Name: protocol for developing a femur osteotomy model in wistar albino rats
Uploaded: 2022-08-31T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats at JoVE.com

Yazarlar, araştırma finansmanı için Hindistan Hükümeti AYUSH Bakanlığı, Homeopati Araştırmaları Merkez Konseyi'ne (CCRH) teşekkür eder. Yazarlar, Central Animal Facility, AIIMS, New Delhi'nin hayvan deneylerine olan yardımları ve destekleri için ve CMET, AIIMS, Yeni Delhi'nin fotoğraf ve videografideki yardım ve destekleri için teşekkür eder.

Hayvan deneyleri, Kurumsal Hayvan Etiği Komitesi (IAEC), AIIMS, Yeni Delhi, Hindistan'dan (286/IAEC-1/2021) etik onay alındıktan sonra yapılmıştır.
1. Preoperatif prosedür
<ol><li>Ev erkek Wistar albino sıçanları, her biri 150-200 g ağırlığında, ayrı ayrı kafeslerde bir Merkezi Hayvan Tesisi'nde (CAF) 6-8 haftalıktır. Bu, birden fazla sıçan kafesleri paylaştığında cerrahi / kırık bölgesi yaralanması olmamasını sağlar.</li>
	<li>Sıçanları% ...

<ol>
	<li>Wang, T., Zhang, X., Bikle, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteogenic+differentiation+of+periosteal+cells+during+fracture+healing.">Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healing.</a> Journal of Cellular Physiology. 232 (5), 913-921 (2017).</li><li>Fakhry, M., Hamade, E., Badran, B., Buchet, R., Magne, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+mechanisms+of+mesenchymal+stem+cell+differentiation+towards+osteoblasts.">Molecular mechanisms of mesenchymal stem cell differentiation towards osteoblasts.</a> World Journal of Stem Cells. 5 (4), 136-148 (2013).</li><li>Bishop, J. A., Palanca, A. A., Bellino, M. J., Lowenberg, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+compromised+fracture+healing.">Assessment of compromised fracture healing.</a> JAAOS - Journal of the American Academy of Orthopaedic Surgeons. 20 (5), 273-282 (2012).</li><li>Fong, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predictors+of+nonunion+and+reoperation+in+patients+with+fractures+of+the+tibia:+an+observational+study.">Predictors of nonunion and reoperation in patients with fractures of the tibia: an observational study.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 14 (1), 103 (2013).</li><li>Ramoutar, D. N., Rodrigues, J., Quah, C., Boulton, C., Moran, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Judet+decortication+and+compression+plate+fixation+of+long+bone+nonunion:+Is+bone+graft+necessary.">Judet decortication and compression plate fixation of long bone nonunion: Is bone graft necessary.</a> Injury. 42 (12), 1430-1434 (2011).</li><li>Goulet, J. A., Senunas, L. E., DeSilva, G. L., Greenfield, M. L. V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autogenous+iliac+crest+bone+graft:+Complications+and+functional+assessment.">Autogenous iliac crest bone graft: Complications and functional assessment.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 339, 76-81 (1997).</li><li>Stevenson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+and+economic+evaluation+of+alendronate,+etidronate,+risedronate,+raloxifene+and+teriparatide+for+the+prevention+and+treatment+of+postmenopausal+osteoporosis.">A systematic review and economic evaluation of alendronate, etidronate, risedronate, raloxifene and teriparatide for the prevention and treatment of postmenopausal osteoporosis.</a> Health Technology Assessment. 9 (22), 1 (2005).</li><li>Haffner-Luntzer, M., Kovtun, A., Rapp, A. E., Ignatius, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+in+bone+fracture+healing+research.">Mouse models in bone fracture healing research.</a> Current Molecular Biology Reports. 2 (2), 101-111 (2016).</li><li>Mills, L. A., Simpson, A. H. R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+models+of+bone+repair.">In vivo models of bone repair.</a> The Journal of Bone and Joint Surgery. British Volume. 94 (7), 865-874 (2012).</li><li>Houdebine, L. -. M., Sioud, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+Animal+Models+in+Biomedical+Research.">Transgenic Animal Models in Biomedical Research.</a> Target Discovery and Validation Reviews and Protocols: Volume 1, Emerging Strategies for Targets and Biomarker Discovery. , (2007).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+bone+healing+models:+Standards,+tips+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting.">Small animal bone healing models: Standards, tips and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49 (4), 591-599 (2011).</li><li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone.">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> Journal of Orthopaedic Research. 2 (1), 97-101 (1984).</li><li>Klein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+healing+process+in+open+osteotomy+model+and+open+fracture+model:+delayed+healing+of+osteotomies+after+intramedullary+screw+fixation.">Comparison of healing process in open osteotomy model and open fracture model: delayed healing of osteotomies after intramedullary screw fixation.</a> Journal of Orthopaedic Research. 33 (7), 971-978 (2015).</li><li>Kolios, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Do+estrogen+and+alendronate+improve+metaphyseal+fracture+healing+when+applied+as+osteoporosis+prophylaxis.">Do estrogen and alendronate improve metaphyseal fracture healing when applied as osteoporosis prophylaxis.</a> Calcified Tissue International. 86 (1), 23-32 (2010).</li><li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration.">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 23, 31-38 (2009).</li><li>Umiatin, U., Dilogo, I. H., Sari, P., Wijaya, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+analysis+of+bone+callus+in+delayed+union+model+fracture+healing+stimulated+with+pulsed+electromagnetic+fields+(PEMF).">Histological analysis of bone callus in delayed union model fracture healing stimulated with pulsed electromagnetic fields (PEMF).</a> Scientifica. 2021, 4791172 (2021).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+osteogenic+potential+of+human+bone+callus.">The osteogenic potential of human bone callus.</a> Scientific Reports. 6, 36330 (2016).</li><li>Haffner-Luntzer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+to+study+fracture+healing+of+the+proximal+femur.">A novel mouse model to study fracture healing of the proximal femur.</a> Journal of Orthopaedic Research. 38 (10), 2131-2138 (2020).</li><li>Aur&#233;gan, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+rat+model+of+femur+fracture+for+bone+and+mineral+research:+An+improved+description+of+expected+comminution,+quantity+of+soft+callus+and+incidence+of+complications.">The rat model of femur fracture for bone and mineral research: An improved description of expected comminution, quantity of soft callus and incidence of complications.</a> Bone &amp; Joint Research. 2 (8), 149-154 (2013).</li><li>Li, Z., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drill+hole+models+to+investigate+bone+repair.">Drill hole models to investigate bone repair.</a> Methods in Molecular Biology. 2221, 193-204 (2021).</li><li>Handool, K. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimization+of+a+closed+rat+tibial+fracture+model.">Optimization of a closed rat tibial fracture model.</a> Journal of Experimental Orthopaedics. 5 (1), 13 (2018).</li><li>Kobata, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevention+of+bone+infection+after+open+fracture+using+a+chitosan+with+ciprofloxacin+implant+in+animal+model.">Prevention of bone infection after open fracture using a chitosan with ciprofloxacin implant in animal model.</a> Acta Cirurgica Brasileira. 35 (8), 202000803 (2020).</li></ol>

