Name: protocol for developing a femur osteotomy model in wistar albino rats
Uploaded: 2022-08-31T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить Центральный совет по исследованиям в области гомеопатии (CCRH), Министерство AYUSH, правительство Индии, за финансирование исследований. Авторы благодарны за помощь и поддержку Центрального животного фонда, AIIMS, Нью-Дели, за их помощь и поддержку в экспериментах на животных и CMET, AIIMS, Нью-Дели, за их помощь и поддержку в фотографии и видеографии.

Эксперименты на животных были проведены после получения этического одобрения от Институционального комитета по этике животных (IAEC), AIIMS, Нью-Дели, Индия (286/IAEC-1/2021).
1. Предоперационная процедура
<ol><li>Домашний самец крыс-альбиносов Wistar в возрасте 6-8 недель, весом о?...

<ol>
	<li>Wang, T., Zhang, X., Bikle, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteogenic+differentiation+of+periosteal+cells+during+fracture+healing.">Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healing.</a> Journal of Cellular Physiology. 232 (5), 913-921 (2017).</li><li>Fakhry, M., Hamade, E., Badran, B., Buchet, R., Magne, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+mesenchymal+stem+cell+differentiation+towards+osteoblasts.">Molecular mechanisms of mesenchymal stem cell differentiation towards osteoblasts.</a> World Journal of Stem Cells. 5 (4), 136-148 (2013).</li><li>Bishop, J. A., Palanca, A. A., Bellino, M. J., Lowenberg, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+compromised+fracture+healing.">Assessment of compromised fracture healing.</a> JAAOS - Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 20 (5), 273-282 (2012).</li><li>Fong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+nonunion+and+reoperation+in+patients+with+fractures+of+the+tibia:+an+observational+study.">Predictors of nonunion and reoperation in patients with fractures of the tibia: an observational study.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14 (1), 103 (2013).</li><li>Ramoutar, D. N., Rodrigues, J., Quah, C., Boulton, C., Moran, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Judet+decortication+and+compression+plate+fixation+of+long+bone+nonunion:+Is+bone+graft+necessary.">Judet decortication and compression plate fixation of long bone nonunion: Is bone graft necessary.</a> Injury. 42 (12), 1430-1434 (2011).</li><li>Goulet, J. A., Senunas, L. E., DeSilva, G. L., Greenfield, M. L. V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autogenous+iliac+crest+bone+graft:+Complications+and+functional+assessment.">Autogenous iliac crest bone graft: Complications and functional assessment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 339, 76-81 (1997).</li><li>Stevenson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+and+economic+evaluation+of+alendronate,+etidronate,+risedronate,+raloxifene+and+teriparatide+for+the+prevention+and+treatment+of+postmenopausal+osteoporosis.">A systematic review and economic evaluation of alendronate, etidronate, risedronate, raloxifene and teriparatide for the prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis.</a> Health Technology Assessment. 9 (22), 1 (2005).</li><li>Haffner-Luntzer, M., Kovtun, A., Rapp, A. E., Ignatius, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+in+bone+fracture+healing+research.">Mouse models in bone fracture healing research.</a> Current Molecular Biology Reports. 2 (2), 101-111 (2016).</li><li>Mills, L. A., Simpson, A. H. R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+models+of+bone+repair.">In vivo models of bone repair.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. British Volume. 94 (7), 865-874 (2012).</li><li>Houdebine, L. -. M., Sioud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+Animal+Models+in+Biomedical+Research.">Transgenic Animal Models in Biomedical Research.</a> Target Discovery and Validation Reviews and Protocols: Volume 1, Emerging Strategies for Targets and Biomarker Discovery. , (2007).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+bone+healing+models:+Standards,+tips+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting.">Small animal bone healing models: Standards, tips and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li><li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone.">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> Journal of Orthopaedic Research. 2 (1), 97-101 (1984).</li><li>Klein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+healing+process+in+open+osteotomy+model+and+open+fracture+model:+delayed+healing+of+osteotomies+after+intramedullary+screw+fixation.">Comparison of healing process in open osteotomy model and open fracture model: delayed healing of osteotomies after intramedullary screw fixation.</a> Journal of Orthopaedic Research. 33 (7), 971-978 (2015).</li><li>Kolios, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+estrogen+and+alendronate+improve+metaphyseal+fracture+healing+when+applied+as+osteoporosis+prophylaxis.">Do estrogen and alendronate improve metaphyseal fracture healing when applied as osteoporosis prophylaxis.</a> Calcified Tissue International. 86 (1), 23-32 (2010).</li><li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration.">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 23, 31-38 (2009).</li><li>Umiatin, U., Dilogo, I. H., Sari, P., Wijaya, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+analysis+of+bone+callus+in+delayed+union+model+fracture+healing+stimulated+with+pulsed+electromagnetic+fields+(PEMF).">Histological analysis of bone callus in delayed union model fracture healing stimulated with pulsed electromagnetic fields (PEMF).</a> Scientifica. 2021, 4791172 (2021).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+osteogenic+potential+of+human+bone+callus.">The osteogenic potential of human bone callus.</a> Scientific Reports. 6, 36330 (2016).</li><li>Haffner-Luntzer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+to+study+fracture+healing+of+the+proximal+femur.">A novel mouse model to study fracture healing of the proximal femur.</a> Journal of Orthopaedic Research. 38 (10), 2131-2138 (2020).</li><li>Aur&#233;gan, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+model+of+femur+fracture+for+bone+and+mineral+research:+An+improved+description+of+expected+comminution,+quantity+of+soft+callus+and+incidence+of+complications.">The rat model of femur fracture for bone and mineral research: An improved description of expected comminution, quantity of soft callus and incidence of complications.</a> Bone &amp; Joint Research. 2 (8), 149-154 (2013).</li><li>Li, Z., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drill+hole+models+to+investigate+bone+repair.">Drill hole models to investigate bone repair.</a> Methods in Molecular Biology. 2221, 193-204 (2021).</li><li>Handool, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+a+closed+rat+tibial+fracture+model.">Optimization of a closed rat tibial fracture model.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 5 (1), 13 (2018).</li><li>Kobata, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+bone+infection+after+open+fracture+using+a+chitosan+with+ciprofloxacin+implant+in+animal+model.">Prevention of bone infection after open fracture using a chitosan with ciprofloxacin implant in animal model.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 35 (8), 202000803 (2020).</li></ol>

