Name: protocol for developing a femur osteotomy model in wistar albino rats
Uploaded: 2022-08-31T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats at JoVE.com

著者らは、研究資金を提供してくれたAYUSH省のホメオパシー研究中央評議会(CCRH)に感謝したい。著者らは、ニューデリーのAIIMSの中央動物施設の支援と支援、およびニューデリーのAIIMSのCMETの写真とビデオ撮影の支援と支援に感謝しています。

動物実験は、インドのニューデリーにあるAIIMSの機関動物倫理委員会(IAEC)から倫理的承認を得た後に行われました(286 / IAEC-1 / 2021)。
1.術前処置
<ol><li>6〜8週齢のオスのWistarアルビノラットを、それぞれ体重150〜200 gの中央動物施設(CAF)で別々のケージに入れます。これにより、複数のラットがケージを共有するときに外科的/骨折部位の損傷がなくなります。</...

<ol>
	<li>Wang, T., Zhang, X., Bikle, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteogenic+differentiation+of+periosteal+cells+during+fracture+healing.">Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healing.</a> Journal of Cellular Physiology. 232 (5), 913-921 (2017).</li><li>Fakhry, M., Hamade, E., Badran, B., Buchet, R., Magne, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+mesenchymal+stem+cell+differentiation+towards+osteoblasts.">Molecular mechanisms of mesenchymal stem cell differentiation towards osteoblasts.</a> World Journal of Stem Cells. 5 (4), 136-148 (2013).</li><li>Bishop, J. A., Palanca, A. A., Bellino, M. J., Lowenberg, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+compromised+fracture+healing.">Assessment of compromised fracture healing.</a> JAAOS - Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 20 (5), 273-282 (2012).</li><li>Fong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+nonunion+and+reoperation+in+patients+with+fractures+of+the+tibia:+an+observational+study.">Predictors of nonunion and reoperation in patients with fractures of the tibia: an observational study.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14 (1), 103 (2013).</li><li>Ramoutar, D. N., Rodrigues, J., Quah, C., Boulton, C., Moran, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Judet+decortication+and+compression+plate+fixation+of+long+bone+nonunion:+Is+bone+graft+necessary.">Judet decortication and compression plate fixation of long bone nonunion: Is bone graft necessary.</a> Injury. 42 (12), 1430-1434 (2011).</li><li>Goulet, J. A., Senunas, L. E., DeSilva, G. L., Greenfield, M. L. V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autogenous+iliac+crest+bone+graft:+Complications+and+functional+assessment.">Autogenous iliac crest bone graft: Complications and functional assessment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 339, 76-81 (1997).</li><li>Stevenson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+and+economic+evaluation+of+alendronate,+etidronate,+risedronate,+raloxifene+and+teriparatide+for+the+prevention+and+treatment+of+postmenopausal+osteoporosis.">A systematic review and economic evaluation of alendronate, etidronate, risedronate, raloxifene and teriparatide for the prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis.</a> Health Technology Assessment. 9 (22), 1 (2005).</li><li>Haffner-Luntzer, M., Kovtun, A., Rapp, A. E., Ignatius, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+in+bone+fracture+healing+research.">Mouse models in bone fracture healing research.</a> Current Molecular Biology Reports. 2 (2), 101-111 (2016).</li><li>Mills, L. A., Simpson, A. H. R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+models+of+bone+repair.">In vivo models of bone repair.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. British Volume. 94 (7), 865-874 (2012).</li><li>Houdebine, L. -. M., Sioud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+Animal+Models+in+Biomedical+Research.">Transgenic Animal Models in Biomedical Research.</a> Target Discovery and Validation Reviews and Protocols: Volume 1, Emerging Strategies for Targets and Biomarker Discovery. , (2007).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+bone+healing+models:+Standards,+tips+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting.">Small animal bone healing models: Standards, tips and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li><li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone.">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> Journal of Orthopaedic Research. 2 (1), 97-101 (1984).</li><li>Klein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+healing+process+in+open+osteotomy+model+and+open+fracture+model:+delayed+healing+of+osteotomies+after+intramedullary+screw+fixation.">Comparison of healing process in open osteotomy model and open fracture model: delayed healing of osteotomies after intramedullary screw fixation.</a> Journal of Orthopaedic Research. 33 (7), 971-978 (2015).</li><li>Kolios, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+estrogen+and+alendronate+improve+metaphyseal+fracture+healing+when+applied+as+osteoporosis+prophylaxis.">Do estrogen and alendronate improve metaphyseal fracture healing when applied as osteoporosis prophylaxis.</a> Calcified Tissue International. 86 (1), 23-32 (2010).</li><li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration.">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 23, 31-38 (2009).</li><li>Umiatin, U., Dilogo, I. H., Sari, P., Wijaya, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+analysis+of+bone+callus+in+delayed+union+model+fracture+healing+stimulated+with+pulsed+electromagnetic+fields+(PEMF).">Histological analysis of bone callus in delayed union model fracture healing stimulated with pulsed electromagnetic fields (PEMF).</a> Scientifica. 2021, 4791172 (2021).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+osteogenic+potential+of+human+bone+callus.">The osteogenic potential of human bone callus.</a> Scientific Reports. 6, 36330 (2016).</li><li>Haffner-Luntzer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+to+study+fracture+healing+of+the+proximal+femur.">A novel mouse model to study fracture healing of the proximal femur.</a> Journal of Orthopaedic Research. 38 (10), 2131-2138 (2020).</li><li>Aur&#233;gan, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+model+of+femur+fracture+for+bone+and+mineral+research:+An+improved+description+of+expected+comminution,+quantity+of+soft+callus+and+incidence+of+complications.">The rat model of femur fracture for bone and mineral research: An improved description of expected comminution, quantity of soft callus and incidence of complications.</a> Bone &amp; Joint Research. 2 (8), 149-154 (2013).</li><li>Li, Z., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drill+hole+models+to+investigate+bone+repair.">Drill hole models to investigate bone repair.</a> Methods in Molecular Biology. 2221, 193-204 (2021).</li><li>Handool, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+a+closed+rat+tibial+fracture+model.">Optimization of a closed rat tibial fracture model.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 5 (1), 13 (2018).</li><li>Kobata, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+bone+infection+after+open+fracture+using+a+chitosan+with+ciprofloxacin+implant+in+animal+model.">Prevention of bone infection after open fracture using a chitosan with ciprofloxacin implant in animal model.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 35 (8), 202000803 (2020).</li></ol>