Bu yöntem, Wistar albino sıçanlarında kırık osteotomi modeli geliştirmek için gereken ayrıntıları açıkça açıklamaktadır. Bu model, umut verici bir osteoanabolik ilacın kırık iyileşmesindeki osteojenik etkisini değerlendirmek ve kemik iyileşmesinin inceliklerini anlamak için kullanılabilir. Bu yöntemin göze çarpan özelliği, basit olması ve çok fazla zamana veya sofistike ekipmana ihtiyaç duymamasıdır. Bu yöntemde, deneyler için kemirgen modeli olarak yetişkin erkek Wistar albino sıç...

Kemik, kemik oluşturan hücrelerden, osteoblastlardan ve kemik emici hücrelerden, osteoklastlardan oluşan yoğun bir bağ dokusudur. Kırık iyileşmesi, osteoblastların ve osteoklastların koordineli etkisiyle kemik defektlerinin yenilenmesiyle sonuçlanan fizyolojik bir süreçtir1. Kırık olduğunda, kırık bölgesinde osteoblastik ve osteoklastik aktivite kemik iyileşmesini belirleyen önemli faktörlerden bazılarıdır2. Kırık iyileşmesi normal seyrinden saptığında, gecikmiş bir birleşme, malunion veya birleşmeme ile sonuçlanır. 9 ay boyunca kırığın birleşme başarısızlığı olduğunda, son 3 ay içinde onarımın ilerlemesi olmadan bir kırığın birleşmediği söylenir3. Tüm kırıkların yaklaşık %10-15'inde nonunion 4'e kadar ilerleyebilecek bir onarım gecikmesiyaşanır. Tüm kırıklarda birleşmeme oranı %5-%10'dur ve tutulan kemiğe ve kırık bölgesine bağlı olarak değişir5.
Kırık kaynamamasının tedavisinde mevcut rejim cerrahi ve/veya tıbbi modaliteleri içermektedir. Şu anda, gecikmiş veya kırıkların birleşmemesi, kemik grefti gibi cerrahi stratejilerle aşılabilir. Bununla birlikte, kemik greftlemenin greft dokusunun mevcudiyeti, donör bölge ağrısı, morbidite ve enfeksiyon gibi sınırlamaları ve komplikasyonları vardır6. Tıbbi tedavi, kemik morfogenetik proteini (BMP) ve teriparatid (parathormon analogu) gibi osteoanabolik ilaçları içerir. Şu anda kullanılan osteoanabolik ajanlar, kırıkların onarımını arttırma potansiyeline sahiptir, ancak fahiş maliyetler veya istenmeyen yan etkiler gibi kısıtlamalara sahiptir7. Bu nedenle, kemik iyileşmesi için uygun maliyetli, cerrahi olmayan alternatifleri belirleme kapsamı vardır. Bir ilacın kemik iyileşme potansiyeli başlangıçta in vitro çalışmalarla belirlenebilir, ancak kavramın nihai kanıtı için in vivo çalışmalara ihtiyaç vardır. Kemik iyileşmesini arttırdığı bilinen bir ilaç in vitro olarak değerlendirilmeli ve umut verici bulunursa in vivo hayvan modeli çalışmaları için kullanılabilir. İlaç in vivo modelde kemik oluşumunu ve yeniden şekillenmesini teşvik ettiğini kanıtlarsa, bir sonraki aşamaya (yani klinik çalışmalara) geçebilir.
Hayvanlarda kırık iyileşmesini değerlendirmek, insan denemelerinden geçmeden önce kemik iyileşmesi için tanıtılan yeni bir ajanı değerlendirmek için ileriye doğru atılmış mantıklı bir adımdır. Kırık iyileşmesi ile ilgili in vivo hayvan modeli çalışmaları için, kemirgenler giderek daha popüler bir model haline gelmiştir8. Kemirgen modelleri, düşük işletme maliyetleri, sınırlı alan ihtiyacı ve kemik iyileşmesi için daha az zaman harcanması nedeniyle artan ilgi yaratmıştır9. Ek olarak, kemirgenler, kemik iyileşmesi ve yenilenmesinin moleküler mekanizmaları üzerine çalışmalara izin veren geniş bir antikor ve gen hedefleri spektrumuna sahiptir10. Bir fikir birliği toplantısı, çeşitli küçük hayvan kemik iyileştirme modellerini kapsamlı bir şekilde vurguladı ve kemik iyileşmesini etkileyen farklı parametrelere odaklandı, ayrıca birkaç küçük hayvan kırığı modeli ve implantı vurguladı11.
