Name: improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion
Uploaded: 2022-05-26T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion at JoVE.com

この研究は、中国国家自然科学基金会(81770420)、上海市科学技術委員会(20140900600)、上海臨床老年医学重点研究所(13dz2260700)、上海市重点臨床専門(shslczdzk02801)、および復旦大学付属華東病院老人冠状動脈疾患センターの支援を受けました。

すべての動物実験手順は、実験動物の世話と使用に関する関連する倫理ガイド(NIH出版物第85-23号、2011年改訂)に準拠し、復旦大学付属華東病院の動物研究委員会によって承認されました。14週齢の雄C57BL/6マウス(28-30g)を無作為に4つの群に分けた:シャム群、シャム+アンII群、RDN群、RDN+Ang II群、n = 6各群。すべての動物は、24 ± 1°Cの温度管理された部屋で、12時間の明暗サイクルと標準的なげっ?...

<ol>
	<li>Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transition+from+hypertension+to+heart+failure:+Contemporary+update.">The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update.</a> JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).</li><li>Lackland, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+recent+clinical+trials+and+hypertension+guidelines+on+stroke+and+future+cerebrovascular+research.">Implications of recent clinical trials and hypertension guidelines on stroke and future cerebrovascular research.</a> Stroke. 49 (3), 772-779 (2018).</li><li>Rossignol, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+double+challenge+of+resistant+hypertension+and+chronic+kidney+disease.">The double challenge of resistant hypertension and chronic kidney disease.</a> The Lancet. 386 (10003), 1588-1598 (2015).</li><li>Du, X., Patel, A., Anderson, C. S., Dong, J., Ma, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+cardiovascular+disease+in+China+and+opportunities+for+improvement.">Epidemiology of cardiovascular disease in China and opportunities for improvement.</a> JACC International. Journal of the American College of Cardiology. 73 (24), 3135-3147 (2019).</li><li>Valenzuela, P. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lifestyle+interventions+for+the+prevention+and+treatment+of+hypertension.">Lifestyle interventions for the prevention and treatment of hypertension.</a> Nature Review Cardiology. 18 (4), 251-275 (2021).</li><li>Krum, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+renal+sympathetic+denervation+for+resistant+hypertension:+a+multicentre+safety+and+proof-of-principle+cohort+study.">Catheter-based renal sympathetic denervation for resistant hypertension: a multicentre safety and proof-of-principle cohort study.</a> The Lancet. 373 (9671), 1275-1281 (2009).</li><li>Bhatt, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+controlled+trial+of+renal+denervation+for+resistant+hypertension.">A controlled trial of renal denervation for resistant hypertension.</a> The New England Journal of Medicine. 370 (15), 1393-1401 (2014).</li><li>Kjeldsen, S. E., Narkiewicz, K., Burnier, M., Oparil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+achieved+by+endovascular+delivery+of+ultrasound+in+RADIANCE-HTN+SOLO+or+by+radiofrequency+energy+in+SPYRAL+HTN-OFF+and+SPYRAL-ON+lowers+blood+pressure.">Renal denervation achieved by endovascular delivery of ultrasound in RADIANCE-HTN SOLO or by radiofrequency energy in SPYRAL HTN-OFF and SPYRAL-ON lowers blood pressure.</a> Blood Press. 27 (4), 185-187 (2018).</li><li>B&#246;hm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+of+catheter-based+renal+denervation+in+the+absence+of+antihypertensive+medications+(SPYRAL+HTN-OFF+MED+Pivotal):+a+multicentre,+randomised,+sham-controlled+trial.">Efficacy of catheter-based renal denervation in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal): a multicentre, randomised, sham-controlled trial.</a> The Lancet. 395 (10234), 1444-1451 (2020).</li><li>Azizi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+ultrasound+renal+denervation+to+treat+hypertension+(RADIANCE-HTN+SOLO):+a+multicentre,+international,+single-blind,+randomised,+sham-controlled+trial.">Endovascular ultrasound renal denervation to treat hypertension (RADIANCE-HTN SOLO): a multicentre, international, single-blind, randomised, sham-controlled trial.</a> The Lancet. 391 (10137), 2335-2345 (2018).</li><li>Kandzari, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+renal+denervation+on+blood+pressure+in+the+presence+of+antihypertensive+drugs:+6-month+efficacy+and+safety+results+from+the+SPYRAL+HTN-ON+MED+proof-of-concept+randomised+trial.">Effect of renal denervation on blood pressure in the presence of antihypertensive drugs: 6-month efficacy and safety results from the SPYRAL HTN-ON MED proof-of-concept randomised trial.</a> The Lancet. 391 (10137), 2346-2355 (2018).</li><li>Townsend, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+renal+denervation+in+patients+with+uncontrolled+hypertension+in+the+absence+of+antihypertensive+medications+(SPYRAL+HTN-OFF+MED):+a+randomised,+sham-controlled,+proof-of-concept+trial.">Catheter-based renal denervation in patients with uncontrolled hypertension in the absence of antihypertensive medications (SPYRAL HTN-OFF MED): a randomised, sham-controlled, proof-of-concept trial.