この方法は、Wistarアルビノラットの骨折骨切りモデルを開発するために必要な詳細を明確に説明しています。このモデルは、骨折治癒における有望な骨同化薬の骨形成効果を評価し、骨治癒の複雑さを理解するために使用できます。この方法の顕著な特徴は、それが単純であり、あまり多くの時間や洗練された機器を必要としないことです。この方法では、成体の雄のWistarアルビノラットを?...

骨は、骨形成細胞である骨芽細胞と骨吸収細胞である破骨細胞からなる密な結合組織です。骨折治癒は、骨芽細胞と破骨細胞の協調作用によって骨欠損の再生をもたらす生理学的プロセスである1。骨折がある場合、骨折部位の骨芽細胞および破骨細胞の活動は、骨治癒を決定する重要な要素のいくつかです2。骨折治癒が通常の経過から逸脱すると、結合の遅延、不和合、または非癒合が発生します。骨折は、骨折の癒合が9か月間失敗し、過去3か月間修復が進行しない場合、非癒合状態にあると言われます3。すべての骨折の約10%〜15%は、非癒合4に進行する可能性のある修復の遅延を経験します。すべての骨折の非癒合率は5%〜10%であり、関与する骨と骨折部位によって異なります5。
骨折非癒合の治療のための現在のレジメンは、外科的および/または医学的モダリティで構成されています。現在、骨折の遅延または非癒合は、骨移植などの外科的戦略によって克服することができます。ただし、骨移植には、移植組織の利用可能性、ドナー部位の痛み、罹患率、感染などの制限と合併症があります6。治療には、骨形成タンパク質(BMP)やテリパラチド(パラトホルモン類似体)などの骨同化薬が含まれます。現在使用されている骨同化剤は、骨折の修復を強化する可能性がありますが、法外なコストや望ましくない副作用などの制約があります7。したがって、骨治癒のための費用効果の高い非外科的代替案を特定する余地があります。薬物の骨治癒の可能性は、最初はin vitro 研究によって決定することができますが、最終的な概念実証には in vivo 研究が必要です。骨治癒を促進することが知られている薬物は in vitro で評価する必要があり、有望であることが判明した場合は、 in vivo 動物モデル研究に使用できます。薬物が in vivo モデルで骨形成とリモデリングを促進することが証明された場合、次の段階(すなわち、臨床試験)に進む可能性があります。
動物の骨折治癒を評価することは、ヒト試験を受ける前に骨治癒のために導入された新しい薬剤を評価するための論理的な前進です。骨折治癒の in vivo 動物モデル研究のために、げっ歯類はますます人気のあるモデル8になりました。げっ歯類モデルは、運用コストが低く、スペースの必要性が限られており、骨の治癒に必要な時間が短いため、関心が高まっています9。さらに、げっ歯類は広範囲の抗体と遺伝子標的を持っているため、骨の治癒と再生の分子メカニズムに関する研究が可能になります10。コンセンサス会議では、さまざまな小動物の骨治癒モデルを包括的に強調し、骨の治癒に影響を与えるさまざまなパラメーターに焦点を当て、いくつかの小動物の骨折モデルとインプラントを強調しました11。
基本的な破壊モデルは、開モデルと閉モデルに大きく分けることができます。閉鎖骨折モデルは、骨に3点または4点の曲げ力を使用し、従来の外科的アプローチを必要としません。それらは、ヒトの長骨骨折に似た斜めまたはらせん状の骨折を引き起こしますが、骨折の位置と寸法の標準化の欠如は、それらの交絡因子として機能する可能性があります12。開放骨折モデルは、骨の骨切り術のための外科的アクセスを必要とし、骨折部位においてより一貫した骨折パターンを達成するのを助けるが、閉鎖モデル13と比較して治癒の遅延と関連している。骨折治癒を研究するために使用される骨の選択は、それらの寸法とアクセシビリティのために、主に脛骨と大腿骨のままです。骨折部位の選択は通常、骨幹または骨幹です。骨端領域は、骨粗鬆症の影響を受けやすいため、骨粗鬆症の被験者で骨折治癒が研究されている場合に特別に選択されます14。髄内ピンや外部固定具などのいくつかのインプラントを使用して、骨折を安定させることができます11,15。
この研究の目的は、研究者が大腿骨骨折後のカルスの発達を理解するのに役立つだけでなく、潜在的な薬物が骨治癒特性を持っているかどうかを判断するのに役立つ、シンプルでわかりやすいげっ歯類モデルを開発することでしたそれが作用するメカニズムを理解することによって。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Raman &#38; Weil Pvt. Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>MFG/MD/2019/000189</td>
			<td>Sterillium hand disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artery forceps&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.105.05S</td>
			<td>5&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bard-Parker handle&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.103.03</td>
			<td>Size number 3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Win-medicare New Delhi, India</td>
			<td>UP14250000001</td>
			<td>10% w/v Povidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cat&#39;s-paw skin retractor&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>908.S</td>
			<td>Small</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India</td>
			<td>43272</td>
			<td>Disodium salt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>115935</td>
			<td>For preparing the staining solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (plain)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>115.06</td>
			<td>6&#34;, plain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (toothed)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>117.06</td>
			<td>6&#34;, toothed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India</td>
			<td>84439</td>
			<td>For preparing the neutral buffered formalin&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haematoxylin</td>
			<td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>104302</td>
			<td>For preparing the staining solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hammer</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>401.M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Cefuroxime</td>
			<td>Akumentis Healthcare Ltd, Thane, Maharashtra, India</td>
			<td>48/UA/SC/P-2013</td>
			<td>Cefuroxime sodium IP, 1.5 g/vial&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Ketamine</td>
			<td>Baxter Pharmaceuticals India Private Limited, Gujarat, India</td>
			<td>G/28-B/6</td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, 50 mg/mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Xylazine</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited, Hyderabad, Telangana, India</td>
			<td>28/RR/AP/2009/F/G</td>
			<td>Xylazine hydrochloride USP, 20 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Lignocaine</td>