Temel kırılma modelleri genel olarak açık veya kapalı modellere ayrılabilir. Kapalı kırık modelleri, kemik üzerinde üç veya dört noktalı bir bükme kuvveti kullanır ve geleneksel bir cerrahi yaklaşım gerektirmez. İnsanlarda uzun kemik kırıklarına benzeyen eğik veya spiral kırıklara yol açarlar, ancak kırık yerinin ve boyutlarının standardizasyonunun olmaması bunlarda kafa karıştırıcı bir faktör olarak hareket edebilir12. Açık kırık modelleri, kemiğin osteotomisi için cerrahi erişim gerektirir, kırık bölgesinde daha tutarlı bir kırık paterni elde edilmesine yardımcı olur, ancak kapalı modellere kıyasla gecikmiş iyileşme ile ilişkilidir13. Kırık iyileşmesini incelemek için kullanılan kemik seçimi, boyutları ve erişilebilirlikleri nedeniyle esas olarak tibia ve femur olarak kalır. Kırık yerinin seçimi genellikle diyafiz veya metafizdir. Metafiz bölgesi, osteoporotik deneklerde kırık iyileşmesinin çalışıldığı durumlarda özel olarak seçilir, çünkü metafiz osteoporozdan daha fazla etkilenir14. İntramedüller pimler ve eksternal fiksatörler gibi çeşitli implantlar kırık 11,15'i stabilize etmek için kullanılabilir.
Bu çalışmanın amacı, araştırmacıların sadece femur kırığını takiben nasır gelişimini anlamalarına yardımcı olmakla kalmayıp, aynı zamanda potansiyel bir ilacın hareket ettiği mekanizmayı anlayarak kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemeye yardımcı olabilecek basit ve takip edilmesi kolay bir kemirgen modeli geliştirmekti.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Raman &#38; Weil Pvt. Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>MFG/MD/2019/000189</td>
			<td>Sterillium hand disinfectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artery forceps&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.105.05S</td>
			<td>5&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bard-Parker handle&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.103.03</td>
			<td>Size number 3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine solution</td>
			<td>Win-medicare New Delhi, India</td>
			<td>UP14250000001</td>
			<td>10% w/v Povidone iodine solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cat&#39;s-paw skin retractor&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>908.S</td>
			<td>Small</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EDTA</td>
			<td>Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India</td>
			<td>43272</td>
			<td>Disodium salt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin</td>
			<td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>115935</td>
			<td>For preparing the staining solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (plain)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>115.06</td>
			<td>6&#34;, plain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps (toothed)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>117.06</td>
			<td>6&#34;, toothed</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Sisco research laboratories Pvt. Ltd, Maharashtra, India</td>
			<td>84439</td>
			<td>For preparing the neutral buffered formalin&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haematoxylin</td>
			<td>Sigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, India</td>
			<td>104302</td>
			<td>For preparing the staining solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hammer</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>401.M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Cefuroxime</td>
			<td>Akumentis Healthcare Ltd, Thane, Maharashtra, India</td>
			<td>48/UA/SC/P-2013</td>
			<td>Cefuroxime sodium IP, 1.5 g/vial&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Ketamine</td>
			<td>Baxter Pharmaceuticals India Private Limited, Gujarat, India</td>
			<td>G/28-B/6</td>
			<td>Ketamine hydrochloride IP, 50 mg/mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Xylazine</td>
			<td>Indian Immunologicals Limited, Hyderabad, Telangana, India</td>
			<td>28/RR/AP/2009/F/G</td>
			<td>Xylazine hydrochloride USP, 20 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Lignocaine</td>
			<td>Jackson laboratories Pvt Limited, Punjab, India&#160;</td>
			<td>1308-B</td>
			<td>2% Lignocaine Hydrochloride IP, 21.3 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection Tramadol&#160;</td>
			<td>Intas Pharmaceuticals Limited, Ahmedabad, Gujarat, India</td>
			<td>MB/07/500</td>
			<td>Tramadol hydrochloride IP, 50 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K-wire&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>166 (1mm)</td>
