicka på anslut till oxygraf"Gå till redigera protokoll" i programvaran och sätt in vävnadsvikten. Gå till layout och välj alternativet specifikt flöde per enhet prov". Välj sedan diagram för att samtidigt komma åt syreförbrukningsavläsningen och vid behov väteperoxidproduktionen.Vänta i cirka 10 minuter. Injicera två pulser väteperoxid, var och en till en slutlig koncentration av 260 mikromolar för kalibrering av kammaren. Injicera 20 mikroliter av succinat, ett mitokondriellt komplex II-substrat, för att aktivera det mitokondriella elektrontransportsystemet.Tillsätt 20 mikroliter ADP för att aktivera ATP-syntes. I följd, lägg till fem mikroliter cytokrom c som en indikator på membranintegritet. Titrera med alikvoter på 0,2 mikrogram per milliliter oligomycin tills ingen ytterligare minskning av syreförbrukningen observeras.Titrera med alikvoter på 0,5 mikromol per liter FCCP, mitokondriell uncoupler, tills ingen ytterligare ökning av syreförbrukningen observeras. För att avsluta experimentet injicera två mikroliter av antimycin A, gör en slutlig koncentration av fem millimolar och vänta tills flödet stabiliseras. Gå till kommandofältet.Sök efter multisensory"i programvaran. Klicka på kontroll "tryck sedan på spara fil" och koppla bort. Öppna den sparade filen och välj syreflödet per massbrickor för att få de experimentella syreförbrukningsresultaten.Välj manuellt fönstret mellan injektionerna genom att trycka på skift plus vänster musknapp. Gå till märken och välj statistik för att visualisera resultaten för varje injektion av substrat, hämmare och uncoupler-protokoll. För väteperoxidproduktion utför samma procedur med förstärkarslutningsspåret.Minskningen av membranpotentialen som främjas av ATP-sytasaktivitet accelererade syreförbrukningen. Tillsatsen av exogent cytokrom C främjade endast minimal stimulering av andning, vilket intygade mitokondriell yttre membranintegritet för denna beredning. Absoluta syreflöden registrerades och endast en ökning med 6,3% observerades i andningen, vilket indikerar god kvalitet på vävnadspreparatet.Syreförbrukningen och ROS-produktionen mättes samtidigt i närvaro av olika substrat som gav bränsle till elektrontransportsystemet. Tillsatsen av pyruvat och malat för mitokondriellt komplex I ökade andningen. Och ytterligare tillsats av succinat för komplex II ökar också syreförbrukningen.Därför kunde andra substrat testas. ROS-produktionen ökade också, vilket indikerar läckage av syre från elektrontransportsystemet. Tillsatsen av adenosindifosfat i mättande koncentration ökade syreförbrukningen som drev ATP-bildning och minskade ROS-produktionen.Däremot minskade oligotitrering syreförbrukningen och ökade ROS-produktionen. Detta föreslog att permeabliserad ischiasnerv kunde replikera standardrelationen i mitokondriell fysiologi. Tillägget av FCCP och retinon, i linje med de förväntade syreflödesförändringarna, bekräftar att mitokondriell fysiologi och bioenergetisk profil bevarades i den permeabliserade ischiasnerven.Det viktigaste steget är att försiktigt förbereda vävnadssektionen, se till att alla kammaröppningar är ordentligt rengjorda. Förändringar i mitokondriernas funktion kan bero på dysfunktion eller ett lägre mitokondriellt tal. därför rekommenderas citerad syntasaktivitet och mitokondriell DNA-innehållsbekräftelse av PCR.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Using Scaffold Liposomes to Reconstitute Lipid-proximal Protein-protein Interactions In Vitro

Använda Scaffold Liposomer att återskapa Lipid-proximala protein-proteininteraktioner<em&gt; In Vitro</em

Studies of integral membrane proteins in vitro are frequently complicated by the presence of a hydrophobic transmembrane domain. Further complicating ...

High-resolution Single Particle Analysis from Electron Cryo-microscopy Images Using SPHIRE

Högupplösande enkelpartikelanalys från elektronkryo-mikroskopi bilder med hjälp av SPHIRE

SPHIRE (SPARX for High-Resolution Electron Microscopy) is a novel open-source, user-friendly software suite for the semi-automated processing of single ...

Measuring Liver Mitochondrial Oxygen Consumption and Proton Leak Kinetics to Estimate Mitochondrial Respiration in Holstein Dairy Cattle

Mätning av levern mitokondriell syreförbrukning och Proton läcka kinetik för att uppskatta mitokondriell Respiration i Holstein mjölkkor

Oxygen consumption, proton motive force (PMF) and proton leak are measurements of mitochondrial respiration, or how well mitochondria are able to convert ...

Human Peripheral Blood Neutrophil Isolation for Interrogating the Parkinson's Associated LRRK2 Kinase Pathway by Assessing Rab10 Phosphorylation

Human perifert blod Neutrophil Isolering för förhör av Parkinsons associerade LRRK2 Kinas väg genom att bedöma Rab10 Fosforylering

The leucine rich repeat kinase 2 (LRRK2) is the most frequently mutated gene in hereditary Parkinson&#8217; disease (PD) and all pathogenic LRRK2 ...

High-Resolution Complexome Profiling by Cryoslicing BN-MS Analysis

Högupplöst Complexome-profilering genom att Cryoslicing BN-MS Analysis

Proteins generally exert biological functions through interactions with other proteins, either in dynamic protein assemblies or as a part of stably formed ...

Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

Rutinmässig insamling av högupplösta kryo-EM-dataset med 200 KV transmissionselektronmikroskop

Cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been established as a routine method for protein structure determination during the past decade, taking an ...

High-Resolution Neutron Spectroscopy to Study Picosecond-Nanosecond Dynamics of Proteins and Hydration Water

Högupplöst neutronspektroskopi för att studera pikosekund-nanosekunddynamik hos proteiner och hydratiseringsvatten

Neutron scattering offers the possibility to probe the dynamics within samples for a wide range of energies in a nondestructive manner and without ...

Advancing High-Resolution Imaging of Virus Assemblies in Liquid and Ice

Främja högupplöst avbildning av virusaggregat i vätska och is

Interest in liquid-electron microscopy (liquid-EM) has skyrocketed in recent years as scientists can now observe real-time processes at the nanoscale. It ...

High-Throughput Quantification of the Synthesis and Distribution of mtDNA

High-Throughput Image-Based Quantification of Mitochondrial DNA Synthesis and Distribution

High-Throughput Image-Based Quantification of Mitochondrial DNA Synthesis and Distribution (Video) | JoVE 

Bildbaserad kvantifiering av mitokondriell DNA-syntes och distribution med hög kapacitet

The vast majority of cellular processes require a continuous supply of energy, the most common carrier of which is the ATP molecule. Eukaryotic cells ...

Stable Isotope Tracing & LC-MS Analysis to Measure DHODH and SDH Activities

Oxygen-Independent Assays to Measure Mitochondrial Function in Mammals

Oxygen-Independent Assays to Measure Mitochondrial Function in Mammals (Video) | JoVE 

Syreoberoende analyser för att mäta mitokondriell funktion hos däggdjur

The flow of electrons in the mitochondrial electron transport chain (ETC) supports multifaceted biosynthetic, bioenergetic, and signaling functions in ...