</a> The Lancet. 390 (10108), 2160-2170 (2017).</li><li>Sun, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+restrains+the+inflammatory+response+in+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">Renal denervation restrains the inflammatory response in myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Basic Research in Cardiology. 115 (2), 15 (2020).</li><li>Sharp, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+prevents+heart+failure+progression+via+inhibition+of+the+renin-angiotensin+system.">Renal denervation prevents heart failure progression via inhibition of the renin-angiotensin system.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (21), 2609-2621 (2018).</li><li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+attenuates+progression+of+atherosclerosis+in+apolipoprotein+E-deficient+mice+independent+of+blood+pressure+lowering.">Renal denervation attenuates progression of atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice independent of blood pressure lowering.</a> Hypertension. 65 (4), 758-765 (2015).</li><li>Chen, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+mitigates+atherosclerosis+in+ApoE-/-+mice+via+the+suppression+of+inflammation.">Renal denervation mitigates atherosclerosis in ApoE-/- mice via the suppression of inflammation.</a> American Journal of Translational Research. 12 (9), 5362-5380 (2020).</li><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+promotes+atherosclerosis+in+hypertensive+apolipoprotein+E-deficient+mice+infused+with+Angiotensin+II.">Renal denervation promotes atherosclerosis in hypertensive apolipoprotein E-deficient mice infused with Angiotensin II.</a> Frontiers in Physiology. 8, 215 (2017).</li><li>Eriguchi, M., Tsuruya, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+sympathetic+denervation+in+rats.">Renal sympathetic denervation in rats.</a> Methods in Molecular Biology. 1397, 45-52 (2016).</li><li>Thukkani, A. K., Bhatt, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+denervation+therapy+for+hypertension.">Renal denervation therapy for hypertension.</a> Circulation. 128 (20), 2251-2254 (2013).</li><li>Zhang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NAD(+)+administration+decreases+microvascular+damage+following+cardiac+ischemia/reperfusion+by+restoring+autophagic+flux.">NAD(+) administration decreases microvascular damage following cardiac ischemia/reperfusion by restoring autophagic flux.</a> Basic Research in Cardiology. 115 (5), 57 (2020).</li><li>Wang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+renal+sympathetic+denervation+ameliorates+renal+fibrosis+and+delays+the+onset+of+hypertension+in+spontaneously+hypertensive+rats.">Long-term renal sympathetic denervation ameliorates renal fibrosis and delays the onset of hypertension in spontaneously hypertensive rats.</a> American Journal of Translational Research. 10 (12), 4042-4053 (2018).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice.">Subcutaneous Angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (103), e53191 (2015).</li><li>Wilde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tail-cuff+technique+and+its+influence+on+central+blood+pressure+in+the+mouse.">Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).</li><li>Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+blood+pressure+in+mice+using+volume+pressure+recording,+a+tail-cuff+method.">Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).</li><li>Esler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Illusions+of+truths+in+the+Symplicity+HTN-3+trial:+generic+design+strengths+but+neuroscience+failings.">Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+sustained-release+deoxycorticosterone+acetate-induced+hypertension+in+Bama+miniature+pigs+for+renal+sympathetic+nerve+denervation.">Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+safety+of+renal+denervation+as+assessed+by+optical+coherence+tomography:+pre-+and+post-procedure+comparison+with+multi-electrode+ablation+catheter+in+animal+experiment.">The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment.</a> Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).</li><li>Cai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+stereotactic+radiotherapy+for+renal+denervation+in+a+swine+model.">Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model.</a> Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).</li></ol>

RDNが血圧を下げることができるかどうかは、シンプリシティHTN-3試験7,25の否定的な結果が発表されて以来、物議を醸しています。しかし、いくつかの臨床試験および動物実験は、高血圧のヒトおよび動物に対するRDNの肯定的かつ効果的な結果を示している9、10、11、12、13、...