			<td>Jackson laboratories Pvt Limited, Punjab, India&#160;</td>
			<td>1308-B</td>
			<td>2% Lignocaine Hydrochloride IP, 21.3 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Tramadol&#160;</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Limited, Ahmedabad, Gujarat, India</td>
			<td>MB/07/500</td>
			<td>Tramadol hydrochloride IP, 50 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K-wire&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>166 (1mm)</td>
			<td>12&#34;, double ended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical drill for inserting K-wire</td>
			<td>&#8206;Bosch, Germany&#160;</td>
			<td>06019F70K4</td>
			<td>GSR 120-LI Professional</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum cutting scissors&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.121.06S</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.108.06</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment&#160;</td>
			<td>GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited, Bengaluru, Karnataka, India</td>
			<td>KTK/28a/467/2001</td>
			<td>Neomycin, Polymixin B sulfate and Bacitracin zinc ophthalmic ointment USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osteotome (chisel)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>1001.S.10</td>
			<td>10 mm, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periosteal elevator&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>918.10.S</td>
			<td>10 mm, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pliers cum wire cutter</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>604.65</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reynold&#8217;s scissors</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.110.06S</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard semi-synthetic diet&#160;</td>
			<td>Ashirvad Industries, Chandigarh, India</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>Detailed composition provided in materials used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel cup for keeping betadine for application</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel tray with lid for autoclaving instruments</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Ideal Healthcare Industries, Delhi, India&#160;</td>
			<td>E(0047)/14/MNB/7951</td>
			<td>Sterile, 5cmx5cm, 12 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile marble block for support</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>Locally fabricated; autoclavable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (1 mL)&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td>1 mL sterile Syringe with 26 G x 1/2 (0.45 mm x 13 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (2 mL)&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India</td>
			<td>REF 307749</td>
			<td>2 mL sterile syringe with 24 G x 1&#39;&#39; (0.55 mm x 25 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (10 mL)&#160;</td>
			<td>Hindustan Syringes &#38; Medical Devices Ltd. Faridabad, India&#160;</td>
			<td>334-B(H)</td>
			<td>10 mL sterile syringe with 21 G x1.5&#34; (0.80 mm x 38 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blades (size no.15)</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA</td>
			<td>REF MDS15115E</td>
			<td>Sterile, Single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blades (size no.24)</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA</td>
			<td>REF MDS15124E</td>
			<td>Sterile, Single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Healthium Medtech Pvt Ltd, Bangalore, Karnataka, India</td>
			<td>SN 3318</td>
			<td>4-0, 16 mm, 3/8 circle cutting needle, monofilament polyamide suture&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wax block in aluminium tray&#160;</td>
			<td>Locally fabricated</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>30 cm x 30 cm x 4 cm aluminium tray containing wax (to prevent animal from slipping)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray machine</td>
			<td>Philips India Ltd, Gurugram, Haryana</td>
			<td>SN19861013</td>
			<td>Model: Philips Digital Diagnost R 4.2&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocol for developing a femur osteotomy model in wistar albino rats

