Name: improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion
Uploaded: 2022-05-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81770420), Science and Technology Commission of Shanghai Municipality (20140900600), Shanghai Key Laboratory of Clinical Geriatric Medicine (13dz2260700), Shanghai Municipal Key Clinical Specialty (shslczdzk02801) og Center for geriatrisk koronararteriesygdom, Huadong Hospital tilknyttet Fudan University.

Alle dyreforsøg var i overensstemmelse med den relevante etiske vejledning for pleje og brug af forsøgsdyr (NIH-publikation nr. 85-23, revideret 2011) og blev godkendt af udvalgene for dyreforsøg på Huadong Hospital tilknyttet Fudan University. Fjorten uger gamle C57BL/6-hanmus (28-30 g) blev tilfældigt opdelt i fire grupper: Sham-gruppe, Sham+Ang II-gruppe, RDN-gruppe, RDN+Ang II-gruppe, n = 6 i hver gruppe. Alle dyr blev holdt under specifikke lukkede patogenfrie forhold i et temperaturkontrolleret rum ved 24 ± 1...

<ol>
	<li>Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transition+from+hypertension+to+heart+failure:+Contemporary+update.">The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update.</a> JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).</li><li>Lackland, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+recent+clinical+trials+and+hypertension+guidelines+on+stroke+and+future+cerebrovascular+research.">Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research.</a> Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).</li><li>Rossignol, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+double+challenge+of+resistant+hypertension+and+chronic+kidney+disease.">The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease.</a> The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).</li><li>Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+cardiovascular+disease+in+China+and+opportunities+for+improvement.">Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement.</a> JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).</li><li>Valenzuela, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lifestyle+interventions+for+the+prevention+and+treatment+of+hypertension.">Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension.</a> Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).</li><li>Krum, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+renal+sympathetic+denervation+for+resistant+hypertension:+a+multicentre+safety+and+proof-of-principle+cohort+study.">Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study.</a> The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).</li><li>Bhatt, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+controlled+trial+of+renal+denervation+for+resistant+hypertension.">A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension.</a> The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).</li><li>Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+achieved+by+endovascular+delivery+of+ultrasound+in+RADIANCE-HTN+SOLO+or+by+radiofrequency+energy+in+SPYRAL+HTN-OFF+and+SPYRAL-ON+lowers+blood+pressure.">Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure.</a> Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).</li><li>B&#246;hm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+catheter-based+renal+denervation+in+the+absence+of+antihypertensive+medications+(SPYRAL+HTN-OFF+MED+Pivotal):+a+multicentre,+randomised,+sham-controlled+trial.">Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial.</a> The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).</li><li>Azizi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+ultrasound+renal+denervation+to+treat+hypertension+(RADIANCE-HTN+SOLO):+a+multicentre,+international,+single-blind,+randomised,+sham-controlled+trial.">Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial.</a> The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).</li><li>Kandzari, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+renal+denervation+on+blood+pressure+in+the+presence+of+antihypertensive+drugs:+6-month+efficacy+and+safety+results+from+the+SPYRAL+HTN-ON+MED+proof-of-concept+randomised+trial.">Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial.</a> The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).</li><li>Townsend, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+renal+denervation+in+patients+with+uncontrolled+hypertension+in+the+absence+of+antihypertensive+medications+(SPYRAL+HTN-OFF+MED):+a+randomised,+sham-controlled,+proof-of-concept+trial.">Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial.</a> The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).</li><li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+restrains+the+inflammatory+response+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).</li><li>Sharp, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+prevents+heart+failure+progression+via+inhibition+of+the+renin-angiotensin+system.">Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+attenuates+progression+of+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-deficient+mice+independent+of+blood+pressure+lowering.">Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering.</a> Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+mitigates+atherosclerosis+in+ApoE-/-+mice+via+the+suppression+of+inflammation.">Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation.</a> American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+promotes+atherosclerosis+in+hypertensive+apolipoprotein+E-deficient+mice+infused+with+Angiotensin+II.">Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II.</a> Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).</li><li>Eriguchi, M., Tsuruya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+sympathetic+denervation+in+rats.">Renal sympathetic denervation in rats.</a> Methods in Molecular Biology. 1397, 45-52 (2016).</li><li>Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+therapy+for+hypertension.">Renal denervation therapy for hypertension.</a> Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).</li><li>Zhang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NAD(+)+administration+decreases+microvascular+damage+following+cardiac+ischemia/reperfusion+by+restoring+autophagic+flux.">NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux.</a> Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).</li><li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+renal+sympathetic+denervation+ameliorates+renal+fibrosis+and+delays+the+onset+of+hypertension+in+spontaneously+hypertensive+rats.">Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats.</a> American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice.">Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).</li><li>Wilde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tail-cuff+technique+and+its+influence+on+central+blood+pressure+in+the+mouse.">Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).</li><li>Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+blood+pressure+in+mice+using+volume+pressure+recording,+a+tail-cuff+method.">Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).</li><li>Esler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Illusions+of+truths+in+the+Symplicity+HTN-3+trial:+generic+design+strengths+but+neuroscience+failings.">Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+sustained-release+deoxycorticosterone+acetate-induced+hypertension+in+Bama+miniature+pigs+for+renal+sympathetic+nerve+denervation.">Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+safety+of+renal+denervation+as+assessed+by+optical+coherence+tomography:+pre-+and+post-procedure+comparison+with+multi-electrode+ablation+catheter+in+animal+experiment.">The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment.</a> Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).</li><li>Cai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+stereotactic+radiotherapy+for+renal+denervation+in+a+swine+model.">Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model.</a> Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).</li></ol>