高血圧は、世界中の主要な慢性心血管疾患です。制御されていない高血圧は、標的臓器に損傷を与え、心不全、脳卒中、および慢性腎臓病の一因となる可能性があります1,2,3。高血圧の有病率は、中国では1991年から2007年の間に20%から31%に増加しました。中国の高血圧症の成人の数は、高血圧の診断基準(130/80 mmHg)4の最近の改訂に続いて倍増する可能性があります。高血圧は薬で制御できますが、最大耐量で少なくとも3つの降圧薬(1つの利尿薬を含む)を投与された場合でも、患者の約20%が高血圧を制御できず、薬剤耐性高血圧の発症につながる可能性があります5。
腎交感神経除神経(RDN)は、高血圧の潜在的な治療法であることが証明されています。2009年、KrumらはRDNを用いた抵抗性高血圧治療を初めて報告した。経皮的腎動脈焼灼術は、患者6の持続的な血圧低下を効果的に引き起こす可能性があることがわかりました。しかし、シンプリシティ高血圧3(HTN-3)試験の失敗により、RDN7の適用が妨げられ、RDNは物議を醸す治療法になりました。それにもかかわらず、RDNの見通しはまだ排除されていません。RADIANCE-HTN SOLO、SPYRAL HTN-OFF MED/ON MED、SPILAL HTN-OFF MED Pivotalなどの最近の臨床試験では、高血圧に対するRDNの有効性が確認されています8,9,10,11,12。したがって、RDNの効果を調査するには、より詳細な機構研究を実施する必要があります。
この研究の全体的な目的は、マウスのRDNをどのように変更して、より簡単で安定した手術を生み出すことができるかを示すことです。多数の実験が、異なる動物モデルにおける血管内凍結焼灼、体外超音波および化学的または神経毒の局所適用など、RDNの様々なアプローチを研究してきた13、14、15、16、17。フェノールによる化学的アブレーションを用いて生成されたRDNモデルは、高血圧に対する交感神経活性化の病因を研究するための確立された実験モデルです。このモデルは、綿棒18を使用した10%フェノール/エタノール溶液による腎交感神経の化学腐食によって生成されます。一方では、従来のRDNは腎交感神経活動を潜在的に阻害し、それがレニン分泌およびナトリウム再吸収を減少させ、腎血流を増加させる。一方、レニン・アンジオテンシン・アルドステロン系19を抑制する。これにより、RDNは高血圧に対して有益な効果を有する。しかし、化学的アブレーションで生成されたRDNモデルにはアブレーション基準やアブレーション時間が欠けており、実験手順の詳細はまだ不明です。また、利用可能なテクニカルレポートはありません。本報告では,C57BL/6マウスにおけるアンジオテンシンII(Ang II)誘発高血圧症における計量紙を用いたフェノールを用いたRDNモデル作製の手術プロトコールについて述べる.フェノールを含む秤量紙で腎動脈を包み、アブレーション時間を統一することで、より再現性と信頼性の高いRDNモデルの確立に貢献します。この実験モデルは、高血圧に対するRDNの効果を評価することを目的としています。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angiotensin II</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:4474-91-3</td>
			<td>To make a hypertensive animol model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab137869</td>
			<td>To evaluate the expression of TH of renal nerves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Analysis</td>
			<td>Visitech Systems</td>
			<td>BP-2000</td>
			<td>Measure the blood pressure of mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-osmotic pump</td>
			<td>DURECT Corporation</td>
			<td>CA 95014</td>
			<td>To fill with Angiotensin II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Norepinephrine ELISA Kit</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab287789</td>
			<td>to measure renal norepinephrine levels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:108-95-2</td>
			<td>Damage the renal sympathetic nerve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing paper</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>F512112</td>
			<td>To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion

血圧に対する腎交感神経除神経(RDN)の利点は、近年の多数の臨床試験で証明されています。しかし、高血圧に対するRDNの調節メカニズムはとらえどころのないままです。したがって、マウスでより単純なRDNモデルを確立することが不可欠です。この研究では、アンジオテンシンIIを充填した浸透圧ミニポンプを14週齢のC57BL / 6マウスに移植しました。ミニ浸透圧ポンプの移植の1週間後、フェノールを使用してマウスの両側腎動脈に対して修正RDN手順を実施した。年齢性別を一致させたマウスに生理食塩水を与え、偽群とした。血圧はベースライン時とその後21日間毎週測定されました。次に、腎動脈、腹部大動脈、心臓を採取し、H&Eおよびマッソン染色を用いた組織学的検査を行った。この研究では、高血圧を制御し、心肥大を緩和できる、シンプルで実用的で再現性のある標準化されたRDNモデルを提示します。この技術は、腎動脈に損傷を与えることなく末梢腎交感神経を除神経することができます。以前のモデルと比較して、修正されたRDNは、高血圧の病態生物学および病態生理学の研究を容易にします。

統計学 すべてのデータは、平均±標準偏差として表されます。一元配置分散分析は、3つ以上の条件での実験に使用され、その後、個々のグループ間の比較のためにボンフェローニ事後検定が行われました。0.05以下のp値を有意値と見なします。すべての統計分析を実行するために、市販のソフトウェアが使用されました。
Ang IIによって誘発される血?...

Watch this Scientific Journal Video about Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion at JoVE.com

Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion

ここでは、アンジオテンシンII注入によって誘発された高血圧マウスにおける腎交感神経除神経(RDN)のプロトコルを提示します。この手順は再現性があり、便利であり、高血圧および心肥大に対するRDNの調節メカニズムを研究することを可能にする。

腎除神経の改善により、アンジオテンシンII注入による高血圧が軽減されました。

The benefits of renal sympathetic denervation (RDN) on blood pressure have been proved in a large number of clinical trials in recent years. However, the ...