			<td>12&#34;, double ended</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical drill for inserting K-wire</td>
			<td>&#8206;Bosch, Germany&#160;</td>
			<td>06019F70K4</td>
			<td>GSR 120-LI Professional</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum cutting scissors&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.121.06S</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holder</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.108.06</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic ointment&#160;</td>
			<td>GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited, Bengaluru, Karnataka, India</td>
			<td>KTK/28a/467/2001</td>
			<td>Neomycin, Polymixin B sulfate and Bacitracin zinc ophthalmic ointment USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osteotome (chisel)</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>1001.S.10</td>
			<td>10 mm, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Periosteal elevator&#160;</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>918.10.S</td>
			<td>10 mm, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pliers cum wire cutter</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>604.65</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reynold&#8217;s scissors</td>
			<td>Nebula surgical, Gujarat, India</td>
			<td>G.110.06S</td>
			<td>6&#34;, straight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard semi-synthetic diet&#160;</td>
			<td>Ashirvad Industries, Chandigarh, India</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>Detailed composition provided in materials used</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel cup for keeping betadine for application</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Steel tray with lid for autoclaving instruments</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Ideal Healthcare Industries, Delhi, India&#160;</td>
			<td>E(0047)/14/MNB/7951</td>
			<td>Sterile, 5cmx5cm, 12 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile marble block for support</td>
			<td>Local purchase</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>Locally fabricated; autoclavable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (1 mL)&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India</td>
			<td>REF 303060</td>
			<td>1 mL sterile Syringe with 26 G x 1/2 (0.45 mm x 13 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (2 mL)&#160;</td>
			<td>Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, India</td>
			<td>REF 307749</td>
			<td>2 mL sterile syringe with 24 G x 1&#39;&#39; (0.55 mm x 25 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe and needle (10 mL)&#160;</td>
			<td>Hindustan Syringes &#38; Medical Devices Ltd. Faridabad, India&#160;</td>
			<td>334-B(H)</td>
			<td>10 mL sterile syringe with 21 G x1.5&#34; (0.80 mm x 38 mm) needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blades (size no.15)</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA</td>
			<td>REF MDS15115E</td>
			<td>Sterile, Single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blades (size no.24)</td>
			<td>Paramount Surgimed Ltd, New Delhi, India for Medline Industries Inc, IL, USA</td>
			<td>REF MDS15124E</td>
			<td>Sterile, Single use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Healthium Medtech Pvt Ltd, Bangalore, Karnataka, India</td>
			<td>SN 3318</td>
			<td>4-0, 16 mm, 3/8 circle cutting needle, monofilament polyamide suture&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wax block in aluminium tray&#160;</td>
			<td>Locally fabricated</td>
			<td>No catalog number available</td>
			<td>30 cm x 30 cm x 4 cm aluminium tray containing wax (to prevent animal from slipping)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-ray machine</td>
			<td>Philips India Ltd, Gurugram, Haryana</td>
			<td>SN19861013</td>
			<td>Model: Philips Digital Diagnost R 4.2&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