Hvorvidt RDN kunne sænke blodtrykket er blevet kontroversielt siden offentliggørelsen af det negative resultat af symplicitet HTN-3 forsøg 7,25. Imidlertid har de mange kliniske forsøg og dyreforsøg vist positive og effektive resultater af RDN på hypertensive mennesker og dyr 9,10,11,12,13,14,15,16,17....

Hypertension er en stor kronisk hjerte-kar-sygdom rundt om i verden. Ukontrolleret hypertension kan beskadige målorganer og bidrage til hjertesvigt, slagtilfælde og kroniske nyresygdomme 1,2,3. Forekomsten af hypertension er steget fra 20% til 31% mellem 1991 og 2007 i Kina. Antallet af voksne med hypertension i Kina kan fordobles efter en nylig revision af de diagnostiske kriterier for hypertension (130/80 mmHg)4. Hypertension kan kontrolleres af medicin, men ca. 20% af patienterne er ikke i stand til at kontrollere deres hypertension, selv når de modtager mindst tre antihypertensive lægemidler (herunder et diuretikum) ved maksimalt tolereret dosis, hvilket kan føre til udvikling af lægemiddelresistent hypertension5.
Renal sympatisk denervation (RDN) har vist sig at være en potentiel behandling for hypertension. I 2009 rapporterede Krum og kolleger resistent hypertensionsbehandling ved hjælp af RDN for første gang. Det blev konstateret, at perkutan nyrearterieablation effektivt kan forårsage vedvarende blodtryksreduktion hos patienter6. Fejlen i Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) forsøget hindrede imidlertid anvendelsen af RDN7, hvilket gjorde RDN til en kontroversiel terapi. Ikke desto mindre er udsigten til RDN endnu ikke udelukket. Nylige kliniske forsøg, herunder RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED / ON MED og SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal har bekræftet effekten af RDN på hypertension 8,9,10,11,12. Således skal der udføres mere detaljeret mekanistisk forskning for at undersøge virkningerne af RDN.
Det overordnede formål med denne undersøgelse er at demonstrere, hvordan RDN hos mus kan ændres til at producere en enklere og mere stabil operation. Et stort antal eksperimenter har studeret forskellige tilgange til RDN, såsom intravaskulær kryoablation, ekstrakorporal ultralyd og lokal anvendelse af et kemikalie eller neurotoksin i forskellige dyremodeller 13,14,15,16,17. RDN-modellen genereret ved hjælp af kemisk ablation med phenol er en veletableret eksperimentel model til at studere patogenesen af sympatisk aktivering på hypertension. Denne model genereres ved kemisk korrosion af nyresympatiske nerver med 10% phenol/ethanolopløsning ved anvendelse af en vatpind18. På den ene side hæmmer den konventionelle RDN potentielt renal sympatisk aktivitet, som derefter nedsætter reninsekretion og natriumreabsorption og øger nyreblodgennemstrømningen. På den anden side undertrykker det renin-angiotensin-aldosteronsystem19. Derved har RDN en gavnlig effekt på hypertension. Imidlertid mangler den kemiske ablationsgenererede RDN-model ablationskriterier og ablationstid, og detaljerne i den eksperimentelle procedure er endnu uklare. Der er heller ingen tekniske rapporter tilgængelige. I denne rapport beskriver vi en kirurgisk protokol til generering af RDN-model med phenol ved hjælp af vejepapir i Angiotensin II (Ang II) induceret hypertension hos C57BL / 6 mus. Vi pakker nyrearterien med vejepapir indeholdende phenol og forener ablationstiden, hvilket hjælper med at etablere en mere reproducerbar, pålidelig RDN-model. Denne eksperimentelle model har til formål at evaluere effekten af RDN på hypertension.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angiotensin II</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:4474-91-3</td>
			<td>To make a hypertensive animol model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab137869</td>
			<td>To evaluate the expression of TH of renal nerves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Analysis</td>
			<td>Visitech Systems</td>
			<td>BP-2000</td>
			<td>Measure the blood pressure of mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-osmotic pump</td>
			<td>DURECT Corporation</td>
			<td>CA 95014</td>
			<td>To fill with Angiotensin II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Norepinephrine ELISA Kit</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab287789</td>
			<td>to measure renal norepinephrine levels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:108-95-2</td>
			<td>Damage the renal sympathetic nerve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing paper</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>F512112</td>
			<td>To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion

Fordelene ved renal sympatisk denervation (RDN) på blodtrykket er blevet bevist i et stort antal kliniske forsøg i de senere år. Imidlertid forbliver reguleringsmekanismen for RDN på hypertension undvigende. Derfor er det vigtigt at etablere en enklere RDN-model hos mus. I denne undersøgelse blev osmotiske minipumper fyldt med Angiotensin II implanteret i 14 uger gamle C57BL/6-mus. En uge efter implantationen af mini-osmotisk pumpe blev der udført en modificeret RDN-procedure på musens bilaterale nyrearterier ved anvendelse af phenol. Aldersmatchede mus fik saltvand og fungerede som falsk gruppe. Blodtrykket blev målt ved baseline og hver uge efterfølgende i 21 dage. Derefter blev nyrearterie, abdominal aorta og hjerte indsamlet til histologisk undersøgelse ved hjælp af H&E og Masson farvning. I denne undersøgelse præsenterer vi en enkel, praktisk, gentagelig og standardiseret RDN-model, som kan kontrollere hypertension og lindre hjertehypertrofi. Teknikken kan denervate perifere nyresympatiske nerver uden nyrearterieskader. Sammenlignet med tidligere modeller letter den modificerede RDN undersøgelsen af patobiologi og patofysiologi af hypertension.

Statistik Alle data udtrykkes som gennemsnit ± standardafvigelse. Envejs ANOVA blev brugt til eksperimenter med tre eller flere betingelser efterfulgt af Bonferroni posthoc-tests til sammenligninger mellem individuelle grupper. Betragt en p-værdi lig med eller mindre end 0,05 som signifikant. En kommerciel software blev brugt til at udføre al statistisk analyse.
Stigning i blodtryk induceret af Ang II blev svækket efter RDN Signifikant stigning i sys...

