Name: improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion
Uploaded: 2022-05-26T13:00:00
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Este trabajo fue apoyado por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (81770420), la Comisión de Ciencia y Tecnología de la Municipalidad de Shanghai (20140900600), el Laboratorio Clave de Medicina Geriátrica Clínica de Shanghai (13dz2260700), la Especialidad Clínica Municipal Clave de Shanghai (shslczdzk02801) y el Centro de Enfermedad Arterial Coronaria Geriátrica, Hospital Huadong Afiliado a la Universidad de Fudan.

Todos los procedimientos experimentales con animales cumplieron con la Guía ética relevante para el cuidado y uso de animales de laboratorio (Publicación de los NIH no. 85-23, revisada en 2011) y fueron aprobados por los comités de investigación animal del Hospital Huadong afiliados a la Universidad de Fudan. Los ratones machos C57BL / 6 de catorce semanas de edad (28-30 g) se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: grupo simulado, grupo Sham + Ang II, grupo RDN, grupo RDN + Ang II, n = 6 en cada grupo. Todos lo...

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	<li>Messerli, F. H., Rimoldi, S. F., Bangalore, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+transition+from+hypertension+to+heart+failure:+Contemporary+update.">The transition from hypertension to heart failure: Contemporary update.</a> JACC Heart Failure. 5 (8), 543-551 (2017).</li><li>Lackland, D. 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(103), e53191 (2015).</li><li>Wilde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tail-cuff+technique+and+its+influence+on+central+blood+pressure+in+the+mouse.">Tail-cuff technique and its influence on central blood pressure in the mouse.</a> Journal of the American Heart Association. 6 (6), 005204 (2017).</li><li>Daugherty, A., Rateri, D., Hong, L., Balakrishnan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+blood+pressure+in+mice+using+volume+pressure+recording,+a+tail-cuff+method.">Measuring blood pressure in mice using volume pressure recording, a tail-cuff method.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (27), e1291 (2009).</li><li>Esler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Illusions+of+truths+in+the+Symplicity+HTN-3+trial:+generic+design+strengths+but+neuroscience+failings.">Illusions of truths in the Symplicity HTN-3 trial: generic design strengths but neuroscience failings.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 8 (8), 593-598 (2014).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+sustained-release+deoxycorticosterone+acetate-induced+hypertension+in+Bama+miniature+pigs+for+renal+sympathetic+nerve+denervation.">Low-dose sustained-release deoxycorticosterone acetate-induced hypertension in Bama miniature pigs for renal sympathetic nerve denervation.</a> Journal of the American Society of Hypertension. 11 (5), 314-320 (2017).</li><li>Han, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+safety+of+renal+denervation+as+assessed+by+optical+coherence+tomography:+pre-+and+post-procedure+comparison+with+multi-electrode+ablation+catheter+in+animal+experiment.">The safety of renal denervation as assessed by optical coherence tomography: pre- and post-procedure comparison with multi-electrode ablation catheter in animal experiment.</a> Hellenic Journal of Cardiology. 61 (3), 190-196 (2020).</li><li>Cai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+stereotactic+radiotherapy+for+renal+denervation+in+a+swine+model.">Noninvasive stereotactic radiotherapy for renal denervation in a swine model.</a> Journal of the American College of Cardiology. 74 (13), 1697-1709 (2019).</li></ol>

Si la RDN podría disminuir la presión arterial se ha vuelto controvertida desde la publicación del resultado negativo del ensayo de simplicidad HTN-3 7,25. Sin embargo, los diversos ensayos clínicos y experimentos con animales han demostrado resultados positivos y efectivos de RDN en humanos y animales hipertensos 9,10,11,12,13,14,15,16,17.<sup class="xref...