protocol for developing a femur osteotomy model in wistar albino rats

Kırık iyileşmesi, osteoblastların ve osteoklastların koordineli etkisiyle kemik defektlerinin yenilenmesiyle sonuçlanan fizyolojik bir süreçtir. Osteoanabolik ilaçlar, kırıkların onarımını arttırma potansiyeline sahiptir, ancak yüksek maliyetler veya istenmeyen yan etkiler gibi kısıtlamalara sahiptir. Bir ilacın kemik iyileşme potansiyeli başlangıçta in vitro çalışmalarla belirlenebilir, ancak kavramın nihai kanıtı için in vivo çalışmalara ihtiyaç vardır. Amacımız, araştırmacıların femur şaftının kırılmasını takiben nasır oluşumunun gelişimini anlamalarına yardımcı olabilecek ve potansiyel bir ilacın kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemeye yardımcı olabilecek bir femur osteotomi kemirgen modeli geliştirmekti. Yetişkin erkek Wistar albino sıçanları, Kurumsal Hayvan Etik Kurulu izninden sonra kullanıldı. Kemirgenler anestezi altına alındı ve aseptik koşullar altında, açık osteotomi kullanılarak femurların şaftlarının ortada üçte birinde tam enine kırıklar oluşturuldu. Kırıklar intramedüller K-teller kullanılarak azaltıldı ve internal olarak sabitlendi ve sekonder kırık iyileşmesinin gerçekleşmesine izin verildi. Ameliyattan sonra 5 gün boyunca intraperitoneal analjezikler ve antibiyotikler verildi. Sıralı haftalık röntgenler nasır oluşumunu değerlendirdi. Sıçanlar radyolojik olarak önceden belirlenmiş zaman noktalarına göre kurban edildi ve kırık nasır gelişimi radyolojik olarak ve immünohistokimya kullanılarak analiz edildi.

Bu çalışma Wistar albino sıçanlarında femur osteotomi modeli geliştirmek amacıyla yapılmıştır. Bu model, kemik iyileşmesini ve umut verici bir osteoanabolik ilacın kemik iyileşmesinde osteojenik etkisini değerlendirmek için kullanılabilir. Standart cerrahi önlemler ve protokoller takip edildi. İşlem için steril önlükler, perdeler ve cerrahi ekipmanlar kullanıldı (Şekil 1). Ekipman (Tablo 1) ameliyattan 48 saat önce sterilize edildi. Hayvanların h...

Watch this Scientific Journal Video about Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats at JoVE.com

Protocol for Developing a Femur Osteotomy Model in Wistar Albino Rats

Burada, Wistar albino sıçanlarının femurunun şaftını iyatrojenik olarak kırmak ve nasır gelişimini takip etmek için bir protokol sunuyoruz. Bu femur osteotomi modeli, araştırmacıların kırık iyileşme sürecini değerlendirmelerine ve bir ilacın kırık iyileşmesini nasıl etkileyebileceğini incelemelerine yardımcı olabilir.