Watch this Scientific Journal Video about Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion at JoVE.com

Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion

Her præsenterer vi en protokol for nyresympatisk denervation (RDN) hos mus med hypertension induceret af Angiotensin II infusion. Proceduren er gentagelig, praktisk og gør det muligt at studere RDN's reguleringsmekanismer på hypertension og hjertehypertrofi.

Forbedret nyredenervation afbødet hypertension induceret af Angiotensin II infusion

The benefits of renal sympathetic denervation (RDN) on blood pressure have been proved in a large number of clinical trials in recent years. However, the ...

Renal sympatisk denervation er en potentiel behandling for hypertension, som er blevet bevist af mange kliniske forsøg. Denne teknik denerverer frie flow nyrenerver uden nyrearterieskader. Desuden er det en enkel, kritisk, gentagelig og standardiseret model.Ming Wang, en laboratorieassistent fra mit laboratorium, demonstrerer proceduren. Begynd med at desinficere operationsbordet med 70% ethanol, og juster derefter temperaturen på varmepladen til 37 grader Celsius. Før operationen steriliseres alle kirurgiske instrumenter, herunder mikrokirurgisk saks, fine lige tang, fint buede tang, hæmostatiske tang, sterile gasbind og vejepapir ved 121 grader Celsius i 30 minutter.Efter bedøvelse af en 14 uger gammel C57BKL/6-hanmus skal du fjerne håret på bagsiden med en barbermaskine og derefter påføre dyrlægesalve på øjnene for at forhindre tørhed. Placer musen på et operationsbord i dorsal position. Stryg og tør det barberede område af med povidon-jod, efterfulgt af tre klude med 70% ethanol.Brug et sterilt skalpelblad til at lave et snit på en centimeter vinkelret på halen bag øret over skulderbladet på forbenet. Brug derefter en steril hæmostat til at lave en subkutan tunnel under huden og skabe en lomme til pumpen. Indsæt forsigtigt en osmotisk pumpe fyldt med angiotensin II i lommen, hvilket sikrer tilstrækkelig ledig plads til at suturere såret uden at strække huden.Sutur musklen med afbrudte 6-0 Vicryl suturer og luk huden med afbrudte 4-0 nylon suturer. derefter vatpind og tør sårstedet med povidon-jod. Anbring alle de kirurgiske instrumenter i en sterilisator i 10 sekunder, og udskift de sterile handsker mellem operationerne.Overvåg musen, indtil den er helt genoprettet. Overvåg nøje og observer sårheling mindst to gange om dagen i løbet af den første uge og en gang hver dag efterfølgende, herunder rødme, hævelse og infektion. Udfør dissektion straks, hvis musen dør under infusion af angiotensin II.Mål blodtrykket ved baseline og hver uge efter angiotensin II infusion med halemanchet plethysmografi metode i bevidste mus. En uge efter infusion af angiotensin II skal du vælge musene med forhøjet blodtryk og registrere deres vægt. Vælg dyr med en minimumsvægt på 24 gram til nyredenervationskirurgi.Fjern derefter hårene på maven af en bedøvet mus med en barbermaskine, og