Этот метод ясно описывает детали, необходимые для разработки модели остеотомии переломов у крыс-альбиносов Wistar. Эта модель может быть использована для оценки остеогенного эффекта перспективного остеоанаболического препарата в заживлении переломов, а также для понимания тонкостей за...

Кость представляет собой плотную соединительную ткань, состоящую из костеобразующих клеток, остеобластов и костно-резорбирующих клеток, остеокластов. Заживление переломов – это физиологический процесс, приводящий к регенерации костных дефектов скоординированным действием остеобластов и остеокластов1. Когда есть перелом, остеобластная и остеокластическая активность в месте перелома являются одними из важных факторов, которые определяют заживление кости2. Когда заживление перелома отклоняется от своего нормального течения, это приводит к задержке союза, неправильному объединению или непрофсоюзированию. Говорят, что перелом находится в непрофсоюзном состоянии, когда происходит неудача соединения перелома в течение 9 месяцев, без прогрессирования восстановления в течение последних 3 месяцев3. Примерно 10%-15% всех переломов испытывают задержку в восстановлении, которая может прогрессировать до несоединения4. Коэффициент несращения для всех переломов составляет 5%-10% и варьируется в зависимости от вовлеченной кости и места перелома5.
Нынешняя схема лечения несращения переломов включает хирургические и/или медицинские методы. В настоящее время отсроченные или несращенные переломы могут быть преодолены хирургическими стратегиями, такими как пересадка кости. Тем не менее, костная трансплантация имеет свои ограничения и осложнения, такие как доступность ткани трансплантата, боль в донорском участке, заболеваемость и инфекция6. Медицинское лечение включает остеоанаболические препараты, такие как костный морфогенетический белок (BMP) и терипаратид (аналог паратормона). Используемые в настоящее время остеоанаболические агенты обладают потенциалом для увеличения восстановления переломов, но имеют ограничения, такие как непомерные затраты или нежелательные побочные эффекты7. Таким образом, существуют возможности для выявления экономически эффективных, нехирургических альтернатив заживлению костей. Потенциал заживления костей препарата может быть первоначально определен исследованиями in vitro , но для окончательного доказательства концепции необходимы исследования in vivo . Препарат, который, как известно, улучшает заживление костей, должен оцениваться in vitro и, если он будет признан многообещающим, может быть использован для исследований in vivo на животных. Если окажется, что препарат способствует формированию и ремоделированию костей в модели in vivo , он может перейти к следующему этапу (т. Е. Клиническим испытаниям).
Оценка заживления переломов у животных является логическим шагом вперед для оценки нового агента, введенного для заживления костей, прежде чем он пройдет испытания на людях. Для исследований заживления переломов in vivo на животных грызуны становятся все более популярной моделью8. Модели грызунов вызвали растущий интерес из-за низких эксплуатационных расходов, ограниченной потребности в пространстве и меньшего времени, необходимого для заживления костей9. Кроме того, грызуны обладают широким спектром антител и генных мишеней, что позволяет проводить исследования молекулярных механизмов заживления и регенерации костей10. Консенсусное совещание всесторонне выделило различные модели заживления костей мелких животных и сосредоточилось на различных параметрах, влияющих на заживление костей, а также на нескольких моделях переломов мелких животных и имплантатах11.
Базовые модели переломов можно в широком смысле разделить на открытые или закрытые модели. Модели закрытых переломов используют трех- или четырехточечную изгибающую силу на кости и не требуют обычного хирургического подхода. Они приводят к косым или спиральным переломам, напоминающим у человека переломы длинных костей, но отсутствие стандартизации расположения и размеров переломов может выступать в качестве сбивающего с толку фактора в них12. Открытые модели переломов требуют хирургического доступа для остеотомии кости, помогают достичь более последовательной картины перелома в месте перелома, но связаны с задержкой заживления по сравнению с закрытыми моделями13. Выбор кости, используемой для изучения заживления переломов, в основном остается большеберцовая и бедренная кости из-за их размеров и доступности. Выбор места перелома обычно является диафизом или метафизом. Метафизарная область специально выбирается в тех случаях, когда заживление переломов изучается у остеопоротических субъектов, так как метафиз больше подвержен влиянию остеопороза14. Несколько имплантатов, таких как интрамедуллярные штифты и внешние фиксаторы, могут быть использованы для стабилизации перелома11,15.
Цель этого исследования состояла в том, чтобы разработать простую и легкую в использовании модель грызунов, которая могла бы помочь исследователям не только понять развитие мозоли после перелома бедренной кости, но и помочь определить, обладает ли потенциальный препарат свойствами заживления костей, понимая механизм, с помощью которого он действует.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Raman &#38; Weil Pvt. Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>MFG/MD/2019/000189</td>
			<td>Sterillium hand disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artery forceps&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.105.05S</td>
			<td>5&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bard-Parker handle&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.103.03</td>
			<td>Size number 3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Win-medicare New Delhi, India</td>
			<td>UP14250000001</td>
			<td>10% w/v Povidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cat&#39;s-paw skin retractor&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>908.S</td>