La hipertensión es una enfermedad cardiovascular crónica importante en todo el mundo. La hipertensión no controlada podría dañar los órganos diana y contribuir a la insuficiencia cardíaca, accidente cerebrovascular y enfermedades renales crónicas 1,2,3. La prevalencia de la hipertensión ha aumentado del 20% al 31% entre 1991 y 2007 en China. El número de adultos con hipertensión en China podría duplicarse tras una reciente revisión de los criterios diagnósticos para la hipertensión (130/80 mmHg)4. La hipertensión puede ser controlada por medicamentos, sin embargo, aproximadamente el 20% de los pacientes son incapaces de controlar su hipertensión, incluso cuando reciben al menos tres fármacos antihipertensivos (incluyendo un diurético) a la dosis máxima tolerada, lo que puede conducir al desarrollo de hipertensión resistente a los medicamentos5.
Se ha demostrado que la denervación simpática renal (RDN) es un tratamiento potencial para la hipertensión. En 2009, Krum y sus colegas informaron sobre el tratamiento de la hipertensión resistente utilizando RDN por primera vez. Se encontró que la ablación percutánea de la arteria renal puede causar efectivamente la reducción persistente de la presión arterial en los pacientes6. Sin embargo, el fracaso del ensayo Symplicity Hypertension 3 (HTN-3) impidió la aplicación de RDN7, convirtiendo RDN en una terapia controvertida. Sin embargo, la perspectiva de RDN aún no se ha descartado. Ensayos clínicos recientes, incluyendo RADIANCE-HTN SOLO, SPYRAL HTN-OFF MED/ON MED y SPYRAL HTN-OFF MED Pivotal han confirmado la eficacia de RDN en la hipertensión 8,9,10,11,12. Por lo tanto, es necesario realizar una investigación mecanicista más detallada para explorar los efectos de la RDN.
El propósito general de este estudio es demostrar cómo se puede modificar la RDN en ratones para producir una cirugía más simple y estable. Un gran número de experimentos han estudiado diversos enfoques de RDN, como la crioablación intravascular, la ecografía extracorpórea y la aplicación local de una sustancia química o neurotoxina en diferentes modelos animales 13,14,15,16,17. El modelo RDN generado mediante ablación química con fenol es un modelo experimental bien establecido para estudiar la patogénesis de la activación simpática en la hipertensión. Este modelo se genera por corrosión química de los nervios simpáticos renales con solución de fenol / etanol al 10% utilizando un hisopo de algodón18. Por un lado, la RDN convencional inhibe potencialmente la actividad simpática renal, que luego disminuye la secreción de renina y la reabsorción de sodio, y aumenta el flujo sanguíneo renal. Por otro lado, suprime el sistema renina-angiotensina-aldosterona19. Por lo tanto, RDN tiene un efecto beneficioso sobre la hipertensión. Sin embargo, el modelo RDN generado por ablación química carece de criterios de ablación y tiempo de ablación y los detalles del procedimiento experimental aún no están claros. Además, no hay informes técnicos disponibles. En este informe, describimos un protocolo quirúrgico para la generación del modelo RDN con fenol utilizando papel de pesaje en hipertensión inducida por angiotensina II (Ang II) en ratones C57BL / 6. Envolvemos la arteria renal con papel de pesaje que contiene fenol y unificamos el tiempo de ablación, lo que ayuda a establecer un modelo RDN más reproducible y confiable. Este modelo experimental tiene como objetivo evaluar el efecto de la RDN sobre la hipertensión.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Angiotensin II</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:4474-91-3</td>
			<td>To make a hypertensive animol model</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Tyrosine Hydroxylase antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab137869</td>
			<td>To evaluate the expression of TH of renal nerves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blood Pressure Analysis</td>
			<td>Visitech Systems</td>
			<td>BP-2000</td>
			<td>Measure the blood pressure of mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini-osmotic pump</td>
			<td>DURECT Corporation</td>
			<td>CA 95014</td>
			<td>To fill with Angiotensin II</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Norepinephrine ELISA Kit</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab287789</td>
			<td>to measure renal norepinephrine levels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phenol</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>CAS:108-95-2</td>
			<td>Damage the renal sympathetic nerve</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weighing paper</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>F512112</td>
			<td>To destroy renal nerve with weighing paper immersed with phenol; https://www.sangon.com/productDetail?productInfo.code=F512112.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improved renal denervation mitigated hypertension induced by angiotensin ii infusion

Los beneficios de la denervación simpática renal (RDN) sobre la presión arterial se han demostrado en un gran número de ensayos clínicos en los últimos años. Sin embargo, el mecanismo regulador de RDN en la hipertensión sigue siendo difícil de alcanzar. Por lo tanto, es esencial establecer un modelo RDN más simple en ratones. En este estudio, se implantaron mini bombas osmóticas llenas de angiotensina II en ratones C57BL / 6 de 14 semanas de edad. Una semana después de la implantación de la mini bomba osmótica, se realizó un procedimiento RDN modificado en las arterias renales bilaterales de los ratones utilizando fenol. A los ratones de la misma edad se les dio solución salina y se les sirvió como grupo simulado. La presión arterial se midió al inicio del estudio y cada semana posteriormente durante 21 días. Luego, se recolectaron la arteria renal, la aorta abdominal y el corazón para el examen histológico utilizando tinción de H&E y Masson. En este estudio, presentamos un modelo de RDN simple, práctico, repetible y estandarizado, que puede controlar la hipertensión y aliviar la hipertrofia cardíaca. La técnica puede denervar los nervios simpáticos renales periféricos sin daño a la arteria renal. En comparación con los modelos anteriores, el RDN modificado facilita el estudio de la patobiología y la fisiopatología de la hipertensión.