骨折治癒は、骨芽細胞と破骨細胞の協調作用によって骨欠損の再生をもたらす生理学的プロセスです。オステオアナボリック薬は骨折の修復を強化する可能性がありますが、高コストや望ましくない副作用などの制約があります。薬物の骨治癒の可能性は、最初はin vitro 研究によって決定することができますが、最終的な概念実証には in vivo 研究が必要です。私たちの目的は、研究者が大腿骨のシャフトの骨折後のカルス形成の発達を理解するのに役立ち、潜在的な薬物が骨治癒特性を持っているかどうかを確認するのに役立つ大腿骨骨切り術げっ歯類モデルを開発することでした。成体のオスのWistarアルビノラットは、施設動物倫理委員会の認可後に使用されました。げっ歯類は麻酔をかけ、無菌条件下では、大腿骨のシャフトの中央3分の1で完全な横骨折が開いた骨切り術を使用して作成されました。骨折は髄内Kワイヤーを使用して縮小および内部固定され、二次骨折治癒が行われました。手術後、腹腔内鎮痛薬と抗生物質を5日間投与しました。連続した毎週のX線はカルス形成を評価した。放射線学的に事前に決定された時点に基づいてラットを屠殺し、骨折カルスの発達を放射線学的および免疫組織化学を用いて分析した。