腎交感神経除神経は高血圧の潜在的な治療法であり、多くの臨床試験で証明されています。この技術は、腎動脈の損傷なしに自由流の腎神経を除神経します。さらに、これはシンプルで、重要で、再現性があり、標準化されたモデルです。手順を実演するのは、私の研究室のラボアシスタントであるMing Wangです。まず、操作台を70%エタノールで消毒し、次に加熱パッドの温度を摂氏37度に調整します。手術前に、顕微手術用ハサミ、細い直線鉗子、細い湾曲した鉗子、止血鉗子、滅菌ガーゼ、計量紙など、すべての手術器具を摂氏121度で30分間滅菌します。14週齢のオスのC57BKL/6マウスに麻酔をかけた後、シェーバーで背中の毛を取り除き、乾燥を防ぐために獣医軟膏を目に塗ります。マウスを背側の手術台に置きます。スワイプして剃った部分をポビドンヨードで拭き、続いて70%エタノールで3回拭きます。滅菌メスの刃を使用して、前脚の肩甲骨の上に耳の後ろの尾に垂直に1センチメートルの切開を行います。次に、滅菌止血剤を使用して皮膚の下に皮下トンネルを作り、ポンプ用のポケットを作ります。アンジオテンシンIIで満たされた浸透圧ポンプをポケットにそっと挿入し、皮膚を伸ばさずに傷口を縫合するのに十分な空きスペースを確保します。中断された6-0ビクリル縫合糸で筋肉を縫合し、中断された4-0ナイロン縫合糸で皮膚を閉じます。次に、傷の部位をポビドンヨードで拭いて拭きます。すべての手術器具を滅菌器に10秒間入れ、手術の合間に滅菌手袋を交換します。マウスが完全に回復するまでマウスを監視します。発赤、腫れ、感染など、最初の週に少なくとも1日2回、その後は毎日1回、創傷治癒を注意深く監視および観察します。.アンジオテンシンII注入中にマウスが死亡した場合は直ちに解剖を行う。ベースライン時およびアンジオテンシンII注入後毎週、意識のあるマウスのテールカフプレチスモグラフィ法で血圧を測定します。.アンジオテンシンII注入の1週間後、血圧が上昇したマウスを選択し、体重を記録します。腎除神経手術のために最低体重24グラムの動物を選択してください。次に、麻酔をかけたマウスの腹部の毛をシェーバーで取り除き、マウスを手術台に置きます。腹部を上に保ち、手足をテープで固定します。腹部の皮膚をポビドンヨードで消毒し、続いて70%エタノールで3回拭きます。腹側正中線2センチの腹部切開を行った後、摂氏37度の生理食塩水に浸したガーゼで腸を引き戻し、左腎動脈を露出させます。慎重に、しかし率直に、湾曲したピンセットを使用して腎動脈から脂肪を解剖します。滅菌鋭利なハサミを使用して、計量紙を腎動脈と同じサイズの長方形に切ります。形状を同じに保つために、一度に数枚の計量紙を切り取ります。計量紙を10%フェノールエタノール溶液に少なくとも30秒間浸します。左腎動脈の表面を覆い、血管を計量紙で2分間包みます。ガーゼを使用して周囲の組織を保護し、計量紙が腎臓や腸に触れないようにします。右腎動脈についても同じ手順を繰り返します。手術後、筋肉を初期位置に再配置し、中断された縫合パターンで6-0ビクリル縫合糸で腹膜を閉じ、中断された4-0ナイロン縫合糸で皮膚を閉じます。完全に回復するまですべてのマウスを監視します。収縮期血圧の有意な上昇は、アンジオテンシンII注入後1週間で観察された。腎交感神経除神経(RDN)アンジオテンシンII群は、RDN処置後21日目に偽アンジオテンシンII群と比較して収縮期血圧の有意な低下を示した。RDN処置後2週間で偽群とRDN群の間に有意差は観察されなかった。腎交感神経と腎動脈のヘマトキシリンとエオジン染色をここに示します。腎動脈の内膜層の肥厚は4群で認められなかった。偽群、断片化核、およびパイクノティック核と比較して、両方のRDN群で神経内組織の消化と腫れが観察されました。神経束の免疫組織化学により、RDNおよびRDNアンジオテンシンII群では、チロシンヒドロキシラーゼの発現が両偽群と比較して有意に低下することが明らかになりました。正常血圧群と高血圧群の両方で除神経腎臓の腎皮質ノルエピネフリン含有量は、神経支配腎臓と比較して有意に減少しました。.マッソン染色では腹部大動脈の内膜中膜に顕著な増加は見られなかった。異なる群における心筋の代表的な画像をここに示す。アンジオテンシンII注入誘発心肥大は、間質線維症および心筋細胞サイズの減少によりRDN治療によって改善した。施術中は、腎動脈以外の周辺組織にフェノールを触れないでください。腸閉塞や腹部感染症、腎動脈狭窄の原因となりますので、お手技をしないでください。この方法は、高血圧を制御するメカニズムの研究に役立つ標準化されたRDNモデルを確立することができます。この技術の将来の応用は、高血圧と心肥大のプロセスを強調する経路の拡大に貢献する可能性があります。

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Medicine

Unit 1

Cardiovascular Drugs: Antihypertensive Drugs

SCIENTISTS IN ACTION

A Laser-induced Mouse Model of Chronic Ocular Hypertension to Characterize Visual Defects

ビジュアル欠陥を特徴づけるために慢性高眼圧症のレーザー誘起マウスモデル

Glaucoma, frequently associated with elevated intraocular pressure (IOP), is one of the leading causes of blindness. We sought to establish a mouse model ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

脛骨神経切断 - マウスにおける脱神経誘発性骨格筋萎縮のために標準化されたモデル

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

慢性腎臓病患者における血管機能の評価

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

ラットにおける超音波検査技術を用いた薬剤誘発性腎血行動態機能障害の早期発見

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Murine Kidney Transplant Technique

マウスの腎臓移植​​技術

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

浸透圧を使用して皮下アンジオテンシンII注入は、マウスで誘導大動脈瘤パンプス

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

腎交感神経活動と意識、持続静脈内投与による血圧の同時記録への新しいアプローチ気ままなマウス。

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

流れ誘導性の肺動脈性肺高血圧症のためのラットモデルにおけるシャント手術、右心カテーテル、および血管形態計測

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Improved Registration of 3D CT Angiography with X-ray Fluoroscopy for Image Fusion During Transcatheter Aortic Valve Implantation

経カテーテル大動脈弁留置中画像融合 3次元 CT 血管造影 x 線透視との登録を改善

The fusion of 3D anatomical models derived from high-fidelity pre-interventional computed tomography angiography (CTA), and x-ray (XR) fluoroscopy to ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

左心房狭窄による肺静脈動脈化術とグループ 2 肺高血圧症ラット

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...