Estadística Todos los datos se expresan como media ± desviación estándar. Se utilizó ANOVA unidireccional para experimentos con tres o más condiciones seguidas de pruebas posthoc de Bonferroni para comparaciones entre grupos individuales. Considere un valor p igual o menor que 0.05 como significativo. Se utilizó un software comercial para realizar todos los análisis estadísticos.
El aumento de la presión arterial inducido por Ang II se atenuó después de ...

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Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion

Aquí, presentamos un protocolo para la denervación simpática renal (RDN) en ratones con hipertensión inducida por infusión de angiotensina II. El procedimiento es repetible, conveniente y permite estudiar los mecanismos reguladores de RDN sobre hipertensión e hipertrofia cardíaca.

La mejora de la denervación renal mitigó la hipertensión inducida por la infusión de angiotensina II

The benefits of renal sympathetic denervation (RDN) on blood pressure have been proved in a large number of clinical trials in recent years. However, the ...

La denervación simpática renal es un tratamiento potencial para la hipertensión, que ha sido probado por muchos ensayos clínicos. Esta técnica denerva los nervios renales de flujo libre sin daño de la arteria renal. Además, es un modelo simple, crítico, repetible y estandarizado.Demostrando el procedimiento estará Ming Wang, un asistente de laboratorio de mi laboratorio. Comience desinfectando la mesa de operaciones con etanol al 70%, luego ajuste la temperatura de la almohadilla térmica a 37 grados centígrados. Antes de la cirugía, esterilice todos los instrumentos quirúrgicos, incluyendo tijeras microquirúrgicas, pinzas rectas finas, pinzas curvas finas, pinzas hemostáticas, gasas estériles y papel de pesaje a 121 grados centígrados durante 30 minutos.Después de anestesiar a un ratón macho C57BKL/6 de 14 semanas de edad, retire el vello de la espalda con una afeitadora y luego aplique ungüento veterinario en los ojos para evitar la sequedad. Coloque el ratón sobre una mesa de operaciones en posición dorsal. Deslice y limpie el área afeitada con povidona yodada, seguido de tres toallitas con etanol al 70%.Usando una hoja de bisturí estéril, haga una incisión de un centímetro perpendicular a la cola detrás de la oreja sobre el omóplato de la pierna delantera. Luego, use un hemostático estéril para hacer un túnel subcutáneo debajo de la piel y cree un bolsillo para la bomba. Inserte suavemente una bomba osmótica llena de angiotensina II en el bolsillo, asegurando suficiente espacio libre para suturar la herida sin estirar la piel.Suturar el músculo con suturas 6-0 Vicryl interrumpidas y cerrar la piel con suturas de nylon 4-0 interrumpidas. Luego frota y limpia el sitio de la herida con povidona yodada. Coloque todos los instrumentos quirúrgicos en un esterilizador durante 10 segundos y reemplace los guantes estériles entre cirugías.Supervise el ratón hasta que se haya recuperado por completo. Controle de cerca y observe la cicatrización de heridas al menos dos veces al día durante la primera semana y una vez al día posteriormente, incluyendo enrojecimiento, hinchazón e infección. Realice la disección inmediatamente si el ratón muere durante la infusión de angiotensina II.Mida la presión arterial al inicio y cada semana después de la infusión de angiotensina II con el método de pletismografía del manguito de la cola en ratones conscientes. Una semana después de la infusión de angiotensina II, seleccione los ratones con presión arterial elevada y registre su peso. Elija animales con un peso mínimo de 24 gramos para la cirugía de denervación renal.A continuación, retire los pelos del abdomen de un ratón anestesiado con una afeitadora, luego coloque el mouse en la mesa de operaciones. Mantenga el abdomen hacia arriba y fije las extremidades con cinta adhesiva. Desinfecte la piel abdominal con povidona yodada, seguido de tres toallitas con etanol al 70%.Después de hacer una incisión abdominal ventral de dos centímetros en la línea media, tire hacia atrás del intestino con una gasa empapada en solución salina de 37 grados centígrados para exponer la arteria renal izquierda. Con cuidado, pero sin rodeos, diseccione la grasa lejos de la arteria renal usando pinzas curvas. Con unas tijeras afiladas estériles, corte el papel de pesaje en un rectángulo del mismo tamaño que la arteria renal.Corte varios trozos del papel de pesaje a la vez para mantener la misma forma. Sumerja el papel de pesaje en una solución de etanol de fenol al 10% durante al menos 30 segundos. Cubra la superficie de la arteria renal izquierda y envuelva el vaso con el papel de pesaje durante dos minutos.Use una gasa para proteger los tejidos circundantes para evitar que el papel de pesaje toque el riñón y el intestino. Repita el mismo procedimiento para la arteria renal derecha. Después de la cirugía, vuelva a colocar los músculos en su posición inicial y cierre el peritoneo con suturas Vicryl 6-0 en un patrón de sutura interrumpida, luego cierre la piel con suturas de nylon 4-0 interrumpidas.Controle a todos los ratones hasta que estén completamente recuperados. Se observó un aumento significativo de la presión arterial sistólica una semana después de la infusión de angiotensina II. El grupo de angiotensina II de denervación simpática renal, o RDN, mostró una reducción significativa en la presión arterial sistólica en comparación con el grupo de angiotensina II simulada a los 21 días después del procedimiento RDN.No se observaron diferencias significativas entre los grupos simulados y RDN a las dos semanas después del procedimiento RDN. Aquí se muestra la tinción con hematoxilina y eosina del nervio simpático renal y la arteria renal. No se observó engrosamiento de la capa íntima de la arteria renal en los cuatro grupos.En comparación con el grupo de simulacros, núcleos fragmentados y picnóticos, se observó digestión e hinchazón del tejido endoneurial en ambos grupos de RDN. La inmunohistoquímica de los haces nerviosos reveló que la expresión de tirosina hidroxilasa disminuyó significativamente en el grupo RDN y RDN angiotensina II en comparación con ambos grupos simulados. El contenido de norepinefrina cortical renal en los riñones denervados tanto en el grupo normotenso como en el hipertenso se redujo significativamente en comparación con el riñón inervado.La tinción de Masson no mostró un aumento notable en la íntima media de la aorta abdominal entre los grupos. Aquí se muestran imágenes representativas del miocardio en diferentes grupos. La hipertrofia cardíaca inducida por infusión de angiotensina II mejoró con el tratamiento con RDN por la disminución de la fibrosis intersticial y el tamaño de los cardiomiocitos.Durante el procedimiento, no toque el fenol en el tejido circundante, excepto en la arteria renal, ya que puede causar obstrucción intestinal, infección abdominal y estenosis de la arteria renal. Este método puede establecer un modelo estandarizado de RDN para ayudar a estudiar los mecanismos que controlan la hipertensión. Las aplicaciones futuras de esta técnica pueden contribuir a ampliar las vías que subrayan el proceso de hipertensión e hipertrofia cardíaca.