placer derefter musen på operationsbordet. Hold maven op og fastgør lemmerne med tape. Desinficer maveskindet med povidon-jod efterfulgt af tre klude med 70% ethanol.Efter at have lavet et to centimeter ventralt midterlinje abdominal snit, træk tarmen tilbage med gasbind gennemblødt i 37 grader Celsius saltvand for at udsætte venstre nyrearterie. Disseker forsigtigt fedtet væk fra nyrearterien ved hjælp af buet pincet. Brug steril skarp saks til at skære vejepapiret i et rektangel af samme størrelse som nyrearterien.Klip flere stykker af vejepapiret ad gangen for at holde formen den samme. Vejepapiret dyppes i 10 % phenolethanolopløsning i mindst 30 sekunder. Dæk overfladen af venstre nyrearterie og pakk beholderen med vejepapiret i to minutter.Brug gaze til at beskytte det omgivende væv for at undgå, at vejepapiret rører nyren og tarmen. Gentag den samme procedure for højre nyrearterie. Efter operationen skal du omplacere musklerne i deres oprindelige position og lukke peritoneum med 6-0 Vicryl-suturer i et afbrudt suturmønster, og luk derefter huden med afbrudte 4-0 nylonsuturer.Overvåg alle mus, indtil de er helt genoprettet. En signifikant stigning i systolisk blodtryk blev observeret en uge efter infusion af angiotensin II. Den renale sympatiske denervation eller RDN, angiotensin II-gruppen viste en signifikant reduktion i systolisk blodtryk sammenlignet med sham angiotensin II-gruppen 21 dage efter RDN-proceduren.Der blev ikke observeret nogen signifikant forskel mellem sham- og RDN-grupper to uger efter RDN-proceduren. Hematoxylin og eosin farvning af nyre sympatisk nerve og nyrearterie er vist her. Der blev ikke observeret nogen fortykkelse af intimalaget i nyrearterien i de fire grupper.Sammenlignet med shams-gruppe, fragmenterede og pyknotiske kerner blev fordøjelse og hævelse af endoneuralt væv observeret i begge RDN-grupper. Immunohistokemi af nervebundterne afslørede, at ekspressionen af tyrosinhydroxylase var signifikant nedsat i RDN- og RDN-angiotensin II-gruppen sammenlignet med begge shams-grupper. Renal kortikal noradrenalinindhold i de denerverede nyrer i både normotensiv og hypertensiv gruppe blev signifikant reduceret sammenlignet med den innerverede nyre.Massonfarvning viste ingen bemærkelsesværdig stigning i intima medier af abdominal aorta blandt grupperne. Repræsentative billeder af myokardiet i forskellige grupper er vist her. Angiotensin II infusionsinduceret hjertehypertrofi blev forbedret ved RDN-behandling ved faldet i interstitiel fibrose og kardiomyocytstørrelse.Under proceduren må du ikke røre phenol til det omgivende væv undtagen nyrearterien, fordi det kan forårsage tarmobstruktion, abdominal infektion og nyrearteriestenose. Denne metode kan etablere en standardiseret RDN-model for at hjælpe med at studere de mekanismer, der styrer hypertension. Fremtidige anvendelser af denne teknik kan bidrage til at udvide de veje, der understreger processen med hypertension og hjertehypertrofi.