			<td>Small</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India</td>
			<td>43272</td>
			<td>Disodium salt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>115935</td>
			<td>For preparing the staining solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (plain)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>115.06</td>
			<td>6&#34;, plain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (toothed)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>117.06</td>
			<td>6&#34;, toothed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India</td>
			<td>84439</td>
			<td>For preparing the neutral buffered formalin&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haematoxylin</td>
			<td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>104302</td>
			<td>For preparing the staining solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hammer</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>401.M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Cefuroxime</td>
			<td>Akumentis Healthcare Ltd, Thane, Maharashtra, India</td>
			<td>48/UA/SC/P-2013</td>
			<td>Cefuroxime sodium IP, 1.5 g/vial&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Ketamine</td>
			<td>Baxter Pharmaceuticals India Private Limited, Gujarat, India</td>
			<td>G/28-B/6</td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, 50 mg/mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Xylazine</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited, Hyderabad, Telangana, India</td>
			<td>28/RR/AP/2009/F/G</td>
			<td>Xylazine hydrochloride USP, 20 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Lignocaine</td>
			<td>Jackson laboratories Pvt Limited, Punjab, India&#160;</td>
			<td>1308-B</td>
			<td>2% Lignocaine Hydrochloride IP, 21.3 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Tramadol&#160;</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Limited, Ahmedabad, Gujarat, India</td>
			<td>MB/07/500</td>
			<td>Tramadol hydrochloride IP, 50 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K-wire&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>166 (1mm)</td>
			<td>12&#34;, double ended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical drill for inserting K-wire</td>
			<td>&#8206;Bosch, Germany&#160;</td>
			<td>06019F70K4</td>
			<td>GSR 120-LI Professional</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum cutting scissors&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.121.06S</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.108.06</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment&#160;</td>
			<td>GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited, Bengaluru, Karnataka, India</td>
			<td>KTK/28a/467/2001</td>
			<td>Neomycin, Polymixin B sulfate and Bacitracin zinc ophthalmic ointment USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osteotome (chisel)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>1001.S.10</td>
			<td>10 mm, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periosteal elevator&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>918.10.S</td>
			<td>10 mm, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pliers cum wire cutter</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>604.65</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reynold&#8217;s scissors</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.110.06S</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard semi-synthetic diet&#160;</td>
			<td>Ashirvad Industries, Chandigarh, India</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>Detailed composition provided in materials used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel cup for keeping betadine for application</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel tray with lid for autoclaving instruments</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Ideal Healthcare Industries, Delhi, India&#160;</td>
			<td>E(0047)/14/MNB/7951</td>
			<td>Sterile, 5cmx5cm, 12 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile marble block for support</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>Locally fabricated; autoclavable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (1 mL)&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td>1 mL sterile Syringe with 26 G x 1/2 (0.45 mm x 13 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (2 mL)&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India</td>
			<td>REF 307749</td>
			<td>2 mL sterile syringe with 24 G x 1&#39;&#39; (0.55 mm x 25 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (10 mL)&#160;</td>
			<td>Hindustan Syringes &#38; Medical Devices Ltd. Faridabad, India&#160;</td>
			<td>334-B(H)</td>
			<td>10 mL sterile syringe with 21 G x1.5&#34; (0.80 mm x 38 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blades (size no.15)</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA</td>
			<td>REF MDS15115E</td>
			<td>Sterile, Single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blades (size no.24)</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA</td>
			<td>REF MDS15124E</td>
			<td>Sterile, Single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Healthium Medtech Pvt Ltd, Bangalore, Karnataka, India</td>
			<td>SN 3318</td>
			<td>4-0, 16 mm, 3/8 circle cutting needle, monofilament polyamide suture&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wax block in aluminium tray&#160;</td>
			<td>Locally fabricated</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>30 cm x 30 cm x 4 cm aluminium tray containing wax (to prevent animal from slipping)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray machine</td>
			<td>Philips India Ltd, Gurugram, Haryana</td>
			<td>SN19861013</td>
			<td>Model: Philips Digital Diagnost R 4.2&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocol for developing a femur osteotomy model in wistar albino rats