この研究は、Wistarアルビノラットの大腿骨骨切り術モデルを開発するために行われました。このモデルは、骨治癒、および骨治癒における有望な骨同化薬の骨形成効果を評価するために使用できます。標準的な外科的予防措置とプロトコルに従った。滅菌ガウン、ドレープ、および手術器具が手順に使用されました(図1)。装置(表1)は手術の48時間前に滅菌さ...

Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats at JoVE.com

Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats

ここでは、Wistarアルビノラットの大腿骨のシャフトを医原性的に破壊し、カルスの発達を追跡するためのプロトコルを提示します。この大腿骨骨切り術モデルは、研究者が骨折治癒のプロセスを評価し、薬物が骨折治癒にどのように影響するかを研究するのに役立ちます。

Wistarアルビノラットにおける大腿骨骨切り術モデルを開発するためのプロトコル

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. ...

この大腿骨骨切り術モデルは、研究者が骨折治癒のプロセスを研究し、薬物が骨折治癒にどのように影響するかを評価するのに役立ちます。これは、研究者が薬物に骨治癒特性があるかどうかを特定し、その作用機序を理解するのに役立つ、シンプルでわかりやすいげっ歯類モデルです。主に骨折治癒の観察と分析に焦点を当てていますが、病気の病因についての洞察を与えることもできます。この方法は、健康と病気における骨治癒に関する将来の研究を導くことができます。潜在的な骨同化薬の効果を評価するために使用できます。適切な破壊線を誘導し、Kワイヤで骨折を固定することは困難です。いくつかの練習セッションが役立つはずです。この方法のシンプルさと再現性は、その視覚的なデモンストレーションで明らかです 私の研究室のジュニアレジデントであるパワンパガクは、手順のデモンストレーションに役立ちます。はじめに、手術台の上に2.5センチメートルの深さまでワックスを含むワックスブロックを置き、滅菌ドレープでそれを覆います。右大腿部の外側を1センチ垂直に皮膚切開した後、メッツェンバウムハサミで深部筋膜を分離し、外側広筋を露出させます。大腿骨の軸に達するまで、筋線維に沿って外側広筋を分割します。次に、骨膜エレベーターを使用して、骨に付着している筋肉から骨を解放します。骨膜内およびその周囲に局所麻酔を注入した後、15番の手術刃を使用して大腿骨のシャフトの中央3分の1にくぼみを作成します。くぼみにノミを置き、ハンマーでノミを軽くたたいて、シャフトの中央3分の1の骨を完全に骨折します。電池式の電動ドリルの助けを借りて保持された1ミリメートルの滅菌Kワイヤーを使用して骨折を内部で固定します。Kワイヤーを骨折部位を通って遠位断片の髄管に通します。次に、大腿骨の遠位端からKワイヤーをドリルアウトします。骨折を減少させた後、転子領域で購入が得られるまで、Kワイヤを遠位端から近位断片の管に進めます。ワイヤーカッターを使用して、皮膚から突き出ているKワイヤーの遠位部分を切り取ります。ペンチを使用してKワイヤーの先端を約90度に曲げ、ベタジンに浸したガーゼ包帯を使用してピンサイトのドレッシングを行います。Kワイヤーは、骨折を縮小した位置に保つための髄内スプリントとして機能します。滅菌ガーゼまたは動脈鉗子を使用して出血領域に圧力をかけ、出血を止めます。4-0ナイロン縫合糸を使用して皮膚を閉じる前に、完全な止血を確認してください。ベタジンで傷をきれいにし、滅菌ガーゼとマイクロポア粘着テープで覆います。術後のケアのために、ラットをケージに戻し、手順後5日間、標準的な半合成食、抗生物質、鎮痛薬を腹腔内投与し続けます。最後に、骨折部位のX線による骨治癒を週に一度評価します。骨折を誘発する前と手術後1日目のK線NC2によるラット大腿骨のX線写真がここに示されています。骨折の治癒は、カルス形成を評価するために手術部位の連続した毎週のX線を撮影することによって放射線学的に監視されます。骨折は縮小されたままであり、髄内Kワイヤーで固定されています。