Wistar Albino Sıçanlarında Femur Osteotomi Modeli Geliştirme Protokolü

Fracture healing is a physiological process resulting in the regeneration of bone defects by the coordinated action of osteoblasts and osteoclasts. ...

Bu femur osteotomi modeli, araştırmacıların kırık iyileşme sürecini incelemelerine ve bir ilacın kırık iyileşmesini nasıl etkileyebileceğini değerlendirmelerine yardımcı olabilir. Araştırmacıların bir ilacın kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemelerine ve etki mekanizmasını anlamalarına yardımcı olabilecek basit ve takip edilmesi kolay bir kemirgen modelidir. Esas olarak kırık iyileşmesini gözlemlemeye ve analiz etmeye odaklansa da, hastalık patogenezi hakkında da fikir verebilir.Bu yöntem, sağlık ve hastalıkta kemik iyileşmesi konusunda gelecekteki araştırmalara rehberlik edebilir. Potansiyel osteoanabolik ilaçların etkisini değerlendirmek için kullanılabilir. Uygun bir kırılma hattının indüklenmesi ve bir K-teli ile kırılma fiksasyonu zordur.Birkaç pratik seansı yardımcı olmalıdır. Bu yöntemin basitliği ve tekrarlanabilirliği, görsel gösteriminde açıkça görülmektedir Laboratuvarımdan genç bir sakin olan Pawan Pagaku, prosedürün gösterilmesine yardımcı olacaktır. Başlamak için ameliyat masasına 2,5 santimetre derinliğe kadar balmumu içeren balmumu bloğunu yerleştirin ve steril örtülerle örtün.Sağ uyluğun lateral tarafında bir santimetre dikey deri kesisi yaptıktan sonra, Metzenbaum makası kullanarak derin fasyayı ayırarak vastus lateralis kasını açığa çıkarın. Vastus lateralis'i, femur miline ulaşılana kadar kas lifleri ile aynı hizada bölün. Ardından, kemiği kendisine bağlı kaslardan kurtarmak için periosteal asansörü kullanın.Perioste içine ve çevresine lokal anestezi enjekte ettikten sonra, 15 numaralı cerrahi bıçağı kullanarak femur şaftının orta üçte birinde bir girinti oluşturun. Girintiye bir keski yerleştirin ve şaftın orta üçte birindeki kemiği tamamen kırmak için keskiye bir çekiçle hafifçe dokunun. Pille çalışan bir elektrikli matkap yardımıyla tutulan bir milimetrelik steril bir K-teli kullanarak kırığı dahili olarak sabitleyin.K-telini kırık bölgesinden distal fragmanın medüller kanalına geçirin. Ardından, K-telini femur distal ucundan delin. Kırığı indirgedikten sonra, K-telini distal uçtan proksimal parçanın kanalına doğru trokanterik bölgede satın alınana kadar ilerletin.Bir tel kesici kullanarak deriden çıkıntı yapan K-telinin distal kısmını kesin. Pense kullanarak K-telinin ucunu yaklaşık 90 dereceye kadar bükün ve pim bölgesi pansumanı için Betadine'e batırılmış bir gazlı bez bandajı kullanın. K-teli, kırığı azaltılmış bir konumda tutmak için intramedüller bir atel görevi görür.Herhangi bir kanamayı durdurmak için steril gazlı bez veya arter forseps kullanarak kanama bölgesine baskı uygulayın. 4-0 naylon dikiş kullanarak cildi kapatmadan önce tam hemostaz sağlayın. Yarayı Betadine ile temizleyin ve steril gazlı bez ve mikrogözenek yapışkan bant ile örtün.Postoperatif bakım için, sıçanları kafeslerine geri döndürün ve işlemden sonraki beş gün boyunca intraperitoneal olarak standart bir yarı sentetik diyetin yanı sıra antibiyotik ve analjezikler vermeye devam edin. Son olarak, haftada bir kez kırık bölgenin röntgeni ile kemik iyileşmesini değerlendirin. Sıçanın femurunun K-tel NC2 ile röntgenleri, kırığı indüklemeden önce ve ameliyattan bir gün sonra burada gösterilmiştir.Kırık iyileşmesi, nasır oluşumunu değerlendirmek için ameliyat edilen bölgenin sıralı haftalık röntgenleri alınarak radyolojik olarak izlenir. Kırık, intramedüller K teli ile küçültülmüş ve hareketsiz kalır. Önceden belirlenmiş bir zaman noktasında kurban edildikten sonra, femur formalin içinde dikkatlice korundu, ardından kemik dekalsifikasyonu izledi.Nasırlı kemik optimal dekalsifikasyondan sonra elde edildi. Sağlam nasır ve nasırın sagital bölümü burada gösterilmiştir. Nasır, diğer teknikler kullanılarak değerlendirilmeden önce optimal kireç çözmeyi sağlamak için aralıklı olarak değerlendirilir.Burada kırık bölgesinin hematoksilin ve eozin boyalı bölümünün düşük büyütme ve yüksek büyütme görüntüleri gösterilmiştir. Kırık bölgesinin lekeli bölümlerinde kıkırdak ve yeni kemik oluşumu ile sert bir nasır görülür. Kemiğin kırık ucu ve ikinci kortikal bölge burada görülebilir.Periosteum yaranın ağrıya en duyarlı kısmıdır ve osteotomiden önce lokal anestezi ile kırık bölgesindeki periostun infiltrasyonu esastır. Bunu kantitatif histomorfometri için duyarsız, mikro-BT'nin immünohistokimyasal ve radyolojik analizi, serumun nasır analizinin biyomekanik mukavemetini analiz ederek takip edebilir. Bu teknik, osteojenik potansiyeli, etki mekanizmasını ve umut verici osteoanabolik ilaçların karşılaştırmalı analizini belirlemek için yararlıdır.