Заживление переломов – это физиологический процесс, приводящий к регенерации костных дефектов скоординированным действием остеобластов и остеокластов. Остеоанаболические препараты могут увеличить восстановление переломов, но имеют ограничения, такие как высокая стоимость или нежелательные побочные эффекты. Потенциал заживления костей препарата может быть первоначально определен исследованиями in vitro , но для окончательного доказательства концепции необходимы исследования in vivo . Наша цель состояла в том, чтобы разработать модель остеотомии бедренной кости грызунов, которая могла бы помочь исследователям понять развитие образования мозоли после перелома ствола бедренной кости и которая могла бы помочь установить, обладает ли потенциальный препарат свойствами заживления костей. Взрослые самцы крыс-альбиносов Wistar были использованы после разрешения Институционального комитета по этике животных. Грызунов обезболивали, а в асептических условиях создавались полные поперечные переломы на средней трети стволов бедренных костей с помощью открытой остеотомии. Переломы были уменьшены и внутренне зафиксированы с помощью интрамедуллярных K-проводов, и было разрешено вторичное заживление переломов. После операции в течение 5 дней давали внутрибрюшинные анальгетики и антибиотики. Последовательные еженедельные рентгеновские снимки оценивали образование мозоли. Крыс приносили в жертву на основе радиологически заранее определенных временных точек, а развитие перелома мозоли анализировали рентгенологически и с помощью иммуногистохимии.