所定の時点で屠殺した後、大腿骨をホルマリンで注意深く保存し、続いて骨を脱灰した。カルスを有する骨は、最適な脱灰後に得られた。無傷のカルス、およびカルスの矢状セクションがここに示されています。カルスは、他の技術を使用して評価する前に、最適な脱灰を確実にするために断続的に評価されます。骨折部位のヘマトキシリンおよびエオジン染色切片の低倍率および高倍率像を以下に示す。骨折部位の染色された切片は、軟骨および新しい骨の形成を伴う硬いカルスを示す。骨の骨折した端と2番目の皮質領域がここで見ることができます。骨膜は創傷の最も疼痛感受性の部分であり、骨切り術の前に局所麻酔薬を用いて骨折部位の骨膜に浸潤することが必須である。その後、カルスの免疫組織化学的および放射線学的分析、定量的組織形態測定のためのマイクロCT、血清のカルス分析の生体力学的強度の分析を行うことができます。この技術は、有望な骨同化薬の発生可能性、作用機序、および比較分析を決定するのに役立ちます。

Research

JoVE Journal

Medicine

Quantifying Glomerular Permeability of Fluorescent Macromolecules Using 2-Photon Microscopy in Munich Wistar Rats

ミュンヘンWistar系ラットにおける2光子顕微鏡を用いた蛍光高分子の糸球体透過性を定量化

Kidney  diseases involving urinary loss of large essential macromolecules, such as  serum albumin, have long been thought to be caused by alterations in ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

ラットにおける重度の脊髄損傷挫傷モデル

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

圧負荷心肥大モデルの作成のためのラットの大動脈狭窄昇順

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

調整可能な剛性、ラット大腿骨骨切り術や分節骨欠損モデルの創外固定器

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

A Novel Model of Mild Traumatic Brain Injury for Juvenile Rats

少年ラット用マイルド外傷性脳損傷の新規モデル

Despite growing evidence that childhood represents a major risk period for mild traumatic brain injury (mTBI) from sports-related concussions, motor ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

孤立の方法<em&gt;エクスビボ</emラットモデルにおける&gt;肺灌流：ラットEVLPプログラムの開発の教訓

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

新しい治療戦略を開発するための膵臓癌幹細胞特性を研究

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

ブタモデルにおける異自家腎移植：ステップバイステップのプロトコル

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

ラットおよびマウスの Circumlimbal 縫合による緑内障のモデル

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

ラットにおける再現可能な集中治療ユニット指向エンドトキシンモデル

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...