Research

JoVE Journal

Medicine

Quantifying Glomerular Permeability of Fluorescent Macromolecules Using 2-Photon Microscopy in Munich Wistar Rats

Münih Wistar Sıçanlarda 2-Foton Mikroskopi kullanarak Floresan Makromoleküllerin Glomerüler geçirgenliği miktarının

Kidney  diseases involving urinary loss of large essential macromolecules, such as  serum albumin, have long been thought to be caused by alterations in ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Basınç Aşırı Kardiyak hipertrofi Modeli Oluşturma Ratlarda Aort daralma, Artan

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

Ayarlanabilir Sertlik, Sıçan Femur Osteotomi ve Segmental Kemik Hata Modelleri için Eksternal Fiksatör

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

A Novel Model of Mild Traumatic Brain Injury for Juvenile Rats

Çocuk Rats için Hafif Travmatik Beyin Hasarı Yeni Bir Model

Despite growing evidence that childhood represents a major risk period for mild traumatic brain injury (mTBI) from sports-related concussions, motor ...

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

Method of Isolated Ex Vivo Lung Perfusion in a Rat Model: Lessons Learned from Developing a Rat EVLP Program

İzole Yöntemi<em&gt; Ex vivo</emBir Rat Modelinde&gt; Akciğer Perfüzyon: Sıçan EVLP Programı Geliştirme Öğrenilmiş Dersler

The number of acceptable donor lungs available for lung transplantation is severely limited due to poor quality. Ex-Vivo Lung Perfusion (EVLP) has allowed ...

Studying Pancreatic Cancer Stem Cell Characteristics for Developing New Treatment Strategies

Pankreas Kanseri Yeni Tedavi Stratejileri Geliştirme Hücre Özellikleri Kök incelenmesi

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) contains a subset of exclusively tumorigenic cancer stem cells (CSCs) which have been shown to drive tumor ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

Bir Domuz Modeli heterotopik Böbrek Ototransplantasyon: Bir Adım-Adım Protokolü

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Model of Glaucoma Induced by Circumlimbal Suture in Rats and Mice

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

The circumlimbal suture is a technique for inducing experimental glaucoma in rodents by chronically elevating intraocular pressure (IOP), a well-known ...

A Reproducible Intensive Care Unit-Oriented Endotoxin Model in Rats

Sıçanlarda Tekrarlanabilir Yoğun Bakım Ünitesi Odaklı Bir Endotoksin Modeli

Sepsis and septic shock remain the leading cause of death in intensive care units. Despite significant improvements in sepsis management, mortality still ...