Это исследование было предпринято для разработки модели остеотомии бедренной кости у крыс-альбиносов Wistar. Эта модель может быть использована для оценки заживления костей, а также остеогенного эффекта перспективного остеоанаболического препарата в заживлении костей. Соблюдались ста?...

Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats at JoVE.com

Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats

Здесь мы представляем протокол для ятрогенного перелома ствола бедренной кости крыс-альбиносов Wistar и наблюдения за развитием мозоли. Эта модель остеотомии бедренной кости может помочь исследователям оценить процесс заживления переломов и изучить, как препарат может повлиять на заживление переломов.

Протокол разработки модели остеотомии бедренной кости у крыс-альбиносов Wistar

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. ...

Эта модель остеотомии бедренной кости может помочь исследователям изучить процесс заживления переломов и оценить, как препарат может повлиять на заживление переломов. Это простая и легкая в использовании модель грызунов, которая может помочь исследователям определить, обладает ли препарат свойствами заживления костей, и понять его механизм действия. Несмотря на то, что он в основном фокусируется на наблюдении и анализе заживления переломов, он также может дать представление о патогенезе заболевания.Этот метод может направлять будущие исследования по заживлению костей в здоровье и болезнях. Он может быть использован для оценки эффекта потенциальных остеоанаболических препаратов. Индуцирование правильной линии перелома и фиксации перелома с помощью K-проволоки является сложной задачей.Пара практических занятий должна помочь. Простота и воспроизводимость этого метода проявляются в его визуальной демонстрации Паван Пагаку, младший ординатор из моей лаборатории, поможет продемонстрировать процедуру. Для начала поместите восковой блок, содержащий воск, на глубину до 2,5 сантиметров на операционный стол и накройте его стерильными шторами.Сделав сантиметровый вертикальный разрез кожи на боковой стороне правого бедра, обнажите мышцу vastus lateralis, разделив глубокую фасцию с помощью ножниц Метценбаума. Расщелите vastus lateralis на одной линии с мышечными волокнами до тех пор, пока не будет достигнут стержень бедренной кости. Затем используйте периостальный лифт, чтобы освободить кость от мышц, прикрепленных к ней.После введения местной анестезии в надкостницу и вокруг нее, создайте углубление в средней трети стержня бедренной кости, используя хирургический клинок No 15. Поместите зубило на углубление и аккуратно постучите молотком по зубилу, чтобы полностью сломать кость в средней трети вала. Внутренне зафиксируйте перелом с помощью одномиллиметрового стерильного K-провода, удерживаемого с помощью силовой дрели с батарейным питанием.Пропустите К-проволоку в медуллярный канал дистального фрагмента через место перелома. Затем просверлите К-проволоку через дистальный конец бедренной кости. После уменьшения перелома продвигают К-проволоку от дистального конца в канал проксимального фрагмента до тех пор, пока она не приобретется в трохантерической области.Отрежьте дистальную часть К-проволоки, выступающую через кожу, с помощью проволочного резака. Согните кончик K-проволоки примерно до 90 градусов с помощью плоскогубцев и используйте марлевую повязку, смоченную в бетадине, для заправки на месте штифта. К-проволока действует как интрамедуллярная шина для удержания перелома в уменьшенном положении.Надавите на область кровотечения, используя стерильную марлю или щипцы артерий, чтобы остановить любое кровотечение. Обеспечьте полный гемостаз перед закрытием кожи с помощью нейлонового шва 4-0. Очистите рану бетадином и накройте ее стерильной марлей и микропористой клейкой лентой.