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antihypertensive Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

En Laser-induceret musemodel af kronisk okulær hypertension til Karakterisere synsfejl

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Tibial Nerve transection - En standardiseret model for denervering-induceret Skeletmuskel Atrofi hos mus

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Vurdering af vaskulære funktion hos patienter med kronisk nyresygdom

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

Tidlig påvisning af Drug-induceret Renal Hæmodynamisk dysfunktion Brug Sonografisk Technology i rotter

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Murine Kidney Transplant Technique

Murine nyretransplantation Teknik

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Subkutan Angiotensin II infusion ved anvendelse af osmotiske pumper inducerer aortaaneurismer i mus

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Romanen tilgang til simultan optagelse af Renal sympatiske Nerve aktivitet og blodtryk med intravenøs Infusion i bevidst, uhæmmet mus.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

Shunt Surgery, Højre Heart kateterisation, og vaskulær Morfometri i en rotte model for Flow-induceret pulmonal arteriel hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Improved Registration of 3D CT Angiography with X-ray Fluoroscopy for Image Fusion During Transcatheter Aortic Valve Implantation

Forbedret registrering af 3D-CT angiografi med X-ray fluoroskopi for billede Fusion under Transcatheter aortaklappen Implantation

The fusion of 3D anatomical models derived from high-fidelity pre-interventional computed tomography angiography (CTA), and x-ray (XR) fluoroscopy to ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Venstre atriale stenose induceret pulmonale venøse Arterialization og gruppe 2 Pulmonal Hypertension i Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...