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Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

Transección del nervio tibial - Un modelo normalizado para la atrofia del músculo esquelético denervación inducida en ratones

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Assessment of Vascular Function in Patients With Chronic Kidney Disease

Evaluación de la función vascular en pacientes con enfermedad renal crónica

Patients with chronic kidney disease (CKD) have significantly increased risk of cardiovascular disease (CVD) compared to the general population, and this ...

Early Detection of Drug-Induced Renal Hemodynamic Dysfunction Using Sonographic Technology in Rats

La detección precoz de la disfunción renal hemodinámico inducido por medicamentos Usando tecnología ecográfica en ratas

The kidney normally functions to maintain hemodynamic homeostasis and is a major site of damage caused by drug toxicity. Drug-induced nephrotoxicity is ...

Murine Kidney Transplant Technique

Riñón murino Trasplante Técnica

The first mouse kidney transplant technique was published in 19731 by the Russell laboratory. Although it took some years for other labs to become ...

Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice

Subcutánea angiotensina II infusión usando osmótica Bombas Induce aneurismas aórticos en ratones

Osmotic pumps continuously deliver compounds at a constant rate into small animals.  This article introduces a standard protocol used to induce aortic ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Nuevo enfoque para la grabación simultánea de la actividad nerviosa simpática Renal y presión arterial con la infusión intravenosa en consciente, libre de ratones.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

La cirugía de derivación, un cateterismo derecho, y Vascular Morfometría en un modelo de rata de flujo inducido por la hipertensión arterial pulmonar

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Improved Registration of 3D CT Angiography with X-ray Fluoroscopy for Image Fusion During Transcatheter Aortic Valve Implantation

Mejor registro de 3D CT angiografía con rayos x fluoroscopia para fusión de imágenes durante la implantación de válvula aórtica transcatéter

The fusion of 3D anatomical models derived from high-fidelity pre-interventional computed tomography angiography (CTA), and x-ray (XR) fluoroscopy to ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

Estenosis Atrial izquierda inducido arterialización venosa pulmonar y el grupo 2 la hipertensión pulmonar en rata

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...