Для послеоперационного ухода верните крыс в клетки и продолжайте давать стандартную полусинтетическую диету, а также антибиотики и анальгетики внутрибрюшинно в течение пяти дней после процедуры. Наконец, оцените заживление кости с помощью рентгеновского снимка переломного участка один раз в неделю. Здесь показаны рентгеновские снимки бедренной кости крысы с помощью K-wire NC2 до индуцирования перелома и через день после операции.Заживление перелома контролируется рентгенологически путем последовательного еженедельного рентгеновского снимка прооперированного участка для оценки образования мозоли. Перелом остается уменьшенным и обездвиженным интрамедуллярным К-проводом. После жертвоприношения в заранее определенный момент времени бедренная кость тщательно сохранялась в формалине с последующим декальцификацией кости.Кость с мозолью была получена после оптимальной декальцификации. Неповрежденная мозоль и сагиттальный отдел мозоли показаны здесь. Каллус периодически оценивается, чтобы обеспечить оптимальную декальцинацию, прежде чем оценивать ее с использованием других методов.Здесь показаны изображения с низким и высоким увеличением окрашенного гематоксилином и эозином участка участка перелома. Окрашенные участки места перелома показывают твердую мозоль с образованием хряща и новой кости. Здесь можно увидеть переломный конец кости и вторую кортикальную область.Надкостница наиболее чувствительна к боли частью раны, и важно инфильтрировать надкостницу в месте перелома местным анестетиком перед остеотомией. За ним может последовать иммуногистохимический и радиологический анализ мозолистых, микро-КТ для количественной гистоморфометрии, анализ биомеханической прочности каллусного анализа сыворотки. Данная методика полезна для определения остеогенного потенциала, механизма действия, а также сравнительного анализа перспективных остеоанаболических препаратов.

Research

JoVE Journal

Medicine

Quantifying Glomerular Permeability of Fluorescent Macromolecules Using 2-Photon Microscopy in Munich Wistar Rats

Количественная клубочковой проницаемости Флуоресцентные макромолекул Используя 2-фотонной микроскопии в Мюнхене крыс Wistar

Kidney  diseases involving urinary loss of large essential macromolecules, such as  serum albumin, have long been thought to be caused by alterations in ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Контузия Модель тяжелого повреждения спинного мозга у крыс

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Возрастанию сужением аорты у крыс для создания перегрузки Давление гипертрофии сердца модели

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

Регулируемая жесткость, внешний фиксатор для модели крысы Остеотомия бедра и сегментный дефекта кости

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

A Novel Model of Mild Traumatic Brain Injury for Juvenile Rats

Роман Модель легкой черепно-мозговой травмой для несовершеннолетних крыс

Despite growing evidence that childhood represents a major risk period for mild traumatic brain injury (mTBI) from sports-related concussions, motor ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Метод Изолированные<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Легких перфузии в крысиной модели: уроки, извлеченные из Разработка EVLP программы Rat

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Изучение рака поджелудочной железы стволовых клеток Характеристики для разработки новых стратегий лечения

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

Гетеротопическая Почечная Аутотрансплантация в свиной модели: Протокол Шаг за шагом

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Модель глаукомы, индуцированных Circumlimbal шва у крыс и мышей

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

Воспроизводимая модель эндотоксинов, ориентированная на отделение интенсивной терапии, у крыс

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...